Inmunidad a Bacterias

Dr. Juan Rodríguez-Tafur Dávila

Prof. Asociado de Farmacología e Inmunologia
Facultad de Medicina
Universidad Privada Telesup
 Péptidos antimicrobianos (AMPs)

• “Antibióticos” de amplio espectro:

◆ Útiles vs Bacterias (Gram +, Gram -),
envolturas de virus, hongos, protozoarios,
células neoplásicas…

• Inmunomoduladores:
◆ h quimiotaxis, i inflamación, h resolución
◆ h reparación tisular, modulan R. adaptativa

Curr Allergy Asthma Rep (2016) 16:1-8

 Antimicrobianos proteinas y peptidos epiteliales (APP)
Peptidos Antimicrobianos Fuente Organismo blanco
Dermicidina Glandulas sudoriparas ecrinas Amplio espectro

Psoriasina Queratinocitos, sebocitos Gram negativos

ARNasa 7 Queratinocitos Amplio espectro

ARNasa 5/Angionenina Queratinocitos Candida albicans

Catelicidina (LL-37) Queratinocitos, sebocitos Gram negativos y positivos

BPI Epitelio oral, TGI, tracto urogenital Gram negativos, positivos, hongos.
Queratinocitos, sebocitos
Betadefensina humana 1 (hBD-1) Gram negativos

Queratinocitos, sebocitos Gram negativos

Betadefensina humana 2 (hBD-2)

Betadefensina humana 3 (hBD-3) Queratinocitos Amplio espectro

Betadefensina humana 4 (hBD-4) Queratinocitos Gram negativos y positivos

SLPI (Peptidasa secretoria

Queratinocitos Amplio espectro
leucocitaria inhibidora)
Elafina Queratinocitos Amplio espectro
Queratinocitos, foliculo piloso, glandulas
Adrenomedulina Gram negativos y positivos.
sudoriparas apocrinas/ecrinas, sebocitos
MIP-3α /CCL20 Queratinocitos Amplio espectro
Queratinocitos, sebocitos, celulas del
Lisozima Gram negativos y positivos
bulbo piloso
Leche, saliva, lagrimas, secreciones
Lactoferrina Amplio espectro
nasals, neutrofilos
 Antimicrobianos Proteinas y Peptidos derivados del Neutrofilo (APP)
Neutrofilo APP Tipo de Granulo Organismo blanco
Lisozima Azurofilo, especifico Gram negativos y positivos

Gram negativos , positivos, Candida

Azurocidina Azurofilo, secretor
albicans.

Elastasa Azurofilo Gram negativos y positivos

Catepsina G Azurofilo Gram negativos y positivos

Proteinasa 3 Azurofilo Gram negativos y positivos

BPI Azurofilo Gram negativos , positivos, hongos

α-Defensinas (HNP-1 a 4) Azurofilo Gram negativos , positivos, hongos, virus.

Catelicidina (hCAP-18) Especifico Gram negativos, positivos, micobacteria.

Lactoferrina Especifico Gram negativos , positivos, hongos, virus.

SLPI (Peptidasa secretoria

Gram negativos, positivos, Aspergillus
leucocitaria inhibidora) Especifico
fumigatus, Candida albicans.

NGAL (Catelicidina proteina Gram negativos , positivos, hongos

Especifico
humana antimicrobiana
Lisozima Azurofilo, especifico Gram negativos y positivos

Gram negativos , positivos, Candida

Azurocidina Azurofilo, secretorio
albicans.

Elastasa Azurofilos Gram negativos y positivos

Catepsina Azurofilo Gram negativos y positivos

• Forman poros transmembrana
(citólisis, efectos intracelulares)

• Inhiben: DNA, RNA, síntesis de proteínas,

formación de pared celular, enzimas en
citoplasma
Dr. Charles A Janeway
Médico Inmunólogo
1943-2003
Medzhitov R, Preston-Hurlburt P,
Janeway CA. A human homologue
of the Drosophila Toll protein signals
activation of adaptive immunity.
Nature. 1997;388(6640):394–397.
 Familia de los Toll-like receptor (TLR) de
Receptores de Reconocimiento de Patrones (PAMPs)

Peptidoglican (G+)
Lipoproteina
Lipoarabinomananos
Zimosan (Hongos) LPS(G-) CpG AND
Proteina GPI RSV F dsRNA Flagelina Bacteriano

MD-2
TLR-6 TLR-2 TLR-1 CD14 TLR-4 TLR-3 TLR-5 TLR-9

Nat. Rev. Immunol. 2001; 1: 135

 ReceptoresToll-Like y sus Ligandos
Receptor Ligando (PAMPs) Origen del Ligando
TLR1 Triacyl lipopetides Bacteria and Mycobacteria
Soluble factors Neisseria meningitidis
TLR2 Heat Shock protein 70 Host
Peptidoglycan Gram-positive bacteria
Lipoprotein/lipopeptides Various pathogens
HCV core and nonstructural 3 protein Hepatitis C Virus
TLR3 Double-stranded RNA Viruses

TLR4 Lipopolysaccharides Gram-negative bacteria

Envelope protein Mouse mammary-tumor virus
Taxol Plants
TLR5 Flagellin Bacteria

TLR6 Zymosan Fungi

Lipoteichoic acid Gram-positive bacteria
Diacyl lipopetides Mycoplasma
TLR7 Single-stranded RNA (ssRNA) Viruses
Imidazoquinoline Synthetic compounds
TLR8 Single-stranded RNA (ssRNA) Viruses
Imidazoquinoline Synthetic compounds
TLR9 CpG-containing DNA Bacteria, Malaria and Viruses

TLR10 Not determined Not Determined

TLR11 Profilin-like molecule Toxoplasma gondii

To l l l i k e r e c e p t o r s ( T L R )
 Bacterias Extarcelulares comunmente Asociadas a Enfermedad

Especies Enfermedad Mechanismo de Patogenicidad

Staphylococcus aureus Infecciones de tejidos blandos y piel. Inflamacion aguda inducida por Toxinas
Abcesos pulmonares Muerte celular por toxinas formadoras de poros
Sindorme de Schock Toxico Superantigeno induce produccion de citociinas
Intoxicacion por alimentos Necrosis de piel,shock, diarrea.

Streptococcus pyogenes Faringitis Inflamacion aguda inducida por Toxinas

(Group A) Infecciones de Piel: Impetigo p.e. Estreptolisina O daña las membrnas celulares
erisipelas, celulitis Acciones antifagociticas de los polisacaridos de la capsula
Fiebre escarlata

Streptococcus pneumoniae Neumonia Cell wall constituent-induced acute inflammation

Meningitis Toxin (pneumolysin, similar to streptolysin)

Escherichia coli Infecciones del Tracto Urinario Toxinas actuan sobre el epitelio intestinal
Gastroenteritis Aumento de la secrecion de cloruro y agua
Shock septico Endotoxinas (LPS) estimulan la sintesis de citocinas

Vibrio cholerae Diarrea Toxina del Colera – ADP ribosiladosse unen a las subuniades de proteina G
Permite el aumento de cAMP en las celulas epiteliales intestinales
Resultando en secrecion de cloruro y Perdida de agua

Clostridium tetani Tetanos Toxina Tetanica se une a la placa motora

en la union neuromuscular
Causa contraccion muscular irreversible

Neisseria meningitis Meningitis Potente endotoxina causa inflamacion aguda y

enfermedad sistemica

Corynebacterium diphtheriae Difteria Diphtheria toxin ADP ribosylates elongation factor – 2

Inhibits protein synthesis
 Respuestas Inmunes a Bacterias
Extracelulares

➢ La infección por bacterias extracelulares induce la producción de anticuerpos.

➢ Los anticuerpos son secretados por las células plasmáticas en los ganglios linfáticos
regionales y la submucosa de los tractos respiratorios y gastrointestinales.
➢ Los anticuerpos actúan de varias maneras:

➢ Prevención de la adhesion bacteriana.

➢ Opsonización y eliminación de bacterias.
➢ Neutralización de toxinas.

➢ Las bacterias extracelulares son patógenas porque inducen una respuesta inflamatoria
localizada o a través de la formación de toxinas.
➢ Las toxinas (endotoxinas y exotoxinas) pueden ser citotóxicas.
➢ Las toxinas pueden actuar de otras maneras – la toxina diftérica bloquea la síntesis de
proteínas a través de la ADP-ribosilación del factor de alargamiento de la traducción EF-2.
➢ Las endotoxinas son componentes de las paredes celulares bacterianas.
➢ Las exotoxinas son secretadas.
 Respuestas Inmunes a Bacterias
Extracelulares

➢ El anticuerpo funciona como una opsonina al unirse a estructuras antigénicas

específicas en la pared celular bacteriana o cápsula.
➢ El componente C3b del complemento, depositado en la superficie de la célula
bacteriana, es una opsonina adicional.
➢ La opsonización aumenta la fagocitosis y el aclaramiento de la bacteria.
➢ Para ciertas bacterias Gram-negativas (por ejemplo, especies de Neisseria), la
formación del complejo de ataque de membrana después de la activación del
complemento puede conducir a la lisis bacteriana directa.
➢ La activación del complemento mediada por anticuerpos puede inducir la
producción localizada de mediadores inflamatorios que amplifican aún más la
respuesta inflamatoria.
➢ C3a, C4a y C5a actúan como anafilotoxinas, induciendo la degranulación local
de mastocitos, lo que resulta en vasodilatación.
➢ Neutrófilos, monocitos y linfocitos se reclutan en el sitio de la inflamación por
C5a, y varias quimioquías.
Anticuerpos Functiones contra Bacterias Extracelulares
 Isotipos de Inmunoglobulinas
Contra Bacterias Extracelulares
Anticuerpos Bloqueadores Anti-Adhesinas evitan la
Colonizacion Bacteriana
 Mechanismos de Evasion Inmune de Bacterias Extracelulares
Proceso de infección Defensa del Huesped
Union a la celulas del Huesped
Proliferacion
Invasión de las células huésped
Daño inducido por toxinas
Supervivencia en fagocitos
Bloqueo de la union por
moleculas de IgA secretoria
Fagocitosis
(Opsonizacion mediada por
anticuerpo y complemento)
Lisis mediada por Complemento
e inflamacion localizada
Aglutinacion mediada por
Anticuerpos
Neutralización de la toxina
por anticuerpo
Generación de oxígeno reactivo
Mecanismo Evasion
Secrecion de proteasas que
cortan los dímeros secretores de IgA
(Neisseria, Hemophilus)
Variación antigénica en la adhesión a
estructuras (Pili de N. gonorrheae)
Producción de estructuras superficiales
(cápsulas de polisacáridos,
Proteína M, capa de fibrina)
Inducción de apoptosis en macrófagos
Shigella
Resistencia generalizada de bacterias
Gram-positivas a la lisis mediada por el complemento
Inserción de MAC prevenida por el lado largo
de la cadena de LPS en la pared celular
La secreción de elastasa inactiva C3a y C5a
Secreción de hialuronidasa
(aumenta la invasividad)
Producción de catalasa
por estafilococo
 Evasión a través de la variabilidad antigénica

Las diferentes cepas de S. pneumoniae tienen polisacáridos capsulares antigénicamente distintos. La cápsula previene la fagocitosis
efectiva hasta que la bacteria es opsonizada por un anticuerpo específico y complemento, permitiendo que los fagocitos lo destruyan.
Anticuerpo a un tipo de S. pneumoniae no reacciona con los otros tipos, por lo que un individuo inmune a un tipo no tiene inmunidad
protectora a una infección subsiguiente con un tipo diferente. Un individuo debe generar una nueva respuesta inmune adaptativa cada
vez que se infecte con un tipo diferente de S. pneumoniae.
Bacterias intracelulares facultativas

Patógenos que no dependen del medio ambiente intracelular

para su supervivencia

Mycobacterium tuberculosis

Mycobacterium leprae

Salmonella enterica

Brucella species

Legionella pneumophila

Listeria monocytogenes

Francisella tularensis
 Enfermedades causadas por la facultativa
Bacterias intracelulares

Patogeno Enfermedad Celula Blanco Localizacion Puerta preferente

en Cels del huesped de entrada

Mycobacterium
Tuberculosis Tuberculosis Macrofagos Fagosoma Pulmon
leprae Lepra Macrofagos Fagolisosoma (?) Mucosa Nasofaringea
Cels de Schwann
otras numerosas cels del huesped
Salmonella Fiebre Tifoidea Macrofagos Fagosoma Intestino
enterica (Typhi)
Brucella sp. Brucelosis Macrofagos Fagolisosoma Mucosa
Legionella Enfermedad de los Legionarios Macrofagos Fagosoma Pulmon
pneumophila
Listeria Listeriosis Macrofagos, hepatocitos Citosol Intestino
monocytogenes
Francisella Tularemia Macrofagos Fagosoma Piel, mucosa, pulmon
tularensis
 Bacterias Intracelulares Obligadas

Los patógenos dependen absolutamente del ambiente intracelular para su

supervivencia. Las bacterias prefieren las células no fagocitarias como células
hospederas, incluyendo las células epiteliales y endoteliales.

Rickettsia prowazekii
Rickettsia rickettsii
Rickettsia typhi
Rickettsia tsutsugamushi
Coxiella burnetii
Chlamydia trachomatis
Chlamydia psittaci
Chlamydia pneumoniae
Delayed-type Hypersensitivity
(Type IV Hypersensitivity)
Delayed-type Hypersensitivity
(Type IV Hypersensitivity)
Activacion of Macrofagos
Fagocitosis
 Bacteria vs Neutrófilo

Fagocitosis: Quimiotaxis g Adherencia g Endocitosis g Digestión

 Neutrophil
Extracellular
Neutrófilos: NETs Traps
 Muerte celular
Neutrófilos: Netosis por liberación
de redes (NETs)

 Atrapa a m-organismos / toxinas

 Favorece destrucción patógenos

 Ayuda a reparación de tejidos

 Funciones de los macrófagos activados
en inmunidad antibacteriana

Respuesta de macrófagos** Papel en la inmunidad mediada por células

Producción de intermedios reactivos de oxígeno, Muerte de microbios en los fagolísomas

óxido nítrico; aumento de las enzimas lisosomales (función efectora de los macrófagos)

Secreción de citocinas TNF-alfa, IL-1: reclutamiento de leucocitos

(TNF-alfa, IL-1, IL-12) (Inflamación)
IL-12: diferenciación Th-1, producción de IFN-gamma
(inducción de la respuesta)

Aumento de la expresión de: Aumento de la activación de células T

CD80, CD86 (amplificación)
Clase I, Clase II MHC

**Estas respuestas del macrófago son inducidas por la ligación CD40 a CD154 (CD40L) y a la IFN-gamma
derivada de cels T en inmunidad mediada por celulas; las respuestas similares son inducidas por los
productos microbianos, particularmente LPS, y IFN-gamma derivado de NK en inmunidad innata.
 Macrófagos: fagocitan m-org

Fagocitosis: Fagosoma g Fagolisosoma g Digestión g Expulsión

Linfocitos NK: citotoxicidad
Muerte bacteriana intracelular
 Evasión bacteriana intracelular de
Muerte por fagocitos

Las bacterias intracelulares han evolucionado estrategias para evadir la

muerte por los mecanismos disponibles para el fagocito.

Capacidad del macrófago efector Mecanismo de Evasion Bacteriana

Defensinas
Acidificacion de Fagosoma
Fusion fagosoma–lisosoma
Enzimas Lisosomales
Muerte Intrafagolisosomal
ROI (oxig)
RNI (nitro) Desconocidos (detoxificadores de ROI probable interferen con RNI)
deprivacion de hierro
deprivacion de Triptofano
desconocido
Neutralizacion del Fagosoma
Inhibicion de la fusion
Resistencia contra enzimas
Evasion dentro del citosol
pared cellular robusta
receptor C3b que media captacion,
detoxificadores ROI , barredores de ROI
Barrenderos de Hierro Microbiano (e.g., sideroforos)
desconocido
Evasión bacteriana intracelular de
la muerte en Fagocitos
 El papel Central de los Linfocitos T

➢ La adquisición de la resistencia contra las bacterias intracelulares dependen

crucialmente de los linfocitos T, que, idealmente, logran la Erradicación bacteriana
estéril.
➢ Cuando existe un estado inmunitario "normal", la depuracion bacteriana se logra
rápidamente en el caso de las bacterias susceptibles, como L. monocytogenes.
➢ En el caso de patógenos resistentes, como el M. tuberculosis, la depuración es con
frecuencia incompleta y se detiene en la etapa de contención bacteriana y control del
crecimiento en focos distintos. La contención bacteriana y la erradicación ocurren en
lesiones granulomatosas.
➢ Cuanto más tiempo continúe la lucha entre el huésped y el patógeno microbiano, más
esencial será el granuloma. La formación y la perpetuación del granuloma son
orquestadas por los linfocitos T.
➢ La comunicacion en el granuloma entre los linfocitos T, los MPs, y las otras células es
promovida por citocinas.
➢ Los linfocitos T son un elemento inevitable de la patogenia de las infecciones
bacterianas intracelulares.
➢ La expansión de los granulomas perjudica las funciones del tejido ocupando espacio
y afectando las células circundantes.
➢ El funcionamiento fisiológico de las células huésped infectadas puede ser afectado
por los linfocitos T específicos.
 Patogenesis de la Infeccion por Listeria

La patogenia de la infección celular de Listeria monocytogenes. Listeria monocytogenes se une a la superficie celular y las proteínas
secretadas que permiten la adhesion a las células del huésped, escapan de la vacuola fagocitaria y se mueven en el citosol de la célula
invadida. Internalina (INLA) e inlb median la adhesion de L. monocytogenes a la superficie de las células huésped, y la listeriolisin O (llo) lisa
la membrana fagosomal. La proteína que induce la actina (ActA) se expresa de manera polarizada y cataliza la polimerización de la actina,
que impulsa las bacterias a través de la célula y a las células vecinas. Para escapar de la vacuola secundaria en la célula recién invadida, L.
monocytogenes expresa la fosfatidilcolina-específico PlcB de la fosfolipasa, una metaloproteinasa secretada del zinc (MPL) y el LLO.
Presentacion de Antigenos de Listeria

Presentación de antígenos derivados de Listeria monocytogenes a células T CD8 +. Los antígenos derivados de Listeria monocytogenes que se presentan
a las células T CD8 + se pueden dividir en dos categorías. a | El primer tipo, que son presentados por las moléculas de la clase de la IA de MHC, es derivado
por la degradación proteasome-mediada de proteínas que L. monocytogenes secreta en el citosol de la célula del huesped.
 Convencional y no Convencional
Celulas T en la Inmunidad Antibacteriana

Moleculas presentadoras de Antigenos

Poblacion de Cels T Tipo Distribucion tejidos Polimorfismo Ligante Sitio de carga ligante

CD4 ab Cels T MHC clase II Restringido (APC) Alto 12–20mer peptido Endosoma
CD8 ab Cels T MHC clase Ia (+ b2m) Amplio Alto No peptido Cytosol/ER
CD8 ab Cels T MHC clase Ib (+ b2m) Amplio Bajo N-f-met-pentapeptido Endosoma
cytosol/ER (?)
DN (CD8) ab Cels T Grp 1 CD1 (+ b2m) Restringido (APC) Bajo Lipido, lipoglicano Endosoma
CD4 (DN) ab Cels T Grp 2 CD1 (+ b2m) Intermedio Bajo ? ?
DN gd Cels T No conocido No aplicable No aplicable Fosfoligantes ?
Tres estadios de la Respuesta Inmune a Bacterias Intracelulares
 Citocinas en la Inmunidad Antibacterial

Citocina Contribucion a la Fuente principal celular Function principal

proteccion antibacteriana en infeccion bacteriana en infeccion bacteriana

Quemocinas Probable Cels. Epiteliales Reclutamiento de Leucocitos y activacion

Cels endoteliales
macrofagos
IL-1 Papel importante probado Macrofago Reclutamiento de Leucocitos y activacion
IL-6 Funcion esencial probada Macrofago, cels. T Reclutamiento de Leucocitos
Diferenciacion cels T
TNF-alfa Funcion esencial probada Macrofagos Reclutamiento de Leucocitos
Mastocitos Activacion de NK
Formacion de granuloma
Coestimulacion IFN-gamma
IFN-gamma Function esencial probada cels Th1 Activacion de Macrofagos
cels NK granuloma
IL-12 Papel importante probado Macrofagos estimulacion cels Th 1 y cels NK
IL-18 Probablemente, no probado Macrofagos estimulacion cels Th 1
IL-4 Exacerbacion cels NK, cels T, cels Th2 inhibicion de cels Th 1
Basofilos (?)
Eosinofilos (?)
IL-10 Exacerbacion Macrofagos Inhibicion de Macrofagos
TGF-beta Exacerbacion probable, no probado Macrofagos Inhibicion de Macrofagos
RespuestasTh1 predominantes
contra Bacterias Intracelulares
 Formación de Granuloma

➢ Los linfocitos T recirculantes que pasan por la lesión inflamatoria son reclutados por citocinas
y quimioquinas pro-inflamatorias..
➢ Gradualmente, las células infiltrantes se organizan y forman un granuloma que consiste
predominantemente en Macrofagos.
➢ TNF- alfa e IFN-gamma parecen ser de crucial importancia para este acontecimiento.
➢ Celulas T ab son la población de linfocitos T dominante en todas las etapas de la formación de
granuloma.
➢ En la fase inicial se ha observado una proporción significativa de Células T gamma/delta. Estas
células T gamma/delta juegan al parecer un papel importante en la organización de una lesión
granulomatosa fuerte y bien estructurada.
Los granulomas están a la vanguardia de la protección restringiendo la replicación bacteriana, así
como los patógenos confinantes a los focos discretos. Esto se logra por lo siguiente:
➢ Macrofagos activados capaces de Inhibir el crecimieto bacteriano.
➢ Encapsulacion promovida por la fibrosis y la calcificacion.
➢ Permitiendo la necrosis por una reduccion de nutrientes y de suministro de oxigeno.
Sin embargo, con frecuencia, los patógenos microbianos no son completamente erradicados, y
algunos organismos sobreviven en forma latente. Un equilibrio lábil entre la persistencia
microbiana y la defensa antibacteriana se desarrolla que dura por largos periodos.
Granuloma Formation
 Formas de Lepra

Lepra Lepromatosa:

• M. leprae gran proliferación dentro de macrófagos.

• Alta infectividad.
• Infección diseminada, compromiso de hueso
cartilago, y difuso daño nervioso.
• Hipergammaglobulinemia.
• Respuesta baja o ausente por células T.
• Falta de respuesta específica a antígenos de M.
leprae.
 Formas de Lepra

Lepra Tuberculoide:

• M. leprae presente a niveles bajos o

indetectables.
• Baja infectividad.
• Granulomas e inflamación local.
• Niveles de IgGs en el suero normales
• Respuesta a células T normal.
• Respuesta específica a M. leprae
 LEPRA TUBERCULOIDE LEPRA LEPROMATOSA

IL-2

CITOQUINAS
IFN-GAMMA Th 1

LINFOTOXINA

IL-4

CITOQUINAS
IL-5 Th 2

IL-10
J Invest Dermatol
Jun;102(6):828-32. 1994
Th1-Th2 paradigm:
insights from leprosy.
Modlin RL.
Muchas gracias…….

Dr. Juan Rodríguez-Tafur

rodrigueztafur@gmail.com
jrodriguezt@unmsm.edu.pe
Face: Juan Manuel Rodríguez-Tafur Dávila