EXTRACCION SOLIDO-LIQUIDO

Resumen. Por medio de aspectos prácticos de la extracción solido-líquido combinados con los ya vistos en
la extracción líquido-líquido, se determinó el contenido de vitamina A expresada en conjunto de
carotenoide, en particular el B-caroteno, en diferente tipos de frutas y hortaliza, específicamente en el
mango (Mangifera indica), obteniendo para esta muestra un total de 13.8 g/100g de carotenoides. A demás
se identificó la especie a cuantificar por medio del espectro Uv-vis donde se pudo observar similitudes entre
el espectro experimental y el teórico. Además se compararon las cantidades de carotenoides obtenidos por
los demás grupos en la práctica y las proporciones teóricas de los mismos.
INTRODUCCIÓN
La prevención de diversas enfermedades causadas por la degeneración de tejidos debida al oxígeno altamente
reactivo, los radicales libres y los componentes tóxicos del medio, que causan daños en los vasos sanguíneos y
en las células nerviosas, han llevado a la búsqueda e investigación de sustancias con alto potencial antioxidante,
como por ejemplo, los carotenoides, como por ejemplo, el B-caroteno (figura 1) o los diferentes tipos de
carotenoides. Las frutas son una excelente fuente de antioxidantes naturales; estas contienen diversos
componentes antioxidantes que proporcionan protección contra los dañinos radicales libres, y se han asociado
con una menor incidencia e índice de mortalidad por cáncer y enfermedades del corazón, además de otros
beneficios para la salud. Entre estos compuestos, los carotenoides constituyen un grupo importante en la dieta
humana pues, además de su actividad vitamínica, cumplen otras actividades biológicas, incluyendo la capacidad
antioxidante, el filtrado de la luz ultravioleta, la modulación de la función inmune, y la regulación de la
diferenciación y proliferación celular1. Unido a la propiedad antioxidante, los carotenoides pueden ser utilizados
como pigmentos naturales, ya que son los responsables de los colores naranja, amarillo y rojo en los alimentos;
ejemplo de ellos es la utilización del achiote y de la páprika en la industria alimentaria. Colombia es uno de los
países con mayor variedad de frutas en el mundo. Su diversidad geográfica, con todas las clases de suelos y
climas, permite que 51.220 especies de plantas florezcan, el segundo lugar en número después de Brasil. Al menos
150 frutas son originarias de Colombia y más de 50 son frutas aclimatadas procedentes de África, Asia, Eurasia
y Australia. Por lo cual, evaluar el contenido de carotenoides en frutas que sean producidas en el terrario permitiría
contemplar el mejoramiento del cultivo y producción de estos2.

Figura 1. Estructura molecular de B-caroteno

La extracción solido-liquido es una técnica bastante utilizada para la extracción de este tipo de compuestos, la
cual consiste en la disolución de un componente (o grupo de componentes) que forman parte de un sólido
empelando un disolvente adecuado en el que es insoluble el resto del sólido. La extracción siempre tiene lugar en
dos etapas:
1. Contacto del disolvente con el sólido a tratar para disolver el componente soluble.
2. Separación de la disolución y el resto del sólido.
Los métodos tradicionales de extracción solido-liquido requieren altos tiempos de residencia y grandes cantidades
de solvente. Por lo cual, actualmente se han desarrollado otros métodos de extracción como: la extracción asistida
por ultrasonido, microondas, solventes acelerado o fluidos supercríticos. Estos procesos acortan el tiempo de
extracción, disminuyen el consumo de solvente, aumenta el rendimiento de la extracción y, en general, mejoran
la calidad del extracto, por lo cual deberían tenerse en cuenta para llevar a cabo en prácticas de laboratorio futuras3.
RESULTADOS Y ANALISIS
Para la extracción del caroteno (provitamina A), se trabajó con una muestra de mango (Mangifera indica), la cual
se estima un contenido teórico de 0,445mg/100g de muestra. El proceso para la extracción consistió inicialmente
en macerar la muestra de mango con acetona siendo este primer paso la extracción solido- liquido, el objetivo
deseado es que las moléculas presente en el mango puedan extraerse unas a la parte acuosa y otras a la fase
orgánica, ya que los carotenoides son compuestos denominados tertrapenos debido a que poseen 40 átomos de
carbono constituido de una cadena larga central de dobles enlaces conjugados (figura 1). La separación del β-
caroteno y la mezcla de otros carotenoides se basa en la polaridad del estos compuesto, siendo estos compuestos
no polares, solubles en disolventes como éter y hexano. Sin embargo, para que su extracción sea completa, el
primer paso (la trituración) se es necesario que, además de disolver los pigmentos, sean solubles en agua, por lo
cual se es conveniente usar solventes como la acetona o alcohol etílico, ya que gran parte del peso fresco de los
tejidos vegetales corresponde al agua. Posteriormente, el extracto acetónico se mezcla con otros solventes como
el éter o benceno, los cuales permiten que se disuelven otros tipos de carotenos y xantofilas4.
Seguidamente ,se produce a filtrar para la obtención del extracto acetónico, el cual contiene los carotenoides
separados anteriormente e identificados por característicos del color amarillo, así que la extracción se realizó
hasta que la muestra perdiera la gran mayoría de su color, indicando así que la mayor cantidad de caroteno fue
transferida a la acetona. Con el extracto obtenido se preparó una solución 1,92μM, y con una alícuota de esta se
procedió a separar con éter etílico, el cual permite la extracción del caroteno a la fase orgánica, siendo este el
principio de la extracción liquido-liquido. Para determinar la cantidad extraída de carotenoides, se evaporo el
solvente por medio de una atmosfera inducida de He, debido a la inestabilidad de los analitos frente al oxígeno,
por este motivo tampoco se pudo secar en la estufa. Todo el proceso de extracción de los carotenoides se realizó
con los materiales de laboratorio envueltos en papel aluminio.
Con la obtención del sólido, se determinó la cantidad de carotenoides extraídos. La solución inicial contenía
1,034mg/L de carotenoides, de la esta se tomó un alícuota de 10mL, siendo el valor de carotenoides a extraer de
0,001034mg y el valor obtenido final fue de 13,8mg. Como se puede observar, la cantidad obtenida es demasiado
grande en comparación con la inicial, lo cual se atribuye a la presencia de éter, por tal motivo no se puede obtener
el % de extracción. Se debe tener cuenta la presencia de errores que afectan la extracción, como lo es la estabilidad
del compuesto debido a que los carotenoides son pigmentos estables en su ambiente natural, pero cuando los
alimentos se calientan, o cuando son extraídos en disolución en aceites o en disolventes orgánicos, se vuelven
mucho más lábiles y su inestabilidad se debe al hecho de que son compuestos altamente insaturados, degradándose
fundamentalmente debido a procesos oxidativos, ya que en contacto con oxígeno, se produce una degradación
oxidativa obteniéndose finalmente compuestos de bajo peso molecular similares a los que aparecen como
consecuencia de la oxidación de ácidos grasos. 5
 Figura 2. Espectro UV-vis experimental de diferentes carotenoides en muestra de mango (Mangifera indica)
Para la determinación del caroteno obtenido se realizó el análisis mediante UV-vis (figura 2), debido a que gran
parte de los carotenoides presentan sistemas conjugados en su estructura molecular (presencia de cromóforos).
Según la literatura, se reporta que el espectro visible de los carotenoides (figura 3) es bastante característico en el
rango de 400 a 500 nm. Se observa un máximo alrededor de 450 nm y generalmente se aprecian dos máximos u
hombros a cada lado y que, para un carotenoide específico dado, las posiciones de las bandas de máxima absorción
están en función del número de dobles enlaces conjugados presentes en la molécula5.

a b
 c
Figura 3. Espectro de absorción Uv-vis teórico, a) contenido de carotenoides totales en mango, b) todo-trans-
B-caroteno (línea negra) y del 15-cis B-caroteno (línea punteada), c) espectro general para los carotenoides
Al comparase espectros a de la figura 3 con el obtenido experimentalmente para la muestra de Mangifera , se
aprecia que el obtenido experimentalmente se encuentra en el rango característico estimado para este tipo de
carotenoides, y además presenta los dos máximos con hombros a los lados, comprobando que el compuesto
extraído efectivamente es un conjunto de carotenoides. Si comparamos el espectro obtenido experimentalmente
con un espectro reportado para la misma especie( figura 3, grafica a), se observa que las señales no difieren
significativamente a simple vista y presentan gran similitud, a diferencia de la cola que presenta el espectro
experimental, por lo cual se debe tener en cuenta que los espectros pueden variar dependiendo de la especie de
mango al cual se le haya realizado el análisis; por tal motivo, para la identificación del caroteno presente en la
muestra se compara con el espectro b presente en la figura 3, donde se puede observar que el espectro experimental
tiene similitud con el espectro del 15-cis- β caroteno, definiendo así que la extracción correspondió en una
proporción apreciable de este compuesto.
Contenido de B-caroteno en 100g
Grupo Fruta Teorico (mg) Experimenrtal (mg) (85.5% pureza)
1 Zanahoria 8.731 56,34
2 Uchuva 0,31
3 Zapote 0,36 0,31
4 Ciruela Amarilla 0,19 50,19
5 Mango 0,445 11,79

Tabla 1. Datos teóricos y experimentales para la obtención de B-caroteno en diferentes frutas7,8,9

Si observamos la tabla 1, la cantidad de B-caroteno que presentan diferentes estudios teóricos de algunas frutas
presentes en la región dan como resultado a una pequeña cantidad de este carotenoide donde el que presenta
mayor cantidad es la zanahoria, por lo cual es una fruta recomendable para su consumo por su gran aporte en este
antioxidante y para el estudio de este tipo de carotenoides. Observando los datos experimentales, estos varían en
gran parte con respecto a los datos teóricos, excepto el grupo 3 el cual su cantidad se aproxima mucho mas que
los otros grupos. Estos resultados pueden varían en errores conjuntos como lo son, poco cuidado al momento de
la filtración con lana de vidrio, ya que esta puede incrementar el peso de la muestra ya que pequeñas fibras pueden
caer sobre la muestra, presencia de solvente en el vial entre errores personales o falta de calibración de equipos o
instrumentos. Además se debe tener en cuenta que la mayoría de muestras no presentan una extracción total de
B-caroteno sino que es un conjunto de carotenoides los cuales dependen de la composición de las frutas.
CONCLUSIONES
 Se separó B-caroteno y diferentes carotenoides del mango de diferentes frutas portadoras de estos
compuestos por medio de los fundamentos básicos de la extraccion solido-liquido apoyada por técnicas
ya usadas en la extraccion liquido-liquido además del estudio de los compuestos obtenidos por medio del
espectro UV-vis.

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