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UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER

Facultad de Ciencias de la Salud


Escuela Académica Profesional de Farmacia y Bioquímica

Estudio fitoquímico y preliminar del extracto hidroalcohólico


de hojas de la Guanábana
(Annona muricata L.)

PROFESORA:
 Q.F. Maribel Verónica Rodríguez Vila

INTEGRANTES:
 CARDENAS SALCEDO DORITA.
 CARLOS DIAZ HOSMER BRAGNER.
 HUAMAN HUAYLLANI, LUIS. A
 LAZO ABAD, CLAUDIA.
 MARQUINA SIMON, JEAN CARLOS.

SECCIÓN:
 FB5N1

LIMA – PERÚ
2019
RESUMEN

La guanábana (Annona muricata L.) es una fruta de la familia Annonaceae que


posee diversas propiedades nutricionales y actividad antioxidante, las semillas son
consideradas un residuo sin utilidad, por lo cual, se ha analizado su composición
fitoquímica para la detección de moléculas con promisoria aplicación a nivel
farmacológico.

Se realizó un estudio fitoquímico preliminar para la detección de


metabolitos secundarios. El análisis Fitoquímico del extracto etanólico de las
hojas de la A. muricata se detectaron carbohidratos, alcaloides, flavonoides,
aminoácidos, lactonas.

El extracto etanólico de la especie en estudio posee gran diversidad de


moléculas con posibles efectos farmacológicos, por lo cual, es importante
continuar la profundización en este tipo de estudios.

Palabras claves: extracto etanolico, análisis fitoquimico, annona muricata.

SUMMARY

Soursop (Annona muricata L.) is a fruit of the Annonaceae family that has various
nutritional properties and antioxidant activity, the seeds are considered a waste
without utility, so its phytochemical composition has been analyzed for the detection
of promising molecules Pharmacological application.

A preliminary phytochemical study was performed for the detection of secondary


metabolites. Phytochemical analysis of the ethanolic extract from the leaves of A.
muricata detected carbohydrates, alkaloids, flavonoids, amino acids, lactones.

The ethanolic extract of the species under study has a great diversity of molecules
with possible pharmacological effects, so it is important to continue deepening in this
type of studies.

Keywords: ethanol extract, phytochemical analysis, annona muricata.


ÍNDICE

RESUMEN

SUMMARY

INDICE

INTRODUCCIÓN

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

JUSTIFICACIÓN

OBJETIVOS GENERALES

OBJETIVOS ESPECIFICOS

I. MARCO TEORICO

1.1. Antecedentes Nacionales

1.2. Antecedentes Internacionales

1.3. DESCRIPCION BOTANICA

1.3.1. Características Generales

1.3.2. Clasificación general de los nutraceúticos

1.3.3. Características de la familia Annonaceae

 Origen, extensión
 Taxonomía

1.3.3.1 Distribución geográfica de la “Annona Muricata L.”

1.3.3.2 Distribución geográfica en el Perú de la “Annona Muricata L.”

1.3.3.3. Uso medicinal de la “Annona Muricata L

1.4. DESCRIPCION QUIMICA

1.4.1. Componentes químicos de las Hojas de Annona muricata

1.4.2. Acciones farmacológicas

II. DESARROLLO EXPERIMENTAL

2.1. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS UTILIZADOS

2.2. METODOLOGÍA Y PROCEDIMIENTO

2.2.1. Ubicación y recolección de la muestra

2.2.2. Preparación de la muestra

III. RESULTADOS EXPERIMENTALES

3.1 DETERMINACIÓN DE SOLUBILIDAD


3.2 IDENTIFICACIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS Y ANALISIS CROMATOGRAFICO

3.2.1 Identificación de Alcaloides

3.2.1.1. Extracción de alcaloides con un solvente orgánico polar en medio básico

3.2.1.2. Reacción de caracterización de los alcaloides.

3.2.2. Identificación de Flavonoides

3.2.3. Identificación de Proteínas y aminoácidos

3.2.4. Identificación de Lactonas

3.2.5. Pruebas generales para Lactonas Sesquiterpénicas y Lactonas Insaturadas

IV. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

V. CONCLUSIONES

VI. RECOMENDACIONES

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS


INTRODUCCIÓN

La guanábana Annona muricata L. pertenece a la familia Annonaceae y es originaria


de América, posiblemente de las Antillas (Hoyos, 1994).

Su etimología procede del arawak wanabán (Tierra Americana, 1999), Annona del
nombre taíno anona, y muricata del latín, en el que significa erizado, por el aspecto
espinoso de la cáscara.

Su importancia económica como árbol frutal ha crecido para proyectarse en la


industria de la perfumería y farmacología, donde se aprovechan también las hojas
y las semillas.

Las hojas y las semillas tienen usos en medicina tradicional por su capacidad
antitumoral, parasiticida y antidiarreica (Bories et al., 1991; Santos Pimenta et al.,
2003). Recientemente, las propiedades anticancerígenas de la guanábana Annona
muricata (Arroyo et al., 2005) aumentan el interés esta fruta muy apreciada ya por
sus atributos sensoriales en numerosas preparaciones tradicionales, desde el
batido de fruta, jugos, helados y conservas, hasta elaborados postres tales como el
merengón (Hoyos, 1994; Scannone, 2005).

En la Tabla de Composición de Alimentos (INN, 2001) se reportan los siguientes


valores nutritivos para 100g de la parte comestible de la guanábana: 63 calorías;
83,1g agua; 1,0g proteína; 0,4g grasa; 14,9g carbohidratos totales; 0,6g cenizas;
2mg Ca; 0,13mg Cu; 28mg P; 0,5mg Fe; 20mg Mg; 275mg K; 14mg Na; 0,34mg Zn;
y las vitaminas tiamina (0,07mg); riboflavina (0,05mg); niacina (0,9mg); B6 (0,06mg);
ácido ascórbico (26mg).

También señalan que hay diversos estudios sobre anonacina, el compuesto de la


guanábana que tendría efectos anticancerosos, y que esos estudios fueron
realizados in vitro o in vivo en animales, pero que no existe aún ningún estudio
clínico, en humanos. El motivo citado para la falta de estudios clínicos en humanos
es que no se puede patentar una planta, lo que lleva a los laboratorios a concentrar
las investigaciones en los principios activos, acetogeninas anonáceas, en vez de la
planta.
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA:

En nuestro país existen distintas plantas que no han podido ser estudiadas a
profundidad, por ello, se necesita saber que componentes químicos son los que
realizan la reacción farmacológica para que se pueda dar una correcta utilidad.

Dado nuestro punto de vista, nos hacemos la siguiente pregunta:

¿Qué metabolitos secundarios se pueden llegar a encontrar en el extracto


hidroalcohólico del Annona muricata L. más conocido como Guanábana?

JUSTIFICACIÓN:

Éste trabajo de investigación será de gran beneficio para todo profesional de salud
o para cualquier persona que deseé realizar una investigación, ya que incluirá los
distintos métodos que tuvimos que realizar en el laboratorio; con el fin de poder
identificar cuáles son los metabolitos secundarios que tiene nuestro extracto
hidroalcohólico del (Annona muricata L.).

Además, con nuestra investigación, ayudaremos a complementar estudios


realizados anteriormente y a reforzar las siguientes indagaciones futuras para que
exista una mejor explicación con respecto al tema.

OBJETIVOS GENERALES:

 Determinar e identificar que metabolitos fitoquimicos se logran obtener en el


extracto hidroalcohólico de las hojas de Annona muricata L (Guanabana)
 Obtención del extracto hidroalcohólico por medio del proceso de maceración.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

 Recolectar y seleccionar las hojas frescas de la (Annona Muricata L)


guanábana
 Realizar el extracto a partir de las hojas “Annona muricata L” (Guanabana).
 Identificar que alcaloides se encuentran en el extracto mediante las pruebas
de extracción ácida y extracción alcalina por agotamiento.
 Identificar carbohidratos por medio de métodos cromatográficos.
 Reconocer alcaloides por medio de la prueba de determinación de la
solubilidad.
 Reconocer flavonoides por medio de pruebas de laboratorio.

I. MARCO TEÓRICO:

1.1 ANTECEDENTES NACIONALES

 Pacahuala y Quispe (2012)1 La “Evaluación del efecto del secado en los


compuestos fenólicos y capacidad antioxidante de la guanábana (Annona
muricata)” para lo cual caracterización la pulpa de guanábana teniendo
proteínas 1.00%, carbohidratos 13.80%, cenizas 0.60%, grasa 0.40%,
fibra 1.10% y humedad 83.10%, expresados en base húmeda y el
contenido de compuestos fenólicos totales para los tratamientos 40, 50 y
60° C fue de 469.01; 410.47 y 537.00 mg AGE/g.m (b.h) respectivamente
y la capacidad antioxidante de 48.1485; 56.6328 y 78.6242 μMol Trolox
Equivalente/g.m. (b.h). El tratamiento más adecuado fue secando la
muestra a 60° C, 40 que nos dio valores de cuantificación de compuestos
fenólicos totales y capacidad antioxidante altos.
 González, B. (2010)2 investigo la Capacidad antioxidante de frutas
tropicales Anacardium occidentale, 39 Manilkara zapota, Annona
muricata, determinando el orden que siguieron las frutas con respecto a
su potencial antioxidante fue caujil>guanábana>níspero, donde la
capacidad antioxidante total equivalente a trolox fue de 12,57; 6,90 y
2,91KmolET/g. El mayor porcentaje de actividad antioxidante en la
fracción lipídica fue en caujil, y en la fracción hidrofílica se halló en
guanábana. Por otra parte, la actividad antioxidante equivalente a ácido
ascórbico fue de 126,87; 74,24; 45,07 mg/100g caujil, guanábana y
níspero respectivamente.
 Quispe, A. et al. (2007)3 Sociedad Científica de San Fernando. Lima,
Perú., Efecto citotóxico de Annona muricata L. en cultivo de líneas
celulares de adenocarcinoma gástrico y pulmonar. Determinaron la
actividad antitumoral del extracto etanólico de hojas de Annona muricata
L. “invitro” se midió la actividad citotóxica de Annona muricata L. en líneas
celulares C- 678, H-460 y VERO. El extracto etanólico de hojas de Annona
muricata L. mostró tener efecto citotóxico sobre las líneas tumorales C678
y H460. Las concentraciones de extracto etanólico utilizadas parecen ser
más citotóxicas que las concentraciones homólogas de 5-Fluoracill.

 Arroyo, J.et al. (2005)4, Actividad Citotóxica in vitro de la mezcla de


Annona muricata L. y Krameria lappacea sobre células cancerosas de
glándula mamaria, pulmón y sistema nervioso. Determinó que las
fracciones 7 a 17 procedentes de la asociación de Annona más Krameria
de la cromatografía en columna mostraron eficacia antitumoral frente al
cultivo celular de células cancerosas de glándula mamaria (MCF-7),
células cancerosas de pulmón (H-460) y células cancerosas del sistema
nervioso (SF-268)
 Palomino C; (20075)5, El estudio titulado “Efecto del extracto etanólico
de hojas de Annona muricata L (guanábana) sobre la hiperglicemia
inducida con aloxano en ratas. El objetivo del estudio fue demostrar el
efecto hipoglicemiante del extracto etanólico de hojas de A. muricata
(EEA) en ratas. Los animales fueron divididos en 5 grupos: Grupo A (ratas
diabéticas), Grupo B (ratas diabéticas+recibieron 200mg/kg de EEA),
grupo C (ratas diabéticas+ recibieron 400mg/kg de EEA), grupo D (ratas
diabéticas + recibieron 600mg/kg de EEA) y grupo E (ratas diabéticas+
5mg/kg de glibenclamida). La conclusión mostro que los animales que
recibieron dosis de 200mg/kg EEAM tuvo un mejor efecto
hipoglicemiante.

1.2 ANTECEDENTENTES INTERNACIONALES


 Correa, G.; Ortiz, D.; Larrahondo, J.; Sanchez, M. y Pachon, H. (2012)6
“Actividad antioxidante en guanábana (Annona muricata l.): una revisión
bibliográfica”; se revisó las principales investigaciones relacionadas con el
estudio de la capacidad antioxidante de la guanábana y los compuestos
presentes que le otorgan dicha propiedad. A partir del análisis de catorce
investigaciones halladas sobre el tema, se encontró que en la mayoría de los
casos la guanábana no contiene concentraciones elevadas de actividad o
compuestos 33 antioxidantes en su pulpa fresca o congelada comparada con
frutos de mayor consumo en Colombia. Sus hojas, al igual que sus jugos y
vinos, no contienen concentraciones elevadas de actividad o compuestos
antioxidantes. Sin embargo, el tema de investigación de compuestos
antioxidantes en guanábana se ha realizado con poca profundidad, hace falta
estudios adicionales con métodos que logren la identificación de los
mecanismos de acción de los compuestos presentes.
 Barahona (2013)7 en la investigación “Evaluación de la actividad
antioxidante y valor nutracéutico de las hojas y frutos de la guanábana
(Annona muricata)” uso como metodología experimental el ensayo de la
capacidad antioxidante según el método enzimático de inhibición de la
polifenoloxidasa y el análisis bromatológico tanto de las hojas y frutos de la
guanábana recolectados en el Recinto la Maravilla de la Provincia de Los
Ríos, para el estudio se realizó en diferentes concentraciones de los
extractos siendo estos 1000 μg/mL, 100 μg/mL y 10 μg/mL. Los resultados
se expresaron en porcentajes de inhibición y con la ayuda de métodos
estadísticos ANOVA y 34 Tukey se comprobó al menos uno de los extractos
presentan diferente actividad antioxidante. En el caso de los extractos de las
hojas el porcentaje de inhibición es de aproximadamente 75 % en la fracción
alcohólica, mientras que en la fracción acuosa es del aproximado del 35 %.
En el extracto de los frutos (pulpa) su actividad antioxidante es del 79% para
la fracción acuosa y del 82% para la fracción alcohólica. En el valor nutritivo
del fruto, destaca su contenido de Proteína (1,1%) y minerales (0,75), el de
la hoja destaca el alto contenido de proteína (3,92), fibra (4,34)
concluyéndose que las hojas y frutos de la guanábana presentan actividad
antioxidante y propiedades nutracéutica.
 Vit, P.; Santiago, B. y Pérez-Pérez, E. (2014)8 en la investigacion la
“Composición química y actividad antioxidante de pulpa, hoja y semilla de
guanábana Annona muricata L” en él se comparó la composición proximal y
la actividad antioxidante de la pulpa, las hojas frescas y secas, y las semillas
de la guanábana. Los mayores contenidos de proteínas (14,77g/100g) y de
grasa (25,75g/100g) se encontraron en las semillas. La pulpa mostró el
mayor contenido de humedad (86,32g/100g) y las hojas secas el mayor
contenido de cenizas (7,17g/100g). La actividad antioxidante de las
fracciones 35 estudiadas fue mayor en extractos etanólicos que en extractos
metanólicos, al igual que el contenido de flavonoides y polifenoles. Los
mayores valores de actividad antioxidante en los extractos etanólicos fueron
de 306,0; 280,2 y 131,2μmol equivalentes Trolox/100g en la pulpa, hojas
secas y semillas respectivamente. La pulpa de guanábana presentó el mayor
contenido de flavonoides (574,0mg EQ/100g) y de polifenoles (941,4mg
EAG/100g)
 Chang, F. et al (2003)9, New adjacent Bistetrahydrofuran Annonaceous
Acetogenins from Annona muricata L. Determinó la Citotoxicidad in vitro en
células de hepatoma humano, líneas Hep G2 y 2,2 Annocatacina A,
Annocatacina B,15 de los principios activos aislados de las hojas y semillas
de Annona muricata L. obteniéndose un efecto citotóxico significativo.
 Zeng, L. et al (1996)10, Five new Monotetrahydrofuran ring Acetogenins from
the leaves of Annona muricata L. Evaluó la citotoxicidad in vitro en cultivo de
líneas celulares de carcinoma de páncreas (PACA-2), pulmón (A-549) y colon
(HT-29), con annopentocinas A, B, C; Cis- y trans-annomuricina-D aisladas
de las hojas de Annona muricata L. Annopentocina A fue selectivamente
citotóxica sobre las células de carcinoma pancreático (PACA-2),
Annopentocina B y C fueron selectivamente citotóxicas sobre células de
carcinoma de pulmón (A-549). La mezcla de cis- y trans-annomuricina-D fue
selectivamente citotóxica sobre las células de pulmón (A-549), colon (HT-29)
y páncreas (PACA-2) con potencias iguales o superiores a Adriamicina.

1.2 DESCRIPCIÓN BOTÁNICA:

1.3.1. CARACTERÍSTICAS GENERALES:

Se trata de un pequeño árbol perenne, perteneciente a la familia de las Annonáceas,


caracterizado por presentar una altura cercana a los 6-8 metros hasta 10. Su tronco
es recto, de corteza lisa y color grisáceo, ramifica a baja altura siendo el ramaje
intenso con ramas delgadas y grisáceas o pardeo grisácea. Su sistema radicular
extensivo le permite soportar períodos relativamente largos de sequía, ya que
explora y cubre una amplia franja de terreno. En suelos sin ningún obstáculo, las
raíces llegan a penetran más de un metro de profundidad.

El árbol de guanábana es de ramas caídas, bajas y delgadas, y alcanza una altura


de 25 o 30 pies (7.5-9 m).

De todas las anonáceas comestibles la guanábana es la de requerimiento más


tropical prefiere los climas cálidos y húmedos con altitudes no mayores a 1000 m.
La temperatura de 7 °C provoca en el árbol la caída de hojas y frutos y la
temperatura bajo los cero grados dañan la madera. Los suelos en que se plante
guanábana comercialmente deben ser profundos, arenosos y con muy buen
drenaje. Son más convenientes los suelos con pH entre 5,5 y 6,5.

El área de distribución natural de la guanábana es desde la región tropical del sur


de México, Centro América, el norte de América del Sur y las Antillas. Hoy en día
crece en áreas tropicales y húmedas a nivel mundial ya que es una especie que
climas húmedos, baja altitud y no es exigente en cuanto al suelo.

 CARACTERÍSTICAS DE LAS HOJAS:

Hojas Ovadas - oblongas y ocasionalmente elíptico - oblongas, miden de 5 a 15 cm


de largo por 2 a 6 cm de ancho, usualmente coto – acuminadas en el ápice y agudas
o un poco redondeadas en la base, de color verde oscuro, brillante en el haz,
amarillentas con estructuras semejantes a bolsas en las axilas de los nervios
laterales por el envés.

Las hojas de fuerte olor, algo desagradable son normalmente perennes, alternas,
lisas, brillantes, de color verde oscuro en la superficie superior, y más claras por la
inferior, oblongas y elípticas de 2 1 / 2 a 8 pulgadas (6.25-20 cm) de largo y 1 a 2 1
/ 2 pulgadas (2.5-6.25 cm) de ancho.

 CARACTERÍSTICAS DE LAS FLORES:

Las flores son simples y pueden surgir en cualquier lugar en el tronco, ramas o
ramillas. Son de corto peciolo, 1 1 / 2 a 2 pulgadas (4 a 5 cm) de largo, regordeta, y
triangular-cónica, de 3 pétalos externos algo anchos y carnosos de color amarillo-
verdoso y tres pétalos más estrechos interiores de color amarillo pálido.
Las flores son hermafroditas, se forman sobre ramitas cortas auxiliares o
directamente sobre el tronco. Poseen tres sépalos color verde oscuro y seis pétalos
de color cremoso. Los estambres son numerosos y dispuestos alrededor de los
pistilos. Tienen abundantes ovarios.

 CARACTERÍSTICAS DE LOS FRUTOS Y SEMILLAS:

La fruta es muy delicada de color verde oscuro cubierta de espinas suaves. Es


relativamente grande y de cáscara muy delgada. Se debe cosechar antes de estar
madura. El fruto de la guanábana es el más grande en su género; es al igual que en
las otras anonáceas. Es asimétrico, elipsoidal u ovoide y mide de 14 a 40 cm de
largo por 12 a 18 cm de ancho, está cubierta por una cáscara delgada de color verde
oscuro con varias espinas pequeñas de 0,3 a 0,5 suaves y carnosas que se
desprenden fácilmente cuando la fruta está madura.

 CARACTERÍSTICAS DE LOS FRUTOS:

La aromática pulpa, con textura similar a la del algodón, es blanca, cremosa y


suaves, recubre totalmente las semillas negras de 1 a 2cm de largo, cada fruta
puede tener hasta 200 semillas, la mayoría de los segmentos no contienen semilla,
su sabor ácido sub ácido ha sido descrito como similar al de la piña o mango.
Cuando el fruto está maduro este se vuelve verde mate y adquiere una consistencia
blanda con apariencia verticulada, de sabor agridulce, por lo que no es comestible
como fruta fresca. La fruta es climatérica, considerada cómo tropical exótica, con
características sensoriales excelsas que le brindan un potencial para su utilización
bien cómo producto fresco o transformado.

La mayoría de los segmentos de la fruta contienen semillas. En cada segmento fértil


existe una única semilla ovalada, lisa y dura, de color negro de l / 2 a 3 / 4 pulgadas
(1,25-2 cm) de largo, Una fruta puede contener desde unas pocas docenas a 200 o
más semillas.

La pulpa de la guanábana está constituida principalmente por agua; además


proporciona sales minerales, potasio, fósforo, hierro, calcio, lípidos, tiene un alto
valor calórico debido a la presencia de hidratos de carbono; además es rica en
vitamina C y provitamina A, así como de vitamina B.

1.3.2 CLASIFICACIÓN GENERAL DE LOS NUTRACEÚTICOS


 Compuestos Nutritivos

Son sustancias que pueden ser utilizadas por el organismo en su metabolismo y


que desempeñan funciones bien establecidas. En esta categoría que representa la
fracción mayoritaria del alimento en sustancias seca (90%), se incluyen proteínas,
hidratos de carbono, minerales y vitaminas. Estos son los azúcares y las grasas,
dentro del primero cabe mencionar al chocolate, porque contiene alta cantidad de
antioxidantes que evitan el daño y el riesgo de enfermedades crónicas y
enfermedades trombóticas, potencia a otros antioxidantes que cuidan el cuerpo.

 Compuestos Químicos

Tenemos como punto de partida los antioxidantes, carotenos, fibra; antioxidantes


porque, normalmente los seres humanos estamos expuestos a un gran número de
agentes oxidantes como la contaminación, el estrés, humo del cigarro; además
nuestro cuerpo produce radicales libres, los cuales van a producir la oxidación de
membranas y daño al DNA desencadenando una serie de reacciones no deseables
que conocemos con el nombre de cáncer, problemas cardiovasculares y
envejecimiento.

 Prebióticos:

Son microrganismos vivos que una vez ingeridos en cantidades razonables ejercen
acciones positivas en la fisiología intestinal que promueven o favorecen la salud. La
forma más frecuente de consumo prebióticos es en alimentos lácteos, que contienen
bacterias que se reproducen en el intestino, como los lactobacilos y las
bifidobacterias, por lo que estos alimentos tienen efectos benéficos adicionales a
los de su función nutritiva.

Entre algunos de los beneficios de estos alimentos se incluyen su acción


coadyuvante en las enfermedades infecciosas gastrointestinales; también en
enfermedades crónicas intestinales como la colitis ulcerosa, actúan como
inmunomoduladores, favorecen la biodisponibilidad de los nutrimentos y
contribuyen al tratamiento de algunas enfermedades cardiovasculares, diabetes
mellitus no insulina dependiente, obesidad osteoporosis, cáncer.

1.3.3. CARACTERÍSTICAS DE LA FAMILIA ANNONACEAE

“Annonaceae”. También conocida por Anonáceas, son una familia que agrupa
árboles y arbustos generalmente siempre verdes, a veces arbustos trepadores, con
canales resiníferos. La familia tiene una distribución pantropical que comprende
unos 120 géneros y alrededor de 2.000 especies. Algunas especies producen frutos
comestibles, mientras que de otras se obtienen aceites esenciales o especias.
Como árboles productores de madera solo tienen cierta importancia local.

Hojas: Simples, alternas (dísticas) sin estípulas. Rara vez espirales, con nerviación
craspedódroma a broquidódroma. Estomas paracíticos. Idioblastos presentes,
oleosos o mucilaginosos. Astrosclereidas y osteosclereidas presentes.

Flores: Flor guanabana, Hermafroditas con verticilos trímeros.

Cáliz: Dialisépalo constituido por tres sépalos.

Corola: Dialipétala con tres o seis pétalos, en el primer caso alargados, en el


segundo formando dos series de tres pétalos los internos redondeados, valvares los
externos acorazonados, y más gruesos. La coloración de los pétalos es amarillo
verdoso, de constitución más o menos carnosa.

Androceo: Estambres numerosos de grandes anteras y cortos filamentos,


dispuestos en forma helicoidal sobre la prolongación del receptáculo.

Gineceo: Con numerosos carpelos que se cierran independientemente


constituyendo un gineceo apocárpico, los carpelos se disponen de modo helicoidal
sobre la prolongación del receptáculo por encima de la inserción de los estambres.
El eje formado por la prolongación del receptáculo es cónico por tanto al androceo
como al gineceo se le denomina androginóforo.
 ORIGEN / EXTENSIÓN

Nativa de Mesoamérica. No se conoce con certeza su lugar de origen.


Extensamente sembrada y naturalizada en los trópicos de América y de Africa
Occidental. Se extiende a lo largo de las Antillas excepto en las Bahamas y desde
México hasta Brasil.

Las “Anonáceas”, por lo general se desarrollan en clima tropical, sólo algunas


especies de los géneros “Asimina” y “Deeringothamnus” aparecen en zonas
templadas de Norteamérica. En general, hay un marcado contraste entre las formas
del Viejo Mundo, que tienden a ser trepadoras o de formas muy extendidas en las
selvas húmedas a baja altitud, hasta los 1500 m de altura, rara vez los 2000 m,
mientras que en el Nuevo Mundo tienden a ser árboles o arbustos y a crecer en
zonas de sabana y cerrado, donde algunas especies están altamente
especializadas como pirófitos, p. ej., ciertas especies de “Annona” y “Duguetia”, lo
cual no es óbice para que alguna especie, como “Raimondia quinduensis” alcance
los 2600 m en las montañas colombianas. Algunas especies del Nuevo Mundo son
árboles caducifolios que habitan las selvas bajas caducifolias.

 TAXONOMIA

Annona muricata L. pertenece a la familia Annonaceae y se conoce en América con


los nombres populares de guanábana o graviola y sursop en idioma inglés.
Sus sinónimos son: A. bonplandiana Kunth, A. cearensis Barb. Rodr., A. macrocarpa
Wercklé, A. muricata var. borinquensis Morales y Guanabanus muricatus M. (Morón
F, Morón D y Nodarse M, 2010).

Reino: Plantae
División: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Orden: Magnoliales
Familia: Annonaceae
Género: Annona
Especie: A. muricata
Nombre Binomial: Annona muricata L.
Sinonimia científica: Annona macrocarpa Wercklé, Annona bonplandiana H.B.K.,
Annonacearensis Barb. Rodr., Guanaba nusmuricatus (L.) M. Gómez 1,
Annonasericea Dunal in Correia, M. P., (1984)
Sinonimia vulgar: “guanábana”, “graviola”, “chirimoya brasilera”, “masamba”,
“corosol”, “cachiman”, “guayábana”, “huanahuana”, “masa samba”, “soursop”

1.3.3.1. DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA DE LA “ANNONA MURICATA L.”

El área de distribución natural de la “Annona Muricata L.” es desde la región tropical


del sur de México, Centro América, el norte de América del Sur y las Antillas. Hoy
en día crece en áreas tropicales y húmedas a nivel mundial ya que es una especie
que climas húmedos, baja altitud y no es exigente en cuanto al suelo. Aunque no se
conoce con certeza su lugar de origen se dice que es originaria de la parte tropical
de Mesoamérica y Sudamérica, es uno de los primeros árboles frutales americanos
introducidos al Viejo Mundo.

Es considerada la más tropical de las “Anonas”, pues no resiste el frío. Fue uno de
los primeros árboles frutales llevados desde América a los trópicos del Viejo Mundo
de donde ha sido ampliamente distribuida por el sureste de China, Australia y las
tierras del este y del oeste de África. Es común en los mercados de Malasia y el
sureste de Asia. Frutos muy grandes y simétricos se han visto en venta en Vietnam.

Quedó definitivamente establecida en una fecha temprana en las islas del Pacífico.
El árbol se ha plantado con éxito, pero nunca ha dado frutos en Israel. En las
regiones donde se prefieren las frutas dulces, como en el sur de la India y Guam, la
“Guanábana” no ha gozado de gran popularidad. Se cultiva solo en medida limitada
en Madras. Sin embargo, en las Indias Orientales es reconocida como uno de los
mejores frutos. La “Guanábana” es uno de los frutos más abundantes en la
República Dominicana y uno de los más populares en Cuba, Puerto Rico, las
Bahamas, Colombia y el noreste de Brasil.

La isla de Granada produce guanábanas especialmente grandes y perfectas y las


exportan regularmente en barco al mercado de Puerto de España, debido a la
escasez en Trinidad. Esta es una de las 14 frutas tropicales recomendadas por el
Instituto Latinoamericano de Mercadeo Agrícola para la plantación y
comercialización a gran escala.

1.3.3.2. DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA EN EL PERÚ DE LA “ANNONA


MURICATA L.”

Especie silvestre neotropical con amplia distribución donde es relativamente


abundante en nuestro país como en el departamento de Piura, Lambayeque, lima,
Ica, Ayacucho, Junín y La Libertad donde se ha encontrado desde la ciudad de
Trujillo, prov. Trujillo, hasta Platanar, prov. Otuzco, región La Libertad, Perú,
7º58´30,3”-8º 03’02,1” S y 78º49´05,4”-79º 51’09,6” W, 0-600 m de elevación como
un integrante de la vegetación herbácea y arbustiva. Taxón que habita en las
vertientes occidentales de Perú. Es una especie heliófila, es decir, requiere
abundante luz del sol; también, es higrófila porque prefiere suelos húmedos, tierras
negras con abundante humus, de igual manera, es una especie psamófila ya que
prospera en suelos arenosos; asimismo, es argilícola porque crece en suelos
arcillosos; generalmente es una especie eutrofa, prefiere suelos con abundantes
nutrientes. Habita en laderas, bordes de caminos, carreteras, acequias, huertos
familiares.
1.3.3.3. USO MEDICINAL DE LA GUANÁBANA

La pulpa de la guanábana está constituida principalmente por agua; además


proporciona sales minerales, potasio, fósforo, hierro, calcio, lípidos, tiene un alto
valor calórico debido a la presencia de hidratos de carbono; además es rica en
vitamina C y provitamina A, así como de vitamina B.

La pulpa de la fruta puede consumirse en jugo o en agua y suele ser diurética, las
hojas se pueden consumir en té al igual que la corteza del árbol, las semillas
pulverizadas sirven como repelente de insectos untándoselas en la piel, el agua de
las hojas de la guanábana también está indicado contra los piojos, es muy
importante tener en cuenta que la guanábana a pesar de ser de un sabor agradable
no por ello debe consumirse demasiada sino ir poco a poco es decir si lo toma en
jugo deberá de tomar media taza en ayunas durante una semana esto es para que
su cuerpo se vaya acostumbrando a los ingredientes que contiene y que no le caiga
pesada, otra cosa que también debemos de tomar en cuenta es que la primera toma
es decir la toma que se hace en ayunas es la más importante del día debido a que
el organismo está vacío y por ello se aprovecha mejor cuando es tomado como
tratamiento para combatir el cáncer. Deberá hacer tres tomas al día antes de cada
alimento, pero siempre recordando que es en forma de menos a más.

Las hojas de la guanábana también se pueden tomar licuadas 3 hojas con un vaso
de agua se licuan y se cuela esto también se debe de tomar en ayunas, pero se
debe empezar con una hoja licuada con una taza de agua esto por una semana y
después ya será el vaso todos estos son tratamientos son herbolarios y no son
sustituto de ningún medicamento o quimioterapia, pero tampoco se contraindican.

 Lista de propiedades medicinales:


 •Combate la hipertensión (cuando la presión arterial es demasiado alta).
 •Combate el asma (enfermedad pulmonar obstructiva caracterizada por
tos).
 •Combate el cáncer (conjunto de enfermedades que llevan al organismo
a producir células malignas).
 •Combate la diabetes (aumento de glucosa en sangre).
 •Combate desordenes del hígado.
 •Combate tumores (alteración de tejido que produce un aumento de
volumen).
 •Insecticida: se usan las hojas y raíz. (Ayuda a eliminar a los insectos
molestos como mosquitos)
 •amebicida, la corteza (combate parásito como por ejemplo la lombriz
intestinal).
 •Vermífugo, la corteza y hojas (es el poder para matar toda clase de
lombrices).
 •Pectoral, flores y hojas (cura toda clase de enfermedades del pecho
como asma, bronquitis entre otras).
 •Antidiabético, hojas (se utiliza para controlar y curar la diabetes y
prevenirla).
 •Vasodilatador, hojas (previene y corrige la mala circulación, así como
también los derrames).
 •Sedativo, hojas (ayuda a calmar los nervios, así como al buen dormir).
 •Antimalárico, hojas (ayuda a contrarrestar la enfermedad de la malaria,
la cual viene acompañada de fiebre, dolores musculares y de cabeza).
 •Galactogogo, fruto (favorece la secreción láctea, es un buen alimento
cuando la mujer está dando de amamantar ya que la producción de leche
será mayor al consumir la fruta.
 •Anticancerígeno, brotes tiernos y hojas (previene y controla la
enfermedad cuando ya se padece en tan solo 48 horas de estarlo
tomando).
 •Antiparasitario, corteza y semillas (es un buen desparasitante para los
niños tomado como té en ayunas).
 •Antiespasmódico, hojas (ayuda y previene las contracciones de músculo
involuntariamente provocando que estos se endurezcan y se abulten para
estos espasmos la guanábana es muy eficaz).
 •Antibacteriano, corteza (la guanábana destruye las bacterias y les impide
que sigan proliferando causando enfermedades).
 •Antiulceroso, corteza (la guanábana facilita y ayuda a cicatrizar las
heridas, es buenísimo para la gastritis).
 •Antidiarreico, (ayuda cuando las personas presentan diarrea con o sin
infección).

1.4 DESCRIPCIÓN QUÍMICA

Extensas evaluaciones fitoquímicas en diferentes partes de la planta de A. muricata


han demostrado la presencia de varios fitoconstituyentes y compuestos, incluidos
alcaloides (ALK), triglicósidos de flavonol (FTG), fenólicos. (PL), ciclopéptidos (CP)
y aceites esenciales. Sin embargo, se ha demostrado que las especies de Annona,
incluida A. muricata, son una fuente generalmente rica de compuestos de
acetogenina anonaceous (AGE). La presencia de diferentes minerales importantes
como K, Ca, Na, Cu, Fe y Mg sugiere que el consumo regular de la fruta de A.
muricata puede ayudar a proporcionar nutrientes y elementos esenciales al cuerpo
humano.
 Estructuras químicas de los principales compuestos aislados de
Annona muricata.
1.4.1. Componentes químicos de las Hojas de Annona muricata

 Alcaloides de tipo isoquinolínico: annomonicina, annomurina, annonaína,


annoníina, (+) coclaurina, (+) coreximina, (+) reticulina.
 Alcaloides misceláneos: muricina, muricinina,estefarina, aterospermina,
terosperminina.
 Las acetogeninas de la hoja con actividad anticancerígena: muricapentocin,
muricatocin C,muricatocin A, annomuricin B, annomuricin A, murihexocin C,
muricoreacin, bullatacinone, y bullatacin.
 Entre los lípidos tenemos: Acido esteárico, ácido linoleico, ácido lignocérico,
y ácido gentísico
 Lactonas: annomontacina, annonacina, solamina, muricatacina.
 Taninos carcinogénicos
 Compuestos fenólicos: ácido cafeíco, ácido p-cumarico,
leuncoantocianidinas
 Ácido ascórbico
 Compuestos cianogenéticos: ácido hidrociánico
 Aceite fijo en las semillas (23,9%)
 Fitoesteroles: β sitoesterol, estigmasterol, arronol, ipuranol.
Compuestos fenólicos presentes en pulpa y hoja de guanábana

Parte de la
N° Compuesto Tipo Referencia
planta

1 Emodina Hoja Antraquinona George et al. (2014)

Marques y Farah (2009);


2 Ácido cafeoilquínico Hoja Pulpa Ácido clorogénico
Jiménez et al. (2014)

3 Ácido clorogénico Hoja Ácido clorogénico Nawwar et al. (2012)

4 Galocatequina Hoja Flavonoide George et al. (2014)

5 Genisteína Hoja Flavonoide George et al. (2014)

6 Gliciteína Hoja Flavonoide George et al. (2014)

7 Homoorientinina Hoja Flavonoide George et al. (2014)

8 Ácido isoferúlico Hoja Flavonoide George et al. (2014)

Nawwar et al. (2012);


9 Kaempferol Hoja Pulpa Flavonoide
Sandoval et al. (2014)

Nawwar et al. (2012);


10 Kaempferol 3-O-rutinósido Hoja Pulpa Flavonoide
Sandoval et al. (2014)

Luteolin 3´7-di-O- George et al. (2014);


11 Hoja Pulpa Flavonoide
glucósido Sandoval et al. (2014)

Correa-Gordillo et al.
12 Morina Pulpa Flavonoide
(2012)

Correa-Gordillo et al.
13 Miricetina Pulpa Flavonoide
(2012)

George et al. (2014);


14 Quercetina Hoja Flavonoide
Nawwar et al. (2012)

15 Quercetina 3-O-glucósido Hoja Flavonoide Nawwar et al. (2012)

Quercetina 3-
16 Hoja Flavonoide Nawwar et al. (2012)
Oneohesperidósido
Parte de la
N° Compuesto Tipo Referencia
planta

17 Quercetina 3-O-robinósido Hoja Flavonoide Nawwar et al. (2012)

18 Quercetina –O-rutinósido Hoja Flavonoide Nawwar et al. (2012)

Quercetina 3-O-a-
19 Hoja Flavonoide Nawwar et al. (2012)
rhamnosyl

20 Robinetina Hoja Flavonoide George et al. (2014)

21 Tangeretina Hoja Flavonoide George et al. (2014)

22 Taxifolina Hoja Flavonoide George et al. (2014)

23 Vitexina Hoja Flavonoide George et al. (2014)

Ácido
24 Ácido cafeico Hoja Jiménez y col. (2014)
hidroxicinámico

25 Ácido gentísico Hoja Hidroquinona TDRG (2002)

George et al. (2014);


26 Ácido gálico Hoja Tanino
Nawwar et al. (2012)

Correa-Gordillo et al.
27 Fisetina Pulpa Flavonoide
(2012)

Marques y Farah (2009);


29 Ácido dicafeolquínico Hoja Pulpa Ácido clorogénico
Jiménez et al. (2014)

30 Ácido feruloilquínico Hoja Ácido clorogénico Marques y Farah (2009)

George et al. (2014);


31 Ácido cinámico Hoja Pulpa Ácido cinámico
Jiménez y col. (2014)

32 Apigenina-6-C-glucósido Hoja Flavonoide George et al. (2014)

33 Argentinina Hoja Flavonoide Nawwar et al. (2012)

34 Catequina Hoja Flavonoide Nawwar et al. (2012)

George et al. (2014);


35 Ácido coumárico Hoja Pulpa Flavonoide
Jiménez y col. (2014)
Parte de la
N° Compuesto Tipo Referencia
planta

36 Daidzeína Hoja Flavonoide George et al. (2014)

Dihidrokaempferol-
37 Pulpa Flavonoide Jiménez et al. (2014
hexósido

1.4.2. ACCIONES FARMACOLÓGICAS

De las variadas actividades biológicas halladas en esta especie sobresalen


aquellas relacionadas con una probable actividad antitumoral y antiparasitaria
demostrada tanto en animales como in vitro.

 Oncología Experimental

Las acetogeninas anomutacina (cis y trans) 10-annonacin-A-ona han demostrado


poseer citotoxidad selectiva en cultivos de células tumorales del pulmón, otro
estudio demostró un efecto citotoxico selectivo frente a células
adenocarcinomatosas del colón con una potencia muy superior a adriamicina. Las
muricinas H,I evidenciaron citotoxidad en los cultivos de hepatomas humanos.

Estudios realizados en los años 1,998 al 2,000 han revelado que las acetogeninas
son inhibidores del complejo I de la cadena de fosforilación oxidativa con lo cual
bloquean la formación de ATP; energía que necesita la célula cancerosa para
poner en funcionamiento su bomba mediada por P-glucoproteína, que le permite
mantenerse activa.

 Actividad antiparasitaria

El extracto etanólico de Annona muricata ha demostrado propiedades


antiparasitarias y antiprotozoarias sobre: Entamoeba histolytica, Trichomonas
vaginalis y Artemia salina encontrándose que las acetogeninas serían los
compuestos responsables probablemente por un mecanismo de acción similar al
hallado en la actividad antitumoral. Un informe da cuenta de la propiedad
antileishmaniásica ejercida por el extracto hexánico, metnólico y etilacetato de
A.muricata resultando el extracto de etilacetato el más eficaz entre las estructuras
que se identificaron anonacina A y anomuricina A.

 Actividad antimicrobiana

El extracto etanólico de las hojas demostró ser efectivo frente al herpes simple
virus 1 y 2 demostrando para el primer caso una concentración inhibitoria mínima
1 mg/ml.

 Actividad S.N.C.

De los diferentes estudios la reticulina se comporta como un estimulante del SNC,


en tanto la efedrina y la aterosperminina tendrían un efecto sedativo. Esta última
presento efectos anticonvulsivantes en animales. La (+) coclaurina administrada
por vía intracerebroventricular suprime la actividad motora inducida por agentes
dopaminérgicos.

 Actividad Antioxidante

Investigadores determinaron por ABTS en diferentes tiempos para pulpa


congelada de guanábana, expresado a equivalentes Trolox, valores de 4.3 ± 0.4
μmolTrolox/g y 4.8 ± 0.3 μmolTrolox/g, transcurridos 1 y 7 min, respectivamente.
Comparando éstos valores con los de mango: 11.8 ± 0.9 μmolTrolox/g (1 min) y
13.2 ± 0.3 μmolTrolox/g (7 min), resultó menor la actividad antioxidante de
guanábana en todos los casos.

 Otras Actividades

El alcaloide cloreximina presenta efecto estimulante respiratorio y antihipertensor,


mientras que la arterosperminina demostró efectos anti arrítmicos, anestésicos y
antifúngicos. La presencia de ácido málico en la pulpa del fruto de guanábana se
considera de utilidad como fuente de hidroxiácidos para ser empleados en
cosmética para tratamientos antiacné.
1.4.3. INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA

Tabla de composición química y valor nutricional del fruto

Tabla de componentes químicos de la hoja de annona muricata


Tamizaje fotoquímico del extracto etanolico y acuoso

Estudio fotoquímico preliminar del extracto etanolico de hojas de Annona


muricata L.
1.4.3.1. CARACTERÍSTICAS DE LA RESPUESTA INMUNE

 Especificidad
 Capacidad de memoria para reconocer antígenos con los que estuvo
previamente en contacto
 Ubicuidad de tal manera que los linfocitos lleguen a prácticamente todos los
tejidos
 Capacidad de amplificación de la respuesta
 Expresividad y cooperación de gran cantidad de elementos celulares y
productos de secreción.

En ocasiones, el sistema inmunológico se debilita dejando al organismo expuesto


a enfermedades graves. Algunos factores que causan el debilitamiento del sistema

inmunológico son:

 Estados emocionales
 Cáncer
 HIV/AIDS
 Enfermedad inflamatoria intestinal
 Deficiencia de nutrientes.
 Procedimientos médicos (cirugías, trasplante, uso de drogas anti rechazo,
entreotros).

El sistema inmunitario es nuestra salvaguarda en la relación que mantenemos con


el medio ambiente. Si el sistema inmunitario se encuentra en funcionamiento
normal, la persona puede estar en contacto con alérgenos y no ser alérgico, con
gérmenes y no tener infecciones, con cancerígenos y no tener cáncer. La medicina
moderna consideraba “afuncionales” muchos órganos del sistema inmunitario, lo
que hacía que se extirparan sin ningún problema, como las amígdalas, adenoides,
apéndice, timos, bazos, creyendo que estas estructuras eran inútiles y que
ocupaban un lugar porqué sí.

Al igual que el sistema nervioso, el sistema inmunitario es capaz de aprender,


analiza sus experiencias, las recuerda y las trasmite a las futuras generaciones de
células. Debido a que sus tejidos son muy activos, sus células se dividen con
mucha rapidez y por lo tanto están expuestas a sufrir daños que puedan mutar el
ADN.

1.4.3.2 CÉLULAS DEL SISTEMA INMUNE:

El sistema inmunológico tiene como células efectoras específicas a los linfocitos T


y B. y a las células plasmáticas; pero existen otras células como los monocitos-
macrófagos, células K, células NK, y leucocitos polimorfo nucleares neutrófilos de
una gran importancia para la efectividad del sistema.

 LINFOCITOS:

Existen dos tipos de linfocitos B y T, cada linfocito de cualquiera de las dos


poblaciones es capaz de reconocer y responder a un solo antígeno o a un número
limitado de antígeno estructuralmente relacionados entre sí. Todos los linfocitos
derivan de una célula, de la medula ósea a partir de la cual sufren una primera fase
de maduración independiente de la existencia o no de antígenos. En circunstancias
normales el número de linfocitos en la sangre es de 1.5-3.5x106/ml.

 LINFOCITOS T:

Maduran principalmente en el timo que constituyen el 60-70% de todos los


linfocitos de la sangre periférica. También se encuentran en la región paracortica
de los ganglios linfáticos y en los manguitos periarteriolares del bazo. Cada célula
T esta genéticamente programada para reconocer un antígeno específico unido a
una célula por medio de un receptor de célula T específico de ese antígeno (RCT).

Las células T son efectoras de la respuesta de la inmunidad celular, de tal manera


que cuando reconocen una proteína extraña del T se activan y posteriormente se
unen a ella hasta eliminarla. Los antígenos solo son reconocidos si son
presentados por los monocitos. La activación de los linfocitos T va seguida de su
proliferación diferenciación, producción de linfoquinas y desarrollo de funciones
efectoras. Las células presentadoras de antígenos sintetizan IL-1 y los linfocitos
proliferados IL-2.
 FUNCIONES DE LOS LINFOCITOS T

 Liberación de linfoquinas en reacciones de hipersensibilidad.


 Reacciones citolíticas-linfocitos T efectores citotóxicos,
especialmente contra virus y células neoplásicas.
 Regulación de la respuesta inmune por medio de linfocitos que la
potencian-T“helper”- o que la suprimen- T supresoras.

 LINFOCITOS B:

Constituyen entre el 10-.20% de los linfocitos periféricos circulantes, también se


encuentran en la médula ósea, en los tejidos linfoides periféricos como los ganglios
linfáticos, el bazo o las amígdalas, y en los órganos extralinfáticos, como el aparato
gastrointestinal. En los ganglios se sitúan en la corteza superficial: en el bazo, forma
parte de la pulpa blanca. En ambas localizaciones constituyen agregados que
adoptan la forma de folículos linfoides y al ser activados desarrollan los pálidos
centros germinales.

Cuando reciben una estimulación antigénica, los linfocitos B se trasforman en


células plasmáticas e inician la secreción de inmunoglobulinas, estas a su vez son
los mediadores de inmunidad humoral. Las células del sistema B reconocen a los
antígenos a través del complejo receptor de antígeno de la célula B.

 MONOCITOS - MACRÓFAGOS

Forma parte del sistema mononuclear fagocitario, son esenciales en la respuesta


inmune por

ser las células con mayor capacidad de presentación de antígenos a células


efectoras T.

Funciones:

 Son necesarios para proceder y presentar el antígenos y las células T


inmunocompetentes.
 Producen distinta citocinas, como la IL-1 e IFN- α (factor de necrosis
tumoral), son
 proinflamatorias y también fibrogénicas.
 Lisan las células tumorales a través de la secreción de metabolitos tóxicos y
enzimas proteolíticas en consecuencia podrían intervenir en la inmuno
vigilancia.

 Son importantes células efectoras en algunas formas de inmunidad celular


como las reacciones de hipersensibilidad retardada.

 CÉLULAS NK

Corresponden al 10% de linfocitos no reactivos presentes en la sangre y ganglios


linfáticos. Son células capaces de lisar células extrañas sin previa sensibilización
como células neoplásicas o células infectadas por virus, corresponden a la
respuesta inmune inespecífica. Comparten antígenos de superficie con los linfocitos
y los macrófagos. Son estimuladas por -2 e INF-GAMA, y son neutralizadas por las
PGE2. Son más grandes que los linfocitos T y B.

 LAS CÉLULAS K

Son células semejantes a los linfocitos de pequeño o mediano tamaño que pueden
lisar células opsonizadas. Son responsables de la citotoxicidad de los tumores, las
células K no tienen capacidad de fagocitosis y no tienen inmunoglobulinas de
superficie.

 INMUNIDAD INNATA

Los gérmenes que logren penetrar en un organismo se encontrarán con las células
y los mecanismos del sistema inmune innato. Las defensas del sistema inmune
innato no son específicas, lo cual significa que estos sistemas reconocen y
responden a los patógenos en una forma genérica. Este sistema no confiere una
inmunidad duradera contra el patógeno. El sistema inmune innato es el sistema
dominante de protección en la gran mayoría de los organismos.

 INMUNIDAD ADAPTATIVA

El sistema inmune adaptativo evolucionó en los vertebrados primitivos y permite una


respuesta inmunitaria mayor, así como el establecimiento de la denominada
memoria inmunológica, donde cada patógeno es recordado por un antígeno
característico y propio de ese patógeno en particular. La respuesta inmune
adaptativa es específica de los anticuerpos y requiere el reconocimiento de
antígenos que no son propios durante un proceso llamado presentación de los
antígenos.

II. DESARROLLO EXPERIMENTAL

2.1. Equipos, materiales y reactivos utilizados

EQUIPOS:

 Licuadora
 Soporte universal
 Estufa

MATERIALES:

 Beacker
 Embudo
 Probeta
 Espátula
 Gasa
 Algodón
 Fuentes de vidrio refractario
 Frasco de vidrio

REACTIVOS:

 Agua destilada
 Etanol

2.2. Metodología y procedimiento

Este trabajo es realizado mediante una metodología descriptiva y experimental,


realizada en los laboratorios de la Universidad Norbert Wiener, por alumnos de
la escuela Académica Profesional de Farmacia y Bioquímica con ayuda de la
Dr. (a). Magister Maribel Rodríguez, con la finalidad Investigar los
principios activos, metabolitos secundarios y las propiedades
terapéuticas que tiene el Annona muricata L. (Guanábana).
Ya que las plantas medicinales son importantes porque ellas nos
brindan al ser humano una posibilidad de poder tener en ellas una
curación a miles de enfermedades que podrían ser mortíferas si no se
curan, ni se a tienden a tiempo.
Lo que buscamos al realizar este trabajo es el impulso, apoyo y la
recolección sostenible de plantas medicinales de buena calidad,
mediante métodos que respeten y propicien la conservación de las
plantas medicinales y del medio ambiente en general. Y por ende
impulsar a que se realice más investigaciones sobre esta planta
medicinal ya que con un solo estudio no basta para determinar las
propiedades terapéuticas y lo beneficioso que esta planta medicinal
puede ser para la humanidad, al determinar sus propiedades curativas.

2.2.1. Ubicación y recolección de la muestra:

Cañete - Ica
2.2.2. Preparación de la muestra

 Procedimiento para la extracción hidroalcohólica obtención


de la hoja de guanábana

 Se recolectan 5 kilos de hojas de guanábana en Cañete:

 Después de la selección, limpieza y corte se logra tener un total de hojas


por 3.200 kg

 Se utilizaron 5 litros de alcohol de 80° utilizando como base alcohol de 96° y


agua destilada.
C1 x V1=C2 x V2
96 x V1=80x 1000ml
V1= 833.4 alcohol 96°
166.6 alcohol H2O destilada.

 Se procede a licuar las hojas de guanábana juntamente con el alcohol de


80°

 Una vez licuado las hojas de guanábana juntamente con el alcohol


procedemos a envasarlo en un
recipiente de vidrio de 10 lts.

 Dejamos macerar 7 días


 Filtrado de extracto alcohólico después de maceración:

 Colocamos gasa en un embudo hecho de botella, luego precedemos a la


filtración

 Finalmente terminamos el filtrado satisfactoriamente.

1. Seguidamente colocamos la
muestra en una fuente para luego
llevarla a la estufa para que inicie el
proceso de concentración.
Día: 02/09/2019
Muestra en ESTUFA
DIA 04/09/2019

Muestra en ESTUFA
DIA 06/09/2019
Muestra en ESTUFA y día de raspado
DIA 09/09/2019

2. Se procede a raspar y retirar la costra obtenida. Se pesa la muestra


obtenida después del secado, obteniéndose 40 g.
III. RESULTADOS EXPERIMENTALES

3.1 DETERMINACION DE SOLUBILIDAD

AGUA CLOROFORMO ETANOL METANOL ETER N-BUTANOL N-HEXANO

TUBO 1 (muestra seca de ++


la Anonna muricata)
TUBO 2 (muestra seca de ++++
la Anonna muricata)
TUBO 3(muestra seca de ++++
la Anonna muricata)
TUBO 4(muestra seca de ++++
la Anonna muricata)
TUBO 5(muestra seca de ++++
la Anonna muricata)
TUBO 6 (muestra seca de ++++
la Anonna muricata)
TUBO 7 (muestra seca +
de la Anonna muricata)
3.2 IDENTIFICACION DE METABOLITOS SECUNDARIOS
3.2.1. IDENTIFICACION DE ALCALOIDES
Son diversos métodos empleados para obtener los alcaloides en forma pura de la planta
que los contiene, pues los compuestos poseen diferentes grados de solubilidad, pero en
todos ellos se aprovecha su carácter básico, algunas técnicas para extraerlos son:
ESTRUCTURA QUIMICA DE LOS ALCALOIDES:
3.2.1.1. EXTRACCIÓN DE ALCALOIDES CON UN SOLVENTE
ORGÁNICO POLAR EN MEDIO BÁSICO

1.- Pesar 1.0391g de la muestra de Annona muricata L.(Droga seca).

2.- Pesar 0.5g de óxido de calcio.

3.- Mezclar y Agregar NH4 (formar pasta).


4.- Agotar con cloroformo y guardar la mezcla.

3.2.1.2 REACCIONES DE CARACTERIZACIÓN DE LOS


ALCALOIDES

1.- Evaporación en fuego del solvente orgánico para obtener la muestra pura y seca:

2.- Agregar 1ml de HCl 5% para que toda la muestra este en contacto con la solución acida.
3.- Escoger 6 tubos de ensayo rotularlos y agregar 2 gotas a cada tubo de la M.P.

Se adiciona II gotas de cada


reactivo a cada tubo

5.- Reconocimiento:

TUBO 1: II gotas del TUBO 3: II gotas del TUBO 5: II gotas del


Rvo. De Mayer. Rvo. De Bertrand. Rvo. De Sonnenschein.

TUBO 1: (++++) Precipitado blanco amarillento.


TUBO 2: (++++) Precipitado anaranjado.
TUBO 3: (++++) Precipitado blanco.
TUBO 4: (++++) Precipitado amarillo.
TUBO 5: (++++) Precipitado amarillo.
TUBO 6: (++++) Precipitado pardo oscuro.

TUBO 2: II gotas del TUBO 4: II gotas del TUBO 6: II gotas del


Rvo. De Dragendorff. Rvo. De Popoff. Rvo. De Bouchardt.
RECONOCIMIENTO DE ALCALOIDES EN LA ANNONA MURICATA

Reacción Reacción de Reacción Reacción Reacción de Reacción


De Mayer Dragendorff de de Popoff Sonnenschein de
Bertrand Bouchardt
TUBO 1 (muestra seca +
de la Anonna
muricata)
TUBO 2 (muestra seca +
de la Anonna
muricata)
TUBO 3(muestra seca +++
de la Anonna
muricata)
TUBO 4(muestra seca +++
de la Anonna
muricata)
TUBO 5(muestra seca +
de la Anonna
muricata)
TUBO 6 (muestra seca +
de la Anonna
muricata)

Toda la muestra se trabajó con etanol. En esta reacción de identificación


de alcaloides hemos analizado que el reactivo de Bertrand sale (+++) y la
reacción de Popoff (+++).
3.2.1.3. IDENTIFICACION Y AISLAMIENTO DE ALCALOIDES POR METODOS
CROMATOGRAFICOS

 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:

1.Preparar las placas cromatografías. Luego preparar los sistemas de solventes (Etanol)

2.Preparar la solución de alcaloides y los extractos de productos naturales


3.Desarrollar los cromatogramas, utilizando los sistemas de solventes.

4.Revelar el cromatograma con el revelador de Dragendorff

RESULTADOS:

Como se observa en la prueba de solubilidad del extracto de guanábana es más


soluble con Metanol que con Etanol, más lento. Se aprecia manchas características
de alcaloides al ser reveladas con revelador Dragendorff, por lo tanto nos da como
resultado (positivo) por presencia de alcaloides.
RESULTADOS

PRUEBA RESULTADO

NINHIDRINA ++

El reactivo de ninhidrina dio positivo en el


reconocimiento de los aminoácidos y proteínas que
presenta la guanábana, el cual dio una coloración
púrpura.

 REACCIÓN DE LA NINHIDRINA

En el segundo paso de la reacción, la hidrindantina formada con una segunda molécula de


ninhidrina, reaccionan con el amoníaco formando un complejo de color púrpura (Púrpura de
Ruhemann).
3.2.2. IDENTIFICACION DE FLAVONOIDES

3.2.2.1. IDENTIFICACIÓN DE FLAVONOIDES POR MÉTODOS


CROMATÓGRAFICOS

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
1. Adicionar cantidad suficiente de la muestra problema de annona muricata
+ etanol al 70% en un beacker, disolver. Preparar el sistema de solventes.
(fase móvil: metanol)

2. Preparar la placa cromatografica. En una placa de silicagel sembrar 100 veces


la muestra problema de annona muricata, luego llevar a la cuba cromatografica.
3. Revelar el cromatograma en vapores de amoniaco, cortar la silicagel en dos
partes iguales, luego llevar una de las partes a U.V. observar, nos dio positivo con
amoniaco.

(presencia de flavonoides)

(con U.V)
RESULTADO:
Se observó por cromatografía en capa fina, las manchas características de flavonoides al revelar
con vapores de amoniaco. Se identificó en el extracto etanolito de las hojas de Anonna muricata
la presencia de flavonoides que son metabolitos secundarios, y se encuentran en todas las partes
de las plantas, cumplen una función protectora de ella y sus frutos a los cuales se les atribuyen
actividades farmacológicas tales como: antidiabética, antiinflamatoria y antioxidante.

3.2.2.2. IDENTIFICACIÓN DE FLAVONOIDES POR REACCIONES DE


CARACTERIZACION

 PRUEBA DE SHINODA:
1. Diluir la muestra con el solvente (etanol) luego colocarlo en un tubo de ensayo.

2.- Agregar una granalla/ viruta/ cinta de Mg.


3.- Agregar 0.5 ml de HCl.

Reacciono al instante de verter el HCl con la presencia de un burbujeo de color rojo.

 PRUEBA SE SHINODA MODIFICADA:


1.- Diluir la muestra con el solvente (etanol) luego colocarlo en un tubo de ensayo.

2.- Agregar/viruta / cinta de Zn.


3.- Agregar 0.50 ml HCl.

Luego de adicionar el HCl 0.5 ml en este tubo la muestra reacciono muy lento produciendo
liberación de hidrogeno y presenciamos un color caramelo.

 PRUEBA DE TRICLORURO DE HIERRO:

1.- Diluir la muestra con el solvente


(etanol) luego colocarlo en un
tubo de ensayo y agregar 0.5 ml de
tricloruro de hierro.

Luego de adicionar el Cl3Fe reacciono rápidamente y dio una coloración verde amarillento (positivo)
 PRUEBA DE TRICLORURO DE ALUMINIO:
1.- Diluir la muestra con el solvente (etanol) luego colocarlo en un tubo de ensayo.

3.2.3. IDENTIFICACION DE PROTEINAS Y AMINOACIDOS

3.2.3.1. PRUEBA DE FUSIÓN DE LAS MEZCLAS PARA IDENTIFICACIÓN


DE AMINOÁCIDOS

1.-En una placa cromatografía realizar la siembra (10 veces) de la mezcla de triptófano +
fenilamina en un extremo y en el otro extremo fenilamina sola.
2.-Preparar el sistema de solvente: (etanol 4ml).

3.-Revelar el cromatograma con el solvente ninhidrina y luego secar la placa en el fuego.

Aquí se nota la presencia de aminos libres que quiere decir que hay presencia de
aminoácidos o alcaloides por lo cual se identifica una característica principal en
cromatografía.a
3.2.4. IDENTIFICACION DE LACTONAS EN LA ANONNA
MURICATA

PESAMOS 10 gramos de la
Agregamos 10 ml de acetato
muestra annona muricata.
de plomo al 5%

Tº:50-60ºC

Agregamos 40 ml de acetato Se procede a someter a baño


de plomo al 5% hasta que la a maría para agilizar la
muestra este disuelta. disolución de la muestra con
acetato de plomo 5%.
Dejamos enfriar unos Filtrado y agregar dos gotas
minutos y procedemos a de ácido acético glacial.
filtrar en caliente/frio.

La solución filtrada vertemos Procedemos a separar la fase acuosa


en la pera de decantación de la fase oleosa, hasta 3 veces.
donde contiene 15 ml Guardamos el producto obtenido
CLOROFORMO.
3.2.5. PRUEBAS GENERALES PARA LACTONAS
SESQUITERPÉNICAS Y LACTONAS INSATURADAS EN ANONNA
MURICATA

A. Pruebas generales para lactonas sesquiterpénicas:


1. Ensayo con Hidroxamato férrico: La muestra de Annona muricata se disuelve en
etanol, se añade solución de clorhidrato de hidroxilamina y KOH. La mezcla se calienta
hasta que aparezca una espuma de color rojizo. Se enfría y se acidula con HCl. Se añade
cloruro férrico y se forma una coloración violeta.

 Resultado para Annona Muricata: Negativo


2. Ensayo de Baljet: Las sesquiterpenlactonas producen coloraciones anaranjadas o rojo
oscuro cuando se tratan con dos soluciones que se mezclan en iguales volúmenes antes
de usarse. Solución A: 1 g De ácido pícrico en 100mL de etanol; solución B: 10 g De
hidróxido de sodio en 100 mL de agua destilada.

 Resultado para Annona muricata: Positivo para Bajlet

3. Prueba de Tollens: Las lactonas α, β y β, γ- insaturadas reducen el reactivo de Tollens


(AgNO3 /NaOH / Amoniaco) formando un espejo de plata

 Resultado para Annona muricata: Positivo para Tollens


B. Ensayo para lactonas insaturadas:
1. Ensayo de Legal: Las sesquiterpenlactonas con anillos lactona, α, β – insaturados
producen coloración rosa cuando se disuelven en piridina, se añade nitroprusiato de sodio
y un álcali. Aunque también las β, γ- insaturadas dan coloración si no se controla bien el
pH, ya que estos se isomerisan. Las metilencetonas también dan coloración.

 Resultado para Annona muricata: Negativo para Legal

2. Ensayo de Kedde: A la muestra disuelta en alcohol se añade:


- ácido 3,5 dinitrobenzoico y KOH,
- Si es positivo se producen coloraciones violetas o azules que desaparecen después de
una hora.

 Resultado para Annona muricata: Negativo para Kedde


 Resultados finales:

ENSAYO Ensayo con Ensayo de Ensayo de Ensayo de Ensayo de

MUESTRA Hidroxamato Bajlet Tollens Legal Kedde


Ferrico

TUBO 1 (muestra seca de la


Anonna muricata)

TUBO 2 (muestra seca de la


Anonna muricata)

TUBO 3(muestra seca de la


Anonna muricata)

TUBO 4(muestra seca de la


Anonna muricata)

TUBO 5(muestra seca de la


Anonna muricata)

TUBO 6 (muestra seca de la


Anonna muricata)
IV. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

V. CONCLUSIONES

VI. RECOMENDACIONES
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Vergara Sotomayor A, Páucar Cuba K, Morales Comettant C, Castro


Mandujano O, Pizarro Solís P, Díaz Rosado J. Obtención de extractos de
hojas de Annona muricata L. (Guanábana) inducidos por su efecto
inhibidor de la corrosión [Internet]. Scielo.org.pe. 2019 [cited ------ 2019].
Disponible en:
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_abstract&pid=S1810634X201
8000100011&lng=es&nrm=iso

2. Palomino Flores C. Efecto del extracto etanólico de hojas Annona muricata


L. ("guanábana) sobre la hiperglicemia inducida con aloxano en ratas
[Internet]. Cybertesis.unmsm.edu.pe. 2019 [cited ------- 2019]. Disponible en:
http://cybertesis.unmsm.edu.pe/handle/cybertesis/2582

3. Balbín Palacios, Yanet Rocio, Tardeo Vidalon, Ysabel “efecto cicatrizante del
gel a base del extracto hidroalcohólico de las hojas de annona muricata l.
(guanábana) en ratas albinas” tesis para optar el título profesional de químico
farmacéutico y bioquímico. Universidad Inca Garcilaso de la Vega facultad
de ciencias farmacéuticas y bioquímica/Lima-Perú 2018

4. JIMÉNEZ-ZURITA, José Orlando, et al. Caracterización de frutos de


guanabana (Annona muricata L.) en Tepic, Nayarit, México. Revista
mexicana de ciencias agrícolas [internet] 2016 [consultado 05 de mayo
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http://www.scielo.org.mx/scielo.php?pid=S200709342016000601261&script
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5. Annona muricata (Annonaceae): A Review of Its Traditional Uses, Isolated


Acetogenins and Biological ActivitiesInt. J. Mol. Sci. 2015, 16(7), 15625-
15658; https://doi.org/10.3390/ijms160715625
6. Garrido A. Fundamentos de bioquímica estructural. Segunda edición editorial
TEBAR. Madrid. 2006.

7. Quispe A., Zavala D., Posso M., Rojas J., Vaisberg A., Efecto Citotóxico De
Annona muricata L (Guanábana) En Cultivo De Líneas Celulares De
Adenocarcinoma Gástrico Y Pulmonar. Cime, 2007; 12(1):19-22.

8. Arroyo J., Rojas J., Ráez E., Ronceros S., Tomás G., Huamán J., et al.
Actividad de los compuestos fenólicos y triterpenoides de Annona muricata más
Krameria lappa sobre el cáncer de colon en ratones. An Fac Med Lima, 2005;
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9. Palomino C. (2007). Efecto del extracto etanólico de hojas Annona muricata


L. (“guanábana”) sobre la hiperglicemia inducida con aloxano en ratas. Tesis de
maestría, Faculta de Farmacia y Bioquímica, Universidad Nacional Mayor de
San Marcos, Lima, Perú.

10. Zeng L., Wu F., Orberlies N., McLaughlin J., Satrodihadjo S. Five new
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