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Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas


Práctica “Hidrólisis de RNA y DNA e identificación de bases púricas
y pirimídicas por cromatografía en capa fina”

INTRODUCCIÓN Estructuralmente, la principal diferencia, en cuanto


a su composición química se refiere, el DNA
Los ácidos nucleicos son compuestos nitrogenados contiene Timina, mientras que el RNA contiene
que se pueden encontrar en las células asociados a Uracilo. Por éste motivo es que las manchas que se
proteínas formando complejos llamados núcleo- pueden apreciar en la placa cromatográfica
proteínas. Estas proteínas tienen carácter básico
(Ilustración 1) nos ayudan a visualizar que
mientras que los ácidos nucleicos son ácidos. efectivamente el RNA contiene Uracilo, ya que ésta
Se conocen dos grupos de ácidos nucleicos: RNA se encuentra a la misma altura que la mancha de
(ácido ribonucleico) y DNA (ácido
RNA; y, en el caso del DNA, también podemos
desoxirribonucleico). confirmar que el este contiene Timina en su
La hidrólisis controlada de RNA y DNA produce estructura, ya que la Timina fue la que corrió al
nucleótidos. Si la hidrólisis continua se producen mismo nivel que la mancha de DNA.
nucleósidos y finalmente fosfatos, azúcares y bases
púricas y pirimídicas.
La función biológica de los ácidos nucleicos es
fundamental; El DNA almacena información
genética y sirve de molde para la síntesis de
proteínas.

OBJETIVO
 Separar las bases nitrogenadas del DNA y
el RNA por cromatografía en capa fina a
partir de hidrolizados de los mismos,
identificándolas por la propiedad que
tienen de absorber luz ultravioleta.
DNA A G C U T RNA
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Ilustración1 . Placa Cromatografíca Revelada

Prueba Mancha Solvente Rf CONCLUSIÓN


DNA hidrolizado 5.3 7 1.75  La Timina sólo se encuentra en el DNA y el
Adenina 3.7 7 0.52 Uracilo sólo se encuentra en el RNA.
Guanina 2.9 7 0.41
Citosina 2.1 7 0.3 BIBLIOGRAFÍA
Uracilo 4.5 7.05 0.63  Voet, D., Voet, J. &Charlotte, W. (2009).
Timina 5 7.1 0.70 “Fundamentos de Bioquímica.” Buenos
RNA hidrolizado 4.1 7.1 0.57 Aires: Médica Panamericana. Pág. 835

Se pudo observar el corrimiento de las diferentes


formas plasmidicas.
Al revisar la literatura, encontramos que el DNA y
el RNA contienen las mismas 3 bases nitrogenadas
(Adenina, citosina, Guanina).
Instituto Politécnico Nacional
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
Práctica “Hidrólisis de RNA y DNA e identificación de bases púricas
y pirimídicas por cromatografía en capa fina”

Una vez obtenida la gráfica de absorbancia


vs longitud de onda, se observa a la
longitud de onda de 210 nm una campana
en la gráfica, la cual corresponde al DNA,
mientras que a la longitud de onda de 260
nm se observa otra campana pero más
pequeña que la de 210 nm, esta
corresponde a las proteínas. Lo anterior
significa que se tiene más DNA que
proteínas, lo cual se puede comprobar
cuando obtenemos las concentraciones de
estos con ayuda de nomograma, en el cual
se tienen que la concentración de DNA es
de 0.054 mg/mL, mientras que en las
proteínas se tiene una concentración de
0.05 mg/mL.

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