25/5/2019 Bacterias productoras de H2S (reductoras de sulfato, reductoras de sulfito, reductoras de azufre, y otras moléculas con azufre) - Cultivo …

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Bacterias productoras de H2S (reductoras de sulfato, reductoras de

sulfito, reductoras de azufre, y otras moléculas con azufre) - Cultivo
cualitativo y cuantitativo; Identificación molecular (PCR y
secuenciación)..

Bacterias productoras de H2S (reductoras de sulfato, reductoras de sulfito, reductoras de azufre,

y otras moléculas con azufre): Importancia en el deterioro de productos pesqueros y cárnicos -
Cultivo cualitativo y cuantitativo; Identificación molecular (PCR y secuenciación)

Información 15-04-18.

Las bacterias productoras de sulfuro de hidrógeno (H2S) comprenden diversos grupos de

bacterias y arqueas que obtienen energía reduciendo diversos compuestos que poseen azufre en su
molécula, incluyendo compuestos orgánicos (aminoácidos azufrados) y compuestos inorgánicos con
azufre oxidado (como sulfato, sulfito, tiosulfato, tetrationatos, o azufre elemental) a H2S. El sulfuro de
hidrógeno es un gas incoloro y tóxico con un fuerte olor fétido a huevos podridos. Es uno de los
compuestos resultantes de la descomposición de la materia orgánica, por lo que está presente en el
medio ambiente. Se encuentra en el aire y agua sin tratar principalmente como resultado de emisiones
naturales, y su concentración se ve aumentada debido a procesos industriales. El H2S es
particularmente notable en algunas aguas subterráneas, dependiendo de la mineralogía de roca de
origen y los microorganismos presentes. El agua potable, así como una serie de alimentos y bebidas
pueden contener sulfuros. En los alimentos, las bacterias productoras de H2S destacan como bacterias
específicas del deterioro en algunos productos pesqueros y carnes rojas, sobre todo si éstas han sido
procesadas.
Como se ha mencionado previamente, las bacterias productoras de H2S, constituyen un amplio y
heterogéneo grupo, donde destacan las bacterias reductoras de sulfato (SO42-), las principales
responsables de la formación de H2S en anaerobiosis. Frecuentemente, la actividad bacteriana sulfato
reductora se encuentra ligada con capacidad de oxidación de otros compuestos oxidados de azufre. Sin
embargo, no siempre es así, y además de estas bacterias, se conocen las bacterias reductoras de
azufre (So), las bacterias sulfito reductoras (SO32-), y se han aislado bacterias tiosulfato
reductoras (SO2O32-) no sulfato reductoras. A continuación, se describen las características de los
principales tipos de bacterias.
Las bacterias reductoras de sulfato o SRB (por sus siglas en inglés), son bacterias
quimiolitotrofas que emplean sulfato como aceptor final de electrones en la degradación de la materia
orgánica, proceso denominado sulfato reducción, que da como resultado la producción de H2S. Hasta
ahora se han descrito más de 220 especies de 60 géneros de SRB, que pertenecen a cinco divisiones o
filos dentro de las bacterias (los formadores de esporas Desufotomaculum, Desulfosporomusa y
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Desulfosporosinus
25/5/2019 dentro de
Bacterias productoras la división
de H2S (reductorasFirmicutes, Deltaproteobacteria,
de sulfato, reductoras la especie
de sulfito, reductoras de azufre, Thermodesulfovibrio
y otras moléculas con azufre) - Cultivo …
dentro de la división Nitrospira y dos filos representados por las especies Thermodesulfobium
narugense y Thermodesulfobacterium / Thermodesulfatator) y dos divisiones dentro de las arqueas (el
género Archaeoglobus del filo Euryarchaeota y los dos géneros Thermocladium y Caldivirga del filo
Crenarchaeota, afiliados al orden Thermoproteales).
Las SRB son bacterias anaerobias estrictas que usan el sulfato, la forma más oxidada del azufre,
como aceptor final de electrones, convirtiéndolo en la forma más reducida, sulfuro. Esta reducción no
asimilativa del sulfato es un proceso en gran escala limitado a las SRB. Además del sulfato, las SRB
pueden emplear otros compuestos oxidados de azufre como aceptores terminales de electrones, entre
ellos los sulfitos y el tiosulfato, intermediarios de la sulfato reducción. Además, entre las SRB también
se encuentran algunas bacterias sulfurreductoras facultativas, que utilizan azufre elemental como
sustrato respiratorio en ausencia de otros posibles aceptadores terminales de electrones tales como
sulfato, sulfito, tiosulfato, nitrito o nitrato. Así, aunque la mayoría de los SRB no pueden crecer mediante
la reducción elemental de azufre, algunas bacterias de los géneros Desulfomicrobium y Desulfovibrio,
utilizan azufre como un aceptor de electrones alternativo.
Las SRB pueden tener un metabolismo heterotrófico, autotrófico, litoautotrófico, o de tipo
respiratorio bajo anaerobiosis. Además, recientemente, se ha descubierto la posible naturaleza
microaerófila de algunas especies de SRB consideradas anteriormente como anaerobios estrictos. Las
SRB pueden emplear más de cien compuestos como donadores de electrones (azúcares, aminoácidos,
ácidos monocarboxílicos, ácidos dicarboxílicos, alcoholes y compuestos aromáticos) y son los
microorganismos que reducen la mayor cantidad de diferentes aceptadores finales de electrones
terminales, incluyendo los compuestos inorgánicos de azufre. Debido a ello, su función ecológica y
metabólica en la naturaleza es de gran importancia. Las SRB se encuentran ampliamente distribuidas
en ambientes acuáticos y terrestres que se vuelven anóxicos. Pueden crecer en diferentes condiciones
físico-químicas, habitando en los ambientes más extremos de nuestro planeta, como los ecosistemas
salino, caliente, frío y / o alcalino. El género mejor estudiado es Desulfovibrio que es común en
ambientes acuáticos o en suelos encharcados con abundante materia orgánica y suficientes niveles de
sulfato.
Las bacterias reductoras de azufre se caracterizan por su capacidad para reducir el azufre
elemental a sulfuro, un proceso denominado sulforeducción. Varios géneros de arqueas y bacterias
quimioorganotróficas poseen la capacidad de oxidar sustratos orgánicos (principalmente péptidos
pequeños, glucosa y almidón) anaeróbicamente, utilizando S° como aceptador final de electrones. En
las arqueas, este proceso de respiración anaerobia se observa mayormente en los géneros
Thermococcus y Thermoproteus, y en menor grado en los géneros Desulfurococcus, Thermofilum y
Pyrococcus. También, otro grupo de arqueas quimiolitotróficas de los géneros Acidians, Pyrodictium y
Thermoproteus demuestran la capacidad de crecer autotróficamente a expensas de CO2, H2 y S°.
Entre las eubacterias, la respiración anaerobia de S° es llevada a cabo por bacterias
pertenecientes a los géneros Desulfuromonas, Desulfurella y Campylobacter. Estas bacterias acoplan la
oxidación de sustratos tales como acetato y etanol a la reducción de azufre elemental a sulfuro de
hidrógeno. La capacidad para reducir azufre elemental se extiende también a bacterias aerobias
facultativas quimiorganotróficas pertenecientes a los géneros Proteus, Pseudomonas y Salmonella, que
también exhiben la capacidad de reducir compuestos sulfurados tales como tiosulfato, sulfito y
dimetilsulfóxido.
Los anaerobios sulfito-reductores constituyen un grupo asociado a los Clostridium spp. y como
tal se caracterizan por ser organismos Gram positivos, anaeróbicos, formadores de esporas. Se
encuentran en diversas fuentes ambientales, como suelo, sedimentos marinos, vegetación en
descomposición, intestino humano y de animales, heces y heridas infectadas de hombre y animales,
aguas superficiales, como también en los alimentos, especialmente cuando las condiciones de higiene
en la elaboración son deficientes. Son deteriorantes, ya que producen malos olores y, con mucha
frecuencia, ennegrecimiento del producto cuando éste tiene hierro, formando un precipitado oscuro de
sulfuro de hierro. Estos microorganismos tienen la capacidad de reducir los sulfitos a sulfuros a partir de
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aminoácidosBacterias
25/5/2019 y compuestos azufrados.
productoras de H2S (reductoras de Estas bacterias
sulfato, reductoras sereductoras
de sulfito, han propuesto
de azufre, y otrascomo
moléculasindicadores de
con azufre) - Cultivo …
contaminación de alto riesgo del agua. La ventaja más importante es que sus esporas sobreviven en el
agua mucho más tiempo que los organismos del grupo coliforme y son resistentes a la desinfección, al
punto que pueden ser detectados en algunas muestras de agua después de haber recibido pre-
desinfección, floculación, sedimentación, filtración y la desinfección terminal. También tienen valor como
indicadores de contaminación fecal de carácter no reciente en alimentos.
La detección de las bacterias productoras de H2S en el laboratorio, se basa principalmente en la
detección de la producción de sulfuro de hidrógeno en cultivo. Para detectar los diferentes tipos de
bacterias, mediante el aislamiento en cultivo, se ajusta la fuente de azufre, los indicadores de sulfuros y
las condiciones de incubación del cultivo. Las diferentes especies de microorganismos productores de
H2S emplean diferentes compuestos inorgánicos o aminoácidos azufrados como fuentes de azufre
(como digeridos proteicos – peptona-, aminoácidos azufrados –cisteína o metionina- y tiosulfato). En el
mercado, existen muchos medios de cultivo con diferentes compuestos azufrados, donde se detecta el
H2S gaseoso producido por la reducción de una fuente de azufre inorgánico como el tiosulfato, o por la
reducción del azufre orgánico como el proporcionado por el grupo funcional R-SH del aminoácido
cisteína presente en las peptonas. La producción del H2S se detecta cuando el gas entra en contacto
con ciertos metales, como plomo, hierro o bismuto, y forma sulfuros con estos metales (de color negro).
Los indicadores de sulfuro varían entre los diferentes medios: hierro peptonizado, sulfato ferroso, sulfato
de amonio ferroso o férrico, citrato férrico, tiosulfato de sodio, sulfito de bismuto o acetato de plomo. Las
sales de hierro son muy empleadas para la detección de los miembros de la familia Enterobacteriaceae,
mientras los procedimientos con acetato de plomo son los más sensibles para la detección de
cantidades ínfimas de H2S en otras bacterias que no sean de la familia Enterobacteriaceae.

Pruebas realizadas en IVAMI:

Detección y recuento de bacterias productoras de H2S por aislamiento mediante cultivo en medios
selectivos.
Identificación molecular de las colonias aisladas en cultivo a nivel de especie (PCR y
secuenciación).
Muestra recomendada:

Muestra del alimento sospechoso o sometido a control. Se recomienda un mínimo de unos 100 g
introducidos en un recipiente de polipropileno (plástico no rígido) estéril.
Muestra del agua sospechosa o sometida a control. Se recomienda un mínimo de 200 mL
introducidos en un recipiente de polipropileno (plástico no rígido) estéril.
Otro tipo de muestra. Consultar a ivami@ivami.com (mailto:ivami@ivami.com)

Conservación y envío de la muestra:

Refrigerada (preferido) durante menos de 48 horas.

Congelado: más de 48 horas.

Plazo de entrega de resultados:

Detección y recuento por aislamiento en cultivos aeróbicos y anaeróbicos: 4 ó 5 días

Detección y recuento por aislamiento en cultivo aeróbico y anaeróbico e identificación de molecular
de especie: 5 a 8 días.
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Coste de la prueba:

Coste de la prueba de detección y recuento por cultivo: civami@ivami.com

(mailto:ivami@ivami.com)
Identificación molecular de especie/s: civami@ivami.com (mailto:ivami@ivami.com)

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