PRACTICA N° 02

SISTEMAS AMORTIGUADORES

1. INTRODUCCION

La capacidad amortiguadora o tampón de un sistema es la cantidad de ácido o base fuerte que

puede neutralizar sufriendo un desplazamiento de pH de una unidad. Esta eficiencia amortiguadora está
vinculada a dos factores: las concentraciones absolutas del sistema y la proporción relativa de las formas
disociada y sin disociar. Dicha eficacia es máxima cuando el cociente sal/ácido está próximo a la unidad.

La curva de titulación de una ácido débil como el acético representa las variaciones de pH con
respecto a diferentes proporciones relativas entre la sal y el ácido de una solución tampón. Antes de
agregar la base, el pH se debe solamente al ácido. Tan pronto como se ha agregado algo de esta base, ésta
reacciona con una cantidad equivalente del ácido y forma una cantidad equivalente de sal y agua. Pero el
ácido débil, más su sal disuelta, constituyen una solución tampón, cuyo pH puede calcularse mediante el
uso de la ecuación de Henderson Haseelbach.

La constancia de la concentración de hidrogeniones en el líquido extracelular es fundamental,

puesto que influye sobre la estructura y actividad de las moléculas proteicas, sobre la distribución de otros
iones entre las células y el líquido extracelular y sobre la actividad de hormonas, drogas y otros iones.
Cerca de la mitad de los ácidos producidos metabólicamente son neutralizados por las bases procedentes
de los alimentos, pero el resto debe ser neutralizado por el propio organismo. Para ello, éste se vale de dos
procedimientos consecutivos: el tamponamiento del ácido (o base) y su posterior eliminación del ácido (o
base), es decir, la compensación respiratoria y renal.

Los tampones fisiológicos son la primera línea de defensa frente a los cambios del pH de los
líquidos corporales. El tampón intracelular más importante es el sistema fosfato y el principal tampón
extracelular en la sangre y fluidos intersticiales es el sistema bicarbonato, otros sistemas reguladores del
pH sanguíneo son las proteínas y los aminoácidos.

2. JUSTIFICACIÓN

1. Esta práctica nos permite aprender hallar los valores de pH de una solución tampón después de
haberle adicionado una base o ácido fuerte a través de la ecuación de Henderson Hasselbach.
2. Comparar el pH práctico, obtenido en los tampones preparados, con el pH teórico, calculado con la
ecuación de Henderson Hasselbach.
3. Nos permite conocer la importancia del rol de los tampones fisiológicos en nuestro organismo para
mantener el equilibrio.
3. MATERIALES Y REACTIVOS

 Potenciómetro.
 Beackers de 100 y 250 mL.
 Pipetas graduadas y volumétricas.
 Baguetas.
 Fosfato ácido de potasio 0.1 M (K2HPO4 0.1 M).
 Fosfato diácido de potasio 0.1 M (KH2PO4 0.1 M).
 Acido acético 0.2 M.
 Acetato de sodio 0.2 M.
 Buffer fosfato pH 7.2 (ya preparado).
 Indicador fenolftaleina 1 %
 Indicador naranja de metilo 0.5 %
 Agua destilada.

4. METODO OPERATIVO

PRIMERA EXPERIENCIA: PREPARACION DE BUFFER FOSFATO.

 Se prepararon mezclas en los vasos de precipitado de 50 mL a partir de las soluciones de K2HPO4 0.1
M y K2HPO4 0.1 M, en diferentes volúmenes de ácido y base conjugada con las proporciones dadas.
 Se halló el pH teórico con la fórmula de Henderson Hasselbach..
 Se realizó la calibración del potenciómetro y se determinó el pH de cada una de las soluciones.
 Se anotaron los datos en la tabla de resultados.
 Se calculó la diferencia entre el pH teórico y el práctico y se anotaron las conclusiones respectivas.

SEGUNDA EXPERIENCIA: PREPARACION DE BUFFER ACETATO

 Se prepararon mezclas en los vasos de precipitado de 50 mL a partir de las soluciones de ácido acético
0.2 M y acetato de sodio 0.2 M, en diferentes volúmenes de ácido y base conjugada con las
proporciones dadas.
 Se halló el pH teórico con la fórmula de Henderson Hasselbach..
 Se realizó la calibración del potenciómetro y se determinó el pH de cada una de las soluciones.
 Se anotaron los datos en la tabla de resultados.
 Se calculó la diferencia entre el pH teórico y el práctico y se anotaron las conclusiones respectivas.

TERCERA EXPERIENCIA: MECANISMO DE ACCION DE SISTEMAS BUFFERS.

  Se colocaron 10 L de agua destilada y dos gotas de naranja de metilo en un vaso de precipitado “A”.
En otro vaso “B” se colocaron 10 mL de buffer fofato de pH 7.2 y el mismo indicador.
 Se realizó la titulación de ambas sustancias con HCl 0.1 M
 Se anotó el gasto y las conclusiones.
 Se colocaron 10 mL de agua destilada y dos gotas de fenolftaleina en un vaso de precipitado “C”. En
otro vaso “D” se colocaron 10 mL de buffer fosfato de pH 7.2 y el mismo indicador.
 Se realizó la titulación de ambas sustancias con NaOH 0.1 M.
 Se anotó el gasto y se sacó conclusiones.

5. RESULTADOS

PRIMERA EXPERIENCIA: PREPARACION DE BUFFER FOSFATO

Reactivos 1 2 3 4 5 6 7 8 9
K2HPO4 0.1 M 39.6 38.0 36.0 28.0 20.0 12.0 4.0 2.0 0.4
KH2PO4 0.1 M 0.4 2.0 4.0 12.0 20.0 28.0 36.0 38.0 39.6
pH teórico 9.17 8.48 8.15 7.57 7.20 6.83 6.24 5.92 5.20
pH práctico 9.37 8.60 8.83 7.83 7.30 7.11 6.37 5.95 5.39
Diferencia 0.2 0.12 0.68 0.26 0.1 0.28 0.13 0.03 0.19

SEGUNDA EXPERIENCIA: PREPARACION DE BUFFER ACETATO

Reactivo 1 2 3 4 5 6 7
CH3COONa 0.2 M 20.0 32.0 24.0 36.0 38.0 30.0 14.0
CH3COOH 0.1 M 20.0 8.0 16.0 4.0 2.0 10.0 26.0
pH teórico 4.73 5.33 4.91 5.68 6.01 5.21 4.46
pH práctico 4.71 5.52 4.94 5.85 6.38 5.33 4.34
Diferencia 0.02 0.17 0.03 0.17 0.37 0.12 0.12

TERCERA EXPERIENCIA: MECANISMO DE ACCION DE SISTEMAS BUFFERS.

Vasos Gasto
A 0.4 mL
B 6.0 mL
C 0.2 mL
D 8.5 mL

6. DISCUSION DE RESULTADOS Y CONCLUSIONES

 Se obtuvo el pH práctico cercano al pH teórico en la mayoría de los casos, pero en

uno la diferencia fue de 0.68, debido seguramente a una mala toma de los volumenes,
a la mala limpieza del electrodo y la impureza de las sustancias.
  En el vaso A la reacción fue muy rápida y el gasto de HCl fue mínimo, en cambio en
el vaso B fue mayor el tiempo para alcanzar su máxima capacidad de tamponamiento
y el gasto fue mayor. Este cambio se observa porque se obtiene el color del indicador
(cambio de color en las coloraciones de las soluciones).
 En el vaso C la reacción ocurre rápidamente, más no así en el vaso D. Se observa una
gran diferencia entre el gasto de C y D.

7. RECOMENDACIONES

 Para la disminución del error, es decir, una mejor aproximación entre los valores de
la práctica con el teórico, se recomienda que las soluciones tanto ácidas como básicas
sean lo más exactas posibles (con una mejor técnica y destreza en el uso de los
instrumentos) y así se pueda obtener el volumen requerido en el manual de
laboratorio.
 Se recomienda titular con mucha precisión para poder obtener un valor exacto del
gasto, tanto del ácido como de la base y poder hacer las comparaciones necesarias.

8. CUESTIONARIO

1. Describa la preparación de 1 L de amortiguador acetato 0.1 M de un pH 5.2 si el

pKa= 4.74 a partir de acetato de sodio (CH3COONa.3H2O, PM = 136) y ácido
acético 1 M.
pH = pKa + log (Sal)/(Ácido)
5.2 = 4.74 + log S/A  log S/A = 0.46  S = 2.88 A
Buffer = A + S
0.1 = A + 2.88 A
A = 0.0258 moles/L
S = 0.0742 moles/L

Para el ácido acético: x = 25.8 mL

1 mol  1000 ml Para la sal conjugada:
0.0258  x 1 mol  136 g.
 0.0742  y y = 10.09 g

Respuesta: Para la preparación se necesitarán de 25.8 mL de ácido acético y 10.09 g

de acetato de sodio

2. Se tiene 250 mL de solución amortiguadora 0.35 M de ácido acético y 0.35 M de

acetato de sodio ¿Cuál será el pH si se agrega 30 mL de HCl 0.1 M suponiendo que
los volúmenes son aditivos? Ka = 1.8 x 10-5.
Ka = 1.8 x 10-5  pKa = - log (1.8 x 10-5)  pKa = 4.74
Para el ácido: Para la base
0.35 moles  1000 ml 0.35 moles  1000 ml
x  250 ml y  250 ml
x = 0.0875 moles x = 0.0875 moles
pH = pKa  pH = 4.74
Se le agrega 0.03 L de HCl 0.1 M.:
0.1 moles  1000
x  30
x = 3 x 10-3 moles HCl.
El volumen total : 250 mL + 30 mL = 280 mL.
La reacción es la siguiente:
CH3COOH  H+ + CH3COO -
0.0875 + 0.003 0.0875 - 0.003
F0.0875 - 0.003 I
4.74 + logG
G J
0.0875 + 0.003 J
pH = 280
G
H 280 JK
pH = 4.74 + log (0.9337)  9H = 4.71
Respuesta: El pH será de 4.71.

3. Calculemos el pH de una mezcla constituida por 10 mL de acetato de sodio 0.1M y

20 mL de ácido acético 1 M si el pKa es 4.74.
Acido (20 mL 1 M): 1 mol  1000 mL
 x  20 mL 0.1 mol  1000 mL
x = 0.02 moles x  10 mL
Base (10 mL 0.1 M): x = 10-3 moles
pH = pKa + log S/A
pH = 4.74 + log (10-3/0.02)
pH = 4.74 + log (0.05)
pH = 3.44
Respuesta: El pH de la mezcla es de 3.44

4. Describa la preparación de 5 L de un tampón acetato 0.3 M pH 5 partiendo de acetato

de sodio trihidratado CH3COONa.3H2O (PM = 136) y ácido acético 2.5 M.
Buffer 5 mL 0.3 M, pH = 5
pH = pKa + log S/A
5 = 4.74 + log S/A  0.26 = log S/A
1.82 = S/A
0.3 = 1.82 A + A
A = 0.11
B = 0.19
Para el ácido: Para la sal:
0.11 moles  1000 mL 0.19 mol  1000 mL
x  5000 mL x  5000 mL
x = 0.55 moles x = 0.95 moles

Para el ácido: Para la base:

2.5 moles  1000 mL n = W/PM
0.55 moles  x W = 136 x 0.95
x = 220 mL W = 129.2 g.
Respuesta: Para preparar dicha sustancia es necesario 220 mL del ácido y 129.2 g de la
sal.

5. ¿Cuál será el pH de buffer “x” si la concentración de ácido es de 0.225 M y sal 0.550

M con un Ka 1.4x10-3 teniendo un volumen de 250 mL? Y si ese volumen fuera la
mitad, ¿Cuál sería el nuevo pH?
 A = 0.225 M
S = 0.55 M
Ka = 1.4 x 10-3
pKa = 2.85
Para el ácido: Para la base:
0.225 moles  1000 mL 0.55 moles  1000 mL
x  250 mL x  250 mL
x = 0.0563 moles x = 0.1375 moles
pH = pKa + log S/A  2.85 + log (0.1375/0.0563)
pH = 3.24
Respuesta: El pH sería de 3.24, y si el volumen fuera la mitad el nuevo pH sería el
mismo (pH = 3.24) porque la concentración del ácido y el de la base conjugada se
mantienen iguales, por lo tanto no cambia.

6. ¿Cómo prepararía 300 mL de tampón citrato 0.01 a pH 4.65 a partir de citrato

monosódico (PM = 214) y citrato disódico (PM = 236)?
pH2 = 4.75
pH = pKa + log S/A
4.65 = 4.75 + log S/A
-0.1 = log S/A
0.7943 = S/A
0.01= 0.7943 A + A
A = 5.573 x 10-3 x 0.3
S = 1.3281 x 10-3
Para el citrato disódico: Para el citrato monosódico:
1 mol  236 g 1 mol  214 g
1.3281 x 10-3  x 1.6719 x 10-3  x
x = 0.3134 g x = 0.358 g
 Respuesta: Se requiere de 0.3134 g de sal y 0.358 g de ácido y suficiente agua para
preparar la solución.

9. BIBLIOGRAFIA
 HERRERA, Emilio.1991. BIOQUIMICA. Aspectos estructurales y vías metabólicas.
Tomo I. Editorial McGraw Hill - Interamericana de España. Primera edición. Madrid
- España.
 MANUAL DE PRACTICAS DE BIOQUIMICA I. UNALM. 2003.
 NIETO ARAVENA, Cecilia. Apuntes de Bioquímica I. Solucionario de Problemas.
Departamento de Química, UNALM. Lima - Perú. 1999.