INTRODUCCIÓN

El análisis de orina consiste en la obtención de una muestra de orina del paciente que posteriormente
será conservada en medios adecuados y llevada a analizar en un laboratorio especializado en este
tipo de estudios. Existen diferentes métodos para analizar una muestra de orina; en líneas generales
y en función del método de análisis utilizado, el estudio de la orina lo podemos clasificar en:

 Tira reactiva de orina: análisis de una pequeña muestra de orina mediante el empleo de
una tira reactiva introducida en la muestra. Se realiza en la misma consulta. Los resultados
se obtiene en 5-10 minutos. Se utiliza como prueba de screening ya que aporta información
básica. Utilizadas para descartar o confirmar embarazo, detectar infección de la orina,
descompensación diabética…
 Sedimento de orina: la muestra de orina pasa por un proceso de centrifugado a partir del cual
se separa el contenido líquido de la orina (el cual se desecha para este estudio), del contenido
sólido será estudiado con la ayuda de un microscopio. Permite detectar la presencia de
partículas como leucocitos, hematíes, bilirrubina, glucosa o microproteínas, entre otros, que
generalmente no se encuentran o se encuentran en niveles muy bajos y cuya presencia
haría sospechar la presencia de una patología que deberá estudiarse posteriormente con
técnicas específicas.
 Microbiología, análisis microbiológico, cultivo de la orina, urocultivo: se realiza mediante el
empleo de diferentes técnicas de laboratorio; permite conocer si existe infección bacteriana
de la orina, el tipo de germen implicado así como establecer los diferentes antibióticos a los
cuales el germen detectado es sensible mediante lo que conocemos como antibiograma.

¿Qué es?

Un cultivo de orina de rutina permite detectar la cantidad de gérmenes (como las bacterias)
presentes en la orina de una persona.

Una vez recogida la muestra de orina, un técnico la conservará en condiciones favorables para la
reproducción de microorganismos. En circunstancias normales y en ausencia de infección, solo se
encuentra una cantidad reducida de gérmenes en la orina de una persona. Si se detecta una mayor
cantidad de gérmenes, el técnico utilizará un microscopio o pruebas de carácter químico para
determinar el tipo específico de gérmenes que están creciendo en el cultivo. En el caso de que el
médico diagnostique una infección, el técnico también practicará pruebas para determinar qué
medicamentos serán los más eficaces para eliminar los microorganismos detectados.

¿Por qué se realiza?

El cultivo de orina se utiliza para diagnosticar una infección urinaria y determinar qué tipos de
gérmenes la han originado. El pediatra solicitará un cultivo de orina si su hijo:

 se queja de dolor al orinar

 siente a menudo una necesidad imperiosa de orinar pero no produce mucha cantidad de orina (lo
que se conoce médicamente como "tenesmo vesical")
 tiene fiebre de origen desconocido o dolor abdominal
 le han hecho un análisis de orina con de resultados anormales, sobre todo si presenta una cantidad
elevada de glóbulos blancos
 ha completado un ciclo completo de tratamiento de una infección urinaria y le interesa saber si ha
desaparecido la infección
 OBJETIVOS
 EN TOMA DE MUESTRA PARA ANÁLISIS DE ORINA
Obtener una muestra de orina con el volumen y condiciones adecuadas para realizar un análisis
físico, químico y microscópico.
 EXAMEN FÍSICO DE ORINA
Por medio de la observación directa de la muestra de orina determinar el color y el aspecto de ésta,
lo cual puede sugerir una patología del tracto urinario u otras enfermedades que estén en diferente
localización, pero que sus manifestaciones secundarias son a nivel del riñón.
 EXAMEN QUIMICO DE ORINA
Determinar las sustancias químicas presentes en una muestra de orina, así como su densidad y pH,
a través de las zonas de reacción presentes en una tira reactiva.
 EXAMEN MICROSCÓPICO DEL SEDIMENTO URINARIO
Observar microscópicamente en el sedimento urinario elementos celulares, cilindros, cristales,
parásitos, filamentos mucoides y bacterias. Con el fin de sugerir una patología del tracto urinario u
otras enfermedades que estén en diferente localización.
 MATERIALES
 EN TOMA DE MUESTRA PARA ANÁLISIS DE ORINA
MUESTRA REQUERIDA: 30 mL de orina de chorro intermedio, recomendable la primera
micción de la mañana.
MATERIALES: Frascos plásticos transparente de boca ancha con capacidad de 30 mL limpio y
seco. 6.1.4.
 EXAMEN FÍSICO DE ORINA
MUESTRA REQUERIDA: 30 mL de orina. Preferible la primera de la mañana, 10 mL de orina en
muestra de niños. 6
MATERIALES:
- Frascos plásticos transparente de boca ancha con capacidad de 30 mL.
- Bolsa pediátrica recolectora de orina.
- Papel toalla.
- Marcador de vidrio.
- Guantes descartables.
 EXAMEN QUIMICO DE ORINA
MUESTRA REQUERIDA: 30 mL de orina. Preferible la primera de la mañana, 10mL de orina en
muestra de niños.
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Frascos plásticos transparente de boca ancha con capacidad de 30 mL.
- Bolsa pediátrica recolectora de orina.
- Tubos cónicos con capacidad de 15 mL.
- Gradilla para tubos.
- Papel toalla.
- Marcador de vidrio.
- Guantes descartables.
- Tiras reactivas para orina.
 EXAMEN MICROSCÓPICO DEL SEDIMENTO URINARIO
MUESTRA REQUERIDA: 15 mL de orina.
MATERIALES:
- Tubos cónicos de 15 mL .
- Láminas portaobjetos.
- Laminillas cubreobjetos.
- Marcador para vidrio.
- Gradillas para tubos.
- Guantes descartables.
EQUIPO:
- Reloj marcador.
- Macrocentrífuga.
- Microscopio.
 PROCEDIMIENTO
 EN TOMA DE MUESTRA PARA ANÁLISIS DE ORINA
PROCEDIMIENTO:
- Limpiar cuidadosamente los genitales.
- Descartar el inicio y el final de la micción; recolectar la orina de la porción intermedia. (En el
caso de la mujer separar los labios genitales).
- Destapar y depositar la muestra de orina en un frasco plástico, transparente, limpio, de boca
ancha con tapón de rosca y capacidad de 30 a 40 mL.
- Tapar el frasco inmediatamente.
 EXAMEN FÍSICO DE ORINA
PROCEDIMIENTO:
- Verificar que el frasco esté bien identificado y completamente tapado.
- Agitar en forma circular sobre la mesa de trabajo.
- Observar color y aspecto.
- Anotar lo observado.
 EXAMEN QUIMICO DE ORINA
PROCEDIMIENTO:
- Identificar el tubo cónico.
- Agitar la muestra de orina en forma circular sobre la mesa de trabajo.
- Verter la orina en el tubo cónico.
- Introducir la tira reactiva en la orina.
- Eliminar el exceso de orina colocando la tira sobre un papel absorbente.
- Esperar el tiempo recomendado por el fabricante para su lectura.
- Anotar los resultados.
 EXAMEN MICROSCÓPICO DEL SEDIMENTO URINARIO
PROCEDIMIENTO:
- Centrifugar durante 5 minutos a 2,500 rpm .
- Descartar el liquido sobrenadante.
- Suspender el sedimento urinario golpeando ligeramente con la mano.
- Colocar una gota de sedimento entre un porta y un cubreobjeto.
- Observar la preparación con el objetivo 10x para lograr una visión general del sedimento.
 ACTIVIDAD
MATERIALES

 Frasco de orina
 Asas de siembra
 Mechero
 Colorantes Gram
 Cepa de Escherichia Coli
 Cepa de Klebsiella pneumoniae
MATERIALES PARA LA SIEMBRA

 Medio Mac Conkey

 Medio Agar sangre
 Medios diferenciales (Citrato, TSI, LIA Y MIO)
 Asa de siembra estéril
 Mechero
 PROCEDIMIENTO
1. Sembrar la muestra de urocultivo con un asa de siembra de una micra, por método
de estria
2. Una vez sembrada llevar la placa de cultivo a incubar a una temperatura de 37°C x
18 a 24 horas.
3. Cumplida la incubación de la muestra, realizar los siguientes pasos:
 Identificar la colonia sospechosa que se encuentra en la placa de Agar Mc
Monkey.
 Obtener la colonia seleccionada con el asa de siembra, tratando de no tocar el
fondo del medio de cultivo ni otra colonia vecina.
 Sembrar por estria en los medios diferenciales empezando por el CITRATO
(En la superficie), TSI, LIA (introduciendo el asa por el centro hasta tocar fondo
del tubo, retirar por el mismo trazo y sembrar en estria la parte inclinada)
 Sembrar por puntura en el centro del agar movilidad hasta una profundidad
aproximada de 1.5 cm.
 Incubar a 35°C x 18 a 24 horas.
 OBSERVACIÓN
MEDIOS DE CULTIVO

Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el desarrollo de

microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se debe sembrar sobre
el medio de cultivo elegido las muestras en las que los microorganismos van a crecer y
multiplicarse para dar colonias.

Los microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones
extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una amplia diversidad de nichos
ecológicos. Entre los requerimientos más importantes para su desarrollo están el carbono, el
oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e hidrógeno. Muchas bacterias sin embargo necesitan del
aporte extra de factores de crecimiento específicos en forma de suero, sangre y extracto de
levadura entre otros.

Clasificación de los medios de cultivo

Según su origen:

a) NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o

vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composición química no se conoce
exactamente.
b) SINTÉTICOS: son los medios que contienen una composición química definida cuali y
cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados reproducibles.
c) SEMISINTÉTICOS son los sintéticos a los que se les añaden factores de crecimiento bajo
una forma de un extracto orgánico complejo, como por ejemplo extracto de levadura.

Según su consistencia

a) LÍQUIDOS: se denominan caldos y contienen los nutrientes en solución acuosa.

b) SÓLIDOS: se preparan añadiendo un agar a un medio líquido (caldo) a razón de 15g/litro. El
agar es una sustancia inerte polisacárida (hidrato de carbono) que se extrae de las algas. Como
esta sustancia no es digerida por las bacterias no constituye ningún elemento nutritivo. Este
conjunto convenientemente esterilizado puede ser vertido en placas de Petri o en tubos de
ensayo y presentan la posibilidad de aislar y diferenciar bacterias, "procesos que antes no eran
posibles en medio líquido".
c) SEMISÓLIDOS: contienen 7,5 g de agar /litro de caldo. Se utilizan para determinar la
motilidad de las especies en estudio.
Actualmente se encuentran disponibles comercialmente con el agregado de agar.

Según su composición: A causa de los requerimientos químicos del mundo microbiano, a veces es
necesario agregar o eliminar componentes químicos del medio.

a) COMUNES O UNIVERSALES: su finalidad es el crecimiento de la mayor parte de los

microorganismos poco existentes. Es el medio más frecuentemente utilizado para mantener
colonias microbianas. Por ejemlo: agar común o caldo común.
b) ENRIQUECIDOS: están compuestos de un medio base como apoyo del crecimiento al cual
 se le puede agregar un gran exceso de nutrientes como suplementos nutritivos, por ejemplo:
sangre, suero, líquido ascítico, etc. Se utiliza para microorganismos que tienen grandes
exigencias nutricionales.
c) SELECTIVOS: son sólidos en los que la selectividad se consigue alterando las condiciones
físicas del medio o añadiendo o suprimiendo componentes químicos específicos con el fin de
inhibir el crecimiento de especies químicas cuyo crecimiento no interesa. Este tipo de medio
sólo permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhibiendo el de otros. Se utiliza
para seleccionar y aislar microorganismos a partir de poblaciones mixtas. Por ejemplo Agar
salado-manitol o Chapman (permite el crecimiento de ciertos estafilococos).
Entre los factores selectivos que alteran las condiciones del medio tenemos:
 Cambio de pH: por ejemplo agregando ácido acético para favorecer el crecimiento de
Lactobacillus (pH final: 5,4 que es hostil par la mayoría de las especies que crecen entre 6,5 y
7,2). Los hongos crecen entre pH 4 y 6 y S. faecalis a pH 9,6.
 Cambio de temperatura: la mayoría de las bacterias crece óptimamente entre 20º C y 40º C.
Los cultivos típicos de S. Faecalis requieren 60º C de temperatura y los de Listeria son capaces
de desarrollarse y crecer a 4º C.
 Alteraciones osmóticas: se acrecientan las propiedades osmóticas un medio con el agregado de
cloruro de sodio. Estos medios intensifican la selección de bacterias halófilas como
Staphylococcus spp. (7,5%).
 Ajuste en la tensión de oxígeno: es importante en la selección de aerobios y anaerobios.
 Ajuste en la tensión de anhídrido carbónico: muchos patógenos importantes pueden ser
cultivados a menos que se eleve la tensión más allá de la atmosférica.

Entre los factores que inhiben el crecimiento de bacterias indeseables tenemos:

 Antisépticos: sustancias antibacterianas inespecíficas que pueden actuar como inhibidores.
Por ejemplo: el medio de cultivo comercial S - S (Salmonella - Shigella) que contiene verde
brillante (inhibe las bacterias grampositivas) y sales biliares (que inhiben un gran número de
gramnegativas menos enterobacterias). Otro ejemplo es el medio de Mc Conkey que contiene
cristal violeta (inhibe las grampositivas pero no las enterobacterias)
 Antibióticos: sustancias antibacterianas específicas que impiden el crecimiento de aquellos
microorganismos que no nos interesa que crezcan en ese medio. Un ejemplo es el medio de
Thayer - Martin con VCN (vancomicina, colistina y nistatina) que se utiliza para el
aislamiento de gonococos. La penicilina en una concentración de 5,50 unidades/ ml inhibe la
mayoría de las grampositivas. Otro ejemplo es el medio de Sabourand - cloranfenicol para el
aislamiento de Cándida albicans.

d) DIFERENCIALES: son medios de cultivos que nos permiten distinguir entre varios géneros
y especies de microorganismos. Por ejemplo si al medio se le ha añadido un carbohidrato y un
indicador y la bacteria que se cultiva es capaz de fermentar dicho carbohidrato, se produce una
acidificación del medio con el consiguiente viraje de color del indicador por el cambio de pH.
El citrato de Simmons es un medio cuya única fuente de carbono es el citrato sódico, entonces
en él solo crecerán las bacterias capaces de desarrollarse utilizando como única fuente de
carbono ese componente. A menudo la separación se basa en la diferencia de color de las
colonias aisladas, como en el agar con azul de metileno - eosina que permite diferenciar E. coli
(colonias oscuras y de brillo metálico) de Enterobacter aerogenes (colonias rosadas de centro
azul sin brillo). Estos dos microorganismos en agar nutritivo producen colonias de color gris
blancuzco.

Suelen ser a la vez selectivos, por lo tanto solo crecerán determinadas bacterias (pueden ser dos o
más tipos) que al actuar sobre alguno de los componentes específicos del medio, demuestran
algunas de sus propiedades o características y nos permite diferenciar entre ambos tipos.
a) DE ENRIQUECIMIENTO: son medios líquidos que contienen un agente que inhibe las
especies no deseadas pero que favorece el crecimiento irrestricto del agente infeccioso. El medio
de Muller - Kauffman, permite el crecimiento de Salmonella inhibiendo a su vez el de numerosos
coliformes. Esto es de gran importancia ya que en ciertas muestras, por ejemplo fecales, el agente
infeccioso (Salmonella) es frágil y puede ser superado en número por agente bacterianos indígenas
como E. coli; por lo tanto antes de realizar las pruebas de laboratorio es necesario aumentar su
número con respecto a ésta en un caldo de enriquecimiento. Ejemplo de este tipo son los caldo de
tetrationato y selenito. El agua de peptona alcalina se utiliza para Vibrio cholerae.
El enriquecimiento es una técnica que utiliza un medio selectivo líquido para permitir el desarrollo
de un microorganismo a partir de una muestra que contiene una gran variedad de
microorganismos. Así, aquellos microorganismos para los que el ambiente sea más favorable
crecerán más que los otros y finalmente serán predominantes

b) DE TRANSPORTE: son utilizados para asegurar la viabilidad de la bacteria sin

multiplicación significativa de los microorganismos desde el momento de su extracción hasta
su posterior estudio. Se utilizan generalmente cuando las muestras deben ser enviadas de un
laboratorio a otro. Se recomienda un límite de dos horas desde la recolección de las muestras y su
estudio en el laboratorio, pero este límite de tiempo es superado (frecuentemente cuando se trata
de muestras tomadas en un consultorio). Esta demora hace necesario el uso de medios de
transporte adecuados. Los medios de transporte más frecuentemente utilizados son los de Stuart,
Amies y Carey - Blair. Existe una unidad descartable de cultivo de transporte llamada Culterette
que consiste en un tapón estéril de poliestireno y un ampolla en la parte inferior que se rompe
cuando se ejerce presión liberando el medio de transporte de Stuart alrededor del extremo del
tapón impregnado en la muestra. Hasta hace algunos años los componentes orgánicos
mencionados debían ser obtenidos por el microbiólogo y el medio de cultivo se preparaba en el
laboratorio. Actualmente se dispone comercialmente de la mayor parte de los medios e incluso de
sus componentes adicionales.Un gran número de medios de cultivo usados en el laboratorio de
microbiología son mixtos, es decir que tienen como finalidad la de varios grupos de los
mencionados, por ejemplo, el agar S- S es selectivo (pues tiene un inhibidor: el verde brillante) y
es a la vez un medio diferencial (lleva lactosa y un indicador) que permite diferenciar las bacterias
fermentadoras o no de dicho polisacárido. El medio de Thayer y Martin para Neisseria es un medio
enriquecido (contiene plasma) y es selectivo (tiene 3 antibióticos inhibidores de la flora bacteriana
y fúngica: colistina, vancomicina y nistatina)
CONLUSIONES

 Se puede concluir que una de las maneras más fácil y común para determinar el
buen estado de los riñones es por medio de su color, olor, textura.

 Al realizar dicho laboratorio tenemos como conclusión la importancia que tienen

los riñones para la homeostasis de nuestro organismo.

 Nos ayudó a identificar los componentes de la orina y estructuras que en él se

encuentra.

 Podemos determinar en base a nuestras experiencia propia y en lo que aviamos

consumido y que efectos conllevan en nuestro organismo.

 Determinamos y comprendimos el proceso de excreción de los desechos por medio

de las vías urinarias
¿Qué factores determinan la apariencia de la orina?
− Aspecto turbio: debido a proteinuria, bacteriuria, precipitación de sales (fosfatos
amónicos en orinas alcalinas o uratos en orinas ácidas.
− Color: rojizo: por hematuria, hemoglobinuria, mioglobinuria, ingesta de remolacha,
presencia de cristales de uratos amorfos (no patológico) amarillo intenso, verde
oscuro hasta amarronado: bilirrubina caoba: pigmentos biliares o porfirias pardo
oscuro, negruzco: lcaptonuria Anaranjado: estado febril, tratamiento con rifampicina
− Aspecto opalescente y color blanco amarillento: pus, infección urinaria
− Olor: dulce, a frutas o cetónico: cuerpos cetónicos, glucosuria fecaloide: procesos
infecciosos
− Espuma persistente: proteinuria, resto de detergente en el frasco de muestra o el
tubo