Reporte No.

“NATURALEZA PROTEICA DE LAS ENZIMAS”

Profesora
Dra. Miriam Cristina Pastelin Solano

Presenta
Brenda Delgado Gonzalez

Periodo
Febrero – Julio 2019 QFB-402
 UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
LABORATORIO DE BIOQUIMICA

“NATURALEZA PROTEICA DE LAS ENZIMAS”

INTRODUCCIÓN
Una enzima es una proteína sintetizada por la célula viva, que cataliza o acelera una reacción
termodinámicamente posible. De esta manera la velocidad de reacción resulta compatible con el
proceso bioquímico esencial para el mantenimiento de la vida celular.
La elevada especificidad e la función catalítica de las enzimas se debe a su naturaleza proteica. La
extraordinaria estructura compleja de las proteínas les confiere tanto los medios de un mecanismo
de reacción particular, como la capacidad de molde para identificar solo a un limitado grupo de
sustratos. La célula puede elaborar enzimas para diferentes funciones debido a que, en realidad la
estructura primaria dictamina la estructura compleja final. (Estructura terciaria).
Por ejemplo, una proteína de 500 residuos de aminoácidos puede ordenarlos de forma tal que
constituyen una seroalbumina. Las enzimas catalizan solamente una reacción o un grupo limitado
de ellas, que estén muy relacionadas entre sí, debido a esta especificidad se necesitan literalmente
miles de ellas. Por ello el estudio de la química y la regulación enzimática resulta un requisito
previo esencial para comprobar los mecanismos de crecimiento celular, reproducción, etc.

UNIDAD DE COMPETENCIA
El alumno confirmará mediante varios métodos una propiedad que es en su naturaleza proteica.
REVISIÓN DE LITERATURA
Preparación de un extracto enzimático. Las membranas de las células presentes en la papa se
rompen por medios mecánicos (licuando la papa) y posteriormente evitamos la oxidación
agregando fluoruro de sodio.
Actividad enzimática. La actividad enzimática es cuando la enzima se activa por la presencia del
sustrato actuando sobre el para formar un complejo enzima-substrato y generando un producto. La
actividad enzimática se realiza bajo dos tipos de reacción de primer orden, en donde la velocidad
de la reacción depende de la cantidad de substrato manteniéndose la velocidad de reacción
constante y por mas que se le adicione esto no varía.
Es muy especifica y una enzima que actúa en una reacción química generalmente no participara
en otra reacción.
Especificidad del sustrato. El sustrato es la molécula sobre la cual actúa la enzima y cuya
transformación está condicionada por la enzima.
Para que una reacción química tenga lugar, las moléculas de los reactantes, deben chocar con una
energía y una orientación adecuada. La actuación de la enzima permite que los reactantes
(sustratos) se unan en el centro activo con una orientación optima para que la reacción se produzca
y modifica las propiedades químicas del sustrato unido a su centro activo, debilitando los enlaces
existentes y facilitando la formación de otros nuevos.
Reacciones

OH OH :O: :O:
37°C
+ EXTRACTO ENZIMÁTICO

TECOL

:O:H
37°C
No reacciona
+ EXTRACTO ENZIMÁTICO

:O:H
HIDROQUINONA

:O:H
37°C
No reacciona
+ EXTRACTO ENZIMÁTICO

FENOL

MATERIAL
Vaso de precipitado de 100 ml
Tubos de ensayo
5 pipetas graduadas de 5 ml
1 Tripié
1 Termómetro
1 Mechero
Baño maría
Gradilla
REACTIVOS
Fluoruro de sodio 0.1 M
Extracto enzimatico
Catecol 0.1 M
Agua destilada
Fenol 0.1
Hidroquima 0.1 M
Sal de tripsina al 5%
Sal de TCA 0.3 M
Cristales de feniltiaurena

MATERIAL BIOLÓGICO
1 Papa

EQUIPO
Licuadora

METODO

PREPARACIÓN DE UN EXTRACTO ENZIMATICO

Pelar papa, cortar en pedazos y colocar en la licuadora.

Licuar con 50 ml de Fluoruro de sodio 0.1 M.

Filtrar con gasa a un vaso de pp.

 ACTIVIDAD ENZIMATICA

Etiquetar 3 tubos de ensayo

A B C

15 gotas de
15 gotas de 15 gotas de
extracto
extracto agua destilada +
enzimático + 15
enzimático + 15 15 gotas de
gotas de agua
gotas de catecol catecol
destilada

Baño maría, agitar c/5 min, durante 25 min, registrar cambios de color.

ESPECIFICIDAD DEL SUSTRATO

Etiquetar 3 tubos de ensayo

A B C

15 gotas de extracto 15 gotas de 15 gotas de extracto

enzimático + 15 extracto enzimático enzimático + 15 gotas
gotas de solución de + 15gotas de fenol de solución de
catecol 0.01 M. 0.01 M. hidroquinona 0.01 M.

Agitar los tubos, baño maría 37°. Examinar c/5 min durante 15 min.
 NATURALEZA QUIMICA DE LA ENZIMA

Etiquetar 3 tubos de ensayo

A B C D

10 gotas de 15 gotas de 15 gotas de

extracto extracto extracto
enzimático + enzimático + enzimático
15 gotas de 15gotas de + cristales
10 gotas de
extracto Sol. de de EDTA.
tricloroacétic
enzimático + papaya. Agitar
o 0.03 M.
15 gotas de Baño maría fuerte por 5
Agitar,
solución de 37° x 10 min. min. + 15
reposar por
catecol 0.01 + 10 gotas gotas de
5 min + 10
M. de sol. de solución de
gotas de
Baño maría catecol 0.01 solución de catecol 0.01
37° x 15 M. baño catecol 0.01 M. B.maría
min. maría 37° x M. B.maría 37° x 10
10 min. 37° x 10 min. min.
Comparar Comparar Comparar
con tubo A. tubo A. tubo A.

Obs. Resultados Registrar actividad enzimática

de tubos B, C, D.
IMÁGENES Y OBSERVACIONES
Extracto

Imagen Observación
Primero se realizó el extracto
enzimático con la papa, adicionándole
Fluoruro de sodio para evitar la
oxidación.

Actividad enzimatica

Imagen Observación
Actividad enzimática
A B C
Tubos A B C a los 5 min. Se observan
las tonalidades distintas, el tubo A es
más oscuro turbio y con un tono café
o cobre. El tubo B es turbio, pero con
un precipitado blanco y el tubo C es
ligeramente amarillo pero
transparente.

A B C Actividad enzimática
Tubos A B C a los 10 min. En esta
ocasión se continúa observando en el
tubo A un tono cobrizo, el tubo B tiene
al fondo un precipitado blanco y la
parte de encima ligeramente
transparente y el tubo C continúa
transparente pero un poquito cobrizo.
 Actividad enzimática
A B C Tubos A B C a los 15 min. El tubo A
es más café y se puede notar una ligera
diferencia de tono dejando al fondo
una más clara, el tubo B continua
teniendo un precipitado blanco y el
tubo C sigue sin cambios siendo
transparente.

A B C Actividad enzimática
Tubos A B C a los 20 min. El tubo A
presenta un tipo de grumos color café,
el tubo B se separó en dos tonalidades
pero con una parte grumosa blanca al
fondo y transparente, y el tubo C no
sufrió cambios, siguió transparente.

Imagen Observación
A B C Actividad enzimática
Tubos A B C a los 25 min. El tubo A
tiene un precipitado café con aspecto
grumoso, el tubo B al fondo tiene un
precipitado grumoso blanco y el tubo
C siguió transparente y muy
ligeramente cobre.

Especificidad

Imagen Observación
Se utilizaron Catecol 0.01 M, Fenol
0.01 M y Hidroquinona 0.01 M.
 Especificidad
A B C
A los 5 min. El tubo A presente un
tono melón, el tubo B es blanco
lechoso y el tubo C un tono café-
cobre.

A B C Especificidad
A los 10 min. Se observan en el tubo
A un color café, en el tubo B y C se
observan una separación de la parte
superior a inferior, pero el B es
blanquecino y el C es color cobre.

A B C Especificidad
A los 15 min. El tubo A disminuyó su
tono de café intenso a uno más tenue,
el tubo B quedó blanco y el tubo C
tuvo un tono entre café y gris.

Naturaleza química de la enzima

Tubos Imagen
AyB A B
El tubo A presentó un tono rosa pastel
con apariencia grumosa, en
comparación con el tubo B que su
apariencia es lechosa y blanca con una
concentración de precipitado el fondo.
 AyC
El tubo A presentó un tono rosa pastel A C
con apariencia grumosa, en
comparación con el tubo C que se
concentra un precipitado blanco al
fondo del tubo.

AyD
A D
El tubo A presentó un tono rosa pastel
con apariencia grumosa, sin embargo,
el tubo D es muy similar al tubo A.
Notando una actividad enzimática
muy parecida.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Naturaleza química de la enzima
TIEMPO
TUBO
5 10 15 20 25

A xx xx xxx xxx xxxx

B xx xx xxx xxx xxxx
C x x x x x
Especificidad el sustrato
TIEMPO
TUBO
5 10 15

A xx xxx xxxx
B xx xxx xxxx
C x xx xxx

Naturaleza química de la enzima

Tubo Actividad enzimática

A xxxx
B xxx
C xxx
D xxxx

RECOMENDACIONES
Realizar este ejercicio con diferentes productos que no sean papa.
Sería bueno realizar pruebas con un extracto enzimático de origen animal y así comparar y ver si
existe alguna diferencia o niveles más altos o bajos.
CONCLUSIONES
Se utilizaron distintos procedimientos a manera de observar la actividad enzimática de la papa.
En la prueba de actividad enzimática se presenta dicha actividad solo en el tubo A y B debido a
la presencia del extracto en ellos, sin embargo, en el tubo B no se puede apreciar del todo por no
contener catecol.
En la prueba de naturaleza química de las enzimas la actividad fue la misma debido a que tanto
en el tubo A como en el D se contenía prácticamente los mismos compuestos.
Concluyendo que es importante tener en cuenta la naturaleza proteica de las enzimas que existe
en los vegetales o tubérculos, o simplemente en aquello que se encuentra a nuestro alrededor y
que consumimos sin saber lo que contiene.

CUESTIONARIO
1. ¿Qué importancia presentan las enzimas para las células?
La actividad secuencial de muchas enzimas permite que las moléculas se degradan o bien se
forman moléculas de mayor tamaño a partir de moléculas sencillas.
2. Explicar. ¿Cuáles son los diferentes tipos de especificidad enzimática?
Se refiere a la capacidad de cada enzima para diferencias sustancias que tienen características
semejantes (especificidad o sustrato) o para realizar una transformación completa (especificidad
de acción). La especificidad de sustrato es absoluta cuando una enzima solo puede catalizar la
transformación de una sustancia.

BIBLIOGRAFÍA
Enzimas. Recuperado de : http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz1.htm 02-05-19

Actividad proteolítica de los extractos enzimáticos. Recuperado de:

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1028-47962006000200003 03.05.19