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LABORATORIO BIOLOGÍA
IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS, PROTEÍNAS Y LÍPIDOS POR
REACCIONES QUÍMICAS, DE COLOR Y MICROSCOPIA DE LUZ.
ANYI MEDINA MEDINA; JOSE ACUÑA ANGULO; IVAN JAIMES
DOCENTE: CAROLINA ARANGO RIVAS
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INTRODUCCIÓN
Todos los organismos vivos poseen carbohidratos, proteínas, lípidos y ácidos nucleicos.
Estas moléculas son frecuentemente llamadas macromoléculas. Todas las macromoléculas
son polímeros sintetizados a partir de la unión de bloques estructurales (compuestos
orgánicos) más sencillos, denominados monómeros.
Los carbohidratos, lípidos, proteínas, pueden ser identificadas por una gran variedad de
pruebas químicas y físicas. En esta práctica se efectuarán algunas de estas pruebas químicas
para identificar carbohidratos y lípidos, en forma cualitativa.
OBJETIVOS
Objetivo general
Identificar carbohidratos, proteínas y lípidos presentes en muestras de orígenes vegetales y
animales a través de reacciones químicas y microscopía de luz, teniendo en cuenta las
reacciones que se producen cuando se mezcla cada muestra con los diferentes reactivos.
Objetivos específicos
Determinar en forma cualitativa la presencia de carbohidratos y lípidos a través de
reacciones químicas.
Identificar y reconocer la función de cada uno de los reactivos (Benedict, Biuret y
Sudan IV) a implementar.
Utilizar correctamente el microscopio óptico compuesto.
PROCEDIMIENTO
1. IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS
Azucares reductores.
Polisacáridos.
Se observó
Se observaron y Se dejó el tubo de
nuevamente y se
se anotaron los ensayo en reposo
anotaron los
cambios. hasta enfriamiento.
resultados.
En un tubo de
Se observaron y
ensayo se preparó Se agregaron 4
anotaron cambios
una solución acuosa gotas de lugol.
producidos.
de macerado de pan.
2. IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS.
Procedimiento 1
Procedimiento 2.
3. IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS.
4. MICROSCOPIA.
RESULTADOS Y ANÁLISIS
PRUEBA DE BENEDICT
Muchos monosacáridos, como la glucosa y la fructosa, y algunos disacáridos, son azúcares
reductores porque poseen un aldehído libre (no enlazado a los otros grupos en la molécula).
La Prueba de Benedict se usa para detectar la presencia de azúcares reductores porque el
reactivo de Benedict contiene cobre que se reduce en presencia de azúcares reductores.
Durante esta reacción el azúcar se oxida. La reacción antes mencionada se conoce como
una reacción oxidación-reducción (“REDOX”) porque la oxidación del azúcar sucede
simultáneamente con la reacción de reducción del cobre.
GLUCOSA:
Al ser esta una azúcar reductora no puede descomponerse en moléculas más pequeñas,
ya que es una azúcar simple. Al haber añadido a este 1 mL de solución Benedict, arrojó
un resultado positivo debido a que la reacción o prueba de Benedict puede identificar
azúcares reductores. En soluciones alcalinas puede reducir el Cu2+ que tiene color azul
claro a Cu+ que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo ladrillo.
A continuación se explica químicamente lo que ocurre en esta reacción:
LECHE:
La lactosa, tiene estructura química abierta necesaria para actuar como agente reductor.
Al haber añadido a este 1 mL de solución Benedict, arrojó un resultado positivo debido
a que la reacción o prueba de Benedict identifica azúcar reductores. En soluciones
alcalinas puede reducir el Cu2+ que tiene color azul claro a Cu+ que precipita de la
solución alcalina como Cu2O de color amarillo.
SACAROSA:
La sacarosa (azúcar con anillo química múltiples) es una azúcar no reductora, no
dan un resultado positivo con la solución Benedict puesto que sus OH anomericos
están siendo utilizados en el enlace glucosìdico.
2. DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE LA PRESENCIA DE ALMIDÓN:
Prueba de lugol
Color inicial Color durante el Color final Resultado
Tubo calentamiento
Almidón inicial más lugol. Almidón más lugol durante el Macerado de pan más lugol.
calentamiento.
El lugol es una solución que contiene yodo (I2) y yoduro de potasio (KI), que se utiliza para
detectar la presencia de almidón en alguna solución, alimento o en cualquier otro tipo de
muestra, dando un azul o morado intenso.
Esta solución interacciona con cadenas helicoidales largas de los polisacáridos. En este
caso el lugol es absorbido por la amilosa que es una cadena lineal (esta no es una reacción
química es la formación de un compuesto por inclusión).
La prueba resulto positiva para la yema de huevo, la clara de huevo, la leche y la gelatina,
con diferente tonalidad cada uno indicando el así la cantidad de proteínas presentes en cada
solución; dicha variedad en la coloración se observó debido a que la yema de huevo
contiene mayor proporción de proteína (globulina), seguida de la leche en la cual
encontramos una menor proporción de proteína (caseína) por lo que se observó una
coloración violeta, con la clara de huevo hubo un menor cambio en la coloración debido a
que tiene menor cantidad de proteína(Ovoalbúmina) y por último en la gelatina la cual es
una mezcla coloidal se observó un color ligeramente morado debido a la baja proporción
en proteínas.
El reactivo de biuret está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4),
junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4H4O6* 4 H2O). El reactivo, de color azul,
cambia a violeta debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+
y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma enlaces peptídicos en la
proteínas. El hidróxido de potasio no participa en la reacción, pero proporciona el medio
alcalino necesario para que tenga lugar.
Complejo formado
Esto se origina debido a que las proteínas con el gran tamaño de sus moléculas, forman
con el agua soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de
coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70°C o al ser tratadas con
soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un proceso
irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados, que al actuar
sobre la proteína la desordenan por la destrucción de su estructura terciaria y
cuaternaria.
COMPLEMENTO DE RESULTADOS
Sustancia Reactivo
Almidones Lugol
Azucares reductores Reactivo de Benedict
Proteínas Reactivo de Biuret
Lípidos Sudan
3. ¿Cuáles son los componentes del reactivo de Benedict?, ¿Que reacción se produce
cuando se calienta el tubo de ensayo que contiene la glucosa y el reactivo de
Benedict?, ¿Cual es la naturaleza del precipitado de color rojo ladrillo que se forma
en la reacción anterior?
Cuando se calentó el tubo que contenía la glucosa el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que
precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja. El fundamento de esta
reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico)
es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+.
Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido
cuproso (Cu2O).
4. ¿A qué se debe la desaparición del color violáceo de la solución de almidón
cuando se calienta el tubo hasta ebullición? ¿Por qué aparece nuevamente el color
cuando la anterior solución se enfría?
PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
Los animales recurren a las grasas, que son lípidos, porque éstas almacenan más del doble
de energía por unidad de masa; y además, son líquidas en las células, lo que las hace más
compatibles con los movimientos del cuerpo. En cambio los polisacáridos que constituyen
fuentes de energéticas para los seres vivos (Glucógeno) se pierden con facilidad ya sea en
el tratamiento culinario (ya que éstos constituyen las plantas) o en el proceso de
almacenamiento en nuestro cuerpo.
Azúcares reductores: son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo (grupo
funcional) intacto, y que a través del mismo pueden reaccionar como reductores con otras
moléculas. Todos los monosacáridos son azúcares reductores, ya que al menos tienen un -
OH hemiacetálico libre, por lo que dan positivo a la reacción con reactivo de Fehling, a la
reacción con reactivo de Tollens, a la Reacción de Maillard y la Reacción de Benedict.
Otras formas de decir que son reductores es decir que presentan equilibrio con la forma
abierta, presentan mutarrotación (cambio espontáneo entre las dos formas cicladas α (alfa)
y β (beta)), o decir que forma osazonas. Los azúcares reductores provocan la alteración de
las proteínas mediante la reacción de glucosilaciónno enzimática también denominada
reacción de Maillard o glicación, ejemplos: glucosa, fructosa, lactosa.
Azucares no reductores: son aquellos que se unen por enlaces glucosídicos de tipo Alfa o
Beta, cuando 2 monosacáridos iguales o diferentes se unen forman un Disacàrido, los
Disacàridos por condensación liberan una molécula de agua y son azúcares no reductores
ya que el grupo Oxidrilo ( OH ) de una hexosa se combina con el grupo Aldehído ( CHO )
de otra hexosa liberando 1 molécula de H20, el licor de Feeling no tiene efecto sobre ellos
lo cual los determina como azúcares no reductores, por ejemplo; sacarosa, maltosa.
4. Consulte que otros reactivos se pueden utilizar para identificar carbohidratos y
proteínas
Carbohidratos:
Proteínas:
CONCLUSIONES:
BIBLIOGRAFÍA.