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BMC Genet . 2015; 16 (1): 8.

Publicado en línea el 3 de febrero de 2015 doi:  10.1186 / s12863-015-0167-2


PMCID: PMC4328591
PMID: 25643626

Mecanismos de la extensión de la vida mediada por


aminoácidos en Caenorhabditis elegans
Clare Edwards , John Canfield , Neil Copes , Andrés Brito , Muhammad Rehan , David
Lipps , Jessica Brunquell ,Sandy D Westerheide ,y Patrick C Bradshaw

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Resumen
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Fondo
En los nematodos de C. elegans , las concentraciones de aminoácidos libres cambian con la edad
[ 1 ] y se alteran en los gusanos de larga vida [ 2 ]. En humanos, las concentraciones de
aminoácidos en plasma alteradas son biomarcadores de varias enfermedades [ 3 ] como la
diabetes tipo 2 [ 4 ]. Desde hace tiempo se sabe que la restricción de calorías retrasa el
envejecimiento [ 5 ] y la restricción de proteínas puede ser responsable de aproximadamente la
mitad de este efecto [ 6 ]. Metionina [ 7 , 8 ] o triptófano [ 9 , 10] la restricción imita
parcialmente la restricción de proteínas para prolongar la vida útil y retrasar enfermedades
relacionadas con el envejecimiento en roedores. Pero el papel que desempeñan otros aminoácidos
en la longevidad y la enfermedad ha sido más difícil de dilucidar. En este sentido, los
experimentos con levadura, gusanos y moscas de la fruta se utilizan cada vez más para abordar
este problema.
Usando la levadura Saccharomyces cerevisiae , se descubrió por primera vez que la
suplementación con los aminoácidos de cadena ramificada (leucina, isoleucina o valina) o la
treonina prolongaba la vida útil cronológica al regular a la baja la vía de control de aminoácidos
en general (GAAC) [ 11 ]. Otros descubrieron que la suplementación con glutamato prolongaba
la vida útil cronológica [ 12 ]. Consistente con la capacidad del glutamato para extender la vida
útil, la eliminación de los genes involucrados en la conversión del glutamato en ácido gamma-
aminobutírico (GABA) aumentó la vida útil replicativa [ 13]] y condujo a una mayor conversión
de glutamato en alfa-cetoglutarato y otros intermedios del ciclo de TCA, que pueden estar
involucrados en la extensión de la vida útil al mantener la función respiratoria
mitocondrial. Otros que utilizaron diferentes condiciones encontraron que la suplementación con
serina, treonina o valina disminuía la vida útil cronológica [ 14 ], mientras que la limitación de
asparagina [ 15 ], metionina, aspartato o glutamato [ 12 ] prolongaba la vida útil. Investigaciones
adicionales sobre el uso de cepas de deleción de levadura de diferentes períodos de vida
encontraron que los niveles intracelulares de muchos aminoácidos se correlacionaron
positivamente con la vida útil [ 16 ].
En Drosophila , la restricción dietética (DR) o la restricción de proteínas [ 17 ] prolonga la vida
útil y la suplementación con metionina en combinación con uno o más de los aminoácidos
esenciales redujo la vida útil nuevamente al nivel completamente alimentado
[ 18 ]. Curiosamente, la adición de metionina por sí misma a las moscas DR aumentó la
traducción de proteínas [ 19 ] y la fecundidad [ 18 ] sin disminuir la vida útil, lo que desacopla
estos eventos. El aumento de los niveles de aminoácidos, especialmente la leucina [ 20 , 21 ],
activa la quinasa TOR, lo que conduce a una mayor tasa de traducción. Inhibición de la quinasa
TOR con rapamicina [ 22] o expresando una quinasa p70-S6 negativa dominante, una quinasa
corriente abajo de la TOR, prolongó la longevidad del organismo [ 23 ]. Se demostró que el
metabolismo de los aminoácidos que contienen azufre es esencial para la longevidad mediada por
DR en Drosophila [ 19 ], pero la suplementación con cisteína o metionina no logró extender la
vida útil en Drosophila conalimentación completa [ 24 , 25 ]. Sin embargo, la suplementación de
caseína y metionina en conjunto llevó a la extensión de la vida útil [ 24 ].
En C. elegans , la suplementación con prolina prolongó la vida útil que se basaba en su
catabolismo y un aumento transitorio en la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) de
la cadena de transporte de electrones mitocondrial [ 26 ]. El aumento de los niveles de triptófano
también aumentó la longevidad en C. elegans, ya que la eliminación de una enzima que
cataboliza el triptófano aumenta la vida útil [ 27 ]. Inesperadamente, la caída de un transportador
de aminoácidos aromáticos también prolongó la vida útil [ 28 ], lo que sugiere que la disminución
de los niveles de triptófano u otros aminoácidos aromáticos también puede aumentar la
longevidad. Otros encontraron que la disminución de la degradación de la tirosina condujo a un
aumento de la longevidad, pero sorprendentemente la suplementación de tirosina al medio de
cultivo no extendió la vida útil [29 ]. La mayoría de los tamaños de grupos de aminoácidos están
regulados al alza en gusanos de larga vida [ 2 ]. En los gusanos deficientes en el receptor de
insulina daf-2 , por ejemplo, aumentaron los niveles de 8 de los 12 aminoácidos medidos,
incluidos los 3 aminoácidos de cadena ramificada. Los aminoácidos de cadena ramificada son de
especial interés para la investigación de la longevidad, ya que sus niveles disminuyeron a niveles
de tipo salvaje en los mutantes dobles daf-2 / daf-16 de vida normal [ 2 ].
Alimentar a los ratones con una dieta alta en aminoácidos de cadena ramificada condujo a un
aumento de la biogénesis mitocondrial en el músculo, disminuyó la producción de ROS y
aumentó la vida útil promedio de los machos [ 30 ]. Sin embargo, los niveles de aminoácidos de
cadena ramificada disminuyeron en los gusanos de larga duración tratados con metformina [ 31 ],
y el aumento de los niveles plasmáticos de los aminoácidos de cadena ramificada se correlaciona
con el desarrollo de resistencia a la insulina y la diabetes tipo 2 en los seres humanos
[ 32 ]. Además, los estudios que correlacionan altos niveles de aminoácidos libres con la
longevidad deben interpretarse con cautela, ya que la disminución de la tasa de traducción se
asocia con frecuencia o incluso se requiere para la longevidad, y el aumento de las reservas de
aminoácidos puede ser el resultado de esa disminución de la tasa de síntesis de proteínas
[ 33,34 ].
Debido al conocimiento incompleto de los efectos de los aminoácidos en la longevidad, así como
al uso generalizado de suplementos de aminoácidos y proteínas en la dieta humana,
determinamos los efectos de los suplementos de aminoácidos individuales en la vida útil de C.
elegans . Descubrimos que la gran mayoría de los aminoácidos prolongaban la vida útil y
determinaban aún más muchas de las vías de señalización requeridas. Luego, probamos la
capacidad de varios aminoácidos o catabolitos de triptófano para inducir una respuesta de choque
térmico, la respuesta de estrés del RE o la respuesta de la proteína mitocondrial desplegada, que
frecuentemente acompañan a la extensión de la vida útil. Los aminoácidos que extendieron la
vida útil en la mayor medida se probaron para determinar los efectos sobre la resistencia al estrés
y la proteotoxicidad.
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Resultados

Los efectos de los L-aminoácidos individuales en la vida útil


de C. elegans
Determinamos los efectos de suplementar individualmente los 19 L-aminoácidos o la glicina en
la vida útil de C. elegans a concentraciones de 1 mM (Figura  1 A), 5 mM (Figura  1 B) y 10 mM
(Figura  1 C). El porcentaje de cambio de la vida útil media en comparación con el de los
controles no tratados realizados al mismo tiempo también se muestra como una tabla (archivo
adicional 1 : Tabla S1). C. elegans gusanos se cultivaron en medio líquido S con E. coli matados
con calorcomo alimento La destrucción del calor evitó o al menos redujo considerablemente el
catabolismo bacteriano del aminoácido añadido. A diferencia del medio de crecimiento de
nematodos (NGM) que se usa de manera estándar, el medio S no contiene peptona, por lo que la
fuente de alimento bacteriana y el aminoácido suplementado son las únicas fuentes de
aminoácidos en la dieta.
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Figura 1
La suplementación individual de la mayoría de los aminoácidos extiende la vida media
en C. elegans . Vida útil media de C. elegans complementada con (A) 1 mM, (B) 5 mM o (C) 10
mM concentración de cada uno de los 20 aminoácidos (* log rank p <0,05 frente al control).
Los gusanos que se alimentaban de bacterias muertas por calor tenían una vida útil media de 17.2
+/− 0.3 días. A una concentración de 1 mM, los aminoácidos que extendieron la vida útil en la
mayor medida (14-17%) fueron prolina, leucina, glutamina, glutamato y triptófano. A una
concentración de 5 mM, la mayor extensión de la vida útil se observó con prolina, serina, cisteína
y glutamina (16-19%). A esta concentración, la fenilalanina disminuyó la vida útil
(8%). Finalmente, a una concentración de 10 mM, los mayores incrementos en la longevidad se
observaron con la adición de serina, prolina, arginina y metionina (14-22%). La asparagina, el
aspartato, la fenilalanina, la glutamina y el glutamato disminuyeron la vida útil a esta
concentración (6-25%). 5 de los aminoácidos aumentaron la vida útil al aumentar la
concentración de 1 a 10 mM (arginina, histidina, metionina, treonina y serina), mientras que 7 de
los aminoácidos disminuyeron la vida útil al aumentar la concentración en este rango (aspartato,
glutamato, glicina, fenilalanina, triptófano, tirosina y valina). 3 de los aminoácidos tuvieron la
mayor extensión de vida útil a la concentración de 5 mM (asparagina, cisteína y glutamina),
mientras que la concentración de 5 mM produjo la menor extensión de vida útil para la
alanina. Se muestran ejemplos de curvas de vida útil para serina, prolina, histidina y triptófano en
concentraciones que produjeron los mayores efectos en la vida útil media (archivo
adicional mientras que la concentración de 5 mM produjo la menor extensión de vida útil para la
alanina. Se muestran ejemplos de curvas de vida útil para serina, prolina, histidina y triptófano en
concentraciones que produjeron los mayores efectos en la vida útil media (archivo
adicional mientras que la concentración de 5 mM produjo la menor extensión de vida útil para la
alanina. Se muestran ejemplos de curvas de vida útil para serina, prolina, histidina y triptófano en
concentraciones que produjeron los mayores efectos en la vida útil media (archivo adicional2 :
Figura S1).

La tasa de absorción de aminoácidos puede limitar el efecto en


la vida útil
Para determinar si la velocidad de transporte de los aminoácidos a los gusanos puede tener
efectos limitados en la vida útil, administramos los análogos de histidina permeables a las células
N-acetil-histidina o metiléster de histidina, que son escindidos por las enzimas intracelulares para
formar histidina y vida útil controlada (Tabla  1). Estos compuestos produjeron una mayor
extensión de la vida útil que la histidina a la dosis de 1 mM, lo que sugiere que la velocidad de
transporte de los aminoácidos a los gusanos probablemente está limitando su efecto en la vida
útil. La concentración más alta de histidina metil éster (10 mM) no extendió la vida útil como se
esperaba para una respuesta a la dosis hormética. Si la misma observación realizada para la
histidina se mantiene para otros aminoácidos, entonces la tasa de absorción de aminoácidos por el
intestino puede ser un factor importante que controla su capacidad para extender la vida
útil. También se ha demostrado que la velocidad de transporte de compuestos antioxidantes
hidrófilos a C. elegans limita su efecto sobre la vida útil [ 35 ].
tabla 1
Los efectos de los D-aminoácidos y los análogos de L-histidina
permeables a la membrana en la vida útil de C. elegans N2

Tratamiento Concentración % de la vida útil valor # de Replica


media no tratada p gusanos

D-alanina 1 mM 114 <0.001 219 2

5 mM 116 <0.001 273 2

10 mM 116 <0.001 240 2

D-aspartato 1 mM 107 0.024 233 2

5 mM 118 <0.001 269 2

10 mM 108 <0.001 228 2

D-glutamato 1 mM 114 <0.001 207 2

5 mM 118 <0.001 249 2

10 mM 97 0.165 232 2

D-serina 1 mM 100 0.600 209 2


Tratamiento Concentración % de la vida útil valor # de Replica
media no tratada p gusanos

5 mM 91 <0.001 198 2

10 mM 93 <0.001 220 2

D-prolina 5 mM 101 0.734 113 2

N-acetil-L-histidina 0.1 mM 103 0.383 142 2

1 mM 112 0.002 188 2

10 mM 110 0.008 196 2

Éster metílico de L- 0.1 mM 108 <0.001 215 2


histidina

1 mM 109 <0.001 246 2

10 mM 104 0.11 193 2

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Los efectos de los D-aminoácidos en la vida útil de C. elegans


Para determinar si los efectos en la vida útil fueron específicos para los L-aminoácidos, también
se determinó si hubo efectos en la longevidad cuando se complementaron los 4 D-aminoácidos
que se encuentran de manera endógena en C. elegans [ 36 ], D-alanina, D-serina, D-aspartato o
D-glutamato (Tabla  1 y archivo adicional 3 : Figura S2), así como D-prolina (Tabla  1 ), que se
encuentra naturalmente en concentraciones bajas en mamíferos [ 37]. La D-alanina y el D-
asparatato mostraron una mayor extensión de la vida útil que sus correspondientes L-
isómeros. La adición de D-glutamato produjo efectos en la vida útil algo similar a su
correspondiente L-isómero. En contraste con los fuertes efectos a favor de la longevidad
observados con la L-serina, la suplementación con D-serina no condujo a la extensión de la vida
útil a ninguna de las concentraciones agregadas e incluso disminuyó ligeramente la vida útil a las
concentraciones más altas. Y, por último, la suplementación con D-prolina no extendió la vida
útil también. Estos resultados de la vida útil son consistentes con el metabolismo de los D-
aminoácidos que se requieren para la extensión de la vida útil, ya que la D-alanina, el D-aspartato
y el D-glutamato están presentes en la fuente alimenticia de E. coli y se ha demostrado que están
catabolizados por los productos de los genes daao-1 de C. elegans, ddo-1 y ddo-3 ,
respectivamente. No se encontró que la D-serina estuviera presente en la dieta de E. coli , sino
que se encontró que se sintetizaba endógenamente por C. elegans . Sin embargo, aún no se ha
encontrado que la enzima C. elegans media la D-serina [ 36 ] o la D-prolina.

La extensión de la vida mediada por aminoácidos, excepto


cuando es inducida por triptófano, es dependiente de DAF-16
Para determinar si la extensión de la vida útil inducida por los aminoácidos requiere rutas de
longevidad específicas, se administraron aminoácidos individuales a mutantes de las rutas de
longevidad conocidas en la concentración que extendió al máximo la vida útil. Primero, los
aminoácidos alanina, cisteína, glutamina, histidina, lisina, prolina, serina, triptófano y tirosina se
complementaron individualmente con los mutantes de corta duración de daf-16
(mgDf50) (Tabla  2 ). DAF-16 / FOXO es un factor de transcripción central que se traslada al
núcleo para activar un programa de respuesta al estrés en gusanos deficientes en la señalización
del receptor de insulina [ 38 ]. El triptófano fue el único aminoácido suplementado que extendió
la vida útil en el daf-16la cepa mutante que indica que el triptófano activa una ruta de longevidad
independiente de daf-16 , mientras que los otros 8 aminoácidos requieren la expresión génica
mediada por DAF-16 para el aumento de la longevidad. La cisteína y la histidina incluso
disminuyeron la vida útil cuando se complementa con esta cepa.

Tabla 2
Los efectos de los aminoácidos en la vida útil de daf-16 mutant y skn-
1 knockdown C. elegans

Tensión Tratamiento % de la vida % de la vida valor # de Replica


útil media útil media no p gusanos
de N2 tratada

daf-16 (mgDf50) Controlar 73 <0.001 608 7


Tensión Tratamiento % de la vida % de la vida valor # de Replica
útil media útil media no p gusanos
de N2 tratada

Histidina 5 92 <0.001 286 2


mM

Prolina 5 mM 106 0.0871 133 2

1 mM de 102 0.111 107 2


alanina

Triptófano 1 118 0.008 183 2


mM

Serina 10 mM 105 0.104 161 2

Glutamina 10 95 0.107 125 2


mM

Cisteína 5 mM 95 0.107 115 2

Cisteína 10 81 <0.001 105 2


mM

Tirosina 5 96 0.578 140 2


mM
Tensión Tratamiento % de la vida % de la vida valor # de Replica
útil media útil media no p gusanos
de N2 tratada

Lisina 5 mM 99 0.907 130 2

N2 ( skn- Controlar 59 <0.001 156 3


1 RNAi) con
bacterias vivas
Triptófano 1 107 0.042 125 3
mM

Serina 10 mM 107 0.01 175 3

Histidina 5 103 0.296 139 3


mM

Prolina 5 mM 105 0.088 111 2

N2 con bacterias Controlar - 298 5


vivas

Triptófano 1 109 <0.001 317 5


mM

Serina 10 mM 109 <0.001 375 5


Tensión Tratamiento % de la vida % de la vida valor # de Replica
útil media útil media no p gusanos
de N2 tratada

Histidina 5 110 <0.001 277 5


mM

Prolina 5 mM 108 <0.001 268 4

Para confirmar que los aminoácidos activan la actividad transcripcional de DAF-16, medimos la
fluorescencia de una cepa reportera de gusanos DAF-16 de sod-3p :: gfp después del cultivo en
presencia de aminoácidos individuales (Figura  2 A). Como se esperaba de los datos de vida útil,
la serina y la prolina aumentaron la fluorescencia de estos gusanos. La presencia de triptófano
también aumentó la fluorescencia, por lo que el triptófano probablemente activa tanto las vías
dependientes de DAF-16 como las vías independientes de DAF-16 para la extensión de la vida
útil. También hubo una fuerte tendencia a que la leucina aumentara la
fluorescencia. Inesperadamente, la histidina no aumentó la expresión de sod-3p :: gfp . Las
razones de este hallazgo no están claras, ya que encontramos que se requería DAF-16 para la
extensión de la vida mediada por histidina.
Figura 2

Los efectos de la adición de aminoácidos en la expresión génica


mediada por DAF-16, SKN-1 y HIF-1. (A) Los efectos de la adición de
aminoácidos en sod-3p :: fluorescencia de GFP como una medida de la actividad transcripcional
DAF-16. (B) y (C) Los efectos de la adición de aminoácidos sobre la fluorescencia de gst-4p ::
GFP como medida de la actividad transcripcional de SKN-1. (D) y (E) Los efectos de la adición
de aminoácidos en la fluorescencia nhr-57p :: GFP como medida de la actividad transcripcional
de HIF-1. Se utilizó cianuro de potasio 20 μM como control positivo (* p  <0,05).

La mayoría de los aminoácidos activan la actividad


transcripcional SKN-1
La ruta de señalización SKN-1 / Nrf2 aumenta la expresión de los genes de desintoxicación y
antioxidantes celulares para extender la vida útil. Se determinó el efecto de la adición de serina,
triptófano, histidina o prolina en la vida útil de los gusanos de eliminación de skn-1 . Como se
muestra en la Tabla 2 , la suplementación con triptófano o serina prolongó la vida útil, pero no en
la medida de lo que ocurre  con los gusanos de control, mientras que solo hubo tendencias
insignificantes hacia una mayor vida útil después de la adición de histidina o prolina.
Para verificar aún más la capacidad de los aminoácidos para activar SKN-1, utilizamos una cepa
reportera de gusanos gst-4p :: GFP SKN-1 (Figura  2 B y C). Encontramos que 8 de los 10
aminoácidos analizados que aumentaron la vida útil aumentaron la expresión de GFP de la cepa
informadora. Aminoácidos que activan gst-4p :: GFPla expresión incluía serina, prolina,
glutamina, alanina, leucina, lisina y tirosina, mientras que el triptófano y la cisteína no. También
probamos los efectos de 2 aminoácidos, fenilalanina y asparagina, que disminuyeron la vida útil
de la fluorescencia de esta cepa informadora y no observamos ninguna inducción de la
expresión. En general, hubo una pequeña correlación entre la cantidad de actividad de SKN-1 y
la extensión de la vida útil, ya que la serina y la prolina prolongaron la vida útil en la mayor
medida y también aumentaron la fluorescencia de la cepa informadora SKN-1 en la mayor
medida. Anteriormente, se ha planteado la hipótesis de que el catabolismo de la prolina aumenta
de forma transitoria la producción de ROS que conduce a la activación de SKN-1
[ 26].]. Nuestros resultados son consistentes con esta hipótesis. La cisteína es un potente
antioxidante y es probable que las ROS requeridas para la activación de SKN-1 probablemente
expliquen la falta de activación de este aminoácido.
Los experimentos de alimentación de ARNi requieren bacterias vivas, mientras que las bacterias
muertas por calor se usaron en todos los demás experimentos de vida útil. Es posible que las
bacterias vivas utilizadas en los experimentos de la vida útil del ARNi de SKN-1 metabolicen los
aminoácidos añadidos amortiguando el grado de extensión de la vida útil. Por lo tanto,
realizamos experimentos de control que complementan los aminoácidos de C. elegans que
se alimentan de E. coli de control vivo HT115 (DE3) . C. elegans alimentado con bacterias de
control vivo tuvo una vida útil promedio de 16.1 +/− 0.2 días, un poco menos que los gusanos
alimentados con bacterias muertas por el calor (vida útil promedio de 17.2 +/− 0.3 días). La
histidina extendió la vida útil de manera similar en presencia de bacterias vivas o muertas por el
calor, como se muestra (Tabla  2 y archivo adicional 1: Tabla S1). Sin embargo, la extensión de
la duración de la vida inducida por el triptófano se redujo ligeramente mediante el uso de
bacterias vivas, y la extensión de la duración de la vida inducida por serina o prolina se redujo en
aproximadamente el 50% mediante el uso de bacterias vivas. Una tasa más alta de catabolismo de
serina y prolina por E. coli que el triptófano y la histidina probablemente explique estas
observaciones.

La histidina y la serina aumentan la expresión del gen diana


HIF-1
La proteína del factor 1 inducible por la hipoxia (HIF-1) se degrada rápidamente durante las
condiciones estándar, pero se estabiliza durante la hipoxia o por otras tensiones específicas para
aumentar la vida útil en C. elegans [ 39 ]. Por lo tanto, probamos la cepa informadora HIF-1 nhr-
57p :: GFP [ 39 ] para detectarcambios inducidos por aminoácidos en la fluorescencia de GFP
(Figura  2D y E). El cianuro se utilizó como control positivo, ya que inhibe la citocromo c
oxidasa, el complejo proteico que se une al oxígeno molecular, el aceptor de electrones terminal
en la cadena de transporte de electrones, para imitar los efectos de la hipoxia en las
mitocondrias. Encontramos que la histidina o la serina aumentaron la fluorescencia, mientras que
el triptófano, la prolina, la tirosina, la alanina, la cisteína, la glutamina, la lisina o la leucina
no. Estos datos indican que la estabilización de HIF-1 puede ser uno de los mecanismos a través
de los cuales la histidina y la serina prolongan la vida útil, aunque se necesitan experimentos de
vida con gusanos mutantes HIF-1 para confirmar esta hipótesis.
La extensión de la vida útil mediada por aminoácidos es
dependiente de AAK-2 (AMPK)
A continuación, administramos individualmente C. elegans, nuestro conjunto de prueba de 10
aminoácidos, excepto leucina, para los gusanos aak-2 (gt33) , que se agotaron de una de las dos
subunidades catalíticas de la proteína quinasa activada por AMP (AMPK) y se realizó un análisis
de vida útil (Tabla  3 ). La señalización de AMPK inhibe la señalización de la quinasa de la
rapamicina (TOR) para estimular la autofagia para reciclar componentes celulares. AMPK
también estimula la sirtuina deacetilasa SIR-2.1, SKN-1 / Nrf2 y DAF-16 / FOXO a favor de la
longevidad [ 40 ]. Ninguno de los aminoácidos extendió la vida útil en esta cepa mutante. La
tirosina disminuyó la vida útil mientras que los otros 8 aminoácidos probados no tuvieron un
efecto significativo. Por lo tanto, AAK-2 es necesario para los beneficios de longevidad
proporcionados por los aminoácidos.

Tabla 3
Los efectos de los aminoácidos en la vida útil de aak-2, sir-2.1 y eat-2 mutant
y bec-1knockorms.

Tensión Tratamiento % de vida útil % de la vida valor # de Replica


media del útil media no p gusanos
control de N2 tratada

aak-2 (gt33) Controlar 80 <0.001 786 8

Histidina 5 100 0.877 189 2


mM

Prolina 5 mM 100 0.919 187 2

1 mM de 100 0.943 209 2


alanina
Tensión Tratamiento % de vida útil % de la vida valor # de Replica
media del útil media no p gusanos
control de N2 tratada

Triptófano 1 102 0.060 220 2


mM

Serina 10 mM 101 0.137 204 2

Lisina 5 mM 87 0.373 180 2

Cisteína 5 mM 85 0.952 140 2

Cisteína 10 90 0.122 145 2


mM

Tirosina 5 mM 80 <0.001 200 2

Glutamina 5 94 0.436 180 2


mM

Glutamina 10 103 0.126 200 2


mM

señor-2.1 Controlar 86 <0.001 299 4


Tensión Tratamiento % de vida útil % de la vida valor # de Replica
media del útil media no p gusanos
control de N2 tratada

(ok434) Histidina 5 100 <0,830 154 2


mM

Prolina 5 mM 104 0.211 114 2

1 mM de 98 0.225 165 2
alanina

Triptófano 1 102 0.673 121 2


mM

Serina 10 mM 101 0.482 136 2

Glutamina 10 110 <0.001 180 2


mM

Cisteína 5 mM 105 0.244 192 2

Cisteína 10 110 <0.001 190 2


mM

Tirosina 5 mM 93 0.231 131 2


Tensión Tratamiento % de vida útil % de la vida valor # de Replica
media del útil media no p gusanos
control de N2 tratada

Lisina 5 mM 107 0.017 146 2

Fenilalanina 1 105 0.049 155 2


mM

Fenilalanina 101 0.402 176 2


10 mM

eat-2 (ad1116) Controlar 142 <0.001 135 2

Serina 10 mM 108 0.078 161 2

Triptófano 1 105 0.099 138 2


mM

Glutamina 5 100 0.841 134 2


mM

Histidina 5 106 0.091 153 2


mM

Prolina 5 mM 107 0.076 176 2


Tensión Tratamiento % de vida útil % de la vida valor # de Replica
media del útil media no p gusanos
control de N2 tratada

N2 ( bec- Controlar 123 <0.001 184 2


1 RNAi) con
bacterias vivas
Triptófano 1 107 <0.001 162 2
mM

Serina 10 mM 101 0.316 152 2

Histidina 5 99 0.274 117 2


mM

Prolina 5 mM 98 0.09 102 2

Abrir en una ventana separada

Muchos aminoácidos requieren SIR-2.1 para la extensión de la


vida útil
A continuación, se determinaron los efectos de la suplementación individual de estos mismos 9
aminoácidos, así como la fenilalanina, en la vida útil del sir-2.1 (ok434) mutante de sirtuina
desacetilasa dependiente de NAD (Tabla  3 ). Se produjeron aumentos de la vida útil de pequeños
a moderados con la suplementación con cisteína, glutamina, lisina y fenilalanina a dosis bajas,
pero no hubo efectos significativos de otros 6 aminoácidos analizados en la vida útil de esta
cepa. Por lo tanto, se requirió SIR-2.1 para la extensión de la vida mediada por poco más de la
mitad de los aminoácidos analizados. Sorprendentemente, la suplementación con fenilalanina en
dosis altas (10 mM) no condujo a una disminución de la esperanza de vida en esta cepa como lo
hizo en los gusanos de control N2.

Los aminoácidos no prolongan significativamente la vida útil de


los gusanos DR de larga duración
La restricción de un aminoácido específico, como la metionina de la dieta, se puede utilizar para
prolongar la vida útil y obtener algunos de los beneficios de la restricción dietética (DR) [ 8 ],
pero no hay mucha evidencia de que la suplementación con aminoácidos específicos pueda
producir un aumento de los efectos de la longevidad. Por lo tanto, administramos aminoácidos
individuales a los mutantes de eat-2 (ad1116)que están restringidos dietéticamente y son de larga
duración debido a la reducción del bombeo faríngeo. Los mutantes de eat-2 de control no
tratados tuvieron una vida útil media un 42% más larga que los controles de N2, lo que indica
que nuestros gusanos de control no estaban restringidos dietéticamente en nuestras condiciones
de crecimiento. Ninguno de los 5 aminoácidos analizados produjo una extensión de vida útil
estadísticamente significativa (Tabla  3). Sin embargo, 4 de los aminoácidos produjeron fuertes
tendencias hacia la extensión de la vida útil (valores de p entre 0,08 y 0,10). Por lo tanto, es
probable que los aminoácidos individuales utilicen alguna parte de la vía de señalización de DR
para la extensión de la vida útil.

La autofagia es necesaria para la extensión de la vida útil


inducida por la suplementación con serina, prolina o histidina,
pero no por triptófano
Dado que se ha demostrado que la autofagia es necesaria para la extensión de la vida útil mediada
por DR [ 41 ], determinamos si la autofagia también era necesaria para la longevidad mediada
por aminoácidos. Para bloquear la autofagia, eliminamos el bec-1 , el homólogo de C.
elegans Beclin-1 y la vida útil monitoreada después de la suplementación con serina, prolina,
histidina o triptófano. El derribo de bec-1 por ARNi alimentó una mayor esperanza de vida como
se mostró anteriormente en [ 42 ] y evitó la extensión de la vida útil inducida por la
suplementación con serina, prolina o histidina, pero no por triptófano (Tabla  3). Por lo tanto, la
mayoría de los aminoácidos, pero no el triptófano, requieren una autofagia para prolongar la vida
útil, lo que sugiere una vez más que el triptófano prolonga la vida útil a través de un mecanismo
distinto de otros aminoácidos.
El factor de transcripción PHA-4 / FOXA es necesario para la inducción de la autofagia y la
extensión de la vida útil en respuesta al DR. Además, se ha demostrado que la expresión del
factor de transcripción PHA-4 está regulada al alza en aproximadamente un 50% por DR
[ 43 ]. Por lo tanto, determinamos si la administración de aminoácidos individuales podría
aumentar los niveles de proteína PHA-4 mediante el uso de una cepa de gusanos diseñados para
expresar PHA-4: GFP: 3xFLAG utilizando el promotor pha-
4endógeno [ 44 ]. Sorprendentemente, encontramos que la adición de serina, histidina o
triptófano no alteró la fluorescencia de GFP de esta cepa (archivo adicional 4: Figura S3). Sin
embargo, la adición de leucina dio lugar a una fuerte tendencia hacia el aumento de la
fluorescencia (p = 0,08). En general, la suplementación con aminoácidos individuales no parece
tener mucho efecto sobre la fluorescencia en esta cepa. Sin embargo, todavía no podemos
descartar la posibilidad de que los cambios en la localización de PHA-4 o la modificación
postraduccional desempeñen un papel en la longevidad inducida por aminoácidos
individuales. También es posible que las etiquetas GFP y FLAG agregadas afecten la estabilidad
de la proteína. Los estudios de vida útil que utilizan pha-4 RNAi son necesarios para determinar
el papel, si lo hay, de PHA-4 en la extensión de la vida mediada por aminoácidos.
La inhibición de la señalización TOR juega un papel en la
extensión de la vida útil mediada por aminoácidos
Los aminoácidos específicos, especialmente la leucina, pero también en menor medida la
arginina y la glutamina pueden ser activadores de la vía de señalización de TOR que limita la
vida útil [ 45 ]. La administración de rapamicina, un inhibidor de TOR o la administración de
TOR RNAi a C. elegans induce la autofagia y prolonga la vida útil [ 46 , 47 ]. Más
recientemente, se descubrió que la suplementación con alfa-cetoglutarato puede conducir a la
inhibición de la TOR para extender la vida útil [ 48 ]. El golpe de gracia o caída de la quinasa S6
ribosomal, que está más abajo de la TOR quinasa en la vía de señalización, también prolonga la
vida útil [ 49 ]. Parte de este efecto puede depender de una tasa reducida de traducción de
proteínas, ya que los inhibidores de la traducción de proteínas también pueden extender la vida
útil [49]. Por lo tanto, determinamos los efectos de los aminoácidos específicos en la vida útil de
los mutantes ribosómicos de la quinasa S6 rsks-1 (ok1255) de larga duración , en los que se
inhibe este brazo de la vía de señalización TOR (Tabla  4 ). A diferencia de los resultados con los
gusanos de control de N2, la adición de serina no alteró la vida útil de esta cepa, mientras que la
adición de prolina o histidina disminuyó ligeramente la vida útil, y la adición de triptófano
disminuyó la vida útil en un 20%. Por lo tanto, estos aminoácidos parecen utilizar la inhibición
de la señalización de TOR para mediar en la extensión de la vida útil, ya que los aminoácidos no
prolongaron la vida útil en gusanos mutantes de larga vida donde la señalización de TOR ya
estaba interrumpida.

Tabla 4
Los efectos de los aminoácidos sobre la vida útil de RSKs-1 , GCN-2 , ife-2 , gas-
1 , y MEV 1-mutantes

Tensión Tratamiento % de vida útil % de la vida valor # de Replica


media del control útil media no p gusanos
de N2 tratada

rsks-1 Controlar 109 <0.001 362 4


(ok1255)

Triptófano 1 71 <0.001 130 2


mM

Histidina 5 93 0.031 135 2


mM
Tensión Tratamiento % de vida útil % de la vida valor # de Replica
media del control útil media no p gusanos
de N2 tratada

Prolina 5 mM 94 0.042 140 2

Serina 10 mM 101 0.236 162 2

gcn-2 Controlar 90 <0.001 479 4


(ok871)

Triptófano 1 99 0.489 160 2


mM

Histidina 5 100 0.335 163 2


mM

Prolina 5 mM 107 0.001 205 2

Serina 10 mM 104 0.006 183 2

Ife-2 Controlar 97 0.245 112 2


(ok306)

Triptófano 1 94 0.029 138 2


mM
Tensión Tratamiento % de vida útil % de la vida valor # de Replica
media del control útil media no p gusanos
de N2 tratada

Histidina 5 98 0.597 110 2


mM

Prolina 5 mM 102 0.352 117 2

Serina 10 mM 99 0.791 96 2

gas-1 Controlar 69 <0.001 119 2


(fc21)

Histidina 5 104 0.092 110 2


mM

Serina 10 mM 98 0.327 106 2

Prolina 5 mM 109 0.003 115 2

mev-1 Controlar 69 <0.001 273 2


(kn1)

Histidina 5 104 0.021 215 2


mM

Serina 10 mM 109 <0.001 258 2


Tensión Tratamiento % de vida útil % de la vida valor # de Replica
media del control útil media no p gusanos
de N2 tratada

Prolina 5 mM 102 0.102 256 2

Se requiere una tasa de traducción reducida para los efectos de


los aminoácidos que se extienden durante toda la vida
GCN-2 (control general no compresible-2) quinasa puede disminuir la velocidad de iniciación de
la traducción mediante la fosforilación del factor de iniciación de la traducción de eucariotas-2
alfa (eIF-2α) cuando los ARNt no se cargan debido a los bajos niveles de aminoácidos [ 34 ] o en
momentos de mitocondria estrés metabólico [ 33 ]. Nuestra hipótesis es que la suplementación
con aminoácidos que causa un desequilibrio de aminoácidos podría resultar en una carga
ineficiente de ARNt o causar una señalización de estrés metabólico a través de GCN-2 para
extender la vida útil. Por lo tanto, determinamos la vida útil de los mutantes gcn-2
(ok871) suplementados con aminoácidos individuales (Tabla  4). Encontramos que la
suplementación con histidina o triptófano no condujo a un aumento de la longevidad cuando se
usó esta cepa, mientras que solo una extensión del 4% o 7% de la vida útil ocurrió cuando se
complementó con la serina o la prolina, respectivamente. Para determinar aún más el papel de la
disminución de la traducción en la longevidad mediada por el desequilibrio de aminoácidos,
realizamos un análisis de la vida útil utilizando la cepa ife-2 (ok306) [ 50], que es deficiente en
una isoforma del factor de iniciación de la traducción eIF4E y se muestra que es de larga
duración. Sorprendentemente, bajo nuestras condiciones de cultivo líquido utilizando bacterias
muertas por calor como alimento, la vida útil de esta cepa no fue significativamente diferente del
control. Sin embargo, la suplementación de serina, prolina, histidina o triptófano a esta cepa no
condujo a una vida útil prolongada, mientras que la adición de triptófano incluso disminuyó
ligeramente la vida útil. Por lo tanto, la señalización para disminuir la velocidad de traducción es
probablemente un mecanismo general involucrado en el aumento de la longevidad mediado por
aminoácidos individuales.

El efecto de los aminoácidos individuales en la vida útil de los


mutantes mitocondriales ETC complejos I y II
Para probar la hipótesis de que la actividad ETC mitocondrial es importante para la extensión de
la vida útil inducida por aminoácidos, complementamos serina, histidina o prolina a cualquiera de
los complejos ETC mitocondriales de vida corta. Gusanos mutantes de gas-1 (fc21) de corta
duración oa ETC mitocondrial de vida corta. gusanos mutantes mev-1 (kn1) defectuosos del
complejo II (Tabla  4 ). Encontramos que la suplementación con prolina prolongó la vida útil
de los mutantes del gas-1 , pero que la serina o la histidina no pudieron extender la vida, aunque
hubo una fuerte tendencia con la histidina (p = 0.09). Cuando complementamos cada uno de estos
3 aminoácidos a mev-1mutantes, encontramos efectos opuestos. Proline no extendió la vida útil,
aunque se observó una fuerte tendencia (p = 0,10), mientras que la serina y la histidina
prolongaron la vida útil. Por lo tanto, se requiere una actividad normal del complejo I (NADH
deshidrogenasa) para la extensión completa de la vida mediada por la serina y la histidina,
mientras que la actividad normal del complejo II se requiere para la extensión de la vida mediada
por la prolina. Estos datos pueden explicarse porque la prolina deshidrogenasa genera
FADH 2 que alimenta electrones en el ETC en el complejo II y el catabolismo de histidina y
serina genera NADH que alimenta electrones en el ETC en el complejo I.

Los metabolitos más suplementados prolongan la vida útil a


una concentración óptima
Dado que la suplementación con una concentración óptima de la mayoría de los aminoácidos
prolongó la vida útil de los gusanos, es posible que su descomposición a los intermedios del ciclo
TCA pueda desempeñar un papel en la extensión de la vida útil. Se ha demostrado anteriormente
que la suplementación con piruvato [ 51 ], acetato (que se puede metabolizar fácilmente en el
sustrato del ciclo de TCA acetil-CoA) [ 52 ], o los intermedios del ciclo de TCA malato,
fumarato [ 53 ], oxaloacetato [ 54 ], y alfa-cetoglutarato [ 48 ] vida útil extendida en C.
elegans. Por lo tanto, determinamos la vida útil de los gusanos complementados individualmente
con concentraciones de 1, 5 o 10 mM de los intermediarios del ciclo TCA citrato, isocitrato, alfa-
cetoglutarato o succinato (Tabla  5 ). Anteriormente, encontramos que el succinato 10 mM no
prolongaba la vida útil, pero sí inducía la translocación del factor pro-longevidad DAF-16 al
núcleo [ 53 ]. Pero aquí encontramos que la reducción de la concentración de succinato a 5 mM o
1 mM resultó en una extensión de la vida útil (Figura  3 A), consistente con un informe reciente
de un beneficio de longevidad [ 48 ]. El citrato está presente a 10 mM en todos nuestros
experimentos como un componente tampón estándar del medio S. Encontramos que eliminarlo
no afectó la vida útil (Figura  3SEGUNDO). Los hallazgos anteriores tampoco lograron encontrar
una extensión de la vida útil con suplementos de citrato [ 48 , 52 ]. Encontramos que el alfa-
cetoglutarato en cualquiera de las 4 concentraciones analizadas de 0,1 a 10 mM de vida útil
extendida (Figura  3 C), como se informó recientemente para una dosis de 8 mM [ 48 ]. Agregar
DL-isocitrato al medio condujo a un aumento en la vida útil a la concentración de 5 mM, pero a
una disminución en la vida útil a la concentración de 10 mM (Figura  3 D). Se desconoce si el
isómero L de origen no natural contribuyó a este efecto, pero dado que encontramos que el
malato D del isómero no natural disminuye la vida útil en las 3 concentraciones analizadas
(Tabla  5), es una posibilidad fuerte. Otro grupo no observó ningún efecto del isocitrato 8 mM en
la vida útil [ 48 ]. Por lo tanto, de los 7 intermedios del ciclo de TCA que hemos probado, 6
fueron capaces de extender la vida útil a una dosis óptima.

Tabla 5
Los efectos de los intermediarios del ciclo de TCA y sus isómeros en la vida útil
de C. elegans
Tratamiento Concentración % de la vida útil media no valor # de Replica
tratada p gusanos

succinate 1 mM 111 <0.001 590 4

5 mM 110 <0.001 570 4

10 mM 104 0.098 607 4

citrato 1 10 mM 98 0.414 229 2

α- 0.1 mM 110 <0.001 261 3


cetoglutarato

1 mM 115 <0.001 345 3

5 mM 111 <0.001 337 3

10 mM 107 0.042 333 3

DL-isocitrato 1 mM 103 0.202 452 4

5 mM 113 <0.001 523 4

10 mM 72 <0.001 217 4
Tratamiento Concentración % de la vida útil media no valor # de Replica
tratada p gusanos

D-malato 1 mM 85 <0.001 106 1

5 mM 76 <0.001 77 1

10 mM 79 <0.001 142 1

1 en
 comparación con un medio que carece de citrato. Todos los demás experimentos contienen
citrato 10 mM como parte de los medios de cultivo estándar.
Abrir en una ventana separada
figura 3
La suplementación individual de muchos metabolitos del ciclo de TCA extiende la vida útil
media en C. elegans . (A) El succinato prolonga la vida útil, (B) el citrato no prolonga la vida
útil, (C) el alfa-cetoglutarato prolonga la vida útil y (D) el isocitrato prolonga la vida útil en una o
más de las concentraciones analizadas. El citrato 10 mM es un componente estándar del medio
S. Se eliminó para determinar el efecto del citrato en la vida útil.
Nuestra hipótesis era que el catabolismo de los aminoácidos para la anaplerosis o la producción
de energía probablemente desempeñaba un papel en la extensión de la vida útil. Si esto es cierto,
complementar otros metabolitos celulares comunes también debería extender la vida útil. Por lo
tanto, realizamos un análisis de la vida útil de los gusanos suplementados con azúcares u otros
metabolitos que carecen de átomos de nitrógeno (Archivo adicional 5: Tabla S2). Con una dosis
óptima, el gluconato, el glicerol, el inositol, el fenofirolpiruvato o la ribosa aumentaron
sustancialmente la esperanza de vida, mientras que la xilosa, galactosa, DL-lactato o caprilato
aumentaron ligeramente la vida útil. La glucuronolactona, el gliceraldehído, la fructosa, el
propionato o la dihidroxiacetona no extendieron la vida útil y los últimos 4 de estos compuestos
incluso disminuyeron la vida útil en un 13-25% a la dosis de 10 mM. El gliceraldehído, la
fructosa y la dihidroxiacetona se convierten fácilmente en intermediarios glicolíticos que
conducen a la formación de metilglioxilo tóxico a partir de gliceraldehído fosfato o
dihidroxiacetona fosfato, lo que podría contribuir a su toxicidad, mientras que el ácido propiónico
es neurotóxico en niveles altos [ 28 ].
Dado que muchos aminoácidos activaron el SKN-1, mientras que los intermediarios del ciclo del
TCA no lo hicieron, planteamos la hipótesis de que los metabolitos que contienen nitrógeno
podrían ser inductores ligeramente más potentes de la extensión de la vida útil. Los efectos de
muchos metabolitos que contienen nitrógeno en la vida útil se muestran en el archivo adicional 6:
Tabla S3. En una dosis óptima, carnosina, beta-alanina, betaína, homocisteína, ornitina,
agmatina, putrescina, taurina y teanina prolongan la vida útil. Para la mayoría de estos
compuestos, la concentración más baja, como 1 mM, produjo una mayor extensión de la vida útil
que la concentración más alta de 10 mM, lo que sugiere una respuesta a la dosis hormética. La
suplementación con creatina, o la histidina, catabolitos, histamina o ácido urocánico, no extendió
la vida a ninguna de las 3 concentraciones analizadas. Aunque la mayoría de los compuestos que
contienen nitrógeno extendieron la vida útil a una dosis óptima, la extensión de la extensión de la
vida no fue notablemente diferente a cuando se complementa con compuestos que carecen de
nitrógeno.

La vida útil de C. elegans no estuvo limitada por la


disponibilidad de nitrógeno
Utilizamos E. coli muerta por calor como fuente de alimento para evitar que las bacterias
metabolicen los metabolitos agregados, pero hemos encontrado que la E. coli que mata con
calorcausa la pérdida de uno o más nutrientes esenciales que limitan el crecimiento durante el
calentamiento. Por lo tanto, la reducción de la concentración de bacterias muertas por calor en los
medios de crecimiento en solo un factor de 2 no permitió completar el crecimiento larvario hasta
la edad adulta, sino que condujo a la formación de dauer. La concentración de bacterias vivas
podría reducirse de 30 a 40 veces antes de la formación de dauer durante el desarrollo
larvario. Para probar si los gusanos pueden haber sido limitados por el nitrógeno en nuestras
condiciones de cultivo, complementamos los gusanos con peptonas u otros compuestos que
contienen nitrógeno y medimos la vida útil. Curiosamente, la peptona a 1,25 g / L, la mitad de la
concentración presente en los medios de crecimiento de nematodos (NGM) disminuyó la vida útil
en un 22% (archivo adicional 6: Tabla S3). Esta concentración contiene aproximadamente 10
mM de aminoácidos totales. Estos resultados respaldan los hallazgos publicados en los que 5 g /
L (2x NGM) y 10 g / L (4x NGM) también disminuyeron la vida útil de C. elegans en medio S
líquido [ 55 ]. La reducción de la concentración de peptona a 0.125 g / L (0.1x NGM) produjo
una vida útil similar a la de los controles no tratados. A continuación agregamos cloruro de
amonio como fuente de nitrógeno. Las concentraciones de cloruro de amonio de 1 a 10 mM no
extendieron la vida útil. Por lo tanto, los aminoácidos no aumentan la vida útil únicamente al
proporcionar nitrógeno a los gusanos.

La fenilalanina y el alfa-cetoglutarato activan una cepa


informadora HSF-1
Debido a que la suplementación de muchos de los aminoácidos y otros metabolitos mostró una
menor extensión de la vida útil a concentraciones más altas, la hipótesis de que C. elegans montó
una respuesta al estrés que resultó en una extensión de la vida útil a niveles más bajos de
aminoácidos, pero a niveles más altos la respuesta al estrés fue superada. a la disminución de la
vida útil. Por lo tanto, determinamos si la suplementación con aminoácidos activa una cepa de
gusanos Phsp-16.2 :: GFP . HSP-16.2 es una proteína de choque térmico citoplásmica pequeña y
un objetivo del factor de transcripción HSF-1 [ 56]. Primero probamos los efectos de la
glutamina, histidina, metionina, serina, triptófano o tirosina, aminoácidos que prolongan la vida
útil, o fenilalanina, un aminoácido que reduce la vida útil de la fluorescencia de GFP en la cepa
Phsp-16.2 :: GFP reportero que usa calor Como control positivo (Figura  4 A). De estos
aminoácidos, solo la fenilalanina activó la expresión del gen reportero de GFP.
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Figura 4
Los efectos de los aminoácidos sobre el choque térmico, la respuesta proteica desplegada
mitocondrial y la respuesta al estrés ER. Los aminoácidos se agregaron a la concentración
probada que produjo la extensión máxima de la vida útil, excepto la fenilalanina, que no extendió
la vida útil. (A) Phsp-16.2 :: GFP (B) Phsp-4 :: GFP (C) Phsp-6 :: GFP (D) Phsp-60 ::
GFP . Para los paneles A y B, el choque térmico a 35 ° C durante 2 horas se usó como control
positivo. Para los paneles C y D se utilizaron 50 µg / ml de tratamiento con bromuro de etidio
durante 2 días como control positivo (* p <0,05 frente al control).
A continuación, probamos los efectos del intermedio del ciclo de TCA o la suplementación con
piruvato en la cepa indicadora Phsp-16.2 :: GFP , ya que los aminoácidos se dividen en
intermediarios del ciclo de TCA cuando están presentes en exceso. Cuando se administró a
la cepa alfa-cetoglutarato de Phsp-16.2 :: GFP , pero ninguno de los otros intermedios del ciclo
TCA suplementado incrementó la fluorescencia de GFP (Figura  5 A). Muchos de los
aminoácidos que muestran los mayores efectos estimulantes en la vida útil (prolina, arginina,
histidina, glutamina y glutamato) se catabolizan a través del glutamato en alfa-cetoglutarato en el
ciclo del TCA.

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Figura 5
Los efectos de los metabolitos del ciclo del TCA y el piruvato sobre el choque térmico, la
respuesta proteica desplegada mitocondrial y la respuesta al estrés ER. (A) Phsp-16.2 ::
GFP (B) Phsp-4 :: GFP (C) Phsp-6 :: GFP (D) Phsp-60 :: GFP (* p <0,05 frente al
control). Para los paneles A y B, el choque térmico a 35 ° C durante 2 horas se usó como control
positivo. Para los paneles C y D se utilizaron 50 µg / ml de tratamiento con bromuro de etidio
durante 2 días como control positivo (* p <0,05 frente al control).
La histidina, el triptófano y el citrato inducen una respuesta al
estrés en la sala de emergencias
A continuación, determinamos si los aminoácidos activaban la respuesta al estrés del retículo
endoplásmico (RE) mediante el uso de una cepa informadora de gusanos diseñados para contener
un promotor de la proteína de choque térmico-4 ( hsp-4 ) que impulsa la expresión de la proteína
verde fluorescente (GFP) [ 57 ]. Probamos el efecto de la suplementación con glutamina,
histidina, metionina, serina, triptófano o tirosina en la expresión de GFP en la cepa reportera de
gusanos Phsp-4 :: GFP utilizando un choque térmico como control positivo (Figura  4 B). La
histidina y el triptófano indujeron la expresión de GFP, la metionina y la glutamina redujeron la
expresión de GFP, mientras que los otros aminoácidos no tuvieron efecto.
Posteriormente, se determinaron los efectos de los intermedios del ciclo de TCA suplementados y
el piruvato en las cepas informadoras de gusanos Phsp-4 :: GFP ER (Figura  5 B). La expresión
del gen reportero Phsp-4 :: GFP activada por citrato , y también hubo una fuerte tendencia (p =
0.05) al aumento de la expresión con alfa-cetoglutarato, mientras que los otros intermedios del
ciclo de TCA no tuvieron efecto. La quelación del calcio u otros iones metálicos es un posible
mecanismo de cómo algunos de estos compuestos o sus metabolitos activan el estrés ER.

El triptófano induce la respuesta mitocondrial de la proteína


desplegada
También probamos la activación de la respuesta de la proteína mitocondrial desplegada
utilizando las cepas informadoras Phsp-6 y Phsp-60 y el tratamiento con bromuro de etidio como
control positivo. HSP-6 es el homólogo de gusano de mamífero mitocondrial hsp-70, mientras
que HSP-60 también se localiza en la mitocondria. Ambas proteínas de choque térmico
mitocondrial desempeñan un papel en la respuesta de la proteína desplegada mitocondrial, pero
esta respuesta no siempre está asociada con la longevidad [ 58 ]. Para la cepa Phsp-6 ::
GFP reporter, probamos glutamina, histidina, serina, fenilalanina y triptófano
(Figura  4DO). Encontramos que la fenilalanina y el triptófano aumentan la expresión de forma
robusta, mientras que los otros aminoácidos no aumentaron la expresión. Además, probamos los
efectos de la glutamina, histidina, fenilalanina, prolina, serina, triptófano y tirosina sobre la
expresión de GFP en la cepa informadora Phsp-60 :: GFP (Figura  4 D). Sólo encontramos
triptófano para aumentar la expresión. También hubo una fuerte tendencia a que la prolina
aumente la expresión (p = 0.06), mientras que la serina redujo ligeramente la expresión. En
general, la mayoría de los aminoácidos no se basan en la vía de respuesta de la proteína
mitocondrial desplegada para la extensión de la vida útil.
A continuación, se determinaron los efectos de los intermedios del ciclo de TCA y el piruvato en
las cepas informadoras de respuesta de proteínas desplegadas mitocondriales. Ninguno de los
metabolitos afectó la expresión del indicador Phsp-6 :: GFP (Figura  5 C), mientras que el
piruvato, el succinato y el malato disminuyeron ligeramente la expresión de la cepa
indicadora Phsp-60 :: GFP (Figura  5 D). En general, los datos sugieren que la suplementación
intermedia del ciclo TCA no requiere la vía de respuesta de la proteína desplegada mitocondrial
para la extensión de la vida útil.
Los metabolitos del triptófano, el ácido nicotínico, la
nicotinamida y el ácido picolínico inducen tanto el estrés del
RE como las respuestas de proteínas mitocondriales
desplegadas.
Dado que el triptófano activó la expresión de la respuesta al estrés del RE y 2 cepas informadoras
de la respuesta de la proteína desplegada mitocondrial, determinamos si uno o más de sus
productos de descomposición o metabolitos relacionados estructuralmente también podrían
inducir estas respuestas. Por lo tanto, agregamos muchos de los productos de degradación del
triptófano o metabolitos celulares relacionados con el triptófano, como la serotonina, el ácido
antranílico, el ácido nicotínico, la nicotinamida, la NAD, el ácido glutárico, el ácido quinurénico,
el ácido quinolínico y el ácido picolínico a la cepa informadora HSF-1, el ER cepa informadora
de estrés y las 2 cepas informadoras mitocondriales desplegadas de respuesta proteica
(Figura  6ANUNCIO). Sorprendentemente, el ácido nicotínico activó la expresión de la misma
respuesta al estrés en el RE y la respuesta a la proteína mitocondrial desplegada como triptófano,
mientras que el ácido picolínico y la nicotinamida activaron la expresión de las 4 cepas
informadoras de GFP, aunque la activación de hsp-60 :: GFP por la nicotinamida fue baja (p =
0.07). El ácido picolínico es un isómero del ácido nicotínico y un importante quelante endógeno
del metal [ 59 ]. El ácido quinolínico indujo la expresión de los 2 informadores no mitocondriales
de la proteína de choque térmico. Por lo tanto, realizamos experimentos de duración de vida
agregando 1 mM de ácido picolínico o 1 mM de ácido quinolínico al medio de cultivo (archivo
adicional 6: Tabla S3). La adición de ácido picolínico mostró una tendencia (p = 0,13) hacia una
mayor vida útil. En contraste, la adición de ácido quinolínico disminuyó la vida útil del gusano
en un 26%, como podría esperarse de su neurotoxicidad conocida [ 60 ]. Previamente, se ha
demostrado que los precursores de NAD inducen la respuesta mitocondrial de la proteína
desplegada [ 61 ]. Aquí, agregamos una dosis de 0.1 mM de NAD y encontramos que solo
activaba la expresión de hsp-4, el marcador de estrés ER. Aunque los subproductos metabólicos
del triptófano podrían contribuir a los efectos protectores del triptófano suplementario, otros han
mostrado datos que sugieren que el triptófano en sí mismo puede ser el metabolito protector en
un modelo de toxicidad alfa-sinucleína de C. elegans [ 27 ].
Abrir en una ventana separada
Figura 6
Los efectos de los metabolitos del triptófano sobre el choque térmico, la respuesta
mitocondrial de la proteína desplegada y la respuesta al estrés del RE. (A) Phsp-16.2 ::
GFP (B) Phsp-4 :: GFP (C) Phsp-6 :: GFP (D) Phsp-60 :: GFP (* p <0,05 frente al
control). Para los paneles A y B, el choque térmico a 35 ° C durante 2 horas se usó como control
positivo. Para los paneles C y D se utilizaron 50 µg / ml de tratamiento con bromuro de etidio
durante 2 días como control positivo (* p <0,05 frente al control).

Prolina y triptófano aumentan la termotolerancia a C. elegans


Los aminoácidos podrían haber inducido la expresión de otros genes de choque térmico o
inducibles por estrés para extender la vida útil no analizados en nuestros experimentos de
reportero descritos anteriormente. Por lo tanto, determinamos el efecto de los suplementos de
aminoácidos individuales en la termotolerancia de C. elegans . Complementamos el medio de
crecimiento con glutamina, histidina, prolina, serina o triptófano y controlamos la viabilidad de
los gusanos después de la transferencia de 20 ° C a 35 ° C (Tabla  6 y archivo adicional 7: Figura
S4A). La prolina proporcionó un aumento del 30% en la termotolerancia y el triptófano
proporcionó un aumento del 10% en la termotolerancia, mientras que no hubo un efecto
significativo de los otros aminoácidos. El efecto de la prolina no es demasiado sorprendente dado
que la prolina estabiliza las proteínas y las membranas y se produce en exceso para proteger a las
plantas y algunos microorganismos de los estreses osmóticos, de salinidad y de temperatura
[ 62 ].
Tabla 6
Los efectos de los aminoácidos sobre la termotolerancia de C. elegans.

Tratamiento % de supervivencia media no tratada valor p # de Replica


gusanos

Histidina 5 mM 102 0.494 229 2

Triptófano 1 110 <0.001 208 2


mM

Serina 10 mM 102 0.794 196 2

Prolina 5 mM 130 <0.001 200 2

Glutamina 5 mM 99 0.584 82 1

A continuación, monitoreamos la resistencia al estrés oxidativo al monitorear la viabilidad de los


gusanos luego de la administración de paraquat (archivo adicional 7 : Figura S4B). El paraquat es
un inductor de la producción de superóxido a través del ciclo redox. Ninguno de los aminoácidos
probados, incluidos prolina, serina, histidina, triptófano o leucina, protegió significativamente la
viabilidad del gusano contra este estrés, aunque hubo una fuerte tendencia a la protección con
histidina (p = 0.08).

Poco efecto de la suplementación con aminoácidos sobre la


toxicidad de beta-amiloide de Alzheimer
Dado que muchos de los aminoácidos prolongaron la vida útil cuando se complementaron con el
medio de cultivo, también determinamos si la suplementación con aminoácidos individuales
podría retrasar la toxicidad en los modelos de trastornos elegibles de neurodegenerativos
humanos de C. elegans . Primero determinamos los efectos de la suplementación con serina,
histidina, prolina, triptófano o metionina sobre la tasa de desarrollo de la parálisis cuando el
péptido amiloide-beta, que se acumula en el cerebro de la enfermedad de Alzheimer, se expresa
en el músculo de la pared del cuerpo del gusano a partir de un inducible por temperatura
promotor [ 63 ]. En general, la suplementación con aminoácidos solo tuvo un efecto mínimo en la
tasa de parálisis. Encontramos que la serina (p = 0.07) (Figura  7 A) o la histidina (p = 0.05)
(Figura  7B) la suplementación dio fuertes tendencias para retrasar la parálisis muscular, mientras
que no se encontraron efectos significativos con prolina, metionina o triptófano (archivo
adicional 8 : Tabla S4).
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Figura 7
Los aminoácidos no proporcionan mucha protección en modelos de
proteotoxicidad. (A) La suplementación con serina y (B) con histidina produce una ligera
protección contra la toxicidad de la beta-amiloide muscular. (C) La suplementación con
triptófano disminuye la fluorescencia agregada de alfa-sinucleína. (D) La suplementación con
aminoácidos no protege contra la toxicidad de TDP-43.
El triptófano protege contra la toxicidad de alfa-sinucleína y
poliglutamina
A continuación, determinamos los efectos de la suplementación con histidina, prolina, serina o
triptófano sobre la agregación de alfa-sinucleína en gusanos que expresan una fusión de proteína
fluorescente alfa-sinucleína-verde (Figura  7 C). La alfa-sinucleína se agrega a los cuerpos de
Lewy en la región de la sustancia negra del cerebro en la enfermedad de Parkinson. El triptófano
era altamente protector y daba una reducción del 17% en la fluorescencia agregada, mientras que
los otros aminoácidos no tenían efecto. También probamos los efectos del triptófano, la serina y
la prolina en los agregados formados a partir de la expresión de una proteína de fusión
poliglutamina (Q35) –GFP [ 64 ] (Archivo adicional 9: Figura S5) como modelo de la
proteotoxicidad que se produce en la enfermedad de Huntington y otros trastornos de la
expansión del trinucleótido poliglutamina. Encontramos una fuerte tendencia hacia una
disminución en el número de agregados con la adición de triptófano (p = 0.07), pero ningún
efecto significativo de los otros dos aminoácidos analizados. No es sorprendente que la
suplementación con triptófano fuera protectora en estos modelos de proteotoxicidad de C.
elegans , ya que el agotamiento de la enzima TDO-2 que degrada el triptófano ha demostrado
aumentar los niveles de gusano triptófano y ser protector en varios modelos de proteotoxicidad
de gusanos [ 27 ]. También se demostró que la suplementación con triptófano era capaz de
aumentar la motilidad de los gusanos que expresan poliglutamina Q40.

El alfa-cetoglutarato, pero no los aminoácidos, protege a C.


elegans que expresa TDP-43
La proteína 43 de unión al ADN tar (TDP-43) es principalmente una proteína nuclear en
condiciones normales, pero la acumulación citoplásmica se asocia con ELA y otras enfermedades
neurodegenerativas. La sobreexpresión de TDP-43 conduce a toxicidad en C. elegans y se usa
como modelo de ELA. Por lo tanto, probamos si varios aminoácidos, incluyendo histidina,
metionina, prolina, serina y triptófano, podrían alterar la vida útil reducida de los gusanos que
sobreexpresan TDP-43 (Figura  7 D y archivo adicional 10: Tabla S5). Sin embargo, ninguno de
estos aminoácidos protegió contra la vida útil reducida, mientras que la adición de histidina
redujo aún más la vida útil. Pero, encontramos un efecto protector de la suplementación con alfa-
cetoglutarato en este modelo, lo que respalda los datos de un estudio en el que el alfa-
cetoglutarato en combinación con otros metabolitos fue protector en el modelo de ALS en
ratones SOD1-G93A [ 65 ].

La serina y el triptófano bloquean parcialmente la reducción de


la vida útil en medios de cultivo con alto contenido de glucosa
La glucosa alta en el torrente sanguíneo es un marcador de resistencia a la insulina y diabetes,
y se sabe que los niveles altos de glucosa en el medio de cultivo de C. elegans reducen la vida
útil [ 66 , 67 ]. Por lo tanto, la suplementación con alto contenido de glucosa se ha utilizado como
modelo de diabetes en C. elegans . Dado que las alteraciones de los niveles de aminoácidos
también acompañan a la diabetes, determinamos si aminoácidos selectos podrían alterar la vida
útil reducida como resultado de la adición de glucosa 50 mM al medio de cultivo. Encontramos
que la adición de glucosa disminuyó la vida útil en un 30 por ciento y que la serina (Figura  8 A)
o el triptófano (Figura  8B) suplementación parcialmente bloqueada reducción de la vida útil. La
adición de histidina, prolina o tirosina no tuvo un efecto significativo, mientras que la adición de
glutamina redujo la vida útil en mayor medida que la glucosa por sí sola (archivo adicional 11 :
Tabla S6).

Figura 8
La serina o el triptófano impiden parcialmente que la glucosa alta reduzca la vida útil de C.
elegans . (A)La serina extiende la vida útil de C. elegans en presencia de niveles altos de glucosa
(p <0.001). (B) El triptófano extiende la vida útil de C. elegans en presencia de glucosa alta (p
<0,001).

La suplementación con aminoácidos no altera


significativamente el consumo de oxígeno de C. elegans y los
niveles de ATP
Debido a que la suplementación con aminoácidos puede aumentar transitoriamente la producción
de ROS para la activación de SKN-1, la hipótesis de que los aminoácidos agregados pueden
catabolizarse para aumentar la función mitocondrial ETC. Por lo tanto medimos el consumo de
oxígeno y los niveles de ATP. Sin embargo, no encontramos un consumo de oxígeno o niveles de
ATP significativamente alterados después de la adición de los aminoácidos individuales serina,
prolina, histidina, triptófano, leucina, asparagina o fenilalanina a los gusanos (archivo
adicional 12 : Figura S6). Por lo tanto, los aminoácidos suplementados no se están metabolizando
a una tasa sustancial o se están metabolizando en reemplazo de los sustratos respiratorios
presentes en la fuente de alimentos de E. coli, lo que evita un aumento general de la tasa
metabólica.
Ir:
Discusión
La suplementación individual con 18 de los 20 aminoácidos proteogénicos en una concentración
óptima aumentó la vida útil de C. elegans . Esta extensión de la vida útil inducida por el
metabolito no fue específica solo para los aminoácidos como complemento de los intermediarios
del ciclo del TCA y muchas clases diferentes de metabolitos celulares también llevaron a una
extensión significativa de la vida útil, lo que sugiere un metabolismo celular alterado o la
anaplerosis del ciclo de la TCA juega un papel destacado. De los 20 aminoácidos, la serina y la
prolina prolongaron la vida útil en la mayor medida posible. Sorprendentemente, estos y otros
aminoácidos superiores no se extiende significativamente la vida útil de larga duración de la dieta
restringida comer-2mutantes Si se produjeran efectos similares en los seres humanos, las dietas
de aminoácidos desequilibradas podrían desarrollarse como un mimético de restricción dietética
para retrasar el envejecimiento y las enfermedades relacionadas con el envejecimiento. En este
sentido, se ha utilizado clínicamente una dieta con restricción de metionina para tratar el
síndrome metabólico [ 68 ]. Sin embargo, aún queda por determinar si las estrategias de
suplementación con aminoácidos se aplicarán a los eucariotas superiores, ya que la
suplementación individual con metionina no logró extender la vida útil de las moscas de la fruta
[ 24 ], mientras que la suplementación con metionina disminuyó la vida útil de los ratones [ 69 ].

La suplementación individual de aminoácidos puede disminuir


la tasa de traducción para extender la vida útil
La mayoría de las vías de longevidad bien estudiadas en C. eleganscomo DAF-16, SKN-1, AAK-
2, SIR-2.1 y HIF-1 parecen estar involucrados en la extensión de la vida mediada por histidina,
serina y prolina, con la excepción de la vía HIF-1 para la prolina. . Sin embargo, el triptófano
prolonga la vida útil de una manera independiente de SKN-1 y DAF-16, aunque el triptófano
incrementa la fluorescencia de una cepa reportera de gusanos DAF-16. Estas diferentes vías de
longevidad pueden converger para disminuir la velocidad de traslación por el ribosoma para la
extensión de la vida útil. Una pequeña a moderada cantidad de desequilibrio de aminoácidos
podría dificultar la carga correcta de aminoacil-ARNt sintetasa de ARNt, reduciendo la velocidad
de traducción de una manera dependiente de GCN-2 para aumentar la vida útil, mientras que una
mayor cantidad de desequilibrio de aminoácidos puede conducir a una reducción tóxica en Las
tasas de traducción disminuyen la vida útil. Previamente,33 ], durante la inhibición de TOR, o
durante la restricción dietética [ 34 ]. Además, también se demostró que los mutantes daf-2
de larga vida tienen una tasa de traducción reducida [ 70 ]. También se ha demostrado que la
reducción de la traducción mitocondrial que causa el desequilibrio de la proteína mitonuclear
conduce a una mayor esperanza de vida [ 71 ]. Las altas tasas de traslación durante el
envejecimiento pueden abrumar los sistemas de proteína chaperona, lo que resulta en
proteotoxicidad. La traducción lenta o el aumento de la actividad de las proteínas de choque
térmico pueden retrasar esta proteotoxicidad para aumentar la longevidad.
El aminoácido de cadena ramificada leucina activa con mayor intensidad la cinasa TOR, que
puede aumentar la velocidad de traducción y reducir la vida útil. Por lo tanto, nos sorprendió
descubrir que la suplementación con leucina 1 mM aumentó considerablemente la vida útil. De
hecho, la leucina fue el segundo aminoácido más potente en esta concentración para promover la
longevidad. Bajo nuestras condiciones de crecimiento estándar, la señalización de TOR ya puede
estar altamente activada por los aminoácidos presentes en la fuente de alimento bacteriano y, por
lo tanto, es posible que no pueda activarse más. En cambio, suponemos que el metabolismo de la
leucina o el desequilibrio de aminoácidos causado por el exceso de leucina puede haber activado
otras vías de señalización que conducen a la inhibición de la TOR. En este sentido, la falta de
extensión de la vida útil por aminoácidos en rsks-1los mutantes sugieren que la suplementación
con aminoácidos individuales inhibe la señalización TOR para extender la vida útil. De los otros
dos aminoácidos de cadena ramificada, la suplementación con valina mostró tendencias similares
a la vida útil de la leucina, aunque no es un potente inductor de la actividad TOR, y la
suplementación con isoleucina mostró poco efecto sobre la vida útil. A concentraciones más
altas, los aminoácidos de cadena ramificada no afectaron la vida útil tanto como a
concentraciones más bajas. Por lo tanto, los altos niveles de aminoácidos de cadena ramificada
no siempre se correlacionan directamente con la extensión de la vida útil. De acuerdo con esta
hipótesis, se encontraron niveles reducidos de aminoácidos de cadena ramificada en ratones
enanos Ames de larga vida [ 72]]. Sin embargo, el desequilibrio de aminoácidos no puede
explicar el aumento de la longevidad que se confiere con la suplementación con muchos otros
metabolitos celulares diversos. Por lo tanto, la anaplerosis del ciclo TCA que conduce a una
reprogramación del metabolismo mitocondrial puede ser el mecanismo molecular responsable de
la extensión de la vida útil.

Los precursores de la NAD y el triptófano inducen la respuesta


al estrés del RE y la respuesta proteica desplegada
mitocondrial
Otro hallazgo significativo en este informe es que la suplementación con triptófano,
nicotinamida, ácido nicotínico o su isómero picolínico dio como resultado la activación tanto de
la proteína mitocondrial desplegada como de las vías de respuesta al estrés ER, mientras que la
adición de NAD indujo solo la respuesta al estrés ER. En el músculo y corazón del ratón, la
disminución de los niveles de NAD nuclear con el envejecimiento causa una disminución
inducida por el factor 1a inducida por hipoxia (HIF-1α) en la transcripción mitocondrial que
conduce a una disfunción mitocondrial que se revirtió mediante la suplementación con un
precursor de NAD [ 73]. Además de revertir esta disfunción mitocondrial inducida por el
envejecimiento, la suplementación de precursores de NAD (o triptófano) puede proteger aún más
las células al inducir una respuesta de estrés ER y una respuesta de proteína mitocondrial
desplegada, aunque ya se ha demostrado que los precursores de NAD inducen una respuesta
proteica mitocondrial desplegada [ 61 ]. El ácido picolínico es un potente quelante de metales que
se toma frecuentemente con cromo como un posible tratamiento para el síndrome metabólico,
aunque se ha cuestionado la eficacia de este tratamiento [ 74 ]. Pero el ácido picolínico en sí
mismo ha demostrado ser neuroprotector [ 59 ] .]. Será importante determinar si los efectos
protectores del ácido picolínico se deben a la quelación del metal y si el ácido picolínico, el ácido
nicotínico y la nicotinamida también inducen la respuesta al estrés del RE o la respuesta de la
proteína mitocondrial desplegada en las células de mamíferos.

¿Es importante el catabolismo de los aminoácidos por sus


efectos de longevidad?
El catabolismo de los aminoácidos suplementados probablemente media sus efectos en la
longevidad, pero existen excepciones a esta regla. Nos sorprendió no encontrar un aumento en el
consumo de oxígeno o los niveles de ATP como marcadores de un aumento del metabolismo
cuando se añadieron aminoácidos al medio de cultivo. Anteriormente se demostró que el
catabolismo de prolina y el consiguiente aumento transitorio en la producción de ROS por la
cadena de transporte de electrones eran esenciales para sus efectos a favor de la longevidad
[ 26 ]. La mayoría de los otros aminoácidos también pueden metabolizarse para emitir una señal
de ROS transitoria que conduce a la extensión de la vida útil dependiente de SKN-1. La posible
evidencia de esto incluye que las enzimas para la degradación de prolina, triptófano, fenilalanina,
glutamina y D-alanina están reguladas al alza en daf-2 de larga duracióngusanos mutantes del
receptor de insulina [ 26 ], donde SKN-1 también se activa [ 75 ].
Sin embargo, se demostró que la extensión de la vida mediada por alfa-cetoglutarato es
independiente de la producción de ROS [ 48 ]. Por lo tanto, los catabolitos del ciclo TCA
corriente abajo, como el alfa-cetoglutarato, el succinato, el malato y el fumarato, extienden la
vida útil a través de los mecanismos independientes de SKN-1, pero dependientes de DAF-16
[ 53]. Además, la extensión de la vida útil inducida por la cisteína y el triptófano fue
independiente de SKN-1, por lo que la suplementación con estos aminoácidos probablemente no
alteró el metabolismo mitocondrial para aumentar la producción de ROS. De acuerdo con esto, la
reducción de la enzima 2,3-dioxigenasa (TDO-2) del triptófano que degrada el triptófano condujo
a un aumento de la vida útil y a un aumento en los niveles de triptófano, pero no se observaron
cambios en los niveles de muchos de los metabolitos derivados de la degradación del triptófano,
lo que sugiere un aumento del triptófano. los niveles y los niveles no alterados de los
subproductos catabólicos fueron responsables del aumento de la vida útil y la protección contra la
proteotoxicidad [ 27 ].
Los estudios futuros tratarán de determinar los mecanismos metabólicos a través de los cuales los
aminoácidos activan la actividad de SKN-1 y a través de los cuales la serina y la histidina activan
HIF-1. Por ejemplo, los estudios de reducción de enzimas que utilizan RNAi pueden usarse para
determinar si el catabolismo de la serina es necesario para la extensión de la vida mediada por la
serina, ya que la serina puede ser directamente desaminada al piruvato, lo que extiende la vida
útil [ 51 ]. Sin embargo, la serina también se puede usar como un donante de un solo carbono
para eventos de metilación, como la metilación de histonas, que puede alterar los patrones de
expresión de los genes y llevar a un aumento de la longevidad [ 76 ].

Ciclo TCA metabolismo y longevidad.


Los diferentes aminoácidos se catabolizan y entran en el ciclo de TCA a través de diferentes
intermedios del ciclo. No encontramos que los aminoácidos que producen los mayores efectos en
la vida útil se degradaron a través de una vía catabólica común. Archivo adicional 13 : Figura S7,
archivo adicional 14Figura S8 y archivo adicional 15: La Figura S9 muestra el ciclo intermedio
de TCA específico en el que se cataboliza cada uno de los aminoácidos y cómo se vio afectada la
vida útil por las concentraciones de aminoácidos 1 mM, 5 mM y 10 mM, respectivamente. Como
se mencionó anteriormente, la única tendencia en el conjunto de datos es que los aminoácidos
divididos en alfa-cetoglutarato produjeron extensiones de vida útil más grandes que el
promedio. Sin embargo, esto no puede explicar la gran extensión de la vida útil inducida por la
adición de serina, que se cataboliza a piruvato. Sorprendentemente, previamente descubrimos que
la suplementación con malato o fumarato aumentaba los niveles de nucleótidos de piridina total
(NAD + NADH) y también indujo un desacoplamiento mitocondrial leve aumentando la relación
NAD / NADH, los cuales pueden haber estado involucrados en la extensión de la vida inducida
por estos intermediarios del ciclo TCA [ 53]. El catabolismo de otros metabolitos puede tener
efectos similares.
La anulación de la aconitasa mitocondrial o una subunidad de la isocitrato deshidrogenasa
dependiente de NAD mitocondrial aumentó la esperanza de vida en C. elegans [ 77 ]. El aumento
de la longevidad de estos mutantes probablemente se deba en parte a la disminución del flujo a
través de esta parte del ciclo de TCA que conduce a un aumento de los niveles de NAD, que ha
demostrado extender la vida útil [ 78 ]. Las enzimas isocitrato deshidrogenasa y alfa-
cetoglutarato deshidrogenasa reducen la NAD mitocondrial a NADH. La suplementación con
citrato puede no aumentar la vida útil debido al aumento del flujo a través de esta parte del ciclo
de TCA, lo que lleva a una disminución en los niveles de NAD, aunque en el citoplasma, el
citrato se metaboliza a acetil-CoA que se ha demostrado que inhibe la autofagia, lo que también
puede prevenir la esperanza de vida. extensión [ 79]. Sin embargo, tampoco se esperaría que la
suplementación con isocitrato aumente la longevidad ya que se predice que su metabolismo
normal disminuirá los niveles de NAD. Sin embargo, también hay una isoforma de isocitrato
deshidrogenasa dependiente de NADP presente que puede ayudar a prevenir disminuciones en
los niveles de NAD y permitir la extensión de la vida mediada por isocitrato al menos en un
rango estrecho de concentraciones.
Es posible que la suplementación con aminoácidos degradados en alfa-cetoglutarato prolongue la
vida útil mediante la ejecución de isocitrato deshidrogenasa en la dirección opuesta a su modo
normal para oxidar NADH a NAD, mientras que el alfa-cetoglutarato y el dióxido de carbono se
metabolizan en isocitrato. Se ha demostrado que algunas células cancerosas utilizan este
metabolismo cuando oxidan la glutamina como un sustrato de energía primaria [ 80]]. El citrato
producido a partir de isocitrato se exporta luego al citoplasma donde se forman acetil-CoA y
oxaloacetato por la ATP citrato liasa. Esta flexibilidad metabólica en el metabolismo del ciclo del
TCA puede ser necesaria para la longevidad mediada por el metabolito del aminoácido y el ciclo
del TCA y es una hipótesis para futuras pruebas, ya que se demostró que es necesario ejecutar el
ciclo del TCA en la dirección inversa de su dirección normal para el malato y el fumarato.
Extensión media de la vida útil [ 53 ].

La glucólisis como vía metabólica de acortamiento de la vida


útil en C. elegans
Como la suplementación con glucosa y otros precursores glucolíticos disminuyen la vida útil
en C. eleganscomo se muestra aquí y en [ 66 , 67 ], es probable que existan vías metabólicas
específicas como la glucólisis que disminuyen la vida útil. Proponemos que muchos de los
metabolitos suplementados que aumentan la vida útil son catabolizados por las mitocondrias para
aumentar los niveles de metabolito del ciclo de TCA. Se ha demostrado que la vía de longevidad
del DAF-16 / FOXO está activada por el aumento de los niveles de metabolitos del ciclo del TCA
[ 53 ]. Por lo tanto, el ciclo TCA parece ser una vía metabólica que prolonga la vida útil en C.
elegans. Además, el aumento del flujo del ciclo de TCA también podría aumentar
transitoriamente la producción de ETCR mitocondrial para activar la ruta de longevidad SKN-1
como se sugirió anteriormente [ 26 ]. Esta oxidación del metabolito para la producción de energía
también disminuiría la dependencia de la glucólisis que acorta la vida útil como fuente de
sustratos respiratorios mitocondriales.

Refinamientos en medios de cultivo de C. elegans para


experimentos de duración de la vida al limitar los niveles de
peptona y usar bacterias muertas por el calor durante la edad
adulta
Al realizar experimentos de duración de la vida, las fuentes de estrés deben eliminarse del
entorno, por lo que el control de la vida útil del animal no está limitado. Desafortunadamente,
cuando se trabaja con C. elegans , esto ha resultado difícil debido a la ligera toxicidad de
su fuente de alimento vivo de E. coli . Nosotros y otros [ 55 ] también hemos encontrado que la
peptona presente en los medios de crecimiento de nematodos (NGM) también induce un tipo de
estrés que disminuye la vida útil. No está claro qué componente de la peptona disminuye la vida
útil, ya que no solo contiene proteínas proteolizadas (aminoácidos y oligopéptidos), sino también
grasas, metales, sales, vitaminas y otros compuestos. Debido a la ligera toxicidad asociada con el
uso de peptona y E. coli viva , elegimos realizar C. elegansexperimentos de vida útil
utilizando E. coli muerta por calor en medio S-líquido, que carece de peptona. Debido a la
degradación parcial de uno o más nutrientes en la fuente de alimento de E. coli necesaria para el
desarrollo larvario durante el tratamiento de eliminación de calor, puede ser ventajoso,
especialmente en ciertos fondos mutantes, tratar los gusanos con E. coli vivo durante el
desarrollo larvario. para asegurar una nutrición adecuada, y luego cambiarlos a E. coli muerta por
calor durante la edad adulta para evitar que las bacterias metabolicen los nutrientes
agregados. Los refinamientos adicionales en los métodos experimentales permitirán que C.
elegans se convierta en un modelo aún más valioso para investigar los efectos del metabolismo
alterado en la vida útil.
Ir:

Conclusiones
La suplementación individual de aminoácidos incrementó la vida útil de C. elegansy una mayor
resistencia al estrés con serina, prolina y triptófano que muestran los mejores efectos. Muchas de
las vías de longevidad que incluyen DAF-16, SKN-1, AAK-2, SIR-2.1, GCN-2, choque térmico,
autofagia, DR e inhibición de la señalización de TOR están involucradas en estos efectos
protectores. La anaplerosis y el metabolismo mitocondrial alterado que aumentan
transitoriamente la producción de ROS para activar el SKN-1 parecen estar involucrados en la
señalización de la longevidad. Las vías exactas involucradas varían ligeramente de un
aminoácido a otro. Por ejemplo, la serina y la histidina estimularon la actividad transcripcional de
HIF-1, mientras que otros 6 aminoácidos no lo hicieron. Del mismo modo, 8 aminoácidos que
prolongan la vida útil aumentaron la actividad transcripcional de SKN-1, pero no triptófano,
cisteína, o los aminoácidos que disminuyen la vida útil fenilalanina y
asparagina. Singularmente, el triptófano activó la respuesta al estrés del RE y las vías de
respuesta de la proteína desplegada mitocondrial y la extensión de la vida útil fue independiente
de SKN-1 y DAF-16. Los experimentos futuros tendrán como objetivo desarrollar un medio
axénico mejorado que pueda usarse para determinar los efectos de la restricción de aminoácidos
en la vida útil deC. elegans . Mediante el uso de suplementos y restricciones de aminoácidos, un
día se puede desarrollar una dieta que pueda aumentar sustancialmente la resistencia al estrés y
retrasar el envejecimiento y la aparición de trastornos asociados con el envejecimiento.
Ir:

Los metodos

C. elegans cepas y mantenimiento
Las cepas de C. elegans se adquirieron en el Centro de Genética Caenorhabditis (CGC,
Universidad de Minnesota) y se cultivaron en la mayoría de los experimentos utilizando
las condiciones estándar de C. elegans a 20 ° C en medio S líquido, pero en algunos
experimentos donde se indicó el medio de agar NGM estándar indicado. utilizado como en
[ 81 ]. Los ensayos de vida útil se realizaron utilizando la cepa estándar de C. elegans N2 Bristol,
a menos que se indique lo contrario . También se realizaron ensayos de vida útil utilizando las
siguientes cepas: GR1307 [ daf-16 (mgDf50 )], TG38 [ aak-2 (gt33) ], DA1116 [ eat-2
(ad1116) ], VC199 [ sir-2.1 (ok434) ], RB1206 [ rsks-1 (ok1255)], RB967 [ gcn-2 (ok871) ],
RB579 [ Ife-2 (ok306) ], TK22 [ mev-1 (kn1) ] y CW152 [ gas-1 (fc21) ]. Los experimentos con
el promotor de la expresión del gen de GFP :: GFP se realizaron con las siguientes cepas: SJ4100
[ hsp-6 :: gfp ], SJ4058 [ hsp-60 :: gfp ], SJ4005 [ hsp-4 :: gfp], CL2070 [ hsp-16 -2 :: gfp +
pRF4 ], CL2166 [ gst-4p :: GFP :: NLS], ZG449 [ egl-9 (ia61) + nhr-57p :: GFP + unc-119
(+) ], CF1553 [ sod- 3p :: GFP  +  rol-6 ], y OP37 [ unc-119 (ed3)  +  pha-4 :: TY1 :: EGFP ::
3xFLAG  +  unc-119 (+)]. Los ensayos de protección de enfermedades y proteostasis se
realizaron utilizando las siguientes cepas: NL5901 [( unc-54p :: alfa-sinucleína :: YFP + unc-
119 (+)) ], CL4176 [ smg -1 ts [ myo -3 :: Aβ 1 –42 largo 3'-UTR ]], CL6049 [( snb-1 :: hTDP-43  
+  mtl-2 :: GFP ], y AM140 [ unc-54p :: Q35 :: YFP ].

Productos quimicos
Los L-aminoácidos se adquirieron de Acros Organics and Research Products International Corp.
La glicina se obtuvo de Fischer Chemical Company. Los D-aminoácidos se adquirieron de
P212121, LLC. Cuando no está presente ninguna indicación de isómero D o L antes del nombre
del aminoácido (a excepción de la glicina), se usó el isómero L. La 5-fluoro-2'-desoxiuridina
(FUdR) se adquirió de Research Products International Corp. y Biotang, Inc. Se añadió hidróxido
de sodio (Fischer Scientific) a las soluciones de reserva de metabolitos para obtener un pH de
7.0.

Análisis de la vida útil


Gravid C. elegans adultos fueron tratados con cloro como se describió anteriormente [ 53 ] para
producir huevos sincronizados con la edad. Casi todos los experimentos de duración de vida se
realizaron utilizando medio S líquido. Los huevos suspendidos en medios S se colocaron en
insertos de cultivo de células transparentes 3 µM (BD Falcon # 353181) en microplacas de 12
pocillos como se describe por primera vez en [ 82 ]. HT115 (DE3) E. coli se cultivaron durante
20 horas en matraces de 2 l con medio LB. La E. colise centrifugó, el sobrenadante se vertió y el
sedimento se congeló hasta su uso. Las E. coli se descongelaron y se eliminaron por calor a 80 °
C durante 1 hora con una ligera vibración utilizando un limpiador ultrasónico Kendal modelo
HB-S-23DHT. La E. coliLas bolitas se resuspendieron luego en un volumen igual de medio
S. Se colocó una suspensión de 1,3 ml de medio S que contenía 9 x 10 9 HT115 (DE3) E. coli por
ml en cada pocillo de una microplaca de 12 pocillos. Los huevos de lombriz sincronizados con
cloro se suspendieron a una concentración de 100 a 200 huevos / ml en la suspensión de E.
coli en medio S. Por último, se colocó un inserto de cultivo celular en cada pocillo seguido de
0,25 ml de la suspensión de huevos / bacterias (25 a 50 huevos) en cada inserto ( n = 3 pozos por
condición). Se colocaron cultivos sincronizados de gusanos en un agitador orbital a 135
rotaciones por minuto a 20 ° C y se controlaron hasta que alcanzaron la edad adulta (~ 72 h),
momento en el que se añadió FUdR a una concentración final de 400 uM. La viabilidad del
gusano se puntuó cada dos días. Los gusanos que no respondieron a estímulos repetidos se
calificaron como muertos y se excluyeron aquellos que contenían larvas incubadas
internamente. El medio de cultivo que contiene E. coli en las placas de 12 pocillos debajo de cada
inserto de cultivo (> 80% del volumen total del medio de cultivo) se cambió cada 3 días. El
análisis de la vida útil utilizando la cepa CL6049 [ snb-1 :: hTDP-43  +  mtl-2 :: gfp ] se realizó
de la misma manera, excepto que la viabilidad de los gusanos se contó todos los días.

Ensayos de vida útil de alta glucosa


Se realizaron los ensayos de vida útil de C. elegans como se describió anteriormente con la
adición de 50 mM de glucosa al medio de cultivo. Los gusanos fueron calificados para la
viabilidad todos los días. Los medios de cultivo en las placas de 12 pocillos se cambiaron cada
dos días.

Experimentos de alimentación RNAi


Los clones de E. coli skn-1 y bec-1 RNAi de la biblioteca de ARNi Ahringer C. elegans (Source
BioScience LifeSciences) se cultivaron durante 16 horas y luego se administró IPTG 1 mM a
la E. colidurante las últimas 4 horas de crecimiento hasta Inducir la expresión del ARN de doble
cadena. Los experimentos de vida útil se realizaron utilizando bacterias vivas en lugar de muertas
por calor. Los medios de cultivo en las placas de 12 pocillos se cambiaron diariamente en lugar
de cada 3 días para disminuir la posibilidad de que el metabolismo de E. coli agote el nivel de
cultivo del aminoácido suplementado.

Cepas de reportero GFP


La fluorescencia de GFP de las poblaciones de C. elegans se analizó utilizando un lector de
microplacas multimodo Biotek Synergy 2. Las cepas se sincronizaron por edad y se cultivaron en
microplacas de 12 pocillos como se describió anteriormente. En la etapa L3 del desarrollo
larvario, los gusanos fueron tratados con aminoácidos u otros metabolitos. Después de 24 horas
de tratamiento, los gusanos se lavaron 3 veces en medio S y se agregaron aproximadamente 400
gusanos en 200 μL a cada pocillo de una placa transparente de fondo plano de 96 pocillos, y se
midió la fluorescencia de GFP utilizando una excitación de 485/20 nm y filtros de emisión de
528/20 nm (un mínimo de n = 8 por grupo de tratamiento).
Microscopía y cuantificación.
Los gusanos utilizados para microscopía se anestesiaron con levamisol 1 mM y se transfirieron a
almohadillas de agar con cubreobjetos de vidrio y se analizaron con un microscopio de
fluorescencia EVOS. Se establecieron resultados comparables en ausencia de levamisol. Se
usaron aproximadamente 20 gusanos por condición y todos los experimentos se repitieron al
menos tres veces. El software ImageJ ™ se utilizó para cuantificar las intensidades de píxeles.

Ensayos de termotolerancia
Una población sincronizada de N2 C. elegans huevos se colocaron en placas de agar NGM
tratadas o no tratadas y se dejaron incubar a 20 ° C. En la etapa L4 de desarrollo, los animales se
transfirieron a una incubadora a 35 ° C. La supervivencia se puntuó como el número de gusanos
que respondían a los golpes suaves con una selección de gusano.

Ensayos de parálisis mediados por Aß


Los ensayos de parálisis se llevaron a cabo como se describe en [ 63 ]. Brevemente, la cepa
CL4176 de C. elegans grávida sincronizada de segunda generación crecida a 16 ° C se colocó en
placas de agar NGM de 6 cm tratadas o no tratadas y se dejó reposar huevos durante 2
horas. Después de eso, los adultos se retiraron y las placas se colocaron en una incubadora a 16 °
C durante 48 horas. Luego las placas se transfirieron a una incubadora a 25 ° C. La puntuación
para los gusanos paralizados comenzó 20 horas después del cambio de temperatura. Los animales
se puntuaron para el movimiento cada dos horas. Los gusanos se consideraron paralizados si no
podían completar un movimiento de todo el cuerpo después de la estimulación con una selección
de gusano.

Ensayos de agregación alfa-sinucleína


Los huevos se recolectaron de la cepa NL5901 de C. elegans después del tratamiento con lejía
alcalina y se colocaron en insertos de cultivo celular de 12 pocillos como se describió
anteriormente, con o sin tratamiento con aminoácidos. Después de 2 días de tratamiento, se
agregaron 400 µM de FUdR a los insertos para prevenir la progenie. El día 8, los gusanos se
lavaron 3 veces con medio M9 y se colocaron en almohadillas de agarosa al 1% para reducir el
movimiento o se inmovilizaron con levamisol 1 mM. La cuantificación del número de
inclusiones que expresan alfa-sinucleína-YFP se midió utilizando un microscopio de
fluorescencia EVOS. Se contaron los focos mayores de 2 μm 2 para cada grupo (n = 30). El
análisis de la imagen se realizó con el software ImageJ ™ y el ensayo se completó al menos 3
veces [ 83]. El análisis estadístico se completó con el software GraphPad Prism y el cálculo de la
significación estadística entre los grupos se realizó con la prueba t de Student.

Ensayos de agregación de poliglutamina


Los gusanos AM140 [ unc-54p :: Q35 :: YFP ] se sincronizaron y se colocaron en placas de agar
NGM suplementadas con triptófano 1 mM, serina 10 mM o prolina 5 mM. Las placas se
sembraron con un 90% de OP50 E. coli muerta por calor y un 10% de OP50 E. coli vivos . Las
imágenes fueron tomadas el día 3 de la edad adulta. La progenie se evitó seleccionando
diariamente después del día 1. Los agregados se puntuaron para 50 gusanos por condición en
duplicados biológicos independientes.

Mediciones de oxigeno medio


Las mediciones de oxígeno medio se obtuvieron utilizando PreSens OxoPlates de 96 pocillos de
fondo plano de acuerdo con las pautas del fabricante. Se colocaron huevos de lombrices de
poblaciones destruidas por lejía en placas de cultivo celular de 12 pocillos en 1 ml de medio S
con bacterias HT115 (DE3) vivas y un aminoácido suplementado. En la etapa de desarrollo L4,
los gusanos se lavaron 3 veces con medios S y se concentraron a aproximadamente 10 gusanos /
μL. Se colocaron 200 μL de cada grupo de tratamiento en cada pocillo de un OxoPlate en réplicas
de 3-4. La concentración de oxígeno se midió utilizando un filtro de excitación de 540/25 nm y
filtros de emisión de 590/20 nm (indicador) y 620/40 nm (referencia) utilizando un lector de
microplacas Biotek Synergy 2. Las mediciones de oxígeno se normalizaron a la proteína del
gusano como en [ 53 ].

Mediciones de ATP
Los huevos sincronizados con lejía se cultivaron en medio líquido S en ausencia o presencia de
un aminoácido en presencia de E. coli HT115 (DE3) vivo . En la etapa L4 de desarrollo larvario,
los gusanos se lavaron 3 veces con medio S para liberarlos de bacterias y luego se lisaron
mediante congelación y descongelación repetidas como en [ 53 ]. Los niveles de ATP se
midieron utilizando CellTiter-Glo (Promega) de acuerdo con las instrucciones del fabricante y se
normalizaron a proteína de gusano.

análisis estadístico
El análisis de supervivencia de Kaplan-Meier y las pruebas de log-rank se realizaron utilizando
Sigmaplot versión 11.0. Las pruebas t de Student se usaron en otros análisis.
Ir:

Expresiones de gratitud
Nos gustaría agradecer a Robert Buzzeo por compartir equipos y reactivos. Las cepas de C.
elegans se obtuvieron del Centro de Genética Caenorhabditis (Universidad de Minnesota,
Minneapolis, MN, EE. UU.), Financiado por la Oficina de Programas de Infraestructura para la
Investigación de NIH (P40 OD010440). La investigación fue financiada por la subvención NIH #
AG046769 otorgada a PB.
Archivos adicionales
Archivo adicional 1: Tabla S1. (370K, pdf)
Los efectos de la suplementación con aminoácidos en la vida útil de C. elegans .
Archivo adicional 2: Figura S1. (277K, tiff)
Ejemplo de curvas de vida útil para varios aminoácidos que extendieron fuertemente la vida útil
en C. elegans . (A) serina, (B) prolina, (C) triptófano y (D) histidina. Las concentraciones
elegidas para la visualización fueron aquellas que estimularon la extensión de la vida útil en la
mayor medida (log rank p <0.001).
Archivo adicional 3: figura S2. (338K, tiff)
La suplementación de varios D-aminoácidos que se encuentran endógenamente en C.
elegans prolonga la vida útil. (A) D-alanina, B) D-aspartato o C) D-glutamato vida útil extendida
en una o más de las concentraciones analizadas (log rank p <0.05), mientras que (D) la
suplementación con D-serina no extendió la vida útil en Cualquiera de las concentraciones
probadas.
Archivo adicional 4: figura S3. (129K, tiff)
El efecto de los aminoácidos en la fluorescencia de una cepa informadora pha-4p :: gfp: pha-
4 de C. elegans (* p <0.05) .
Archivo adicional 5: Tabla S2. (108K, pdf)
Los efectos de los azúcares y otros metabolitos que carecen de nitrógeno en la vida útil de C.
elegans .
Archivo adicional 6: Tabla S3. (106K, pdf)
Los efectos de los metabolitos que contienen nitrógeno en la vida útil de C. elegans .
Archivo adicional 7: Figura S4. (252K, tiff)
(A) La suplementación con prolina o triptófano aumenta la termotolerancia en C. elegans . (log
rank p <0,001) La suplementación con serina, histidina o glutamina no afectó significativamente
la termotolerancia. (B) La suplementación con aminoácidos no retrasó significativamente la
toxicidad inducida por paraquat. Sin embargo, hubo una fuerte tendencia hacia la protección con
histidina (p = 0.08), pero no hubo efecto con serina, prolina, triptófano o leucina.
Archivo adicional 8: Tabla S4. (172K, pdf)
Los efectos de los aminoácidos en la parálisis muscular inducida por beta-amiloide.
Archivo adicional 9: figura S5. (1.5M, tiff)
El triptófano redujo ligeramente los agregados de poliglutamina en C. elegans . En cada foto se
muestra la fluorescencia de GFP de cinco gusanos colocados uno al lado del otro. En promedio,
hubo 7 agregados menos en los gusanos tratados con triptófano que en los controles (p = 0,07).
Archivo adicional 10: Tabla S5. (98K, pdf)
Los efectos de los aminoácidos o alfa-cetoglutarato en la vida útil de C. elegans transgénicos de
TDP-43 humanos .
Archivo adicional 11: Tabla S6. (250K, pdf)
Los efectos de los aminoácidos en la vida útil de C. elegans en presencia de glucosa 50 mM.
Archivo adicional 12: figura S6. (577K, tiff)
La suplementación con aminoácidos no alteró significativamente el consumo de oxígeno o los
niveles de ATP de C. elegans . A) La cantidad de oxígeno en el medio después de una incubación
de 30 minutos en el pozo de un Oxoplate. B) Niveles de ATP.
Archivo adicional 13: Figura S7. (304K, tiff)
Metabolismo y efectos en la vida útil de una dosis de 1 mM de aminoácidos. Se muestra un
diagrama de los metabolitos del ciclo TCA a los que se catabolizan los 20 aminoácidos. También
se muestra cómo la suplementación de una concentración 1 mM de los aminoácidos o algunos de
los metabolitos del ciclo del TCA afectó la vida útil de C. elegans .
Archivo Adicional 14: Figura S8. (303K, tiff)
Metabolismo y efectos en la vida útil de una dosis de 5 mM de aminoácidos. Se muestra un
diagrama de los metabolitos del ciclo TCA a los que se catabolizan los 20 aminoácidos. También
se muestra cómo la suplementación de una concentración de 5 mM de los aminoácidos o algunos
de los metabolitos del ciclo del TCA afectó la vida útil de C. elegans .
Archivo adicional 15: Figura S9. (310K, tiff)
Metabolismo y efectos en la vida útil de una dosis de 10 mM de aminoácidos. Se muestra un
diagrama de los metabolitos del ciclo TCA a los que se catabolizan los 20 aminoácidos. También
se muestra cómo la suplementación de una concentración de 10 mM de los aminoácidos o
algunos de los metabolitos del ciclo del TCA afectó la vida útil de C. elegans .
Ir:

Notas al pie
Conflicto de intereses
Los autores declaran que no tienen intereses en competencia.

Contribuciones de los autores


CE realizó la mayor parte de la vida útil, la cepa informadora GFP, los experimentos de
proteotoxicidad y el análisis de datos. JC realizó análisis de datos. NC realizó GFP
reportero experimentos de cepa y análisis de datos AB, MR y DL realizaron unos pocos
experimentos de cepa de reportero de GFP. JB y SW planearon los experimentos con
los gusanos que expresan poliglutamina, mientras que JB realizó estos
experimentos. CE y PB concibieron los estudios y redactaron el manuscrito. Todos los
autores leyeron y aprobaron el manuscrito final.
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Información del colaborador


Clare Edwards, correo electrónico: ude.fsu.liam@drawdebc .
John Canfield, correo electrónico: ude.fsu.liam@2cmj .
Neil Copes, correo electrónico: ude.fsu.liam@sepocn .
Andres Brito, Correo electrónico: ude.fsu.liam@2otirba .
Muhammad Rehan, correo electrónico: ude.fsu.liam@naherm .
David Lipps, correo electrónico: ude.fsu.liam@sppiled .
Jessica Brunquell, correo electrónico: ude.fsu.liam@niksohlj .
Sandy D Westerheide, correo electrónico: ude.fsu@ediehretsews .
Patrick C Bradshaw, correo electrónico: ude.fsu@ahsdarbp .
Ir:

Referencias
1. Swire J, Fuchs S, Bundy JG, Leroi AM. La geometría celular del crecimiento impulsa la
economía de aminoácidos de Caenorhabditis elegans. Proc Biol Sci. 2009; 276 (1668): 2747–
54. doi: 10.1098 / rspb.2009.0354. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
2. Fuchs S, Bundy JG, Davies SK, Viney JM, Swire JS, Leroi AM. Una firma metabólica de
larga vida en Caenorhabditis elegans. BMC Biol. 2010; 8 : 14. Doi: 10.1186 / 1741-7007-8-
14. [ Artículo libre de PMC ][ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
3. Roth E, Druml W. Desequilibrio de aminoácidos en el plasma: ¿peligroso en enfermedades
crónicas? Curr Opin Clin Nutr Metab Care. 2011; 14 (1): 67–74. doi: 10.1097 /
MCO.0b013e328341368c. [ PubMed] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
4. Lote BC, Hyland K, Svetkey LP. Aminoácidos de cadena ramificada: biomarcadores de la
salud y la enfermedad. Curr Opin Clin Nutr Metab Care. 2014; 17 (1): 86-9. [ PubMed ] [ Google
Scholar ]
5. Sohal RS, Weindruch R. Estrés oxidativo, restricción calórica y
envejecimiento. Ciencia. 1996; 273(5271): 59–63. doi: 10.1126 / science.273.5271.59. [ Artículo
libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
6. Pamplona R, Barja G. Estrés oxidativo mitocondrial, envejecimiento y restricción calórica: la
conexión de proteínas y metionina. Biochim Biophys Acta. 2006; 1757 (5–6): 496–508. doi:
10.1016 / j.bbabio.2006.01.009. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
7. Miller RA, Buehner G, Chang Y, Harper JM, Sigler R, Smith-Wheelock M. La dieta deficiente
en metionina prolonga la vida útil del ratón, retarda el envejecimiento del sistema inmunitario y
de los lentes, altera la glucosa, T4, IGF-I y aumenta los niveles de insulina. Niveles de MIF del
hepatocito y resistencia al estrés. Envejecimiento celular. 2005; 4 (3): 119–25. doi: 10.1111 /
j.1474-9726.2005.00152.x. [ PubMed] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
8. Orentreich N, Matias JR, DeFelice A, Zimmerman JA. La baja ingestión de metionina por las
ratas prolonga la vida útil. J Nutr. 1993; 123 (2): 269–74. [ PubMed ] [ Google Scholar ]
9. Ooka H, Segall PE, Timiras PS. Histología y supervivencia en ratas alimentadas con bajo
contenido de triptófano y retraso en la edad. Mech Aging Dev. 1988; 43 (1): 79–98. doi:
10.1016 / 0047-6374 (88) 90099-1. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
10. Segall PE, Timiras PS. Hallazgos fisiopatológicos después de la deficiencia crónica de
triptófano en ratas: un modelo para retrasar el crecimiento y el envejecimiento. Mech Aging
Dev. 1976; 5 (2): 109–24. doi: 10.1016 / 0047-6374 (76) 90012-9. [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
11. Alvers AL, Fishwick LK, Wood MS, Hu D, Chung HS, Dunn WA, Jr, et al. La autofagia y la
homeostasis de los aminoácidos son necesarias para la longevidad cronológica en Saccharomyces
cerevisiae. Envejecimiento celular. 2009; 8 (4): 353–69. doi: 10.1111 / j.1474-
9726.2009.00469.x. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
12. Wu Z, Song L, Liu SQ, Huang D. Efectos independientes y aditivos del ácido glutámico y la
metionina en la longevidad de la levadura. Más uno. 2013; 8 (11): e79319. doi: 10.1371 /
journal.pone.0079319. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
13. Kamei Y, Tamura T, Yoshida R, Ohta S, Fukusaki E, genes de la vía del metabolismo de
Mukai Y. GABA, UGA1 y GAD1, regulan la vida útil replicativa en Saccharomyces
cerevisiae. Biochem Biophys Res Commun. 2011; 407 (1): 185-90. doi: 10.1016 /
j.bbrc.2011.02.136. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
14. Mirisola MG, Taormina G, Fabrizio P, Wei M, Hu J, Longo VD. Serina y treonina / Valina
de PDK y Tor Orthologs convergen en Sch9 para promover el envejecimiento. PLoS
Genet. 2014; 10 (2): e1004113. doi: 10.1371 / journal.pgen.1004113. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
15. Powers RW, 3rd, Kaeberlein M, Caldwell SD, Kennedy BK, Fields S. Extensión de la vida
útil cronológica de la levadura mediante la disminución de la señalización de la ruta TOR. Genes
Dev. 2006; 20 (2): 174–84. doi: 10.1101 / gad.1381406. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
16. Yoshida R, Tamura T, Takaoka C, Harada K, Kobayashi A, Mukai Y, et al. Predicción
sistemática basada en la metabolización de la vida útil de la levadura y su aplicación para el
cribado semi-racional de mutantes relacionados con el envejecimiento. Envejecimiento
celular. 2010; 9 (4): 616–25. doi: 10.1111 / j.1474-9726.2010.00590.x. [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
17. Min KJ, Tatar M. La restricción de aminoácidos prolonga la vida útil de Drosophila
melanogaster. Mech Aging Dev. 2006; 127 (7): 643–6. doi: 10.1016 /
j.mad.2006.02.005. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
18. Grandison RC, Piper MD, Partridge L. El desequilibrio de aminoácidos explica la extensión
de la vida útil por restricción dietética en Drosophila. Naturaleza. 2009; 462 (7276): 1061-4. Doi:
10.1038 / nature08619. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
19. Kabil H, Kabil O, Banerjee R, Harshman LG, Pletcher SD. El aumento de la transulfuración
media la longevidad y la restricción dietética en Drosophila. Proc Natl Acad Sci US
A. 2011; 108 (40): 16831-6. doi: 10.1073 / pnas.1102008108. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
20. Ban H, Shigemitsu K, Yamatsuji T, Haisa M, Nakajo T, Takaoka M, et al. La arginina y la
leucina regulan la p70 S6 quinasa y 4E-BP1 en células epiteliales intestinales. Int J Mol
Med. 2004; 13 (4): 537–43. [ PubMed ] [ Google Scholar ]
21. Hara K, Yonezawa K, Weng QP, Kozlowski MT, Belham C, Avruch J. Suficiencia de
aminoácidos y mTOR regulan la quinasa p70 S6 y eIF-4E BP1 a través de un mecanismo efector
común. J Biol Chem. 1998; 273 (23): 14484–94. doi: 10.1074 / jbc.273.23.14484. [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
22. Moskalev AA, Shaposhnikov MV. La inhibición farmacológica de fosfoinositida 3 y TOR
quinasas mejora la supervivencia de Drosophila melanogaster. Rejuvenecimiento
Res. 2010; 13 (2–3): 246–7. Doi: 10.1089 / rej.2009.0903. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
23. Kapahi P, Zid BM, Harper T, Koslover D, Sapin V, Benzer S. Regulación de la vida útil en
Drosophila mediante la modulación de genes en la vía de señalización TOR. Curr
biol. 2004; 14 (10): 885-90. doi: 10.1016 / j.cub.2004.03.059. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
24. Massie H, Williams T. Efecto de los compuestos que contienen azufre en la vida útil de
Drosophila. Años. 1985; 8 (4): 128–35. Doi: 10.1007 / BF02431953. [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
25. Zajitschek F, Zajitschek SR, Friberg U, Maklakov AA. Efectos interactivos del sexo, el
entorno social, la restricción dietética y la metionina sobre la supervivencia y la reproducción en
moscas de la fruta. Edad (Dordr) 2013; 35 (4): 1193-204. doi: 10.1007 / s11357-012-9445-
3. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
26. Zarse K, Schmeisser S, Groth M, Priebe S, Beuster G, Kuhlow D, et al. La señalización
deficiente de insulina / IGF1 prolonga la vida útil al promover el catabolismo mitocondrial de L-
prolina para inducir una señal de ROS transitoria. Metab Célula. 2012; 15 (4): 451–65. doi:
10.1016 / j.cmet.2012.02.013. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
27. van der Goot AT, Zhu W, Vázquez-Manrique RP, Seinstra RI, Dettmer K, Michels H, et
al. Retrasar el envejecimiento y la disminución asociada a la edad en la homeostasis de proteínas
por inhibición de la degradación del triptófano. Proc Natl Acad Sci US A. 2012; 109 (37): 14912-
7. doi: 10.1073 / pnas.1203083109. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
28. He C, Tsuchiyama SK, Nguyen QT, Plyusnina EN, Terrill SR, Sahibzada S, et al. La
longevidad mejorada por el ibuprofeno, conservado en múltiples especies, ocurre en la levadura a
través de la inhibición de la importación de triptófano. PLoS Genet. 2014; 10 (12):
e1004860. doi: 10.1371 / journal.pgen.1004860. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
29. Ferguson AA, Roy S, Kormanik KN, Kim Y, Dumas KJ, Ritov VB, et al. Las mutaciones
TATN-1 revelan un nuevo papel para la tirosina como una señal metabólica que influye en las
decisiones de desarrollo y la longevidad en Caenorhabditis elegans. PLoS Genet. 2013; 9 (12):
e1004020. doi: 10.1371 / journal.pgen.1004020. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
30. D'Antona G, Ragni M, Cardile A, Tedesco L, Dossena M, Bruttini F, et al. La
suplementación con aminoácidos de cadena ramificada promueve la supervivencia y apoya la
biogénesis mitocondrial del músculo esquelético y cardíaco en ratones de mediana edad. Metab
Célula. 2010; 12 (4): 362–72. doi: 10.1016 / j.cmet.2010.08.016. [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
31. De Haes W, Frooninckx L, Van Assche R, Smolders A, Depuydt G, Billen J, et al. La
metformina promueve la vida útil a través de la mitohormesis a través de la peroxiredoxina
PRDX-2. Proc Natl Acad Sci US A. 2014; 111 (24): E2501–2509. doi: 10.1073 /
pnas.1321776111. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
32. Newgard CB. Interacción entre lípidos y aminoácidos de cadena ramificada en el desarrollo
de resistencia a la insulina. Metab Célula. 2012; 15 (5): 606-14. doi: 10.1016 /
j.cmet.2012.01.024. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
33. Baker BM, Nargund AM, Sun T, Haynes CM. Acoplamiento protector de la función
mitocondrial y la síntesis de proteínas a través de la eIF2alpha kinase GCN-2. PLoS
Genet. 2012; 8 (6): e1002760. doi: 10.1371 / journal.pgen.1002760. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
34. Rousakis A, Vlassis A, Vlanti A, Patera S, Thireos G, Syntichaki P. El control general no
expresable-2 quinasas media la respuesta al estrés y la longevidad inducida por el objetivo de la
inactivación de la rapamicina en Caenorhabditis elegans. Envejecimiento celular. 2013; 12 (5):
742–51. Doi: 10.1111 / acel.12101. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
35. Shibamura A, Ikeda T, Nishikawa Y. Un método para la administración oral de sustancias
hidrófilas a Caenorhabditis elegans: efectos de la suplementación oral con antioxidantes en la
vida útil del nematodo. Mech Aging Dev. 2009; 130 (9): 652-5. doi: 10.1016 /
j.mad.2009.06.008. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
36. Saitoh Y, Katane M, Kawata T, Maeda K, Sekine M, Furuchi T, et al. Localización
espaciotemporal de D-aminoácido oxidasa y D-aspartato oxidasas durante el desarrollo en
Caenorhabditis elegans. Mol Cell Biol. 2012; 32 (10): 1967–83. Doi: 10.1128 / MCB.06513-
11. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
37. Hamase K, Konno R, Morikawa A, Zaitsu K. Determinación sensible de D-aminoácidos en
mamíferos y el efecto de la D-aminoácido-oxidasa en sus cantidades. Biol Pharm
Bull. 2005; 28 (9): 1578–84. doi: 10.1248 / bpb.28.1578. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
38. Murphy CT, Hu PJ. Insulina / señalización del factor de crecimiento similar a la insulina en
C. elegans. WormBook 2013: 1–43. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ]
39. Zhang Y, Shao Z, Zhai Z, Shen C, Powell-Coffman JA. El factor inducible por hipoxia HIF-1
modula la vida útil de C. elegans. Más uno. 2009; 4 (7): e6348. doi: 10.1371 /
journal.pone.0006348. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
40. Salminen A, proteína kinasa activada por AMP de Kaarniranta K. (AMPK) controla el
proceso de envejecimiento a través de una red de señalización integrada. Envejecimiento Res
Rev. 2012; 11 (2): 230–41. doi: 10.1016 / j.arr.2011.12.005. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
41. Jia K, Levine B. La autofagia es necesaria para la extensión de la vida mediada por
restricción dietética en C. elegans. Autofagia 2007; 3 (6): 597-9. doi: 10.4161 /
auto.4989. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
42. Hansen M, Chandra A, Mitic LL, Onken B, Driscoll M, Kenyon C. El papel de la autofagia
en la extensión de la vida útil por restricción dietética en C. elegans. PLoS Genet. 2008; 4 (2):
e24. doi: 10.1371 / journal.pgen.0040024. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
43. Panowski SH, Wolff S, Aguilaniu H, Durieux J, Dillin A. PHA-4 / Foxa media la longevidad
inducida por restricción dietética de C. elegans. Naturaleza. 2007; 447 (7144): 550-5. Doi:
10.1038 / nature05837. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
44. Zhong M, Niu W, Lu ZJ, Sarov M, Murray JI, Janette J, et al. La identificación del genoma
de los sitios de unión define funciones distintas para Caenorhabditis elegans PHA-4 / FOXA en
el desarrollo y la respuesta ambiental. PLoS Genet. 2010; 6 (2): e1000848. doi: 10.1371 /
journal.pgen.1000848. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
45. Kim SG, Buel GR, Blenis J. Regulación de nutrientes de la vía de señalización del complejo
1 mTOR. Células Mol. 2013; 35 (6): 463–73. doi: 10.1007 / s10059-013-0138-2. [ Artículo libre
de PMC ] [ PubMed] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
46. Robida-Stubbs S, Glover-Cutter K, Lamming DW, Mizunuma M, Narasimhan SD,
Neumann-Haefelin E, et al. La señalización TOR y la rapamicina influyen en la longevidad al
regular SKN-1 / Nrf y DAF-16 / FoxO. Metab Célula. 2012; 15 (5): 713–24. doi: 10.1016 /
j.cmet.2012.04.007. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
47. Vellai T, Takacs-Vellai K, Zhang Y, Kovacs AL, Orosz L, Muller F. Genética: influencia de
la TOR quinasa en la vida útil en C. elegans. Naturaleza. 2003; 426 (6967): 620. Doi: 10.1038 /
426620a. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
48. Chin RM, Fu X, Pai MY, Vergnes L, Hwang H, Deng G y otros. El metabolito alfa-
cetoglutarato prolonga la vida útil al inhibir la ATP sintasa y la TOR. Nature 2014. [ Artículo
libre de PMC ] [ PubMed ]
49. Hansen M, Taubert S, Crawford D, Libina N, Lee SJ, Kenyon C. Extensión de la vida útil por
condiciones que inhiben la traducción en Caenorhabditis elegans. Envejecimiento
celular. 2007; 6 (1): 95–110. doi: 10.1111 / j.1474-9726.2006.00267.x. [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
50. Syntichaki P, Troulinaki K, Tavernarakis N. eIF4E función en células somáticas modula el
envejecimiento en Caenorhabditis elegans. Naturaleza. 2007; 445 (7130): 922–6. Doi: 10.1038 /
nature05603. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
51. Mouchiroud L, Molin L, Kasturi P, Triba MN, Dumas ME, Wilson MC, y otros. El
desequilibrio del piruvato media la reprogramación metabólica y simula la extensión de la vida
útil por restricción dietética en Caenorhabditis elegans. Envejecimiento celular. 2011; 10 (1): 39–
54. doi: 10.1111 / j.1474-9726.2010.00640.x. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
52. Chuang MH, Chiou SH, Huang CH, Yang WB, Wong CH. El efecto promotor de la vida útil
del ácido acético y el polisacárido Reishi. Bioorg Med Chem. 2009; 17 (22): 7831-40. doi:
10.1016 / j.bmc.2009.09.002. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
53. Edwards CB, Copes N, Brito AG, Canfield J, Bradshaw PC. El malato y el fumarato
prolongan la vida útil en Caenorhabditis elegans. Más uno. 2013; 8 (3): e58345. doi: 10.1371 /
journal.pone.0058345. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
54. Williams DS, Cash A, Hamadani L, Diemer T. La suplementación con oxaloacetato aumenta
la vida útil en Caenorhabditis elegans a través de una vía dependiente de AMPK /
FOXO. Envejecimiento celular. 2009; 8 (6): 765-8. doi: 10.1111 / j.1474-
9726.2009.00527.x. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
55. Yamaguchi T, Onodera A, Yasuda K, Nishio Y, Arai M, Tsuda M, et al. Un sistema de
análisis rápido y de bajo costo que utiliza el nematodo de vida libre Caenorhabditis elegans para
determinar los efectos de los medicamentos Kampo en la vida útil. AATEX. 2008; 13 : 1–
10. [ Google Scholar ]
56. Hajdu-Cronin YM, Chen WJ, Sternberg PW. La ciclina tipo L CYL-1 y el factor de choque
térmico HSF-1 son necesarios para la expresión de proteínas inducida por choque térmico en
Caenorhabditis elegans. Genética. 2004; 168 (4): 1937–49. doi: 10.1534 /
genetics.104.028423. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
57. Kapulkin WJ, Hiester BG, Link CD. Regulación compensatoria entre chaperones de
urgencias en C. elegans. FEBS Lett. 2005; 579 (14): 3063-8. doi: 10.1016 /
j.febslet.2005.04.062. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
58. Bennett CF, Kaeberlein M. La respuesta mitocondrial de la proteína desplegada y el aumento
de la longevidad: ¿causa, consecuencia o correlación? Exp Gerontol. 2014; 56 : 142–6. doi:
10.1016 / j.exger.2014.02.002. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
59. Grant RS, Coggan SE, Smythe GA. La acción fisiológica del ácido picolínico en el cerebro
humano. Int J triptófano Res. 2009; 2 : 71–9. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ Google
Scholar ]
60. Lugo-Huitron R, Ugalde Muniz P, Pineda B, Pedraza-Chaverri J, Ríos C, Pérez-de la Cruz V.
Ácido quinolínico: una neurotoxina endógena con múltiples objetivos. Oxid Med Cell
Longev. 2013; 2013 : 104024. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
61. Mouchiroud L, Houtkooper RH, Moullan N, Katsyuba E, Ryu D, Canto C, et al. La vía NAD
(+) / Sirtuin modula la longevidad a través de la activación de UPR mitocondrial y señalización
FOXO. Célula. 2013; 154 (2): 430–41. doi: 10.1016 / j.cell.2013.06.016. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef] [ Google Scholar ]
62. Hayat S, Hayat Q, Alyemeni MN, Wani AS, Pichtel J, Ahmad A. El papel de la prolina en
entornos cambiantes: una revisión. Plant Signal Behav. 2012; 7 (11): 1456–66. doi: 10.4161 /
psb.21949. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
63. Dostal V, Link CD. Ensayo de la toxicidad de beta-amiloide utilizando un modelo
transgénico de C. elegans. J Vis Exp. 2010; 44 : e2252. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
64. Morley JF, Brignull HR, Weyers JJ, Morimoto RI. El umbral para la agregación de proteínas
de expansión de poliglutamina y la toxicidad celular es dinámico y está influenciado por el
envejecimiento en Caenorhabditis elegans. Proc Natl Acad Sci US A. 2002; 99 (16): 10417-
22. doi: 10.1073 / pnas.152161099. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google
Scholar ]
65. Ari C, Poff AM, Held HE, Landon CS, Goldhagen CR, Mavromates N, et al. La terapia
metabólica con el suplemento Deanna Protocol retrasa la progresión de la enfermedad y prolonga
la supervivencia en el modelo de ratón con esclerosis lateral amiotrófica (ELA). Más
uno. 2014; 9 (7): e103526. doi: 10.1371 / journal.pone.0103526. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
66. Lee SJ, Murphy CT, Kenyon C. La glucosa acorta la vida útil de C. elegans al reducir la
actividad de DAF-16 / FOXO y la expresión del gen de acuaporina. Metab Célula. 2009; 10 (5):
379–91. doi: 10.1016 / j.cmet.2009.10.003. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
67. Schulz TJ, Zarse K, Voigt A, Urban N, Birringer M, Ristow M. La restricción de glucosa
prolonga la vida útil de Caenorhabditis elegans al inducir la respiración mitocondrial y aumentar
el estrés oxidativo. Metab Célula. 2007; 6 (4): 280–93. doi: 10.1016 /
j.cmet.2007.08.011. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
68. Plaisance EP, Greenway FL, Boudreau A, Hill KL, Johnson WD, Krajcik RA, y otros. La
restricción de la metionina en la dieta aumenta la oxidación de las grasas en adultos obesos con
síndrome metabólico. J Clin Endocrinol Metab. 2011; 96 (5): E836-40. doi: 10.1210 / jc.2010-
2493. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
69. Massie HR, Aiello VR. El efecto de la metionina en la dieta sobre el contenido de cobre de
los tejidos y la supervivencia de ratones jóvenes y viejos. Exp Gerontol. 1984; 19 (6): 393–9. doi:
10.1016 / 0531-5565 (84) 90049-4. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
70. Depuydt G, Xie F, Petyuk VA, Shanmugam N, Smolders A, Dhondt I, et al. La reducción de
la insulina / la señalización del factor de crecimiento tipo 1 y la restricción dietética inhiben la
traducción, pero conservan la masa muscular en Caenorhabditis elegans. Proteómica De Células
Mol. 2013; 12 (12): 3624-39. doi: 10.1074 / mcp.M113.027383. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
71. Houtkooper RH, Mouchiroud L, Ryu D, Moullan N, Katsyuba E, Knott G, et
al. Desequilibrio de proteínas mitonucleares como mecanismo de longevidad
conservado. Naturaleza. 2013; 497 (7450): 451–7. Doi: 10.1038 / nature12188. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
72. Wijeyesekera A, Selman C, Barton RH, Holmes E, Nicholson JK, Withers DJ. Metabotipado
de ratones de larga vida mediante espectroscopia 1H NMR. J Proteome Res. 2012; 11 (4): 2224–
35. doi: 10.1021 / pr2010154. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
73. Gomes AP, Price NL, Ling AJ, Moslehi JJ, Montgomery MK, Rajman L, et al. La
disminución de NAD (+) induce un estado pseudohipóxico que interrumpe la comunicación
mitocondrial nuclear durante el envejecimiento. Célula. 2013; 155 (7): 1624–38. doi: 10.1016 /
j.cell.2013.11.037. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
74. Golubnitschaja O, Yeghiazaryan K. La controversia de opinión sobre la seguridad y eficacia
de la terapia con picolinato de cromo: ¿ignorar las "anécdotas" de los informes de casos o
reconocer los riesgos individuales y las nuevas pautas de urgencia para introducir la innovación
mediante el diagnóstico predictivo? Epma J. 2012; 3 (1): 11. doi: 10.1186 / 1878-5085-3-
11. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
75. Tullet JM, Hertweck M, An JH, Baker J, Hwang JY, Liu S, et al. Inhibición directa del factor
promotor de la longevidad SKN-1 por la señalización similar a la insulina en C.
elegans. Célula. 2008; 132 (6): 1025–38. doi: 10.1016 / j.cell.2008.01.030. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
76. Han S, Brunet A. La metilación de la histona deja su huella en la longevidad. Tendencias de
la célula Biol. 2012; 22 (1): 42-9. doi: 10.1016 / j.tcb.2011.11.001. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef] [ Google Scholar ]
77. Hamilton B, Dong Y, Shindo M, Liu W, Odell I, Ruvkun G, et al. Una pantalla sistemática de
RNAi para los genes de longevidad en C. elegans. Genes Dev. 2005; 19 (13): 1544-55. doi:
10.1101 / gad.1308205. [ Artículo libre de PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
78. Hashimoto T, Horikawa M, Nomura T, Sakamoto K. Nicotinamide dinucleótido adenina
extiende la vida útil de Caenorhabditis elegans mediada por sir-2.1 y daf-
16. Biogerontología. 2010; 11 (1): 31–43. doi: 10.1007 / s10522-009-9225-3. [ PubMed ]
[ CrossRef ] [ Google Scholar ]
79. Marino G, Pietrocola F, Eisenberg T, Kong Y, Malik SA, Andryushkova A, et al. Regulación
de la autofagia por acetil-coenzima citosólica a. Mol Cell. 2014; 53 (5): 710–25. doi: 10.1016 /
j.molcel.2014.01.016. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
80. Mullen AR, Wheaton WW, Jin ES, Chen PH, Sullivan LB, Cheng T, et al. La carboxilación
reductiva apoya el crecimiento en células tumorales con mitocondrias
defectuosas. Naturaleza. 2012; 481 (7381): 385–8. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
81. Stiernagle T. Mantenimiento de C. elegans. WormBook. 2006; 11 : 1–11. [ Artículo libre de
PMC ] [ PubMed ] [ Google Scholar ]
82. Fitzgerald VK, Mensack MM, Wolfe P, Thompson HJ. Un sistema de alimentación de cultivo
líquido de múltiples pocillos sin transferencia para la detección de pequeñas moléculas que
afectan la longevidad de Caenorhabditis elegans. Biotecnicas. 2009; 47 (4 supl.): Ix – xv. doi:
10.2144 / 000113277. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]
83. Shukla V, Phulara SC, Yadav D, Tiwari S, Kaur S, Gupta MM, et al. El compuesto iridoide
10-O-trans-p-coumaroylcatalpol prolonga la longevidad y reduce la agregación de alfa sinucleína
en Caenorhabditis elegans. Objetivos farmacológicos del SNC Neurol Disord. 2012; 11 (8): 984–
92. doi: 10.2174 / 1871527311211080007. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Scholar ]

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