Manual de uso de equipos: Autoclave LAC-5060S

Laboratorio de Bioquímica Versión: 1

Elaborado por: Revisado por: Fecha de revisión:
Juan David Londoño M. César Alonso Godoy V. ?

1. INTRODUCCIÓN

La autoclave es un equipo usado rutinariamente en laboratorios de microbiología y biología

molecular, se emplea principalmente para la correcta esterilización de medios de crecimiento
y materiales de trabajo. El proceso de autoclavado consta principalmente de un calentamiento
por encima de los 100 °C a alta presión, de esta manera los medios de cultivo que son
generalmente acuosos no se evaporan. Siempre es importante realizar este tipo de
procedimientos al momento de trabajar con células, para así evitar contaminaciones por otros
organismos en el ambiente o por esporas.

2. COMPONENTES DEL EQUIPO

A continuación, se muestra el equipo de manera general:

Figura 1. Autoclave LAC5060S.

1
2.1 Controlador principal

Figura 2. Controlador del equipo.

El controlador consta de los siguientes comandos:

1. PV (valor del proceso) display de LEDS, muestra la

temperatura actual del equipo.
2. SV (establecer valor) display de LEDS, muestra el valor
de temperatura a establecer o tiempo restante para el final
del proceso.
3. Bombilla indicadora de inicio, titila al iniciar el proceso.
4. Indicador de alejamiento, brilla cuando el horno está
encendido, titila durante la operación.
5. Indicador del temporizador, brilla cuando el usuario
establece el tiempo. Titila cuando se ha presionado iniciar
y la temperatura PV alcanza la SV, luego se apaga.
6. Indicador de auto-ajuste, titila durante el auto ajuste.
7. Botón de iniciar/parar, inicia o suspende la operación.

8. Botón de modo, se oprime para modificar parámetros de

tiempo y temperatura.
9. Botón de desplazamiento a la izquierda.

10. Botón de desplazamiento a la derecha.

11. Botón de desplazamiento hacia arriba, cambia valores
de a 1 incremento.
12. Botón de auto-ajuste, establece temperatura y tiempo
de manera alternativa, deje presionado para iniciar el auto-
ajuste.
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La presión máxima de operación es 2.2 kgf/cm2, asegúrese de que el indicador de presión
señale 0 kgf/cm2 cada vez que abra la compuerta. A continuación, se describen los rangos de
presión de acuerdo al indicador del equipo y su respectiva función.

Tabla 1. Rangos de presión, función y precauciones.

Presión 0 ~ 1.0 kgf/cm2 1.0 ~ 2.5 kgf/cm2 > 2.5 kgf/cm2

Presión de Presión de
Rango Peligro
precalentado esterilización

Color Zona amarilla Zona verde Zona roja

Se incrementa
presión y
Por encima de este
temperatura hasta Aquí, la temperatura
valor, el vapor
alcanzar los está entre 121°C y
Característica puede escapar y
parámetros 135 °C para la
explotar alrededor
establecidos para el esterilización.
de la compuerta.
ciclo de
esterilización.
Presione STOP para
detener el
calentamiento y el
aumento de presión.
Abra la válvula de
liberación de
Acción No esterilización Esterilización
presión lentamente.
No apague el
equipo. Deje que la
presión baje a 0
kgf/cm2 y que el
equipo se atempere.

Figura 3. Válvula de drenaje y salida de vapor. Instale

en la salida de vapor, antes de iniciar, una manguera
resistente al calor. Aquí el vapor es liberado para regular
la presión dentro del equipo. Al finalizar la utilización
del equipo, conecte otra manguera a la válvula de
drenaje para extraer toda el agua residual. No abra la
válvua de drenaje sin que la presión se encuentre en
0 kgf/cm2.

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3. PROCESO DE AUTOCLAVADO

 Antes de iniciar, debe haber recibido una breve inducción del laboratorista encargado o
del docente. Recuerde registrarse en la bitácora del equipo, anotar cualquier
inconsistencia que observe previo al uso o después de usado.
 Abra la compuerta del equipo y proceda a adicionar el agua destilada a la cámara (~6.5
L), de tal manera que el agua cubra la resistencia que se observa al fondo. Esto lo debe
realizar con la válvula de drenaje cerrada. Adapte una manguera resistente al calor en la
salida de vapor del equipo que desemboque en un recipiente grande también resistente al
calor.
 Disponga del material y medios a esterilizar dentro de las canastas metálicas, medios de
cultivos en la parte inferior y materiales en la parte superior. Recuerde que los medios
líquidos alcanzan hasta el doble del volumen original durante la esterilización, cerciórese
de utilizar los contenedores adecuados. Los recipientes con medio de cultivo deben estar
a medio cerrar, al igual que todos los materiales con tapa; coloque un poco de cinta de
autoclavado en la superficie de cada objeto para verificar el proceso.
 Cierre la compuerta y conecte el equipo, éste debe ser conectado solamente en los
enchufes de corriente destinados para ello. La autoclave indica si la compuerta ha
quedado mal cerrada poniendo “OPEN” en la pantalla del controlador principal, si la
compuerta está debidamente cerrada se mostrarán unos ceros.
 Proceda a establecer el ciclo de esterilización que requiera, el equipo ya viene
configurado previamente para realizar 30 minutos de autoclavado a 121 °C. Si requiere
cambiar estos parámetros, oprima el botón “mode” y aparecerá en la pantalla del
controlador principal “TEMP”, con los botones desplazamiento modifique la temperatura
de esterilización (no por encima de 121°C). Para modificar el tiempo del ciclo, vuelva a
oprimir “mode” y aparecerá “TIME” en la pantalla del controlador principal, modifique
los tiempos con los botones de desplazamiento (máximo 59 minutos con 59 segundos).
 Una vez establecidos los parámetros del ciclo de esterilización, se procede a iniciarlo.
Presione el botón “START/STOP” para comenzar. El temporizador empieza la cuenta
regresiva una vez el equipo haya alcanzado la temperatura establecida, demora
aproximadamente 30 minutos calentando y otros 30 minutos enfriando, para un ciclo de
30 minutos todo el proceso dura aproximadamente 90 minutos. Aléjese y evite el contacto
físico con la superficie metálica del equipo, se calienta bastante durante su
funcionamiento, recuerde estar revisando el indicador de presión con regularidad.
 Una vez terminado el ciclo de esterilización, aparecerá en la pantalla del controlador
principal “END”, presione el botón “START/STOP”, verifique que la presión se
encuentre en 0 kgf/cm2 y abra la compuerta del equipo con precaución (No coloque
ninguna parte del cuerpo de frente con la compuerta, sale vapor caliente, evite
quemaduras. Recuerde usar guantes térmicos).
 Compruebe el indicador de la cinta de autoclavado, si es oscura el proceso fue exitoso,
de lo contrario se repite el ciclo. Cierre completa e inmediatamente los recipientes con
medios de cultivo, traslade el material esterilizado a donde se requiera. Apague el equipo.
 Cierre la compuerta, adapte la manguera de la salida de vapor a la válvula de drenaje y
ábrala. Drene toda el agua del equipo y descártela si no se empleará más. Una vez hecho
esto vuelva a abrir la compuerta, deje enfriar y seque el equipo. Cierre el equipo hasta
próximo uso.