Inhibición enzimática

María Aurora Martínez Trujillo

 Inhibidor
• Compuesto que interactúa con una
enzima provocando una disminución en la
velocidad de reacción.
• Naturales: control de las velocidades de
reacció en en el metabolismo.
• Artificiales: herramientas experimentales
que permiten conocer las reacciones
enzimáticas.
 Inhibidor
• Muchos compuestos tóxicos son
inhibidores, y se consideran tóxicos por
inhibir reacciones vitales ð antibióticos,
pesticidas, herbicidas, etc.
• Los inhibidores interactúan con una
enzima de diferentes maneras, y la
cinética enzimática es la mejor
herramienta para distinguir los tipos de
inhibición.
 Tipos de Inhibición…
• Reversibles
– Se ligan a la enzima mediante enlaces
débiles (como los de ES).
– La cantidad de inhibición depende de la
cantidad de enzima que se ha ligado al
inhibidor (equilibrio).
 Tipos de Inhibición…
• Irreversibles
– Conocidos también como inactivadores
enzimáticos.
– Se combinan con la enzima formando un
enlace fuerte, generalmente covalente.
– La enzima se deshabilita de manera
permanente.
– Desplazan la dependencia con el tiempo ð
el grado de inhibición se incrementa con el
tiempo que la enzima esté en contacto con el
inhibidor.
 Inhibición Competitiva (reversible)
• Inhibidor competitivo: compuesto que
tiene semejanza estructural y química con
el sustrato de la enzima ð compite con el
sustrato por el sitio activo de la enzima.
• La enzima no puede convertir el inhibidor
a producto ð el inhibidor bloquea el sitio
activo.
• Es una inhibición isostérica
Inhibición competitiva
Inhibición competitiva – cinética
Inhibición competitiva – cinética
• Ambas reacciones son muy rápidas y
reversibles ð existen en equilibrio.
• La posición del equilibrio dependerá de las
concentraciones de los reactantes
– ð a niveles muy altos de I todas las moléculas de
enzima se convetirán a EI (enzima completamente
inhibida).
– ð a concentraciones de substrato muy altas, toda la
enzima se convertirá al complejo ES (no hay
inhibición).
• Los inhibidores competitivos pierden su poder
inhibidor a altas concentraciones de sustrato.
Inhibición competitiva – Km y Vmáx
• Reducen la afinidad del complejo ES ð
incremento de Km.
• No disminuyen la velocidad de reacción a
altas concentraciones de sustrato ð no
cambian la Vmax.

Vmax [S ]
v0 =
æ [I ] ö
Kmç1 + ÷ + [S ]
è Ki ø
Inhibición competitiva
Lineweaver Burk
 Inhibición No Competitiva
(reversible)

• Inhibidor no competitivo: compuesto que

se une a la enzima en un sitio distinto al
del sustrato ð modifica la interacción de la
enzima con el sustrato por el sitio activo
de la enzima, impidiendo la liberación del
producto.
Inhibición no competitiva
Inhibición no competitiva – cinética
 Inhibición no competitiva
Km y Vmáx
• Este inhibidor no tiene efecto sobre la
forma en que la enzima se liga al
substrato ð Km no cambia.
• Hay mayor inhibición a altas
concentraciones de substrato ð Vmax
disminuye.
Vmax [S ]
v0 =
æ [I ] ö
Km + ç1 + ÷ * [S ]
è Ki ø
Inhibición no competitiva
Lineweaver Burk
 Inhibición mixta
• Es un tipo de inhibidor no competitivo que
afecta la afinidad de ES.
• Permite que el substrato se una, pero
reduce su afindad ð Km se incrementa.
• Causa inhibición a altas concentraciones
de substrato ð Vmax disminuye.
Vmax [S ]
v0 =
æ [I ] ö æ [I ] ö
Kmç1 + ÷ + [S ]çç1 + ' ÷÷
è Ki ø è Ki ø
Inhibición mixta – cinética
Inhibición mixta - Lineweaver Burk
Inhibición anticompetitiva
Inhibición anticompetitiva – cinética
• Un inhibidor anticompetitivo es inactivo a muy bajas
concentraciones de sustrato, cuando casi toda la enzima
está presente en forma libre.
• A altas concentraciones de sustrato, cuando la mayoría
de las moléculas de enzima están en el complejo ES, el
inhibidor es efectivo.
Vmax [S ]
æ [I ] ö
ç1 + ÷
è Ki ø
v0 =
Km
+ [S ]
æ [I ] ö
çç1 + ' ÷÷
è Ki ø
Inhibición anticompetitiva – cinética
 Inhibición anticompetitiva
Km y Vmáx
• Este inhibidor incrementa la cantidad de
sustrato que se liga a la enzima, dando un
aparente incremento en la afinidad ES ð
disminución de Km.
• Como el substrato debe ligarse primero a
la enzima, esta inhibición es efectiva a
altas concentraciones de sustrato ð
disminución de Vmax.
Inhibición anticompetitiva
Lineweaver Burk
En resumen…
 Inhibición por producto
• El producto se liga al sitio activo por los
mismos enlaces que lo hace el sustrato ð
reacción rápida y reversible.
• Las moléculas de producto se pueden
ligar a la enzima libre ð EP.
• S y P no se pueden ligar a E al mismo
tiempo ð P es un inhibidor competitivo.
• No se observa al inicio de la reacción (v0),
pero siempre sucede
 Inhibición por exceso de sustrato
• Un incremento en la concentración de
sustrato incrementa la velocidad de la
reacción enzimática.
• Grandes cantidades de sustrato pueden
tener el efecto contrario sobre la enzima,
disminuyendo la velocidad de reacción.
• Esta inhibición sucede cuando dos
moléculas de sustrato se ligan al sitio
activo al mismo tiempo.
Inhibición por exceso de sustrato
Cinética de la inhibición por exceso
de sustrato
Inhibición por exceso de sustrato –
Lineweaver Burk
 La constante de inhibición Ki
• Mide la afinidad de la enzima por el
inhibidor
• Es comparable con Km
– ↓ Afinidad, ↑Ki
– ↑ Afinidad, ↓Ki
La constante de inhibición Ki
1. Siempre sucede
2. No es posible con los
inhibidores
anticompetitivos
3. No es posible con
inhibidores competitivos
4. No es posible con los
inhibidores no
competitivos y
anticompetitivos
Un inhibidor no
competitivo sigue todas
las reacciones