“AÑO DE LA LUCHA CONTRA LA CORRUPCIÓN E IMPUNIDAD”

UNIVERSIDAD NACIONAL “JORGE BASADRE GROHMANN”

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD (FACS)

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA (ESMH)

CURSO : BIOQUIMICA

TEMA : CINÉTICA ENZIMÁTICA

CATEDRÁTICO : Dr. Guillermo Bornaz Acosta

ESTUDIANTE : Victor José Llanque Salcedo

CÓDIGO : 2019-123007

CICLO : II

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1. INTRODUCCIÓN
La cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones
químicas que son catalizadas por las enzimas. El estudio de la cinética y
de la dinámica química de una enzima permite explicar los detalles de
su mecanismo catalítico, su papel en el metabolismo, cómo es
controlada su actividad en la célula y cómo puede ser inhibida su
actividad por fármacos o venenos o potenciada por otro tipo
de moléculas.
Las enzimas, en su mayoría, son proteínas con la capacidad de
manipular otras moléculas sin ser alterados por la reacción, esas
moléculas son denominadas sustratos. Un sustrato es capaz de unirse
al sitio activo de la enzima que lo reconozca y transformarse en un
producto a lo largo de una serie de pasos denominados mecanismo
enzimático. Algunas enzimas pueden unir varios sustratos diferentes y/o
liberar diversos productos, como es el caso de las proteasas al romper
una proteína en dos polipéptidos. En otros casos, se produce la unión
simultánea de dos sustratos, como en el caso de la ADN polimerasa, que
es capaz de incorporar un nucleótido (sustrato 1) a una hebra
de ADN (sustrato 2). Aunque todos estos mecanismos suelen seguir una
compleja serie de pasos, también suelen presentar una etapa limitante
que determina la velocidad final de toda la reacción. Esta etapa limitante
puede consistir en una reacción química o en un cambio conformacional
de la enzima o del sustrato.
2. OBJETIVOS
2.1. Desarrollar con datos experimentados los modelos de Michaelis
y Menten, de Lineweaber y Burk, y de Eddie y Hofster.
2.2. Calcular el valor de la Km y la Vmax.
3. MATERIALES
 Hoja milimetrada
 Pizarra
 Plumones
4. PROCEDIMIENTO
4.1. Se selecciona el medio al cual se debe trabajar, esto es
pH: 5
T°: 25 °C

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 4.2. Después se estudia al sustrato con el cual realizaremos el
experimento, este es el paranitrofenil fosfato, al cual se le añadirá
agua en presencia de fosfatasa ácida, obteniendo un producto
denominado paranitrofenol, además de otros más.

FIGURA 01. Reacción del sustrato en fosfatasa ácida

4.3. Después se establece una regla de correspondencia entre la
cantidad de sustrato que se administra y la velocidad inicial con la
que actúa, además de otros datos que se verán en la siguiente tabla.
1/[S] [S] 1/Vi Vi (μmoles de Vi/[S]
mM Producto/min)
2 0.5 0.014 71 142
1 1.0 0.011 92 92
0.5 2.0 0.0067 150 75
0.25 4.0 0.0054 184 46
0.166 6.0 0.005 200 33.3
0.125 8.0 0.0048 208 26
0.1 10.0 0.0047 214 21.4

5. RESULTADOS
5.1. Mediante los datos obtenidos se pudo establecer el valor de la
Km y la Vmax, establecidos además en las gráficas propuestas.

6. CONCLUSIONES
6.1. Se pudo llegar a construir los gráficos según los modelos
propuestos gracias a los datos establecidos en la tabla hecha.
6.2. La Km y la Vmax son valores importantes en una reacción que
nos ayudarán a conocer más sobre la cinética de la enzima.