Soluciones químicas

Fundación Universitaria del Área Andina

Programa de medicina
Ciencias Básicas Médicas
Valledupar-Cesar
2019
 INTRODUCCIÓN

Uno de los aspectos más importantes del trabajo en el laboratorio, es la preparación

de los reactivos con los cuales se tienen que desarrollar las prácticas, experimentos
o montajes de procedimientos, pues de la calidad de los reactivos y de la precisión
con la que se preparen los reactivos y soluciones, dependerá el éxito de los
resultados. A nivel de áreas como la biología celular, bioquímica, genética y biología
molecular, se suele trabajar con concentraciones más bajas que con las que se
trabajan en las industrias, así por ejemplo resulta bastante frecuente trabajar en
bioquímica y biología molecular con soluciones con concentraciones en partes por
millón, soluciones milimolares, micromolares, entre otras.
Dado que muchas veces resulta difícil pesar cantidades tan pequeñas, se hace
necesario preparar soluciones de concentraciones mayores a las que realmente se
van a emplear y posteriormente hacer los cálculos correspondientes para disminuir
la concentración en una solución que se prepara a partir de la solución madre o
stock. Es importante tener muy en cuenta la magnitud de los valores que se obtienen
en los cálculos que se establecen, pues resulta incoherente pensar por ejemplo en
cantidades extremadamente altas de solutos en pequeñas cantidades de solventes,
sin embargo existen casos donde se van a preparar soluciones sobresaturadas.
En los laboratorios de investigación, en los campos de la genética, biología celular,
bioquímica y biología molecular es muy frecuente trabajar con concentraciones muy
bajas Milimolares (mM=milésima parte de una mol) y micromolares (uM=
millonésima parte de una mol).
Finalmente es importante recordar la importancia de las soluciones stock, madre o
patrón, estas soluciones se preparan con el fin de tomarlas como punto de partida
en la preparación de soluciones finales, cuando las cantidades no se pueden medir
o pesar, y se conocen como soluciones stock o soluciones madres. Las
concentraciones milimolares y micromolares se emplean por ejemplo para
determinar los efectos celulares, genéticos y/o moleculares de un compuesto en
determinado tipo de células. Estos compuestos pueden ser fármacos, pesticidas,
metales pesados, sales, o cualquier tipo de sustancia.
 OBJETIVOS

General
Adquirir destreza en la preparación de soluciones químicas, aplicando las formulas
necesarias para su obtención.

Específico
Preparar diluciones a partir de las soluciones stock en concentraciones
frecuentemente utilizadas en los laboratorios de genética y biología molecular.
Determinar el peso molecular de cualquier compuesto a partir de su fórmula
química.
Conocer las unidades empleadas en ciencias biomédicas para la investigación en
sistemas biológicos.
 MARCO TEÓRICO
Las soluciones hacen partes de los sistemas dispersos, siendo estos la materia
que está formada por la mezcla de dos o más sustancias, mediante la dispersión de
partículas de una o más sustancias en el interior de otra. La sustancia o sustancias
que se dividen se denominan componentes dispersos o discontinuos, y la sustancia
en que se dispersan es el componente dispersor o continuo. Las propiedades de los
sistemas dispersos resultan de la combinación de las propiedades de las sustancias
componentes por un lado, y del tamaño de las partículas de él o los componentes
discontinuos por otro.
Una solución es una dispersión homogénea de dos o más sustancias químicas. La
homogeneidad hace que las soluciones se consideren como sistemas monofásicos,
o sea, aquellos que presentan las mismas propiedades físicas y químicas en toda
su extensión. Por ejemplo si se mezclan agua y Cloruro de Sodio (NaCl) el NaCl se
distribuye en todo el solvente hasta que su concentración es la misma en cualquier
parte de la solución. Los componentes de las soluciones se dividen en un solvente
y uno o más solutos.
Una solución consta de dos partes: una dispersante, llamada solvente y que es la
que se encuentra en mayor proporción; y la otra dispersa, llamada soluto que es la
que se encuentra en menor proporción.
Las soluciones pueden existir en fase sólida, líquida o gas, pero generalmente están
referidas al líquido que se obtiene al difundir sólido, líquido o gas en otro líquido.
Más del 90% de las reacciones químicas ocurren en soluciones y más del 95% de
las reacciones químicas que ocurren en soluciones se dan en soluciones acuosas.
El estudio de las soluciones es muy importante, debido a sus múltiples usos en la
industria, en el hogar y en los seres vivos. Por ejemplo, la mayoría de reacciones
químicas se llevan a cabo en disolución, muchas drogas y sueros que se
administran a los pacientes son soluciones. Las gaseosas, las bebidas alcohólicas,
el plasma sanguíneo, la savia en las plantas y otros sin fin de sustancias comunes
presentes en los seres vivos y en sustancias de uso cotidiano para la vida del ser
humano.
En Bioquímica, las soluciones acuosas son las más importantes porque todos los
procesos químicos que se estudian se efectúan en forma de solución, con agua
como solvente. La forma en que se puede establecer cuantitativamente la
proporción de mezcla, se denomina concentración de una solución y se puede
expresar de variadas maneras, siendo las más usadas:
1.- Porcentaje de masa de soluto en masa de solución, % m/m.
2.- Porcentaje de masa de soluto en volumen de solución, % m/v.
3.- Porcentaje de volumen de soluto en volumen de solución, % v/v.
4.- Molaridad, M.
5.- Partes por millón, ppm.
La concentración de las soluciones juega un papel importante en los resultados.
Teniendo en cuenta la proporción de soluto respecto a la del solvente podemos
encontrar varios tipos de soluciones:
a) Saturada: Una solución está saturada cuando contiene la máxima cantidad de
soluto que la cantidad presente de solvente puede disolver, en las condiciones de
presión y temperatura existentes. Por lo general, este tipo de soluciones existe en
equilibrio con un exceso de soluto, que está fuera de la solución en forma de
precipitado, del cual las moléculas de soluto se intercambian constantemente.
b) Sobresaturada. Es una solución que contiene una cantidad de soluto mayor de
la que el solvente puede disolver a la temperatura actual y por lo tanto es inestable,
cualquier disturbio la hace precipitar.
c) Concentrada. Una solución concentrada contiene una cantidad menor de soluto
que la necesaria para saturarla a la temperatura en que se encuentra, pero que se
aproxima a ella. En forma práctica, se consideran concentradas las soluciones de
concentración mayor a 1 M.
d) Diluida. Las soluciones diluidas contienen una pequeña fracción del total de
soluto que pueden disolver. En la práctica la concentración de una solución diluida
es menor de 1M pero mayor de 0.01 M.
e) Muy diluidas. Son aquellas cuya concentración es menor a 0.01 M.

La concentración de las soluciones es muy importante conocerlo porque gracias a

ellas se puede establecer las cantidades de soluto y solvente presentes en una
solución, muchos profesionales tienen que medir, necesariamente, una de las
siguientes magnitudes físicas: Masa (m), volumen (v) y cantidad de sustancia (n).
Por ejemplo:
El ingeniero químico mide la cantidad de azufre en el petróleo, la cual sirve para de
referencia para determinar el valor del crudo.
Los químicos y biólogos miden las cantidades de monóxido y dióxido de carbono,
dióxido de azufre y otros agentes contaminantes para determinar los niveles de
contaminación en el ambiente.
Los laboratoristas que trabajan en la industria farmacéutica miden las cantidades
desustancias necesarias para preparar soluciones nasales, oftálmicas, sedantes,
analgésicos, antiespasmódicas, hidratantes; todas estas de concentración
determinada y de cuya exacta preparación depende de la vida y la pronta
recuperación de cientos de miles de enfermos.
En las industrias de bebidas gaseosas los ingenieros miden las cantidades de
edulcorantes, cafeína, ácido fosfórico, entre otros, con el propósito de que estas
sean gratas al paladar, refrescantes y comercialmente rentables.
En las industrias siderúrgicas los ingenieros químicos determinan las cantidades de
hierro, carbono, manganeso, cromo, níquel y silicio que se tienen que mezclar para
preparar los diferentes tipos de acero.
Los bioanalistas que trabajan en laboratorios clínicos practican exámenes a
muestras de sangre y orina para determinar los valores de cada una de las
sustancias.
En las industrias de los perfumes los químicos miden las cantidades de esencias y
de alcohol necesarias para obtener la fragancia deseada. (5)
El mundo que nos rodea nos modifica constantemente la Conducta y
Comportamiento de nuestro organismo generando cambios a nivel físico y químico
a través de los Órganos Sensoriales, que se encargan de generar una serie de
Impulsos Eléctricos que son transmitidos a lo largo de todo el Sistema Nervioso
hacia el importante órgano que es el Cerebro, permitiendo entonces generar lo que
es conocido como Percepción Sensorial. Cada uno de estos estímulos y respuestas
está explicado por la ciencia mediante el análisis de la Química, siendo esta ciencia
la que se encarga de analizar todo lo que posee nuestro planeta dependiendo del
Análisis de la Materia a través de los elementos de la tabla periódica.
Entre las distintas ramas que se desprenden de esta ciencia debemos resaltar la
Bioquímica, que es muy útil en conjunción con la medicina u otras ciencias donde
se requiera un análisis de las Sustancias Químicas que conforman y son benéficas
para el cuerpo de un ser vivo. Un claro ejemplo son las soluciones amortiguadoras,
para que un individuo se conserve saludable, existen muchos fluidos en cada uno
de nuestros cuerpos que se deben mantener dentro de unos límites muy estrechos
de pH. Para que este objetivo se realice, se crea un sistema amortiguador.
Un sistema amortiguador es una solución que puede absorber grandes cantidades
moderadas de ácidos o bases, sin un cambio significativo en su pH, es decir, es una
disolución que contiene unas sustancias que inhiben los cambios de HP, o
concentración de ion hidrógeno de la disolución. Dichas sustancias pueden
contener un ácido débil y su sal, por ejemplo, ácido acético y acetato de sodio, o
una base débil y una sal de esa base, por ejemplo, hidróxido de amonio y cloruro
de amonio. Los fluidos de los organismos vivos están fuertemente tamponados, y el
agua del mar y ciertas sustancias del suelo son otros ejemplos de disoluciones
tampones existentes en la naturaleza. Las disoluciones tampones se utilizan en
química y sirven como referencia en la medida del pH.
La sangre esta amortiguada, principalmente, por el ion bicarbonato (HCO3-), pero
cuando ocurre la hiperventilación que se trata de un estado de sobre-respiración,
causado por el miedo, la excitación o la ansiedad, ya que al ocurrir este proceso
una persona expele más dióxido de carbono de lo necesario, alterando el equilibrio
del ácido carbónico.
Las soluciones tienen una amplia variedad de aplicaciones en la industria
farmacéutica para uso terapéutico como vehículos para los productos orales,
parenterales, tópicos, ópticos, oftálmicos, y nasales. También se utilizan como
excipientes, buffers, conservadores y como agentes de suspensión para una
variedad de formas de dosificación líquida. Las soluciones concentradas en
inventario sirven a menudo como componentes de productos preparados
extemporáneamente. Las soluciones de prueba también desempeñan un papel
importante en el análisis de productos farmacéuticos de todo tipo.
De los beneficios que traen para el hombre y para cualquier ser vivo las soluciones,
también presentan una importancia a nivel industrial como por ejemplo para poder
conducir la electricidad en las baterías de los automóviles se utiliza una solución de
ácido sulfúrico. El ácido muriático que es una solución acuosa de HCl, se utiliza para
limpiar materiales cerámicos de los baños como baldosas de los baños y para
limpiar partes metálicas en la industria. La gasolina y los aceites lubricantes son
otros ejemplos de soluciones. Otro ejemplo de uso de soluciones a nivel industrial
lo podemos ver en la joyería, el oro que se usa se mezcla previamente con una
pequeña cantidad de plata para hacerlo más manejable, puesto que el oro puro es
muy duro, además esta mezcla tiene temperatura de fusión menor que la del oro
puro lo cual resulta más fácil de moldear.
 METODOLOGÍA

MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

Micropipetas, Puntas amarillas y azules, NaCl, Agua destilada, Azul de metileno
Tubos de ensayo, Tubos de PCR, Tubos ependorf.
Figura 1.

Materiales de laboratorio necesarios para la preparación de soluciones.

En el laboratorio se colocó en práctica la teoría de soluciones químicas,

evidenciando así la importancia de las soluciones en nuestra cotidianidad y el uso
de estas en muchas áreas de nuestra vida, tales como: cocina, medicina, industria
farmacológica, bioquímica….
Teniendo en cuenta las recomendaciones dadas por el docente se prepararon
algunas soluciones utilizando materiales y reactivos mencionados anteriormente, a
diferentes concentraciones con volúmenes y tubos correspondientes para lograr
mayor eficacia en los resultados.

Algunos de estos fueron:

10 microlitros,50 microlitros,100 microlitros, 0.5 ml, 1000 µl
Luego se preparó una solución sobresaturada de NaCl, teniendo en cuenta el peso
molecular de este compuesto. Se adicionaron 4 g de NaCl y luego se agregó H2O
hasta llegar a 10 ml de solución. Posteriormente se tapó el tubo donde realizó la
solución y se mezcló suavemente por inmersión 10 veces.
Es necesario mencionar que para preparar las soluciones anteriores fue necesario
el uso de micropipetas para lograr obtener los volúmenes y concentraciones
necesarias. Este utensilio fue de vital importancia para la realización de los
preparados químicos, ya que estos se encontraban en volúmenes pequeños.

Diagrama de flujo

Seleccionar los materiales

Calcular las concentraciones a las que Comparar los resultados con

se va a realizar la solución. los demás grupo.

Identificar la solución del Analizar y confrontar la

volumen a preparar solución con los cálculos
creados.

Pipetear los volúmenes Mezclar el soluto y el solvente

adecuados
 RESULTADOS
En el paso por el laboratorio apreciamos el significado tangible de lo que son las
soluciones, colocando en práctica los conocimientos trasmitidos por el docente.
Los materiales utilizados para este laboratorio fueron:
Micro pipetas, puntas amarillas y azules NaCl, agua destilada, azul de metileno,
tubos de ensayo tubos PCR, Balanzas, tubos ependorf.
Hicimos mediciones en los tubos dependiendo me la micro pipeta y la cantidad
necesaria, los volúmenes fueron:
10 micro litros, 50 micro litros, 100 micro litros, 05 ml, 1000 ul
Primeramente se evidenció la mínima y máxima cantidad que se pude probar en
los tubos de ensayo y nuestra practica con la micropipeta.
También se adicionaron 4g de NaCl y una cantidad precisa de agua para obtener
una solución de 10 ml. En esta prueba se evidencio el concepto de soluciones
sobresaturadas, ya que el soluto se encontró en una proporción tan elevada que la
cantidad de solvente administrada en la solución no fue suficiente para disolverlo.
Obteniendo como resultado la precipitación de cantidades considerables de NaCl.
Nuestros resultados fueron bastante aceptables y al realizar la comparación con
otros grupos se apreciaron grandes similitudes, demostrando así que la teoría fue
benéfica y bien aceptada por todos y cada uno de nuestros compañeros.
Gracias a eta práctica pudimos aprender y ver más a fondo los métodos de
laboratorio, las soluciones químicas y la utilización de algunos elementos como las
micropipetas, los tubos de ensayo, tubos de PCR, tinciones como Giemsa, entre
otros.

Fotografia 1.

Materiales necesarios para la preparación de soluciones químicas.

Figura 2.

Resultados de soluciones con Giemsa y H2O a diferentes volúmenes y concentraciones.

Figura 3.

Solución con Giemsa y H2O

Figura 4.
Figura 5.

Soluciones De Giemsa y H2O de grupos

distintos.

Solucion sobresaturada de NaClo y H2O

Figura 6.

Solución sobresaturada de NaCl y H2O

 DISCUSIÓN
Las soluciones químicas son la dispersión homogénea de dos o más sustancias.
Están formadas por un soluto y un solvente que generalmente es agua.
La capacidad que tiene un soluto de disolverse en un solvente depende mucho de
la temperatura y de las propiedades químicas de ambos. Por ejemplo, los solventes
polares como el agua y el alcohol, están preparados para disolver a solutos iónicos
como la mayoría de los compuestos inorgánicos, sales, óxidos, hidróxidos. Pero no
disolverán a sustancias como el aceite. Pero este si podrá disolverse en otros
solventes como los solventes orgánicos no polares. Un ejemplo evidente de
soluciones con solventes polares fue una de las mezclas realizadas en el laboratorio
donde se utilizó NaCl y agua para crear la solución.
La capacidad de formar soluciones y de mezclar sustancias es fundamental para el desarrollo
de nuevos materiales y para el entendimiento de las fuerzas químicas que permiten a la
materia juntarse. Esto resulta de particular interés para los campos de la química,
la biología y la geoquímica, entre otro.

Figura 6.
También es importante mencionar la
homogeneidad que se presentó en la
solución de HSO y Giemsa, donde todo
fue químicamente bien distribuido por todo
el volumen de la solución.

En la presente grafica se puede apreciar

una solución de NaCl y H2O. Es posible
deducir que es del tipo sobresaturada por
la cantidad de soluto que se precipita en el
tubo.
Al comparar la solución con la de otros
grupos se pudo apreciar que existieron
pequeños márgenes de errores que
pueden deberse a varios factores como:
tomar mayor cantidad de solvente del
adecuado, perder inconscientemente
mínimas cantidades de soluto (NaCl) o
por mezclar la solución la cantidad de
veces incorrecta.
Figura 5.
La solución de Giemsa y H2O
presentó mayor similitud entre los
distintos grupos. En esta se pudo
comprobar la armonía y equilibro
presente entre solutos y solventes
de una mezcla homogénea.
En las preparaciones de las
soluciones con Giemsa se
utilizaron diferentes volúmenes y
tubos a distintas concentraciones.
Fue apreciable desde el punto de
vista físico y químico. Los colores
de las soluciones variaban
dependiendo de la concentración molar que cada una de ellas presentaba.
Químicamente las propiedades eran cambiantes debido a la cantidad variable de
soluto y solvente en cada uno de los preparados del laboratorio realizados.

Figura 2.

Evidentemente mediante
esta fotografía
corroboramos el
equilibrio de las
soluciones de Giemsa y
H2O y la gran similitud
que presentan los
preparados de los
diferentes grupos.

De manera general se puede expresar que las experiencias descritas anteriormente

fueron benéficas para el crecimiento personal y profesional de cada uno de los
estuantes de segundo semestre de la institución universitaria del área andina. El
margen de error que se obtuvo en la preparación de las soluciones fue mínimo y
esto se debe gracias al esmero y buen uso de los materiales de laboratorio. La
práctica y la perseverancia son la clave para obtener mejores resultados.
 CONCLUSIÓN

De este proyecto se pueden concluir tres factores importantes puesto que el trabajo
realizado como matriz investigativa arroja estudios considerativos y positivos para
la obtención y aprendizaje del laboratorio y son los siguientes:

1. Se conoció todas las unidades utilizadas para pipetear mediante el artefacto

conocida como las micro pipetas y se adquirió la destreza necesaria para la
preparación de los tipos de soluciones considerando que al principio se aprendió y
utilizo los dispositivos para pipetear las cantidades exactas con el líquido giemsa de
esto se concluyó que hay que tener mucho rigor para pipetear ya que si no la hay
se puede presentar un margen de error.

2. Se determinó el peso molecular de los compuestos y se preparó solución de NaCl

a partir de la solución stock en concentraciones frecuentes con la finalidad de que
se obtuviera una cierta cantidad de sedimentación resultante a ello se tuvo en
cuenta el número de vueltas al tubo de ensayo para que el líquido (H2O) y el NaCl
cumplieran el proceso de disolución; Se concluyó en el proceso que depende de la
precisión y la cantidad exacta depende la disolución.

3. Se conoció la manera para realizar este trabajo mediante diferentes medidas en

diferentes presentaciones y se concluyó que a mayor cantidad de soluto y menos
de solvente, la solución puede tornarse más oscura.

De forma somera y concisa se concluye que este proyecto fue de utilidad ya que en
ello se tratan temas como las soluciones, soluto, solvente y disoluciones .
 BIBLIOGRAFÍA
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8. Theodore L Brwon, H Eugene LeMay Jr, Bruce E Bursten, Julia R Burdge.
2004
 ANEXOS
Compuesto Formula Uso Comercial Peso Molecular
Amoxicilina C16H19N305 S Antibiótico 365.4 g/mol
Clavulanato C8H9N05 Antibiótico 199.16 g/mol
Penicilina C16H18N204S Antibiótico 334.4 g/mol
Cloranfenicol C11H12CL2N205 Antibiótico 323.131 g/mol
Hidróxido de sodio NaOH Analgésico 39.9971 g/mol

2. Considerando los siguientes datos, conteste las siguientes preguntas.

Los datos del cuadro siguiente corresponden a la solución Stock o Patrón.

NaCl Bromuro Lisozima Proteinasa Citrato KCl SDS EDTA PHA Colcemid Lisostafina
de etidio k de
sodio
1M 100 1000 50 1% 1M 1% 1M 200 100 20
mg/ml mg/2ml mg/2ml mg/ml mg/ml mg/ml

2.1 Se requiere adicionar 100ul de NaCl 0.1M 10 muestras de concentración. ¿Cómo prepararía la
cantidad necesaria a partir de la solución patrón?

100 ul

NaCl = 1M V1 x C1=V2 x C2 V1 x 1M=1000ul x 0.1M

0.1 = M V1=1000ul x 0.1M÷1M = 100ul

Debo tomar 100ul de solución NaCl (1M) y se le adicionan 900ul de H20

2.2 La cámara de electroforesis que dispone, requiere 2400ml de Buffer TBE, y por cada 100ml de
este buffer TBE se requieren 10ul de Bromuro de etidio de concentración 10mg/ml

A) Cómo prepararía el bromuro de estudio que se requiere?

B) Cuánto debe adicionar al buffer de la cámara?

Cámara 2400ml

100ml TBE= 10ul Broeti = 10mg/ml

A) 100ul = 10mg

240ul = x x = 240ml x 10ul÷100ml = 2.4 mg , Pesar 2.4mg de bromuro de etidio y

disolver en en 240ml del solvente

B) X= 2400x10÷100 = 240 ml÷1000 = 0.24

2.3 Para extraer el ADN bacteriano se requiere adicionar 20 ug de lisozima. Se tienen 20

muestras de bacterias Mycobacterium tuberculosis obtenidas a partir de muestras de esputo.
A) Cuántos microgramos gastaría para estas muestras?
 B) Cuántos microlitros le debe adicionar a cada muestra?

RTA/ Por muestra se le adicionan 0.4 ml (400ul)

20 ug

20 muestras = 400 ug

1000mg / 2ml 2000ul----100000ug

1000mg/2000ul x ---- 20ug x = 0.4 ml por muestra

100000ug/2000ul

2.4 Prepara una solución de 1000ul de proteinasa K de concentración 25mg/ml

1000ul 25mg/ml 50mg/2ml

V1 x C1 = V2 x C2

¿ 50 1000 25

V1= 1000x 2/ 50 = 500ul

Se toman 500 ul de la proteinasa K y se le adicionan 500ul de solvente

2.5 Se requiere preparar una solución hipotónica de citrato de sodio al 0.7%, Cómo debe
preparar 50000ul de esta solución?

Citrato de sodio al 0.7%

50000ul = 50 ml

V1 x C1= V2 x C2 = V1= 50 x 07/1 = 35ml

1 50 0.7

Se toman 35 ml de Citrato de sodio al 1% y se le adicionan 15ml de H20

2.6 Se requiere preparar una solución de KCL de concentración 0.082M a partir de la solución

Madre. A cada muestra se le adicionan 7ml, y se dispone de 40 muestras. Cuánto y cómo

Debe preparar esta solución?

KCl 0.082M

7ml por muestra, 40 muestras = 280ml KCl

V1 x C1 = V2 x C2 V1= 280ml x 0.082M/1M = 22.96 ml

Se toman 22.96 ml de KCl y se le adicionan 257.04ml de H20

2.7 Prepare una solución de 0.5LT de EDTA de concentración 500mM

 0.5Lt EDTA 500mM 1M V1 x C1 = V2 x C2

V1= 05Lt x 500mM/1000mM = 0.25 Lt (250ml)

Se toman 250 ml de la solución stock y se le agregan 250 ml de solvente