EL DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO DE PARASITOLOGÍA
INTRODUCCIÓN
Para diagnosticar las diferentes parasitosis
contamos con innumerables recursos,
algunos son útiles para detectar una amplia
gama de parásitos, mientras que otros se
limitan exclusivamente a cierta especie. Sea
cual sea el método que se utilice la finalidad
de todo el proceso siempre será la
identificación del agente etiológico de la
patología.
CICLO VITAL COMO AYUDA EN EL
DIAGNOSTICO
La comprensión de los ciclos vitales de los
parásitos es de suma utilidad al momento de
realizar un examen diagnóstico; sobre todo
para conocer la distribución geográfica,
transmisión y patogenia del parásito. Por
ejemplo el comprender que Ascaris
lumbricoides y otros nematodos intestinales
expulsan huevos que pueden evacuarse en
las heces, permite que sean identificables al
microscopio en un examen.
PARASITOSIS DE LOS TUBOS DIGESTIVO Y
UROGENITAL
Estas zonas son más propensas a ser
parasitadas por amebas, flagelados y
nematodos. Aunque los trematodos, ciliados
y céstodos pueden también encontrarse
asociados a patologías. En el tubo digestivo
el examen en fresco o la tinción de frotis
resultan inadecuados por lo tanto deben
repetirse en ocasiones (Sobre todo al tratarse
de heces).
RECOGIDA DE MUESTRAS FECALES
1. Las muestras fecales deben ser recogidas
en un contenedor limpio, de boca ancha
e impermeable al agua, con una tapa
que encaje e
impida se
escape su
contenido y
también la
contaminació
n de la misma.
2. La muestra no
debe contaminarse con materiales
orgánicos extraños como tierra u orina, y
con inorgánicos como el agua, jabones
etc. Estos podrían contener organismos
que interfieran con los parásitos humanos
o en su caso destruirlos.
3. No deben contener bario, bismuto ni
medicamentos que contengan aceite
mineral, antibióticos, fármacos
antipalúdicos u otros químicos, pues
influyen en la posible detección de
parásitos que se alojen a nivel del
intestino. Los pacientes que hubiesen
consumido bario deben esperar de 5 a 10
días mínimo; si han usado antiparasitarios
o antibióticos (tetraciclinas p.Ej) 2
semanas para atenuar efectos tóxicos.
4. Si no se encuentran microorganismos en
las heces normales, se debe administrar un
purgante que no afecte a los parásitos los
más adecuados son el Sulfato de Sodio y
el Bifosfato sódico tamponado.
MANEJO Y PRESERVACIÓN DE MUESTRAS
FECALES
 Toda muestra fecal sin conservante debe
ser enviada al laboratorio en las 2 primeras
horas luego de ser evacuada.
 Si las heces son líquidas existe una mayor
probabilidad de contener trofozoítos y deben
remitirse al laboratorio para ser examinadas
en 30 minutos.
 En toda muestra fecal remitida para el
examen parasitológico deben hacerse los
siguientes tipos de preparaciones:1) En
frescos directas, 2) Concentrados, 3) Frotis
teñidos permanentes.
Preparados en fresco directos:
Es útil para diferenciar e identificar los
trofozoítos de protozoos, quistes, ooquistes, y
huevos y larvas de helmintos. Se realizan 2
preparaciones
1. Por emulsificación de un fragmento
de heces en una gota de solución
salina al 0.9% sobre un porta objetos.
2. En el mismo portaobjetos realizar otra
con un fragmento de heces y una
gota de lugol o preparaciones de
yodo 1:5.
 EL EXAMEN COPROLÓGICO O presencia de los pigmentos como el
COPROSCÓPICO estercobilinógeno. Puede haber variación
normal, como por ejemplo en la ingesta
Es un tipo de examen directo que se utiliza en de carne se vuelve oscura por la
el laboratorio para diagnóstico médico: es el presencia de hierro o clara por la ingesta
estudio de las heces fecales y revela la de leche. Dentro de las tonalidades
digestión de un individuo normal en un posibles están:
momento determinado de la fisiología  Negras: por sangre procedente del
intestinal, razón por la cual su valor es un tubo digestivo alto (melena), también
poco limitado para la práctica clínica. por bismuto, hierro,
En el laboratorio de Parasitología es de carbón, entre otras.
utilidad para reconocer al parásito, por lo  Blancas: por
que existen muestras previamente rotuladas y ausencia de
que contienen al parásito que se necesita pigmentos biliares
para la práctica. (acolia), en un
síndrome de mala
ELIMINACION NORMAL DE LAS HECES absorción que provoca un aumento en
Con un régimen equilibrado un adulto normal la eliminación de las grasas
defeca como término medio una vez al día, (esteatorrea) o por ingestión de bario.
sin embargo hay que tomar en cuenta la  Verde: Por un aumento de la
individualidad de cada persona. biliverdina, este hecho se puede
producir luego de la administración de
COMPOSICIÓN DE LAS HECES un antibiótico que disminuya la flora
Los 2/3 o ¾ partes de todas las heces fecales bacteriana, la
son agua, perdiéndose por este concepto cual se
aproximadamente 100 ml al día. El 1/3 o ¼ encarga de
constituye componentes sólidos, distribuidos reducir la
de la siguiente manera: biliverdina
 30% de alimentos no digeridos, pigmentos También puede
biliares y detritus celulares reducirse esta coloración luego de una
 20-30% de bacterias muertas ingesta de vegetales.
 20% de grasa (en general se pierde  Amarillo: por la ingesta de leche o
aproximadamente 5 g de lípidos diarios) tránsito intestinal acelerado que
 10-20% de bacterias vivas dificulta la buena absorción de grasas.
 10-20% de sustancias inorgánicas  Rojo: Por la presencia de sangre
 2-3% de proteínas proveniente del tubo digestivo bajo;
 Además se pierden por las heces 1mEq de ingesta de remolacha o administración
Na y 1 mEq de Cl al día. de fármacos como la rifampicina.

EXAMEN MACROSCOPICO D) CONSISTENCIA. Existen tres tipos

principales que son: Dura o formada,
Se estudian algunos parámetros como: blanda y líquida.
cantidad, color, consistencia, aspecto, forma E) ASPECTO. Homogéneo o heterogéneo.
y elementos sobreañadidos F) FORMA. Una deposición normal debe ser
A) CANTIDAD. Varía entre 60 y 300 g/día moldeada y tomar
dependiendo de la fisiología del individuo la forma del
y de la dieta, así si es rica en celulosa conducto ano-
aumenta, mientras que si es rica en rectal las heces
proteínas disminuye. acintadas se
B) OLOR. Esta dado por el indol, escatol pueden dar por
(derivados del triptófano), mercaptano e un estrechamiento
hidrogeno sulfurado, en general productos del conducto sea
del metabolismo bacteriano. Por lo cual el por una masa o
aumento de la flora bacteriana o el por espasticidad; o, de forma esférica
reemplazo por bacterias patógenas dará llamados escíbalos presentes en un
como resultado un olor fétido a las heces. estreñimiento crónico.
C) COLOR. Varía de castaño claro a castaño Clínicamente se puede aplicar la escala de
oscuro. El color está determinado por la heces de Bristol:
Que sirve para determinar el tipo de heces y
su probabilidad
diagnóstica.
G) ELEMENTOS
SOBRE-
AÑADIDOS.
Entre estos
podemos
encontrar
restos
alimenticios
por una
deficiente
masticación,
presencia de
parásitos y fermentación y el amoníaco producido
otros determinados por compromiso de la
mucosa intestinal como:
 Moco: El moco se produce
normalmente en el colon y tiene
funciones de evitar la escoriación de la
mucosa intestinal, cohesión del bolo
fecal, protege de la actividad
microbiana y protege de los ácidos por
poseer bicarbonato de sodio.
La presencia macroscópica sugiere
irritación de la mucosa coloidea
(colitis), si es sanguinolenta se debe a
una disentería o neoplasia, mientras
más adherido esté el moco a las heces,
mas alto es su origen.
 Pus: Sugiere ulceraciones intestinales,
con la consecuente invasión
bacteriana; como ejemplo tenemos la
colitis ulcerativa, la disentería basilar
crónica, etc.
 Sangre: Presencia de hemorragia en el
tubo intestinal o áreas adyacentes se
ha determinado que pérdidas de entre
50 a 65 ml/día de sangre de tubo
digestivo alto dan origen ya a las
denominadas melenas.
 Grasa: Pérdidas de más de 5 gr al día
se las puede determinar colocando un
papel sobre las heces y verificando la
mancha grasienta en el mismo, la
eliminación excesiva de grasa como
en un síndrome de mala absorción da
lugar a la presencia de la llamada
esteatorrea con heces blandas,
voluminosas, de olor fétido, espumosas
y que flotan en el agua.
H) PROCESOS DIARREICOS
Se habla de diarrea cuando hay un aumento
de la frecuencia o de la cantidad y/o
disminución de la consistencia, un ejemplo
práctico consiste en decir, que se considera
diarrea a aquella deposición que adquiere la
forma del recipiente que lo contiene.
Consideramos a la diarrea como más de 3
deposiciones líquidas en un período menor a
24 horas.
Cuando las deposiciones son liquidas y de
olor fétido, provienen del intestino delgado,
en cambio si son blandas, voluminosas y con
la presencia de moco, se considera que
provienen del intestino grueso.
I) EXAMEN QUÍMICO
 pH: Fluctúa entre 7 a 7.5, es decir
ligeramente alcalino, El pH está
determinado por la relación entre los
ácidos producidos por la flora de
por la flora de putrefacción, un pH ácido,
por lo tanto estará provocado por un
aumento de la flora de fermentación por
diarreas virales y por diarreas por bacterias
entero-invasivas.
 Test de sangre oculta en las heces: Se lo
utiliza para detectar la presencia de
sangre que no es visible
macroscópicam
ente
 El reactivo
utilizado es el
peróxido de
hidrogeno
(guayaco) que
junto con otras
sustancias que
reaccionan con la Hb, dan una reacción
de color.
 Prueba de hemoglobina humana: Se utiliza
anticuerpos monoclonales anti-
hemoglobina humana por la que no
presente acción cruzada con Hb
procedente de carne de anímales.
Detecta hasta 0.88 mg de Hb por gramo
de materia fecal.
EXAMEN MICROSCÓPICO
Para la investigación de parásitos se debe
suprimir los alimentos ricos en celulosa 2 a 3
días antes del examen de esta manera se
observan los quistes de mejor manera.
Debemos tomar en cuenta que en las heces
líquidas se pueden encontrar trofozoítos de
protozoarios mientras que en heces formadas
se encuentran quistes.
Al microscopio encontramos:
 Restos alimenticios: de origen animal
 Fibras musculares: proviene de la carne y
se las observa como rectángulos
amarillentos con estrías casi borradas
 Tejido: conectivo
 Grasas: gotas de aceite
 Pelos animales: considerar que son
macroscópicos
 Restos alimenticios de origen vegetal.
Celulosa: proviene de papas, zanahoria,
porotos, arvejas, etc. Pueden ser de forma
irregular como restos vegetales y membranas
o de forma regular como resortes, pelos y
anillos vegetales.
Almidón: Se puede encontrar dos tipos que
son el digerido y el no digerido, con el lugol
toman el color rojo o violeta,
respectivamente.
Flora bacteriana: Se la observa, como
bastoncillos, pequeños con movimiento
llamados pululación bacteriana.
Con el lugol se puede dividir en flora yodófila
y no yodófila dependiendo si con el lugol se
tornan de color azulado y no azulado
respectivamente.
Levaduras: miden de 2 a 4 mieras, de forma
ovalada, están presentes normalmente, pero
se presenta aumentada especialmente,
cuando hay alteración de la flora
bacteriana, como cuando se administran
antibióticos y solo cuando se asocia a
seudomicelios se debe reportar como
hongos.
Cristales: No tienen significado especial y
pueden ser de oxalato de calcio, de
trifosfato, fosfato de magnesio, colesterol. Los
cristales de Charcot-Leyden miden de 10 a
30 micras y provienen de la degranulacion
de los eosinofilos, los cuales presentan
granulaciones con un centro cristalino,
llámalo core, que al salir al exterior se unen
formando estos cristales. Sugieren la
presencia de helmintos.
Células endógenas: de difícil, observación
como leucocitos polimorfonucleares en
Shigelosis o mononucleares en fiebre tifoidea
y eritrocitos en disentería, fistulas, etc.
Células epiteliales: Provenientes de la
descamación normal del intestino delgado
Otros: Como gotas de agua, burbujas de aire
y parásitos.
Métodos de concentración fecal
Dado que los huevos, quistes y ooquistes
suelen encontrarse en escasas cantidades
para ser visibles mediante un examen directo
siempre deben realizarse métodos de
concentración. Los métodos más usados con
frecuencia son el de flotación y el de
sedimentación.
Sedimentación de heces
La finalidad de estos métodos es el aumentar
el número de parásitos en el volumen de
materia fecal que va a ser analizada.
Ventajas: es fácil de realizar, no requiere
observación microscópica inmediata y se
puede aplicar a la concentración de la
mayoría de los parásitos intestinales.
Desventajas: la observación microscópica
puede dificultarse por concentración de
elementos no parasitarios.
Dentro de los métodos más útiles están el de
centrifugación por formol éter o
concentración de Ritchie y el de
sedimentación espontánea
Técnicas de flotación de heces
El método de flotación emplea un medio
líquido más pesado que los parásitos
permitiendo que los mismos suban a la
superficie y puedan ser recuperados de la
película superficial.
Ventajas: el preparado es más límpido,
facilitando la observación microscópica.
Desventajas: debe hacerse la observación
microscópica en menor tiempo debido a
que la película superficial puede destruirse y
los parásitos caer al fondo del tubo, a su vez,
los parásitos de mayor peso que la solución
empleada no flotarán.
Existen varios métodos de flotación, el más
utilizado es el Método de Faust o de Sulfato
de Zinc al 33%
Referencias
1. 1. David Botero, Marcos Restrepo:
Parasitosis Humanas, 5ta Edición.
2. 2. Ash, Orihel: Atlas de Parasitologia
Humana, 5ta Edición.
3. 3. Patrick Murray, Ken Rosenthal,
Michael Pfaller: Microbiología Médica,
6ta Edición.
4. 4. Koneman: Diagnostico
Microbiológico-Texto y Atlas a Color,
7ma Edición.
5. 5. Saredi Nelida, Manual Práctico de
Parasitología, 1era edición.
 PRESERVANTES DE LAS MUESTRAS FECALES

Formaldehido al 10% en solución fisiológica

Agregar 100 mL de formaldehido en 900 mL de solución salina 0.9%
Ventajas Desventajas
 Facil preparación  No son adecuadas para tinción tricrómica.
 Tiene un vencimiento prolongado  No mantiene los trofozoítos de protozoos.
 Se conserva bien la morfología de huevos de  Puede interferir en el diagnostico por PCR.
helmintos, larvas, quistes y ooquistes.
Alcohol polivinilico de baja densidad LV-PVA
Alcohol polivinilico 10g
Etanol al 95%: 62,5 mL.
Cloruro mercúrico, en solución acuosa saturada
Glicerina, 3mL.
Mezclar los ingredientes líquidos en un vaso de precipitación de 500 mL, agregar el PVA en polvo
sin mezclar, cubrir el vaso de precipitación con papel, haciendo que el PVA se remoje durante una
noche. Calentar la mezcla lentamente a 75 oC y agitar suavemente hasta lograr una consistencia
lechosa.
Ventajas Desventajas
 Conserva bien la morfología de trofozoítos y  No conserva adecuadamente la morfología
quistes de protozoos. propia de los huevos y larvas de helmintos.
 Se preparan fácilmente frotis tricrómicos  Por el HgCl se convierte en difícil y costoso de
permanentes. desechar.
 Las muestras permanecen estables durante  Es difícil de preparar en el laboratorio.
semanas.  No puede usarse en concentración e
inmunoanálisis.
MIF (Mertiolate-yodo-formaldehido)
Se deben preparar 2 soluciones y almacenarse, por separado. Deben mezclarse inmediatamente
antes de usarse.
Solución 1
Tintura de timerosal 1:1000, 40mL.
Formaldehido solución acuosa al 10%, 5mL.
Glicerol, 1mL
Agua Destilada, 50mL
Solución 2
Yoduro de potasio, cristales, 10g.
Yodo, cristales, 5g.
Agua destilada 100mL.
Agregar los cristales de Yodo luego de disolver los de KI
Mezclar 9.4 mL de la solución 1, con 0,6 mL de la solución II justo antes de su uso. Agregar el
equivalente de cerca de ¼ de cuchara de té de heces emitidas, mezclar con un agitar y dejar
reposar por 24 horas.
Ventajas Ventajas
 Fijan y tiñen todas las formas parasitarias.  No es adecuado para tinciones tricrómicas.
 Es sencilla y de prolongada duración.  La morfología de los trofozoítos se conserva de
 Adecuada para los procedimientos de modo adecuado.
concentración.  Puede interferir con otras tinciones.