Bioquímica General

I.- Introducción

Cada célula y cada tejido tienen su actividad propia, lo que provoca continuos cambios
en su estado bioquímico, en la base de la cual están las enzimas, que tienen el poder de
catalizar, facilitar y agilizar terminados procesos sintéticos y analíticos. La temperatura
influye en la actividad de las enzimas. El punto óptimo es aquel que representa el máximo
de actividad, a temperaturas bajas las enzimas se hallan “muy rígidas” y cuando se supera
un valor considerable (mayor a 50°C) la actividad cae bruscamente porque, como
proteína, la enzima se desnaturaliza.

Efecto del pH

El pH puede afectar de varias maneras:

• El centro activo puede contener aminoácidos con grupos ionizados que pueden
variar con el pH.

• La ionización de aminoácidos que no están en el centro activo pueden provocar

modificaciones en la conformación de la enzima.

• El sustrato puede verse afectado por las variaciones del pH.

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II.- Objetivos:

 Demostrar como el calor y/o pH pueden influir en la estructura terciaría de una

enzima.
 Demostrar como el calor y/o pH pueden influir en la funcionalidad de una enzima.

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III.- Marco Teórico

La actividad enzimática puede verse afectada por cualquier factor físico o químico que
altere su estructura tridimensional. Generalmente, las condiciones óptimas se encuentran
entre límites estrechos de temperatura, pH, concentración salina, etc. A medida que las
condiciones se alejan del punto óptimo, la actividad de la enzima empieza a decrecer y
en condiciones extremas, puede perder su estructura tridimensional y se dice que la
enzima es desnaturalizada. De acuerdo con las reacciones que catalizan. (REYNA.M
2004).

Los enzimas son biomoléculas especializadas en la catálisis de las reacciones químicas

que tienen lugar en la célula. Son muy eficaces como catalizadores ya que son capaces de
aumentar la velocidad de las reacciones químicas mucho más que cualquier catalizador
artificial conocido, y además son altamente específicos ya que cada uno de ellos induce
la transformación de un sólo tipo de sustancia y no de otras que se puedan encontrar en
el medio de reacción.

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IV.- Materiales:

MATERIALES

 10 Tubos de ensayo de 15 ml
 1 Pinza para tubo de ensayo
 1 Mechero
 1 Gradillas (por mesa)
 2 Pipetas de 5 ml
 Cocinilla
 Mortero
 Hielo

REACTIVOS
 HCl 1M
 NaOH 1M
 Agua destilada

MATERIALES DADO POR EL ESTUDIANTE:

 1 trozo de hígado de pollo fresco

 3 hojas de espinaca fresca
 Bisturí o navaja
 1 frasco de agua oxigenada 5%
 Guantes y bolsa plástica pequeña para descartar residuos

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V.- Metodología
Experimento 1: Normal

 Para empezar, trozamos el hígado de pollo en un mortero, seguidamente

repetimos los pasos con la hoja de espinaca.

 Luego pasamos a colocar en un tubo de ensayo unos trocitos de hígado, e

igualmente le agregamos a otro tubo de ensayo las hojas de espinaca.
 Seguidamente le añadimos 5 ml de agua oxigenada a cada tubo de ensayo.
 Inmediatamente observaremos un intenso burbujeo, que se debe al
desprendimiento de oxígeno de la reacción catalizada por la enzima catalasa.

Normal

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Experimento 2: Efecto de la temperatura

 Primeramente, rotulamos 5 tubos de ensayo.

 Luego añadimos 5 mL de hígado homogenado a cada tubo rotulado con las
siguientes condiciones:
 Tubo 1 = 80°C (poner tubo por 5 minutos)
 Tubo 2 = 37°C (poner tubo por 5 minutos)
 Tubo 3 = Temperatura ambiental
 Tubo 4 = En hielo (dejar por 30 minutos)
 Tubo 5 = En congelador / 4°C (dejar por 30 minutos)
 Seguidamente hacemos hervir la muestra durante 5 min, para después retirar el
agua sobrante, y poder añadir 5 ml de agua oxigenada.
 Luego pasamos a las observaciones de cada muestra:
 Logramos observar en el tubo Nº1 a 80°C al poner por 5 minutos a calentar, no
hay actividad enzimática. Por lo tanto, todas las enzimas sufren
desnaturalización frente al calor. Esto quiere decir que cuando la temperatura
es muy elevada, la enzima pierde su estructura terciaria, por lo tanto, su sitio
activo también se desnaturaliza, y ya no puede cumplir su función.
 Logramos observar en el tubo Nº2 a 37°C al poner por 5 minutos a calentar,
hay actividad enzimática lenta.
 Logramos observar en el tubo Nº3 a temperatura ambiente, si hay actividad
enzimática.
 Logramos observar en el tubo Nº4 al poner por 30 minutos en hielo, si hay
actividad enzimática rápida, porque se desnaturaliza por calor no por hielo.
 Logramos observar en el tubo Nº5 al poner por 30 minutos en congelador a
4ºC, que hay actividad enzimática lenta.

Efecto de la temperatura

Experimento 3: Efecto del pH

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 Rápidamente rotulamos 3 tubos de ensayo en A - B - C.

 Luego pasamos añadir 1 mL de hígado a cada tubo.
 Seguidamente le añadimos 3 mL de HCL (1M) al tubo A
 Luego añadimos 3 mL de NaOH (1M) al tubo B
 Seguidamente volvemos añadir 3 mL de agua sola al tubo C
 Después agitamos suavemente hasta mezclar
 Pasamos a incubar a temperatura ambiente la muestra durante 5 min (mezclándola).
 De ahí pasamos a retirar el ácido o base sobrante para añadir 3 mL de peróxido de
hidrógeno a cada tubo.
 Por último, pasamos a las observaciones:
 Logramos observar que en el tubo A, no hay actividad enzimática. (Porque se
descompone su estructura nativa).
 Logramos observar que en el tubo B, si hay actividad enzimática lenta.
 Logramos observar que en el tubo C, si hay actividad enzimática inmediatamente.

Efecto del pH

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VI.- Resultado
Cuadro de resultados:

Normal Temperatura pH
Tubo A: No hay actividad
Observaremos un intenso Tubo Nº1: No hay actividad enzimática. (Porque se
enzimática. Por lo tanto,
burbujeo, que se debe al descompone su estructura
todas las enzimas sufren
desprendimiento de oxígeno desnaturalización frente al nativa).
calor.
de la reacción catalizada por Tubo B: Si hay actividad
Tubo Nº2: Hay actividad
la enzima catalasa. enzimática lenta.
enzimática lenta. Tubo C: Si hay actividad
Tubo Nº3: Si hay actividad enzimática
enzimática. inmediatamente.
Tubo Nº4: Si hay actividad
enzimática rápida, porque se
desnaturaliza por calor no
por hielo.
Tubo Nº5: Hay actividad
enzimática lenta.

Resultado de Desnaturalización de enzimas por calor y PH

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VII.- Conclusión:

 Se determino un intenso burbujeo, que se debe al desprendimiento de oxígeno de

la reacción catalizada por la enzima catalasa.
 Se determino que cuando no hay actividad enzimática. Por lo tanto, todas las
enzimas sufren desnaturalización frente al calor.
 Se determino que hay actividad enzimática rápida por hielo, porque se
desnaturaliza por calor no por hielo.
 La elevación de la temperatura incrementa la velocidad de una reacción catalizada
por enzimas.

VIII.- Bibliografía

 file:///C:/Users/royqu_000/Downloads/informedebioquimica11-131013135412-
phpapp02.pdf
 https://prezi.com/fxrmc4azagqb/desnaturalizacion-por-temperatura-y-ph/

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IX.- Cuestionario:
1. ¿Cuál es la relación entre el pH y la actividad enzimática?

Como la conformación de las proteínas depende, en parte, de sus cargas eléctricas,

habrá un pH en el cual la conformación será la más adecuada para
la actividad catalítica (Figura de la derecha). Este es el llamado pH óptimo. La
mayoría de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH.

2. Las enzimas del estómago funcionan mejor con un pH de 2. ¿Cómo afectaría

un pH de 4 en el estómago a la digestión?

Si el pH aumenta a 4, siendo pH 2 el óptimo, la enzima se desnaturalizaría la

digestión se vería afectada al no haber enzima capaz de realizar dicha actividad.
Esto traería consigo enfermedades digestivas.

3. ¿De qué otras maneras se le ocurriría se podría probar el funcionamiento o

no funcionamiento de las enzimas estudiadas en el laboratorio?

Se podría estudiar su funcionamiento en base a la temperatura óptima. Asimismo,

se podría estudiar agregándole ciertos inhibidores que impidan su actividad.

4. ¿Puede mencionar ejemplos de otras enzimas que actúen en nuestro cuerpo?

 La amilasa salival, la cual se encarga de descomponer el almidón para
reducirlo en maltosa.
 La lactasa que actúa sobre la lactosa y la descompone en glucosa y
galactosa.
 La lipasa, encargada de digerir las grasas.
5. ¿Qué efecto podría tener una fiebre alta prolongada sobre el funcionamiento
de las enzimas?

Las enzimas son proteínas, y como tales tienen un funcionamiento óptimo a una
determinada temperatura. Cuando tenemos mucha fiebre, nos aumenta la
temperatura. El efecto de la temperatura sobre las proteínas es que las
desnaturaliza, o sea hace que estas comiencen a perder su forma y con ello, su
funcionalidad. Como la función de las enzimas es catalizar las reacciones
químicas de nuestro organismo, el efecto que produce la temperatura en las
enzimas es que vamos a “gastar" más energía de nuestro cuerpo para que las
reacciones se lleven a cabo, por lo tanto, sentiremos cansancio, y debilidad.

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6. ¿Puede mencionar alguna condición médica que se deba al

malfuncionamiento o no funcionamiento de una enzima?
 Intolerancia a la lactosa: cuando el cuerpo no produce suficiente lactasa
para descomponer la lactosa.
 Gastritis: debido al mal funcionamiento de las enzimas digestivas alno
poder digerir los alimentos.
 Enfermedad de Takahara (causa infecciones en la mucosa labial): cuando
existe una ausencia de catalasa por una falla genética.
7. ¿En qué parte de las células encontramos la enzima catalasa y cuál es la
función de dicha enzima?
La catalasa en una enzima que la podemos encontrar en muchos organismos
vivos, y cataliza la reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno en agua
y oxígeno
Esta función la efectúa esta enzima que cataliza su descomposición en agua y
oxígeno. Además, la catalasa se usa en la industria textil para la eliminación del
peróxido de hidrógeno, así como en menor medida se emplea en la limpieza de
lentes de contacto que se han esterilizado en una solución de peróxido de
hidrógeno.
8. ¿Qué factores, además de la temperatura, podrían afectar la actividad de una
enzima?

 Concentración de enzimas
 Concentración de sustrato
 Salinidad
 Temperatura
 Concentración del producto
 Activadores enzimáticos
 Inhibidores enzimáticos

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