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El saber las diferentes técnicas de separación y purificación de proteínas, nos ayuda en

gran medida la importancia en el cuidado de nuestra salud y para procesos industriales
así como a la investigación y a la tecnología. En muchos procesos experimentales es
importante disponer de proteínas purificadas, incluyendo estudios estructurales y ensayos
bioquímicos in vitro. Las proteínas pueden ser obtenidas de tejidos celulares o, más
comúnmente, en algún organismo modelo La importancia de un esquema de purificación es
retener la mayor cantidad de proteína funcional con el menor número de contaminantes
posibles. El esquema de purificación de una proteína debe ser claro, optimizado para
completar el proceso en el menor número de pasos posibles

INTRODUCCION

La lactato deshidrogenasa (LDH) es un enzima NAD que se encuentra abundantemente

distribuida en tejidos de animales, vegetales y en microorganismos.

Su peso molecular es aproximadamente 135 kDa y su estructura es la de un tetrámero

dispuesto tetraédricamente, en el que las subunidades van unidas por enlaces hidrófobos,
puentes de hidrógeno y fuerzas electrostáticas.

Existen en la naturaleza dos tipos distintos de subunidades, M y H, cuyas combinaciones

posibles dan lugar a cinco formas moleculares, con actividad lactato deshidrogénica y con
características cinéticas y fisicoquímicas diferentes, que se han denominado isoenzimas.

Como en una enzima citoplasmática que se encuentra en forma soluble o ligada a

membrana. Las formas diferentes isoenzimas se encuentran en distintas proporciones en
cada tejido, lo que puede dar idea de la funcionalidad de cada isoenzima, atendiendo a
las funciones metabólicas que estas participan

Cataliza la siguiente reacción:

Piruvato + NADH + H+ Þ Þ Þ Lactato + NAD+

Por tanto, es un papel importante en el metabolismo de glúcidos, que interviniendo en el

último paso de la glucolisis anaerobia y en un primer paso hacia la gluconeogénesis a
partir de lactato. Además, aporta combustible al ciclo de Krebs en tejidos consumidores de
lactato como el músculo cardiaco. Es específica para L-Lactato y utiliza únicamente NAD
como coenzima.

La LDH es una enzima cercana al equilibrio, por tanto, no reguladora, pero sí regulada por
la razón NADH / NAD+ y por la posibilidad de presentar formas iscenzimáticas con
características distintas tanto cinéticas como de inhibición por sustrato. La inhibición por
exceso de sustrato tiene lugar por la formación de un complejo NAD - piruvato que
compite con el NADH por el centro activo del enzima. Asimismo, la LDH presenta
inhibición por intermediarios de ciclo tricarboxílico: oxalacetato y citrato. Se conocen otros
inhibidores como oxalato y oxamato.
Esta enzima es muy importante en el metabolismo anaerobio de la glucosa para la
regeneración y producción de ATP

Para el estudio, purificación de una proteína y características biológicas es necesario

llevar a cabo técnicas de purificación y aislamiento, que permitan llevar a cabo el proceso
sin destruir la misma estas técnicas de separación y purificación, deben basarse en las
propiedades fisicoquímicas que caracterizan a las proteínas

Hipótesis

Si se toman en cuenta las características físicas, químicas y estructurales de LDH

entonces, se podrá la técnica correcta para su purificación y podrá determinarse su
concentración y actividad enzimática

Referencias:

https://prezi.com/cd7-uo0wayxd/purificacion-de-proteinas-metodos-cromatograficos/

file:///C:/Users/Administrador/Downloads/211545159-ESTRUCTURA-Y-PROPIEDADES-DE-
PROTEINAS-s-docx%20(1).pdf