Esta forma de estudiar las plantas El cultivo in vitro consiste en tomar tiene dos características una porción de una planta (ej. el fundamentales: la asepsia (abandono ápice, una hoja o segmento de ella, de gérmenes, etc), y la inspección de segmento de tallo, meristemo, los factores que afectan el desarrollo. embrión, nudo, semilla, antera, etc.) y El progreso alcanzado por las colocarla en un medio nutritivo estéril ciencias biológicas ha autorizado en (usualmente gelificado, semisólido) los últimos años el artículo detallado donde se regenerará una o muchas de las plantas total a nivel citológico plantas. como molecular, y en situación de El cultivo in vitro de vegetales se laboratorio es posible en este fundamenta en el retraimiento de momento representar todos los órganos, tejidos o células vegetales y factores que puedan incurrir en el en el arreglo del contexto necesarias desarrollo y progreso de las plantas. para la producción de respuestas Este principio general se aplica fisiológicas o morfogénicas a partir de asimismo al cultivo in vitro de plantas. estos explantes (Höxtermann, 1997). La totipotencia es la capacidad de El cultivo de células y tejidos in vitro una célula de generar un individuo (CCTV) involucra diferentes técnicas completamente idéntico a la célula a partir de desigual material vegetal madre, la cual tiene la misma tales como cloroplastos, células, información genética y la misma tejidos, órganos e incluso plantas función, es decir, indica que completas. cualquier célula vegetal contiene una El énfasis cultivo in vitro de plantas, copia íntegra del material genético de significa estudiar plantas la planta a la que pertenece sin intrínsecamente de un frasco de importar su función o posición en ella, y por lo tanto tiene el potencial para usado para los procesos de difusión regenerar una nueva planta completa. in vitro son las yemas vegetativas de El CCTV es una forma de las plantas. Los frascos que reproducción asexual, la cual se contienen las plantas se ubican en puede realizar gracias al mecanismo estanterías con luminaria artificial de división mitótico de las células intrínsecamente de la cámara de vegetales. La división celular mitótica desarrollo, en que se fija la implica una replicación de los temperatura en valores que oscilan cromosomas de las células hijas, por entre los 21 y 23°C, conjuntamente lo que poseen un genotipo idéntico al de inspeccionar la cuantía de horas de la célula madre. (1) de luz. Por su parte, el medio de labor se compone de una mezcla de sales El cultivo se incuba bajo condiciones minerales, vitaminas reguladores de de luz, temperatura y humedad crecimiento, azúcar, agua y agar. La controladas, que junto con las composición del medio depende de la fisicoquímicas y nutricionales especie vegetal y de la etapa del conducen el desarrollo del explante proceso de micropropagación. hacia la formación de una masa celular amorfa denominada callo, o DESARROLLO hacia la diferenciación en un tejido MEDIOS DE CULTIVO organizado que producirá órganos o El medio de cultivo puede ser solido o embriones. (1) liquido (agente gelificante) como el La micropropagación o difusión agar que es un polisacárido de algas clonal, es una de las aplicaciones rojas y se vuelve gelatinosa al crecidamente generalizadas del disolverlo en agua y calentado cultivo in vitro, a través de la este medio de cultivo tiene que estar micropropagación, a partir de un trozo esterilizado (explante) de un vegetal madre, se CONDICIONES DE TRABAJO obtiene una clase uniforme, con plantas genéticamente idénticas, Hay que trabajar en condiciones denominadas clones. El explante más estériles en cabinas de flujo laminar MATERIALES DE PARTIDA alcohol puro para evitar o disminuir el exceso de contaminación, limpiar la Se puede utilizar semillas o plantas, superficie de trabajo encender el órganos. mechero de gas flamear el Explantos, tejidos células y instrumental a utilizar pinzas y bisturí, protoplasmas esterilizar los embriones con agua esperar 5 min y seguir esterilizando OBJETIVOS con el alcohol hasta concluir con Evaluar diferentes medios de todos los embriones , luego depositar cultivo in vitro en el desarrollo los embriones en el medio de cultivo. de embrión RESULTADOS Establecer el medio de cultivo adecuado para el desarrollo in En un frasco se pudo observar que se vitro de embriones contamino con hongos
MATERIALES Se ha informado que existen más de
8,000 especies de hongos que Medio de cultivo producen enfermedades en las Material vegetal (hierba buena, plantas (2), los cuales se relacionan estevia, semillas) con los tejidos externos e internos de Alcohol para las manos las misma .La infección por Fusarium Pinzas y bisturí sp. Se va expandiendo lentamente y Mechero de gas y alcohol las partes lesionadas se hunden y
PROCEDIMIENTO arrugan, tomando formas de anillos
concéntricos, a medida que el tejido El estudio se realizó en el laboratorio se va secando. (3) De las lesiones de PROFAC de la universidad mayor emerge el micelio del hong. Por otro de san simon donde se Remojaro las lado, Penicillium, considerado un semillas un dia antes , con un bisturí hongo de postcosecha, produce sacar el embrión de las semillas de micotoxinas que dañan los frutos, poroto haba arveja y maíz esterilizar flores y semillas de las plantas Los las semillas Limpiar las manos con contaminantes pueden introducirse con el explante, durante la manipulación en el laboratorio o por bacterias endofíticas (4). Estos patógenos endófitos y epifíticos pueden interferir con el desarrollo del cultivo de tejidos y competir por los nutrientes, por lo que las contaminaciones microbianas en la base del explante o alrededor de el, a) explante de segmento nodal, constituyen una gran problemática en b)Inducción de callo, c)multibrotación. el cultivo in vitro,. Por otro lado, se ha informado que estos dos géneros CONCLUSIONES
fúngicos se detectan frecuentemente Se encontró que las células
en el cultivo de tejidos vegetales. (5) desdiferenciadas presentan una gráfica típica sigmoide con las fases DISCUSIÓN de acomodo, exponencial y La alineación de callo, se indujo a expiración de la celular, resultandoun partir de explantes detallo con un solo tiempo de duplicación celular (tdc) de nudo, el estudio de conjunto 6.64 días y una velocidad específica procedimiento se llevó a extremo por de crecimiento. triplicado. En las observaciones realizadas en las primeras triunvirato Los cultivos in vitro de Phaseolus
semanas (21 días) de período, los Vulgaris dividir de explantes de brote
explantes presentaron formación de con las mismas contexto de
células desdiferenciadas (callo), así incubación.
como brotes múltiples, la en la Continuar con la división del material
mayoría de los tratamientos in vitro para la purificación y utilizados. aislamiento de la curcina. BIBLIOGRAFÍA 1 Cultivo In Vitro de Células y Tejidos . Vegetal. [Online]. Available from: