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SEMINARIO DE INVESTIGACIÓN
Presentado por:
MYRIAM MARINELDA CÓRDOBA LEYTON. Código: 1.088.732.433
JHONY ALBEIRO GOYES. Código: 1.085.900.458
MILTON YEISON JIMENEZ. Código: 1.089.459.483
JOSE FERNANDO GUERRERO. Código 98417551
Presentado a:
TUTOR JUAN CAMILO MENDOZA
Grupo: 100108_142
Introducción
En el presente trabajo se encuentra el desarrollo de la Fase 4 – Realizar
proyecto: cumplimiento guía – Proyecto 2, en la cual se continua con la
problemática de investigación detectada en base a la temática propuesta en el
entorno colaborativo, Profundizando de manera general en lo relacionado al
tema de la desnutrición en nuestra sociedad, debemos tener en cuenta como
ello requiere de una investigación consiente y muy bien estructurada, que se
enfoque en la necesidad como tal de hallar un argumento válido que justifique
el porqué de su evidencia y así mismo nos impulse a minimizar esta
problemática que contrae consigo una serie de factores negativos y de alto
nivel perjudicial, de forma general nos centraremos en el departamento de la
Guajira, lugar en donde de manera preponderante se generan altos índices de
desnutrición.
Marco Teórico
Desnutrición
La desnutrición puede entenderse como un déficit de energía, proteínas u otros
nutrientes que afecta los tejidos y la composición corporal, generando efectos
adversos en la funcionalidad e incrementando el riesgo de morbilidad y
mortalidad. Particularmente en los adultos mayores, la desnutrición es una
condición multifactorial agravada por los cambios propios del envejecimiento
como son la disminución de la masa magra, alteraciones fisiológicas del
sistema digestivo, pérdida sensorial del olfato y el gusto, y pérdidas dentales
acompañadas de la presencia de enfermedades crónicas, polifarmacia,
depresión, problemas cognitivos y aislamiento social. Estos factores actúan de
manera sinérgica haciendo que esta población sea más vulnerable a esta
condición nutricional. (Giraldo& Acevedo; 2017)
En cambio se dice que un niño estará en estado de desnutrición aguda cuando
presente una de las siguientes tres condiciones: menos de 115 mm de
circunferencia en el brazo, tenga edemas o su puntaje en el indicador de peso
para la talla se encuentre por debajo de tres desviaciones estándar del
promedio. (Morón, J. B. , & 𝐻𝑎ℎ𝑛 𝑊; 2017), la desnutrición en niños causa
deficiencias en su desarrollo a nivel psicomotriz, retraso en el desarrollo
cerebral y deficiente capacidad intelectual. (PULLES, C. & Grimaneza, A;
2011).
La desnutrición, así como cualquier otra enfermedad, es causada por la
ausencia o deficiencia de nutrientes, los hábitos, estados fisiológicos,
enfermedades intercurrentes y otros factores del huésped. Además de ciertas
condiciones del medio ambiente como producción y distribución de alimentos,
poder adquisitivo, situación social, económica y cultural de la comunidad, entre
otras. (Vera , Guerrero , & Cruz , 2017)
Desde muchos años atrás y hasta la actualidad, en algunos lugares de
Colombia la desnutrición sigue siendo una problemática latente y cada vez más
voraz, que se presenta como una enfermedad en niños, al igual que en los
adultos mayores, por lo cual es considerada como uno de los principales
problemas de salud pública, se ha detectado que los factores que contribuyen a
la desnutrición son los hábitos o estilo de vida de las familias entre las causas
más comunes los deficientes recursos económicos o a enfermedades que
comprometen el buen estado nutricional. (PULLES, C. & Grimaneza, A; 2011).
Lacto-suero
El lactosuero es la porción acuosa de la leche obtenida por acidifcación térmica
o por coagulación. El lacto-suero se procesa adicionalmente mediante técnicas
de separación o fraccionamiento para eliminar el agua, la lactosa, los lípidos,
los minerales, además de enzimas, hormonas y factores de crecimiento;
representa entre el 85 y el 90 % del volumen de la leche, y contiene
aproximadamente el 55 % de sus nutrientes, entre los cuales los más
abundantes son la lactosa, las proteínas hidrosolubles, los lípidos, las sales
minerales y las vitaminas. El lacto-suero constituye una fuente importante de
nutrientes que otorga múltiples propiedades en una amplia gama de alimentos.
(Marulanda, 2016)
Dicho de otro modo el lacto-suero es el líquido que se obtiene por la
coagulación de las proteínas presentes en la leche durante la elaboración del
queso, una vez que se separa la cuajada del queso (la caseína) y la grasa.
Contiene principalmente lactosa, proteínas como sustancias de importante
valor nutritivo, minerales, vitaminas y grasa. (Gorostidi Martínez , 2014), Por tal
razón las proteínas del Lacto-suero son una excelente fuente para fortificar los
alimentos y agregarles valor nutricional; los productos del suero mejoran la
textura, realzan el sabor y el color, mejoran las propiedades de flujo y muestran
muchas otras propiedades funcionales que aumentan la calidad de los
productos alimenticios; además, proporcionan varias propiedades funcionales
en alimentos tales como gelificación, estabilidad térmica, formación de espuma
y emulsificación. La proteína del suero es actualmente uno de los sectores de
mayor crecimiento en la industria láctea; y sin embargo, su uso se encuentra
limitado por su sabor. (Marulanda, 2016).
Las proteínas del suero, se han relacionado con diferentes funciones, tanto con
la motilidad como con respuestas inmunes en el nivel intestinal, sin embargo,
en la última década, se han reportado diversas actividades como inhibición de
células cancerosas y actuar con agentes antihipercolesterolémicos La
lactoferrina, otra proteínas del suero de leche, ha mostrado tener propiedades
moduladores del sistema inmunológico mediante su acción microbiana y su
efecto inhibidor sobre la producción de toxinas por microorganismos. (Vela ,
Castro , & Caballero , 2011)
Se estima que a partir de 10 litros de leche de vaca se puede producir de 1 a 2
Kg de queso y un promedio 8 a 9 kg de suero. Al representar cerca del 90% del
volumen de la leche, contiene la mayor parte de los compuestos hidrosolubles
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Fase 4: Trabajo Colaborativo 6
(Ramírez Navas, J. S., 2012, p. 71). Este suero posee mejores aptitudes para
el procesamiento y obtención de subproductos de mayor valor agregado.
Mientras que el lacto-suero ácido se produce cuando el coagulo se forma por
acidificación con un pH de 5.1 o menos, en la elaboración de quesos de pastas
frescas y pastas blandas como son el tipo: Cottage y Ricotta, entre otros.
(Gorostidi Martínez , 2014), de dicho proceso se obtiene un líquido sobrante el
cual presenta un pH cercano a 4,5 debido a la producción de ácido láctico y
alto contenido de minerales, más del 80% de los minerales de la leche de
partida. (Ramírez Navas, J. S., 2012).
El lacto-suero dulce y ácido presenta las siguientes características:
Alimentos funcionales
El concepto de alimentos funcionales aparece por primera vez en Japón en los
años 80 cuando las autoridades sanitarias japonesas se dieron cuenta de que,
para controlar los gastos sanitarios generados por la mayor esperanza de vida
de la población anciana, había que garantizar también una mejor calidad de
vida, y por eso se introduce este nuevo concepto de alimentos, desarrollados
específicamente para mejorar la salud y reducir el riesgo de contraer
enfermedades (Tonello 2012. p, 12).
Dentro de los alimentos funcionales se destacan los pro-bióticos que son
microorganismos y sustancias que contribuye al equilibrio microbiano intestinal,
para restituir la población del medio interno y proteger la integridad intestinal.
Según Uno de los alimentos enriquecidos con pro-bióticos es el Yogurt, este
producto de consistencia semisólida que procede de la leche, generalmente de
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Fase 4: Trabajo Colaborativo 9
Probióticos
Los probióticos se definen como microorganismos vivos que, al administrarse
en cantidades adecuadas, confieren un beneficio a la salud o en la fisiología del
huésped. La forma más frecuente de consumir probióticos es a través de
alimentos lácteos que contienen especies intestinales de lactobacillus y
bifidobacterias; por los efectos benéficos adicionales a los nutritivos, estos
alimentos se consideran en el grupo de los alimentos funcionales. (Gorostidi
Martínez , 2014)
Una vez que los probióticos son ingeridos ocurren cambios en la microflora
intestinal que repercuten positivamente en el estado de salud del consumidor.
Contribuyen al mantenimiento de un equilibrio saludable de bacterias dentro del
tracto gastrointestinal. Las bacterias probióticas ejercen su influencia
beneficiosa de varias maneras. Algunas producen sustancias antimicrobianas,
otras compiten con las bacterias patógenas por los nutrientes o por los puntos
de unión en la pared intestinal, y otras modulan el sistema inmunitario del
huésped. (Gorostidi Martínez , 2014)
Entre las bacterias probióticas más utilizadas para el consumo humano se
encuentran las llamadas bacterias acido lácticas (BAL), que incluyen las
siguientes: Lactobacillus acidophilus, L. plantarum, L. casei, L. casei spp
rhamnosus, L.delbrueckii spp bulgaricus, L. fermentum, L. reuteri, Lactococcus
lactis spp lactis, Lactococcus lactis spp. Cremoris, Bifidobacterium bifidum, B.
infantis, B.adolecentis, B. longum, B. breve, Enterococcus faecalis,
Enterococcus faecium, entre otros. También se consideran probióticas las
bacterias ácido propiónicas (BAP) cuya inclusión al grupo es bastante reciente,
especialmente las del género propionibacterium. (Gorostidi Martínez , 2014)
Las bacterias probióticas se desarrollan lentamente en la leche debido a una
falta de actividad proteolítica y a menudo pierden viabilidad durante el
almacenamiento en refrigeración. Normalmente se añaden bacterias
convencionales para el yogur, como pueden ser, Lactobacillus delbrueckii
subsp. Bulgaricus y Streptococcus thermophilus para reducir el tiempo de
fermentación en la producción del yogur. Es importante tener en cuenta la
viabilidad de las cepas utilizadas, a lo largo de la vida útil del producto y en el
momento de su consumo, para garantizar que ofrezca beneficios para la salud
del consumidor (Gorostidi Martínez , 2014)
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Comentarios
Materiales y Métodos
Materia prima
El lacto-suero dulce usado será adquirido en la empresa productora de lácteos
Coolechera Cartagena, derivado de la producción de queso costeño. Las cepas
de bacterias ácido-lácticas utilizadas en la fermentación durante la
investigación serán suministradas por la empresa CHR-HANSEN Colombia,
constituidas por Estreptococcus Salivarius ssp. Thermophilus y Lactobacillus
Casei ssp. Casei. (Marulanda, M. & 𝐺𝑎𝑟𝑐í𝑎, 𝐿. , 2016).
Análisis Microbiológico
Se realizará un recuento en placa por triplicado a las diferentes muestras de las
bebidas fermentadas tipo yogur, siguiendo la metodología descrita por NTC
4519, con el objetivo de reflejar la calidad sanitaria, las condiciones de
manipulación y las condiciones higiénicas. Posteriormente se determinará los
coliformes totales y fecales en dos fases,(Marulanda, et. al. , 2016), se
realizarán mediante la técnica del número más probable (NMP). Una vez
obtenido la dilución 1x10-8, se depositará 1ml de cada dilución en cada uno de
los tres tubos, el cual debe contener 10ml de caldo lactosado simple con tubo
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Análisis Fisicoquímico
La estimación de vida útil del producto se determinará mediante unos análisis
fisicoquímicos según las normas técnicas NTC 399 de 2002 y NTC 4978 de
2001, al someter el producto a una prueba en tiempo real bajo condiciones
normales de refrigeración a 4 °C y así comprobar día a día el deterioro que
puede presentar el producto frente a sus propiedades fisicoquímicas,
microbiológicas y sensoriales. En el instante en que alguno de estos
parámetros sea inaceptable siguiendo las NTC 399 el producto habrá llegado al
fin de su vida útil. (Marulanda, et. al. , 2016)
Específicamente el análisis fisicoquímico se realizarán análisis de porcentaje
de grasa por el método gerber, NTC 4722; densidad por el método de lacto
densimetría; lactosa por el método de Lane y Eynon (AOAC 923.09, 920.183b);
la proteína será analizada por el método de Kjedahl (AOAC 920.152); solidos
totales por espectrofotometría en el equipo MilkoScan FT 6000; sales
minerales, (AOAC 942.05); se determinará el pH mediante el método 945.10/90
de la AOAC adaptado y acidez expresada en porcentaje de ácido láctico de
acuerdo a la Norma Técnica Colombiana (NTC) 399 (2002), utilizando una
solución de NaOH al 0.1N, solución de fenolftaleína disuelta al 1% en alcohol
amílico, que se basa en los métodos de la A.O.A.C. (2003). Los análisis se
realizaran por triplicado al lacto-suero y producto final. (𝐷𝑖𝑒𝑔𝑜, 𝐴. 𝑒𝑡 𝑎𝑙, 2015).
Evaluación sensorial
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Caracterización de la fermentación
Se registraran datos de pH y concentración de ácido láctico, con el fin de
estudiar la dinámica de acidificación de la bebida inoculada con cultivos
lácteos. (𝐷𝑖𝑒𝑔𝑜, 𝐴. 𝑒𝑡 𝑎𝑙, 2015).
Análisis de datos
En la investigación, se manejará un diseño experimental totalmente aleatorio.
Las determinaciones se efectuaran por triplicado y los resultados expresados
como la media con su desviación estándar. (𝐷𝑖𝑒𝑔𝑜, 𝐴. 𝑒𝑡 𝑎𝑙, 2015).
Diligenciamiento de la Tabla
Diseño
Tipo de ENFOQUE
investigación
El presente proyecto de investigación denominado:
Desarrollo de yogur funcional, a partir del lacto suero a
un costo accesible en la población de escasos recursos
económicos, para combatir la desnutrición en Colombia,
principalmente en la Guajira. 2019, es de tipo
cuantitativo, cualitativo, estadístico formulando así
análisis de resultados. (Maisincho & Navas , 2006)
MODALIDAD BASICA DE LA INVESTIGACIÓN:
Es un estudio de manera deductiva, analítica y objetiva, en la
cual se desea resaltar lo cuantitativo a cualitativo. Esto será
de gran importancia, (Maisincho & Navas , 2006) ya que nos
interesa conocer si es posible desarrollar un yogur funcional, a
partir del lacto suero, el cual sea a un bajo costo, de tal
manera que lo puedan comprar personas de escasos recursos
económicos, a la vez que sea altamente nutritivo con el fin de
combatir la desnutrición presente en Colombia,
específicamente en la Guajira, por esta razón será necesario
realizar pruebas al producto final, como: análisis fisicoquímico,
microbiológico y sensorial.
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Análisis Microbiológico
Se realizará un recuento en placa por triplicado a las
diferentes muestras de las bebidas fermentadas tipo yogur,
siguiendo la metodología descrita por NTC 4519, con el
objetivo de reflejar la calidad sanitaria, las condiciones de
manipulación y las condiciones higiénicas. Posteriormente se
determinará los coliformes totales y fecales en dos
fases,(Marulanda, et. al. , 2016), se realizarán mediante la
técnica del número más probable (NMP). Una vez obtenido la
dilución 1x10-8, se depositará 1ml de cada dilución en cada
uno de los tres tubos, el cual debe contener 10ml de caldo
lactosado simple con tubo de Durham invertido. Estos se
llevaran a incubación durante 24h/37°C, transcurrido este
tiempo, se observaran los tubos que mostraron producción de
gas, se escogerá la dilución más alta en la que se observe la
presencia de gas en los tres tubos y se tomará una asa de los
tubos con gas para sembrar en una placa de agar MacConkey.
Esta placa se incubará 24h a 37 ºC y se determinará la
presencia de colonias de bacterias coliformes (NTC 399,
2002). Las muestras de lacto-suero serán homogenizadas
durante 30 segundos, utilizando un agitador automático. Se
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Análisis Fisicoquímico
La estimación de vida útil del producto se determinará
mediante unos análisis fisicoquímicos según las normas
técnicas NTC 399 de 2002 y NTC 4978 de 2001, al someter el
producto a una prueba en tiempo real bajo condiciones
normales de refrigeración a 4 °C y así comprobar día a día el
deterioro que puede presentar el producto frente a sus
propiedades fisicoquímicas, microbiológicas y sensoriales. En
el instante en que alguno de estos parámetros sea inaceptable
siguiendo las NTC 399 el producto habrá llegado al fin de su
vida útil. (Marulanda, et. al. , 2016)
Específicamente el análisis fisicoquímico se realizarán análisis
de porcentaje de grasa por el método gerber, NTC 4722;
densidad por el método de lacto densimetría; lactosa por el
método de Lane y Eynon (AOAC 923.09, 920.183b); la
proteína será analizada por el método de Kjedahl (AOAC
920.152); solidos totales por espectrofotometría en el equipo
MilkoScan FT 6000; sales minerales, (AOAC 942.05); se
determinará el pH mediante el método 945.10/90 de la AOAC
adaptado y acidez expresada en porcentaje de ácido láctico de
acuerdo a la Norma Técnica Colombiana (NTC) 399 (2002),
utilizando una solución de NaOH al 0.1N, solución de
fenolftaleína disuelta al 1% en alcohol amílico, que se basa en
los métodos de la A.O.A.C. (2003). Los análisis se realizaran
por triplicado al lacto-suero y producto final.
(𝐷𝑖𝑒𝑔𝑜, 𝐴. 𝑒𝑡 𝑎𝑙, 2015).
Evaluación sensorial
La evaluación sensorial se realizada a las bebidas
fermentadas tipo yogur a 10 ± 2 ºC comparados con yogur
comercial, siguiendo los métodos descritos por Morales A.
(2005) y Carpenter R. (2009), mediante una prueba analítica
discriminativa de ordenamiento, con el fin de establecer si
existen diferencias entre las muestras en un salón iluminado
uniformemente, por grupos de 30 panelistas con tapaojos.
(Marulanda, et. al. , 2016).
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Caracterización de la fermentación
Se registraran datos de pH y concentración de ácido láctico,
con el fin de estudiar la dinámica de acidificación de la bebida
inoculada con cultivos lácteos. (𝐷𝑖𝑒𝑔𝑜, 𝐴. 𝑒𝑡 𝑎𝑙, 2015).
Población y muestra
Población Se realizarán tres réplicas en la elaboración de la bebida
fermentada tipo yogur con lactosuero dulce, estableciendo tres
formulaciones, basadas en las diferentes concentraciones de
sólidos solubles
Muestra Muestra 1 (M1) contendrá un 13 % de sólidos solubles; la
muestra 2 (M2), un total de 17 % de sólidos solubles y la
muestra 3 (M3), 21% de sólidos solubles.
Análisis estadístico
Análisis de datos
En la investigación, se manejará un diseño experimental totalmente aleatorio.
Las determinaciones se efectuaran por triplicado y los resultados expresados
como la media con su desviación estándar. (𝐷𝑖𝑒𝑔𝑜, 𝐴. 𝑒𝑡 𝑎𝑙, 2015).
EQUIPOS 38.871.971
SOFTWARE 2500000
MATERIALES 240577
SALIDAS DE CAMPO 0
VIAJES 550.000
CONSTRUCCIONES 0
MANTENIMIENTO 890.000
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ADMINISTRACION 470.000
TOTAL 87.826.980
NÚMERO DE
Dedicaci
INVESTIGADOR / FUNCIÓN MESES DE
ón
EXPERTO/ DENTRO DEL VINCULACIÓ VALOR
Horas/se
AUXILIAR PROYECTO N CON EL
mana
PROYECTO
Myriam Marinelda Asistente técnico 1.656.23
3 12
Córdoba Leyton de proyecto 2
Jhony Albeiro Asistente técnico 1.580.00
3 10
Goyes en campo 0
Asistente técnico
Oscar Andres 1.475.00
en formulación del 3 8
Bernal 0
producto
Asistente técnico
Jose Fernando 1.450.00
en control de 3 7
Guerrero 0
calidad
Asistente técnico
Milton Yeison en recolección de 1.400.00
3 5
Jimenez datos y análisis 0
de información
Diana Suarez Gerente 12 40 4.616.250
Diego Hernández Secretaria 12 40 1.154.063
Fernando Castro Jefe de Producción 12 40 3.846.875
Auxiliar de
Valentina Díaz 12 40 991.494
Empaque
Amparo Muñoz Auxiliar de Bodega 12 40 991.494
Margariata Rojas Contador 12 40 2.769.750
Alba Meneses Auxiliar Contable 12 40 1.307.938
Asistente de
Blanca Pérez 12 40 2.308.125
Mercadeo
Armando Guerrero Auxiliar de Ventas 12 40 1.384.875
7.561.23
TOTAL
2
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EQUIPO VALOR
Incubadora 6.670.315
Balanza (0- 1500kg) 950.000
Frigorifico 5.082.000
Baldes 48.000
Envasadora 4.128.896
Cocina industrial 9.528.222
Olla industrial 1.905.644
Termómetro 63.521
Termo Laxtodensímetro 479.587
Acidómetro 397.088
Mesa de trabajo 5.082.726
Cucharon 15.882
Cernidor 28.590
TOTAL 34.380.471
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Para llevar de
manera
Paquete contable 2500000
sistematizada la
contabilidad
TOTAL 2500000
Necesarios en el buen
Compra de funcionamiento en la
maquinarias y producción de la bebida 40.000 70.000 2 220000
equipos láctea
** Se debe justificar cada viaje en términos de su necesidad para el éxito del proyecto
Pueden agruparse por categorías, ej: vidriería, reactivos, papelería, etc., suscripciones a revistas, libros,
etc.
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Myriam
Córdoba
- Lacto-suero
dulce
- Cepas de
bacterias
ácido-lácticas
(Estreptococc
us Salivarius
ssp.
Yogur funcional, a partir del Thermophilus
lacto suero a un costo y
accesible en la población de Lactobacillus
escasos recursos Casei ssp.
económicos, para combatir la Casei.
desnutrición en Colombia, - Leche
principalmente en la Guajira. descremada
- Azúcar
- Contenido de
El lactosuero es la porción sólidos
acuosa de la leche obtenida por solubles:
acidifcación térmica o por muestra 1
coagulación. (M1) 13 %; Habitantes del departamento
de la guajira con estado de
muestra 2 desnutrición. (de niños hasta
se presentará 3 formulaciones (M2) 17 %, y adultos)
diferentes con el fin de la muestra 3
establecer por medio del (M3) 21 %.
análisis sensorial cual tiene - Acidez de 0.7
mayor aceptabilidad por los %.
consumidores y por ende para - pH 5.
determinar cuál posee más - Recuento en
contenido nutricional. Además placa por
se realizará una investigación triplicado.
experimental por tanto se - Técnica del
necesitará un laboratorio. número más
probable
(NMP).
- Dilución 1x10-
8 del caldo
lactosado
- 3 tubos de
ensayo.
- Tubo de
Durham
invertido
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- Placa de
agar
MacConkey.
- 3 agitadores
automáticos.
- Agua
peptonada
estéril.
- Método
gerber, NTC
4722
- Método de
lacto
densimetría
- Método de
Lane y Eynon
(AOAC
923.09,
920.183b).
- Método de
Kjedahl
(AOAC
920.152).
- MilkoScan FT
6000.
- Sales
minerales,
(AOAC
942.05).
- Método
945.10/90 de
la AOAC.
- NaOH al
0.1N.
- Solución de
fenolftaleína
disuelta al 1%
en alcohol
amílico.
- Yogur
comercial.
- Salón
iluminado
uniformement
e
- 30 panelistas.
Consecución de
materiales e
instrumentos a
utilizar y personal
que trabajara en la
investigación
Dirigidos a la apropiación social del conocimiento
En la investigación, se
manejará un diseño
experimental totalmente Usuarios de la red.
aleatorio. Las Comunidades en
Archivo impreso y
determinaciones se general educativas de
disponible en línea.
efectuaran por triplicado y los Colombia.
resultados expresados como
la media con su desviación
estándar.
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Conclusiones
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Referencias Bibliográficas
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casei Elaboration of a dairy drink based on whey fermented using
Streptococcus salivarius ssp., Thermophilus and Lactobacillus casei ssp.
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https://pdfs.semanticscholar.org/c670/86dd6f0a436ae17fc64d9fc71544f5
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Marulanda, M. & García, L., (2016). Análisis sensorial y estimación
fisicoquímica de vida útil de una bebida tipo yogur a base de lactosuero
dulce fermentada con Estreptococcus Salivarius ssp. Thermophilus y
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2016. Vol.11, No.1 - 94•102. Recuperado el 26 de octubre de 2019 , de
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Marulanda, M., (2016). [PDF]. Análisis sensorial y estimación fisicoquímica de
vida útil de una bebida tipo yogur a base de lacto-suero dulce
fermentada con Estreptococcus Salivarius ssp. Thermophilus y
Lactobacillus Casei ssp. Casei. Producción + Limpia. Vol.11, No.1 -
94•102. Recuperado el 4 de noviembre de 2019 , de
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