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:
Inmunología 11
No. Y NOMBRE DE LA PRÁCTICA: FECHA DE ENTREGA:
Practica 10, Determinación por sábado 23 de
inmunodifusión radial –IDR noviembre del 2019
NOMBRE COMPLETO:
Tania Katiuska Pinargote Ortega
RESULTADOS
1. IDR 24 hora
LIBRE CONTROL
Hepatitis negativa
← Suero
← Control C4
← HIV positivo
← Hepatitis positiva
HIV negativo
Imagen 1.1 Se observa los halos de difusión después de haber reposado por 24 horas
2. IDR 48 horas
LIBRE C4 CONTROL
Suero
HIV +
Suero
Hepatitis+
Hepatitis+
Hepatitis+
Hepatitis+ Suero
HIV +
HIV + Hepatitis -
Suero
HIV +
HIV +
Imagen 2.1 Se observa los halos de difusión después de haber reposado por 48 horas
CONTROL
Horas en cámara Suero Control C4 HIV positivo HIV negativo Hepatitis Hepatitis
húmeda positiva negativa
24 0,5 cm 0,2 cm 0,1 cm 0 cm 0,3 cm 0 cm
48 0,6 cm 0,4 cm 0,2 cm 0 cm 0,3 cm 0 cm
Tabla 1.1 Se muestran los resultados medidos en mm del anticuerpo y los antígenos de la
sección de control
LIBRE
Horas en cámara Suero Control C4 HIV positivo HIV negativo Hepatitis positiva Hepatitis negativa
húmeda
24 0,8 cm 0,1 cm 0,1 cm 0 cm 0,3 cm 0 cm
0,7 cm 0,1 cm 0,4 cm
0,6 cm 0,1 cm 0,3 cm
0,5 cm 0,1 cm 0,3 cm
0,2 cm
48 0,9 cm 0,1 cm 0,1 cm 0 cm 0,3 cm 0 cm
0,7 cm 0,1 cm 0,4 cm
0,6 cm 0,2 cm 0,3 cm
0,6 cm 0,1 cm 0,3 cm
0,2 cm
Tabla 1.2 Se muestran los resultados medidos en mm del anticuerpo y los antígenos de la
sección libre
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
La Inmunodifusión radial es considerada como una técnica fundamentada inmunológicamente
específica y confiable, en donde por medio de la colocación de muestras biológica, en donde en la
práctica se usó suero, reaccionan por medio de los anticuerpos agregados, formando
inmunocomplejos junto con proteínas observándose precipitados de forma circular, que con el tiempo
de incubación puede aumentar o mantenerse, esto se puede observar en la imagen 1.1
comparándola con la 1.2 tanto en el control como en la libre, ya que según Alberto Juan Dorta-
Contreras “La proteína en cuestión forma una reacción inmunoquímica con el anticuerpo
específico presente en el gel de agarosa, y forma un inmunocomplejo que precipita y origina
un anillo de precipitado” (Alberto Contreras, 2018)
Al dejar reposar la caja Petri con agar, se realizó la lectura del halo formado en 24 y 48 horas, en
donde la Tabla 1.1 y 1.2 se muestran los valores en la determinación de la caja Petri en la sección
control como en la libre donde se muestra la reproducibilidad que nos permitió la valoración del
diámetro de cada anillo precipitado, observándose un aumento o el mantenimiento del diámetro del
halo, por lo tanto se puede determinar que se puede evidenciar que el método es válido, en el caso
donde se pudo observar un aumento del halo de las 24 a 48 horas, se puede considerar según
Alberto Juan Dorta-Contreras que puede ser “debido a que el anillo del inmunocomplejo
precipitado es en general de un diámetro mayor en comparación con otras proteínas y esto pudo
haber afectado la delimitación del anillo por la cercanía de los otros anillos de precipitación”.
(Alberto Contreras, 2018) para esto, se analiza que el espacio de separación de cada pocillo realizado
en el agar, en vez de ser 1 cm (determinado por la instructora) se aumente a 1,5cm o 2 para evitar
estas posible interferencias.
CUESTIONARIO
o Explique cuáles son las características que debe tener el gel de agarosa para procedimientos
de electroforesis.
o Investigue porqué razón se puede hacer una determinación de las cadenas kappa y lambda
de una inmunoglobulina
Por medio de un ensayo que es capaz de utilizar los anticuerpos policlonales específicos para
que se detecten las cadenas ligeras κ y λ mientras se encuentren en forma libre o no unidas
a cadenas pesadas, así formando parte de las inmunoglobulinas, ya que este medio se
considera muy sensible, tiene la capacidad de medir la cantidad de cadena ligera libre
producida por el tumor. (Delgado, 2015) Es decir, que no existe reacción con la cadena liviana
que se encuentra unida a la inmunoglobulina. “Esta gran especificidad se debe a que los
epítopes reconocidos por los anticuerpos policlonales del reactivo quedan ocultos tras la
cadena pesada, cuando la molécula está ensamblada como un anticuerpo y solo quedan
accesibles cuando se encuentran en las formas libres. La detección de ambas proteínas
séricas permite calcular la relación κ/λ, cuya alteración identifica monoclonalidad y tiene un
papel crítico en el diagnóstico de discrasias de células B”. (Delgado M. , 2014)
BIBLIOGRAFÍA
Alberto Contreras, C. L. (2018). Optimization of the usage of single radial immunodiffusion plates
from Siemens. Obtenido de
https://www.researchgate.net/publication/329327747_Optimizacion_del_uso_de_las_Placas
_de_Inmunodifusion_Radial_Simple_de_la_firma_Siemens
Delgado, F. (2015). Cadenas ligeras: ¿totales o libres? Qué medir y por qué. Obtenido de
https://www.medigraphic.com/pdfs/hematologia/re-2015/re152f.pdf
Delgado, M. (2014). Utilidad del ensayo de cadenas livianas libres en suero en el manejo de
gammapatías monoclonales: diagnóstico, pronóstico y monitoreo. Obtenido de
http://www.scielo.edu.uy/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1688-03902014000100008
García Martínez, S.-D. D. (2013). DIAGNÓSTICO DE LAS INMUNODEFICIENCIAS PRIMARIAS.
Obtenido de https://www.aeped.es/sites/default/files/documentos/7-
inmunodeficiencias_primarias_0.pdf
Microkit. (2014). http://www.medioscultivo.com/agarosa/. Obtenido de
http://www.medioscultivo.com/agarosa/
Surat. (2018). Técnicas de la purificación del anticuerpo. Obtenido de https://www.news-
medical.net/life-sciences/Antibody-Purification-Techniques-(Spanish).aspx