MITOSIS EN EL MERISTEMO RADICULAR DE CEBOLLA

a
Steven Agredo b Alejandra Olarte c Vanessa Sanchez d Nury Estupiñan
a
steven.agredo00@usc.edu.col, bmaría.olarte001@usc.edu.co c
darly.sanchez00@usc.edu.co d marinur01@hotmail.com

Universidad Santiago de Cali, Facultad de Ciencias Básicas, Laboratorio de Biologia celular y

molecular
Santiago de Cali, Colombia
Abril 9 de 2019

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RESUMEN
Dentro del estudio de la biología molecular, es vital comprender el proceso de la
mitosis, para eso en esta practica se identificó morfológicamente las características de
esta, en el merisemo radicular de la cebolla (Allium cepa). El proceso incia con el
lavado instrumental y la preparación de la placa, porteriormente se puso en el
microscopio, para finalmente observar células vegetales, la mayoría de ellas en su
estado de reposo (interfase) y solo dos en estado de profase, se obtuvo un 8% de
índice mitotico y un 100% de índice de la etapa de profase. Cabe resaltar que la mala
maceración de la radícula con el bisturí puede dejar muestras grandes sin macerar, las
cuales oueden confundir a la hora de observar las células, ya que estas se verán una
encima de la otra, lo cual no ons dejaría distinguir la morfología. Se logro desarrollar el
aprendizaje de un estadio de la mitrosis en células vegetales.

En la metafase los paes de cromátidas se

. mueven dentro del huso, parentemente
1. INTRODUCCIÓN
La mitosis es la divison celular
propiamente dicha, y produce dos células
hijas genéticamente idénticas entre si.
En las plantas la mitosis se produce
sobre todo en los meristemos, que son
los tejidos que permiten el crecimiento de
la planta y que se encuentran, entre otros
lugares, en los extremos de los tallos y de
las raíces.[1]
Un bulbo de cebolla cuya base se
mantenga en contacto con agua durante
4 ó 5 dias, nos proporciona abundante
cantidad de raices jovenes, estas
regiones de crecimiento sirven para
estudiar el ciclo celular ya que se pueden
observar celulas que teñidas con orceina
pueden mostrar los cromosomas en las
células en proceso de mitosis.
La orceina acetica es una sustancia que
se ocupa de teñir y ver las distintas fases
de los cormosomas, con esta técnica de
tinción los cromosomas se ven
impregnados por esta en color morado,
esto facilita la visualización de las etapas
del ciclo celular.
En la profase los centriolos se separan.
Entre los pares de centriolos, formandose
a medida que estos se separan, están los
microtúbulos que se transfroman en las
fibras polares del huso. Para el final de la
profase los cromosomas están
completamente condensados y no están
separados del citoplasma.
conducidos por las fibras del huso, como
si fueran atraídos por un polo y luego por
el otro. Finalmente, los pares de
cromátidas se disponen en el plano
medial de la celula. Esto señala el final de
la metafase.
La anafase es la etapa mas rápida de la
mitosis, los centrómeros se separan
simultáneamente en todos los pares de
cromátidas. Luego se separan las
cromátidas de cada par y cada cromátida
se transforma en un cromosoma
separado, siendo ambas cromátidas
atraídas, aparentemente hacia polos
opuestos por las fibras del cinetocoro.
En la telofase los cromosomas alcanzan
los polos opuestos y el huso comienza a
dispersarse. Luego se forman sendas
envolturas nucleares que se vuelven a
formar alrededor de los dos conjuntos de
cromosomas, que una vez mas se
vuelven difusos. En cada núcleo
reaparecen los nucleolos.
MATERIALES Y REACTIVOS
Se usaron portaobjetos y cubreobjetos
para poner la muestra de raíz de cebolla.
1 cuchilla de bisturí con el que se corto el
extremo de la raíz que se iba a observar
al microscopio y se macero la muestra.
1 pinza metálica con garra con la que
tomamos muestra y no contaminarla

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Cajas Petri donde se depositaron las
raicillas de la cebolla.
1 frasco lavador con el que se lavo la raíz
y alcohol al 70% para esta misma
aplicación
Orceina acética para tenir las células de
la cebolla.
METODOLOGIA.
De la caja Petri se tomaron las muestras
de raíz de cebolla, se lavaron y se
depositaron en otra caja Petri con alcohol
al 70% por un periodo de 5 minutos, se
corto el meristemo radicular de la raíz, se
coloco sobre un cubreobjetos y se le
añadió 1 gota de orceina acética HCL y
se macero con la ayuda del bisturí, se
puso el cubreobjetos ejerciendo presión
sobre la muestra para que no quedaran
burbujas en esta, se procedio a observar
al microscopio.
RESULTADOS Y DISCUSION
En la figura 1 se observaron células
vegetales en dos estados: interfase y
profase.
Se observo en este campo de visión un
total de 25 celulas, 2 de ellas en profase,
las restantes estaban en estado de
interfase.
- Índice mitotico: (# de células en
mitosis/ # total de células) x100
- Índice profasico: (#de células en la
etapa de mitosis/ #total de células
en mitosis) x100
Como resultado se obtuvo:
- Índice mitotico: 8%
- Índice profasico: 100%
Fig. 1 celulas vegetales. Objetivo 40X.
Se observaron células dispersas por todo
el campo de visión, en dos fases de la
división celular, los cromosomas se ven
teñidos por la orceina, la granmayoria de
estos en la interfase, estado metabolico
en el ciclo celular durante el cual la celula
no se divide, los cromosomas no se
distinguen individualmente y se producen
fenómenos biomecánicos y fisiológicos
como la síntesis de DNA.
En las células de la profase los centriolos
se separan, los microtúbulos están
formandose a medida que estos se
separan, después estos microtúbulos se
transforman en las fibras polares del
huso. Finalizando esta fase los
cromosomas se condensan
completamente desapareciendo la
envoltura nuclear. [2]
Se realizó la fijación con intenciones
de mantener la morfología de la forma
menos alterada posible, de modo que
los componentes celulares se
conserven al igual que sus propias
características químicas,
posteriormente se destruyó la pared
celular por medio de la hidrolisis, para
poder visualizar de forma sencilla las
fases del ciclo celular. En este
proceso se debe tener precaución con
el tiempo expuesto y la concentración
de ácido utilizado, ya que estos
factores pueden causar daños en la
célula, dándole un aspecto amorfo, el 1997
cual no permitiría identificar con
facilidad las fases de la mitosis.

5. CONCLUSIONES

- La imagen demuestra que las

células observadas se encuentran
en dos estados de la mitosis:
interfase y profase
- En esta practica se entendio por
primera vez algunos estadios de la
mitosis en células vegetales,
pudiendo asi sacar su porcentaje
mitotico
- Las raíces de la cebolla son una
zona muy activa, los meristemos
de las cebollas utilizados son
ejemplares para el estudio de
las fases de la mitosis, ya que
estos denotan particularidades
o características ideales para el
estudio de estas.
- En cuanto a la tinción de los
cromosomas, se utilizó orceína
acética, esta tiene afinidad por
las sustancias acidas, lo cual
teñirá debido a la unión de las
moléculas básicas del
colorante con las acidas de los
componentes de preparación.
- Una de las ventajas de la
tinción con orceína acética es
que además de que permite ver
los cromosomas de una célula
determinada, ocasiona la
muerte de los microorganismos
que están presentes y reduce
la posibilidad de
contaminación.

6. REFERENCIAS

1. http://www.mclibre.org/otros/daniel_toma
s/laboratorio/Mitosis/mitosis.html)
2. El proyecto biológico,
departamento de bioquímica y
molecular, bioquímica,
universidad de Arizona, marzo

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