TEHNICI

DE
SEPARARE
SI
CONCENTRARE
IN
BIOTEHNOLOGII
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 1
 EXTRACTIA
CU FLUIDE
SUPERCRITICE

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 2

Procese de separare

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 3

 ISTORIC
• Cunoscuta de 125 de ani (Hannay &
Hogarth, 1879 – The Royal Society of
London);
• Ignorata pana dupa cel de-al 2-lea razboi
mondial;
• Ia amploare dupa 1971 (Paul & Wise –
prevad aplicatii ulterioare in ind.
alimentara, farmacie, chimie fina);
• 1979 – prima instalatie ind. de extractie cu
CO2 SC – decafeinizarea cafelei (SUA).

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 4

 Starea supercritica
• Diagrama P-T P
(diagrama de faze)
ZONA
• Punct triplu: SUPER-
CRITICA
– coexista cele trei
stari: L, S, G
Pcr
Punct

• Punct critic:
critic
LICHID

– diferentele intre SOLID

L si G dispar
– proprietatile G Punct
GAZ

sunt identice cu triplu

proprietatile L Tcr
T
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 5
Starea supercritica

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 6

 Starea supercritica

• Menisc vizibil care • La cresterea T

separa faza lichida meniscul se
(jos) de faza gazoasa estompeaza
(sus)

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 7

 Starea supercritica

• Cresterea P si T duce • La Pcr si Tcr meniscul

la apropierea valorilor dispare, ρL = ρG;
ρL si ρG; meniscul este • Exista o singura faza
inca vizibil omogena, fluidul
supercritic (FSC)

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 8

 Starea supercritica

Doua faze distincte Distinctia intre faze O singura faza, cea de

lichid si gaz se estompeaza FLUID SUPERCRITIC

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 9

Starea supercritica

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 10

 Starea supercritica
• In comparatie cu solventii lichizi, fluidele
supercritice prezinta:
– difuzivitate ridicata; extractie rapida
– densitate scazuta; 
– viscozitate scazuta; separare usoara
a fazelor

• Sistemele supercritice combina calitatile L

si G, rezultand un fluid foarte “elastic”, un
solvent cu “geometrie variabila”.
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 11
 Starea supercritica
• Proprietati de transport (Hann, 1991):
Densitate Viscozitate Coef. de difuziune
Fluidul [kg/m3] [Pa.s] [m2/s]
Gaz: 0,1 MPa
288 – 303 K
0,1 - 2 (1-3).10-5 (0,1-0,4).10-4
FSC: Tcr, Pcr 200 - 500 (1-3).10-5 0,7.10-7
FSC: Tcr, 4Pcr 400 - 900 (3-9).10-5 0,2.10-7
Lichid: 0,1 MPa
288 – 303 K
600 - 1600 (0,2-3).10-3 (0,2-2).10-9

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 12

Parametrii critici ai unor posibili solventi

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 13

 Solventi recomandati
• Directiva EC 84/344/EEC:
– solventi de extractie acceptabili conform cu GMP

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 14

 Solventi supercritici
• Solventii cei mai utilizati:

Tcr Pcr ρcr

SOLVENTUL
[K] [MPa] [kg/m3]
282 5,03
ETENA 0,218
(9 °C) (~50 bari)

DIOXIDUL DE 304 7,38

0,468
CARBON (31 °C) (~73 bari)

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 15

 Solventi supercritici
• Avantajele etenei si dioxidului de carbon:
– Tcr apropiata de T ambianta;
– Pcr nu prea ridicata;
– solubilitatea ridicata a multor substante in
acesti doi solventi;
– selectivitate buna, care poate fi marita prin
adaos de agenti de antrenare;
– accesibili si cu pret de cost relativ mic;
– mai putin toxici si periculosi decat alti solventi.

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 16

 Regiune pentru utilizarea in industrie
a fluidelor supercritice

Zona
supercritica
Zona
subcritica
7,38
Presiune [MPa]

Punct critic

Solid Lichid

Gaz

Punct triplu

31,1
Temperatura [ºC]

Diagrama de faze a CO2 TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 17

 Zone optime de lucru cu CO2
• Obtinerea de extracte cu compozitii
variabile: modificarea puterii de solvatare
a CO2 (P, T, cosolvent, cond. de separare)
– Extractie totala: CO2 L sau SC la valori
ridicate;
– Extractie selectiva: CO2 G sau SC la valori
scazute;
– Extractie fractionata: CO2 SC la valori
succesive diferite de P si T.

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 21

Zone optime de lucru cu CO2
(Brennan, 1990)

EXTRACTII
TOTALE

FRAC-
TIONARE

EXTRACTII
AROME

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 22

Solubilitatea unor compusi in CO2 lichid la 298 K (Mc Hugh, 1986)

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 23

 Principii generale privind
solubilitatea in CO2 supercritic
• Puterea de solvatare a CO2 creste cu P
pana la valoarea coresp. CO2 lichid;
• Cu cresterea puterii de solvatare scade
selectivitatea;
• Sunt solubili:
– Compusii oxigenati si cei lipofili cu M mica si
medie (cetone, esteri, alcooli, eteri, aldehide,
lactone);
– Compusii polari cu M mica (acizi carboxilici)
M – masa moleculara
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 24
 Principii generale privind
solubilitatea in CO2 supercritic
• Intr-o familie de compusi, solubilitatea
scade cu cresterea M;
• Gruparile polare (-OH, -COOH, -NO2)
reduc solubilitatea substantelor in FSC;
• Glucidele si aminoacizii nu sunt solubili in
CO2 SC;
• Solubilitatea apei la 20 °C = 0,1%

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 25

 Principii generale privind
solubilitatea in CO2 supercritic
• Adaugarea unei mici
cantitati de compus
polar (metanol, apa,
etc.) in CO2 SC, duce
la solubilizarea
compusilor polari;
• Sol. Naproxen in CO2 SC la
333,1 K, cu adaus de 3,5% mol
cosolvent [Ting et al., 1993]

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 26

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 27
 Principii generale privind
solubilitatea in CO2 supercritic
• Solubilitatea creste cu
cresterea continutului
de cosolvent polar:
• Sol. Naproxen in CO2 SC la
333,1 K, cu adaus variabil de
etanol in calitate de cosolvent
[Ting et al., 1993]

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 28

 Principii generale privind
solubilitatea in CO2 supercritic
• Solubilitatea in FSC nu implica in mod
automat EXTRACTIBILITATEA din
matrice.
• EX:
– Cafeina este solubila in CO2 SC, dar acesta nu
poate extrage cafeina din boabe de cafea
uscate.
– Este necesara umezirea boabelor (modificarea
matricii).

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 29

Exemplu de matrice vegetala

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 30

 Principii generale privind
solubilitatea in CO2 supercritic

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 31

Solubilitatea in CO2
lichid si supercritic

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 32

Procedee de extractie supercritica
• Extractie cu contact unic
VENTIL DE LAMINARE
Gaz comprimat
+ solut

Alimentare Solut
amestec EXTRACTOR SEPARATOR

Gaz
comprimat
Reziduu
COMPRESOR

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 33

 Extractia cu contact unic
• unul sau mai multi componenti din amestec
se solubilizeaza selectiv in fluidul SC;
• timpul de solubilizare este variabil;
• sistemul este separat (modificand P si T);
• fluidul SC este comprimat si recirculat

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 34

Procedee de extractie supercritica
• Extractie multipla
VENTIL DE LAMINARE
Gaz comprimat
+ solut

Solut 1
SEPARATOR 1
Alimentare
amestec EXTRACTOR
SEPARATOR 2
Solut 2

Solut 3
SEPARATOR 3

Gaz
comprimat
Reziduu
COMPRESOR

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 35

 Extractia multipla
• se aplica atunci cand factorul de separare
are valori scazute (selectivitate mica de
separare)
• separarea componentilor extrasi:
– modificarea in trepte a cond. de extractie
– modificarea in trepte a cond. de separare

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 36

Procedee de extractie supercritica
• Extractie multipla in contracurent

Gaz comprimat

SEPARATOR
+ solut
comprimat
Gaz

COMPRESOR EXTRACTOR Solut

Alimentare
amestec
Reziduu
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 37
Extractia multipla in contracurent
• Proces similar extractiei L - L

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 38

Instalatii de extractie cu CO2 SC
Regim discontinuu

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 39

Instalatii de extractie cu CO2 SC
Regim continuu

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 40

Decafeinarea boabelor de cafea

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 41

Decafeinarea boabelor de cafea

THEOBROMINA CAFEINA

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 42

Decafeinarea boabelor de cafea

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 43

Instalatie de extractie a cafeinei
in mai multe trepte

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 44

 Imbogatirea etanolului
(eliminarea apei) cu CO2 SC

Separator
Ventil de
Amestec laminare
apa-etanol
dioxid de
Extractor

carbon
reciclat
Etanol

dioxid de
carbon

Rafinat
Compresor

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 45

Aplicatii industriale
(Hamei)

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 48

Aplicatii industriale

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 49

Aplicatii industriale

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 50

Instalatie de extractie cu CO2 SC
Capacitate: 2 x 400 L

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 51

Indepartarea colesterolului din
produse de origine animala

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 52

Instalatii industriale de extractie cu FSC

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 53

Instalatii industriale de extractie cu FSC

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 54

Extractorul pilot XTractorTM

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 55

Extractorul pilot XTractorTM

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 56

Extractorul industrial XTractorTM

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 57

Extractorul industrial XTractorTM

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 58

Extractie cu fluide
supercritice
IERBURI SI CONDIMENTE
Usturoi Scortisoara
Eucalipt Rozmarin Nucsoara
Patrunjel
Seminte de anason Ghimbir Cuisoare
Primula de seara Ceapa
Frunze de menta Cimbru
Busuioc Coriandru
Ulei de salvie
Seminte de telina Vanilie
Seminte de stafide Radacina de Kava

Piper negru
Musetel Galbenele
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 59
Extractie cu fluide
supercritice
ULEIURI SPECIALE
Seminte de struguri Seminte de stafide Seminte de dovleac
Ulei de germeni de grau Primula de seara Ulei de tarate de orez
Ulei de susan Ulei de ovaz

GRASIMI

ALTELE
Ceai decofeinizat Expandare tutun Cacao degresata
Cafea decofeinizata Impregnare Acoperiri
Hamei Coaja Fructe

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 60

 Prelucrarea hameiului
• Compozitia Celuloza & lignina 40%
tipica a Rasini ( &  acizi) 15%
hameiului uscat: Proteine 15%
Apa 10%
Cenusa 8%
Taninuri 4%
Grasimi & ceruri 3%
Pectine 2%
Monozaharide 2%
Uleiuri esentiale 1%
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 61
Solventi de extractie - HAMEI
1908 Etanol Anglia
1942 Diclorometan Germania
1960 Tricloroetan Germania
1961 Benzen Anglia
1965 Metanol Anglia
1970 Hexan USA
1980 CO2 Lichid Australia/UK
1982 CO2 Supercritic Germania

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 62

 Produse obtinute din hamei
formule anti-microbiene

molecule de arome si parfumuri

lupulone

humulene epoxide
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 63
 Produse obtinute din hamei
Polifenoli

OH OH

HO OH
HO O

O O
OH O

Xanthohumol 8-prenyl naringenin

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 64

 Extractie cu CO2 lichid - HAMEI
Coloane de extractie Preincalzitor
Recompresor

Racitor

Extract

Rezervor deCO2 CO2

Refrigerator

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 65

 Selectivitatea CO2 lichid
Lichid diclorometan etanol CO2 lichid

Alfa acizi 35-45% 30-40% 40-50%

Beta acizi 15-20% 10-15% 18-40%
Alte rasini moi 3-8% 3-8% 5-20%
Rasini tari 2-5% 2-10% Lipsa
Uleiuri volatile 1-3% 1-2% 2-8%
Grasimi si ceruri 1-2% Urme 0-5%
Taninuri Urme 1-5% Lipsa
Clorofila <1% Urme Lipsa
Saruri anorganice <1% 0.5-1% Urme
Solvent rezidual <1% 0.01-0.1% Lipsa
Apa Urme 1-5% 1-5%
Randament tipic 28% 38% 19%

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 66

Extractie cu CO2 supercritic - HAMEI
Ventil de laminare

Coloane de extractie

Schimbatoare
de caldura

Separatoare
Refrigerator
Extract Extract

Rezervor de CO2 CO2

Pompa

Schimbator de caldura
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 67
 Extracte din plante
Extracte si molecule antimicrobiene

abietic acid
COOH
co-lupulone
(Pine extract)
(Hop extract)
OH

carvacrol
(Origanum extract)
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 68
 Extracte si molecule antimicrobiene
• Cele mai multe sunt terpenoide din plante aromatice
• Utilizate curent in:
– extractia zaharului din sfecla si trestie - inlocuiesc
formaldehida si sulfitii
– producerea berii - inlocuiesc Nisinul
– conservarea alimentelor - inlocuiesc hidroxibenzoatii
– produse de igiena orala - inlocuiesc triclosanul
– furaje - inlocuiesc antibioticele
– biofouling

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 69

 Antidaunatori naturali

OH

(4aS,7S,7aR)-nepetalactone (cis,trans) O

(4aS,7S,7aR)-nepetalactol (cis,trans)

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 70

 Antidaunatori naturali
O

Tasmania lanceolata

Humulus lupulus
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 71
 Alte aplicatii ale fluidelor supercritice
• Inlocuirea solventilor utilizati in litografie
• Polimerizarea fluoropolimerilor (lubrifianti pentru
HDD) in CO2 SC;
• Hidrogenarea catalitica a CO2 SC  obtinerea
acidului formic:

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 72

 Alte aplicatii ale fluidelor supercritice
• Aditivi la polimeri: vopsirea textilelor, obtinerea
materialelor reflectorizante;
• Uscarea: obtinerea aerogelului de silice
– uscare fara
vaporizare
– fara expansie de
volum
– fara distrugerea
structurii

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 73

 Alte aplicatii ale fluidelor supercritice
• Inlocuirea solventilor potential cancerigeni din
curatatoriile chimice (dry cleaning) cu CO2 SC;
• Cromatografia cu FSC:
– rezolutie inalta
– sensibilitate ridicata
– lucru la temperatura mai coborata decat in HPLC sau
GC

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 74

Alte aplicatii ale fluidelor supercritice
• Distrugerea
reziduurilor organice
prin oxidare in apa
supercritica
• Apa in stare
supercritica:
– densitatea, constanta
dielectrica si
solubilitatea
anorganicelor SCAD
– solubilitatea hidro-
carburilor CRESTE

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 75

Curbe densitate – presiune pentru apa

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 76

 Alte aplicatii ale fluidelor supercritice
• La T > 550 °C, comp. organici toxici sunt
miscibili cu apa, la fel si O2 si H2O2;
• La T > 550 °C, majoritatea comp. anorganici
sunt insolubili;

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 77

 Alte aplicatii ale fluidelor supercritice
• Gazeificarea biomasei cu apa supercritica
– componentele biomasei (celuloza, amidon,
lignina), se dizolva si se scindeaza in apa SC;
– in conditii corespunzatoare (~ 600 °C, ~ 35
MPa), gazeificarea este completa;
– Produsii principali ai gazeificarii sunt:
H2, CH4, CO2.

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 78

Alte aplicatii ale fluidelor supercritice

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 79

 Alte aplicatii ale fluidelor supercritice
• In conditii mai blande, “aproape critice” (300 – 350
°C; 15 – 20 MPa), are loc lichefierea biomasei;
• Biomasa lichefiata = titei din biomasa;
• In conditii corespunzatoare se pot forma zaharuri,
acizi organici,
alte produse
valoroase.

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 80

Alte aplicatii ale fluidelor supercritice

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 81

 Alte aplicatii ale fluidelor supercritice
• Expansiunea Rapida a Solutiilor
SuperCritice (ERSSC);
• Procese de Cristalizare Gaz Antisolvent
(CGAS) si Solvent AntiSolvent (CSAS);
• Separarea Particulelor din Solutii
Suprasaturate (SPSS).

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 82

 Aplicatii ale ERSSC, CGAS, CSAS
• Microincapsularea aromelor si parfumurilor
(volatile, termolabile, sensibile la oxidare,
scumpe)
– eliberarea aromelor in timpul prepararii hranei cu
microunde;
– protejarea aspartamului in timpul gatirii;
– protectia la oxidare a uleiurilor si esentelor;
– mascarea gustului de KCl;
– reducerea amestecarii aromelor;
– produse finite necontaminate cu solvent;
– comp. active nu se degradeaza ca la uscarea prin
atomizare

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 89

 Aplicatii ale ERSSC, CGAS, CSAS
• Aplicatii farmaceutice:
– medicamentele sub forma de aerosoli necesita
particule uniforme, de mici dimensiuni;
– este necesara
obtinerea de pro-
duse sterile;
– CO2 inlocuieste
conditiile aseptice
asigurate cu eter
etilic.

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 90

 CONCLUZII
• Fluidele supercritice au proprietati unice:
– difuzivitate ridicata;
– tensiune superficiala scazuta;
– constanta dielectrica joasa;
– densitate continuu variabila.
• Sunt neinflamabile, netoxice, ieftine, nu necesita
conditii speciale de depozitare;
• Reprezinta o alternativa “verde” pentru solventii
clasici in:
– curatire
– extractie
– sinteza
TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 94
 CONCLUZII
• Fluidele supercritice permit fabricarea unor
materiale special structurate, care nu pot fi
obtinute prin metode conventionale;
• Deschid noi drumuri in procesele de:
– extractie
– separare cromatografica
– eliminare a deseurilor toxice.

TEHNICI DE SEPARARE © Lucian GAVRILA 95