Manitol Salado Agar

Uso: Medio de cultivo Aislamiento y diferenciación de

selectivo estafilococos.

Fundamentos Manitol: Es el hidrato Es un medio altamente selectivo
de carbono por la alta concentración
fermentable salina y diferencial debido a la
capacidad de fermentación del
manitol por los microorganismos
Las bacterias que crecen en
un medio con alta
concentración de
sal y fermentan el manitol,
producen ácidos, con lo que
se modifica el pH del medio y
vira el indicador de pH del
color rojo al amarillo
Los estafilococos coagulosa
positiva fermentan el manitol y
se visualizan como colonias
amarillas rodeadas de una zona
del mismo color.

Formula Su fórmula cumple con

los requerimientos de
la Armonización de
Farmacopeas

Instrucciones Suspender 111 g del Reposar 5 minutos y calentar con Distribuir en recipientes Enfriar y distribuir en placas de
polvo en 1 litro de agua agitación frecuente, llevando a apropiados y esterilizar en Petri estériles.
purificada ebullición durante 1 o 2 minutos autoclave a 118-121°C
para disolución total. durante 15 minutos.

Interpretación de microorganismos microorganismos no

resultados fermentadores de fermentadores de manitol:
manitol: colonias del color del medio,
colonias de color rojas rodeadas o no de halo rojizo-
amarillo rodeadas o no púrpura
de un halo amarillo

Características Medio de cultivo Medio de Cultivo preparado: color

deshidratado: color rojo.
beige rosado,
homogéneo, libre
deslizamiento.

Almacenamiento: Medio de cultivo Medio de cultivo preparado a 2-8

deshidratado a 10-35 ºC ºC

Procedimiento Siembra: Sembrar en Incubación: En aerobios, a 35-37 Incubación durante 3 días a 32

superficie un inóculo °C durante 18-24 hs. Si a las 24 °C, en aerobios.
denso de la muestra por horas las
estría Placas presentan resultado
negativo, incubar otras 24 horas.
 Mac conkey Agar
Uso: Aislamiento de bacilos Gram negativos Aerobios y anarobios Diferencia bacterias que usan o
facultativos no lactosa en muestras
químicas
Fundamentos Las peptonas aportan nutrientes necesarios La lactosa es el hidrato de La mezcla de sales biliares y el
para el desarrollo bacteriano carbono fermentable disminuye cristal violeta inhiben el
el PH alrededor de la colonia desarrollo de gran parte de la
(Color rojo neutro) flora Gram positiva
Microorganismos no
fermentadores de la lactosa
producen colonias incoloras
Formula

PH final 7.1 /0.2

Instrucciones Suspender 50 g de polvo por litro de agua Reposar por 5 min. Y mezclar Calentar suavemente y hervir
destilada hasta uniformar de 1 a 2 min. Hasta disolver.
Estelarizar en autoclave 121° C
durante 15 min.
Interpretación de Escherichia coli color rojo con halo turbio Salmonella incoloras Proteus mirabilis incolora
resultados Klebsiella pneumoniae color rosadas Shigella incoloras Enterococus incoloras,
mucosas diminutas y opacas
Características Medio preparado: rojo purpura

Almacenamiento: Medio deshidratado: 10-35°C Medio preparado: 2-8°C

Procedimiento Siembra: Sembrar en superficie utilizando Incubación: de 18-48 horas a 35-

técnica de Pour Plate: sembrar 1 ml y 37° C. en atmosfera aeróbica
agregar aprox. 15 ml de medio de cultivo
fundido y enfriado a 45-50 ° C

Uso: Selectivo y diferencial para el
aislamiento y recuento de
estafilococos
Fundamentos Peptona de caseína y el extracto de
carne constituyen la fuente de
carbono y nitrógeno
Formula
B Parker Agar
El extracto de levadura aporta vitaminas del El teolurito de potasio y el cloruro de litio
complejo B inhiben el desarrollo de la flora
La glicina y el piruvato de estafilococos. El agar acompañante
es el agente solidificante
Adición de la yema de huevo con telurito de
potasio,

Instrucciones Placas listas

Interpretación de Observar las características de las
resultados colonias

Características Medio de cultivo color amarillo

Almacenamiento: De 2-8°C
 Nutritivo Agar
Uso: Aislamiento y recuento de
microorganismos con escasos
requerimientos nutricionales.
Fundamentos el extracto de carne constituyen la
fuente de carbono, nitrógeno y aportan
nutrientes para el desarrollo bacteriano
Formula
Instrucciones Colocar los frascos cerrados en baño maría
y llevar a ebullición para fundir el medio de
cultivo sólido contenido en los mismos.
Interpretación de resultados Hemólisis alfa: lisis parcial de los
glóbulos rojos. Se observa un halo de
color verdoso alrededor de la colonia en
estudio. Es debido a la oxidación de la
hemoglobina a metahemoglobina
(compuesto de color verdoso) por el
peróxido de hidrógeno generado por los
microorganismos
Características Medio de cultivo color ámbar claro.
Almacenamiento: Medio de cultivo listo para usar en frascos
a 10-35 ºC.
Procedimiento En superficie: inocular directamente la
muestra por estría.
análisis de alimentos, aguas y
otros materiales de
importancia sanitaria
El agregado
de cloruro de sodio mantiene
el balance osmótico y el agar
es el
agente solidificante,
Una vez que se ha fundido el
medio de cultivo, retirar
cuidadosamente los frascos del
baño maría y dejar enfriar.
Cuando alcanzan temperatura
45-50 ºC, abrirlos y distribuir
aproximadamente 15 ml en
placas de Petri estériles.
Hemólisis beta: lisis total de los
glóbulos rojos. Se observa un
halo claro, brillante alrededor
de la colonia en estudio
En caso de ser suplementado
con sangre ovina: color rojo
cereza.
Medio de cultivo listo para usar
en placas a 2-8 ºC
En profundidad: inocular una
alícuota de la muestra directa o
de su dilución. Verter un
volumen del medio de cultivo
fundido y enfriado a 40-45°C.
Homogeneizar mediante
movimientos de vaivén y
rotación. dejar solidificar
Medio de cultivo nutritivo no
selectivo
permite una clara
visualización de las
reacciones de hemólisis,
Preparación de agar Sangre:
agregar 5-10 % de sangre
ovina desfibrinada estéril
(ReF Britasheep) al medio
esterilizado, fundido y enfriado
a 45-50 ºC. Homogeneizar y
distribuir en placas de Petri
estériles.
Hemólisis gamma: ausencia de
lisis de los glóbulos rojos. El
medio de cultivo no presenta
modificaciones de color y
aspecto alrededor de la
colonia en estudio.
Incubación
El tiempo, la temperatura, y la
atmósfera de incubación,
dependerán
del microorganismo que se
quiera recuperar
 EMB Agar
Uso: Aislamiento de bacilos Gram positivos de Desarrollo de familias de
rápido desarrollo y escasas exigencias las especies
nutricionales enterobacteriacae
Fundamentos Es nutritivo por la presencia de peptona Los indicadores eosina y Pueden crecer especies de candida de
azul de metileno ejercen color rosado y son puntiformes
un efecto inhibitorio sobre
una amplia variedad de
bacterias Gram positivas
Formula

Instrucciones Suspender 36 g de polvo en un litro de Calentar y llevar ebullición Estilizar en autoclave 121° C DURANTE 15
agua purificada hasta su disolución total Min.
Distribuir en cajas de Petri estériles
Interpretación de Crecimiento de colonias con brillo Crecimiento y colonias de Crecimiento y colonias incoloras o
resultados metálico característico de E. coli color rosado: ligeramente amarillas:
Microorganismo entérico Microorganismo entérico gram
Gram negativo Negativo lactosa negativo
Lactosa positivo.

Características Cultivo deshidratado: color purpura Cultivo preparado: color

purpura vinoso

Almacenamiento: Medio de cultivo deshidratado: 10-35°C Medio de cultivo

preparado:2-8°C

Procedimiento Siembra: Estriado directo a partir de la Profundidad: Desarrollo

muestra de clamidosporas