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FUNDAMENTO
pueden emplear ciertas sustancias colorantes inocuas para la vida de las células y que
pulmón o del tejido subcutáneo, células de Küpffer o las dendríticas fagocíticas de los
mitocondrias. Las soluciones de uso más común son la tinta china, carmín de litio y azul
específica componentes celulares como mitocondrias con el verde de Jano, los gránulos
reticulocitos con el azul brillante de cresilo, las ramificaciones nerviosas con el azul de
metilo o el DNA y RNA de las células con naranja de acridina (mediante el microscopio
de fluorescencia).
Coloración o tinción
Los cortes de los tejidos adheridos a los portaobjetos están listos para colorearse,
tinción consiste en que una estructura celular o tisular adquiere específicamente un color
decolora. Es una sustancia colorante la que puede transferir su color a otro cuerpo.
acuerdo con esto, las partículas de las sustancias colorantes disueltas penetran en los
cohesión molecular. Por ejemplo, la coloración de las grasas o lípidos es una tinción
puramente física, pues el Sudán III o el Sudán IV se absorben por la facilidad que tienen
celulares o tisulares, que se unen a los cromógenos básicos o ácidos de los colorantes,
respectivamente. Así se forman sales insolubles. De acuerdo con esta teoría, los
colorantes se unen (ligan) a los tejidos por enlaces iónicos, covalentes o de hidrógeno.
El enlace iónico o electrostático ocurre cuando el colorante y la sustancia a teñir
eléctrica (+) y las partículas del colorante tienen carga eléctrica (-).
Existen varios criterios para clasificar los colorantes: Por su origen, pueden ser
de Campeche”.
colorantes nucleares porque tienen afinidad por los ácidos nucleicos (DNA
3. Neutros. Son sales en las que tanto la parte básica como la ácida
Leischman, y otros.
Existe una serie de procedimientos por intermedio de los cuales células y tejidos se
tiñen por lo colorantes. De acuerdo con ellos, las coloraciones se clasifican en:
tenga efecto.
sobrante.
4. Coloración regresiva: en este caso los tejidos se sobrecolorean con la
del colorante.
Montaje. Concluido el proceso de tinción de los cortes, éstos se deben colocar en
condiciones de protección para poderlos utilizar muchas veces sin que se deterioren.
una gota de una sustancia adherente, diluida casi siempre en xilol (resina natural como
el bálsamo de Canadá o resinas sintéticas cuyos índices de refracción son similares a los
del vidrio) y sobre ellos una laminilla cubreobjetos, con cuidado de no dejar burbujas de
adquiera solidez suficiente para ello; las láminas se colocan en una platina caliente (45 a
50º) durante 24 a 48 horas, tiempo suficiente para que estén listas y puedan observarse.
Sangre
La tinción de Wright
clasificada como una tinción policrómica, dado que puede teñir compuestos ácidos o
“El reactivo de Wright está compuesto por eosina y azul de metileno (…) empleando
Composición
Metanol 1L
Los colorantes policromatófilos son mezclas de compuestos básicos
Tabla 1
Tinción policromatófila
El resultado de la tinción puede ser influido por diferentes factores, como el valor del
Levadura
procedió a diluir con agua destilada en un tubo de ensayo, y después del frotis
Yogurt y vinagre
caracterizados por presentar pared celular, ribosomas del tipo 70S y carecer de
verdadero núcleo, poseen una formación nuclear sin membrana. La célula bacteriana
flagelos y cápsula,
Al microscopio, la forma de las bacterias difiere de unas especies a otras, pero resulta
los mismos.
Todas las técnicas de tinción exigen una preparación previa del frotis antes de proceder
a la tinción en sí. Los pasos que hay que seguir, escalonadamente, son: extensión,
- Extensión
un posible desvanecimiento del frotis. Los portaobjetos suelen flamearse antes de su uso
- Desecación
Siempre debe realizarse al aire. Puede favorecerse colocando el frotis bajo una lámpara,
- Fijación:
Esta operación pretende que los microorganismos se adhieran al portaobjetos por
preparación con alcohol metílico o etílico, dejando en contacto dos o tres minutos,
eliminando después el exceso o inflamando el resto; las muestras con contenido celular
y taxonómica de las bacterias. Las bacterias se clasifican en dos grandes grupos según
cristal violeta:
Las técnicas de tinción varían según los autores; cada laboratorio elige la que le ofrece
mejores resultados.
sobre la naturaleza de la muestra, a veces muy valiosa para la elección de una actitud
terapéutica inicial. Su uso está particularmente indicado para orientar las técnicas de
resultados que no ofrecerán los cultivos. Por estas razones, nunca se debe prescindir de
diferencia de esta última, núcleo celular. Los organismos más simples como lo
son los protozoarios es tan constituidos de una sola célula eucariota mientras que
la luz, esto porque las células no presentan demasiados elementos que impidan
el paso de los rayos luminosos (pues están constituidas casi en un 70% da agua);
observación.
Una de las características de las tinciones es que casi nucas pueden usarse en
mucosa bucal).
adiposo y sangre)
Gram.
III. MATERIALES
Biológico No biológico
Cebolla Hisopos
Acetona Gotero
Violeta de genciana
Aceite de inmersión
IV. PROCEDIMIENTO
Las células de la epidermis de las hojas internas del bulbo de la cebolla, son de forma
Pasos a seguir:
Separe una de las capas del bulbo de la cebolla. Con ayuda de una pinza
extiéndala en el portaobjetos.
observe en el microscopio
Colocar una gota de agua estancada sobre una porta objeto y cubrir con una
laminilla
dobladas
El sudan III es el compuesto que tiñe los lípidos de color rojo intenso.
Lavara la muestra con agua y cubrirla con unas gotas de Sudan III. Dejar
Observar en el microscopio
horizontal
López Jácome, L., Hernández Duran, M., Colín Castro, C., Ortega Peña, S., Cerón Gonzáles, G., &
Franco Cendejas, R. (2014). Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología.
Investigación en Discapacidad Medigraphic, III(1), 10-18.
Vidal Saucedo, F., & Gurrola, T. A. (s.f.). Introducción al Análisis Clínico / Manual de prácticas.
Mexico D.F: Escuela Nacional Preparatoria, UNAM.