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CULTIVO IN VITRO DE CELULAS Y TEJIDOS EN VEGETALES Y SEMILLAS

STEVIA RABAUDIANA, MENTHA SPICATA, PHASEOLUS VULGARIS, VICIA


FABA,PISUM SATIVUM, ZEA MAYS

INTRODUCCIÓN vidrio en un ambiente compuesto.


Esta forma de estudiar las plantas
El cultivo in vitro consiste en tomar
tiene dos características
una porción de una planta (ej. el
fundamentales: la asepsia (abandono
ápice, una hoja o segmento de ella,
de gérmenes, etc), y la inspección de
segmento de tallo, meristemo,
los factores que afectan el desarrollo.
embrión, nudo, semilla, antera, etc.) y
El progreso alcanzado por las
colocarla en un medio nutritivo estéril
ciencias biológicas ha autorizado en
(usualmente gelificado, semisólido)
los últimos años el artículo detallado
donde se regenerará una o muchas
de las plantas total a nivel citológico
plantas.
como molecular, y en situación de
El cultivo in vitro de vegetales se laboratorio es posible en este
fundamenta en el retraimiento de momento representar todos los
órganos, tejidos o células vegetales y factores que puedan incurrir en el
en el arreglo del contexto necesarias desarrollo y progreso de las plantas.
para la producción de respuestas Este principio general se aplica
fisiológicas o morfogénicas a partir de asimismo al cultivo in vitro de plantas.
estos explantes (Höxtermann, 1997).
La totipotencia es la capacidad de
El cultivo de células y tejidos in vitro
una célula de generar un individuo
(CCTV) involucra diferentes técnicas
completamente idéntico a la célula
a partir de desigual material vegetal
madre, la cual tiene la misma
tales como cloroplastos, células,
información genética y la misma
tejidos, órganos e incluso plantas
función, es decir, indica que
completas.
cualquier célula vegetal contiene una
El énfasis cultivo in vitro de plantas, copia íntegra del material genético de
significa estudiar plantas la planta a la que pertenece sin
intrínsecamente de un frasco de importar su función o posición en ella,
y por lo tanto tiene el potencial para usado para los procesos de difusión
regenerar una nueva planta completa. in vitro son las yemas vegetativas de
El CCTV es una forma de las plantas. Los frascos que
reproducción asexual, la cual se contienen las plantas se ubican en
puede realizar gracias al mecanismo estanterías con luminaria artificial
de división mitótico de las células intrínsecamente de la cámara de
vegetales. La división celular mitótica desarrollo, en que se fija la
implica una replicación de los temperatura en valores que oscilan
cromosomas de las células hijas, por entre los 21 y 23°C, conjuntamente
lo que poseen un genotipo idéntico al de inspeccionar la cuantía de horas
de la célula madre. (1) de luz. Por su parte, el medio de labor
se compone de una mezcla de sales
El cultivo se incuba bajo condiciones
minerales, vitaminas reguladores de
de luz, temperatura y humedad
crecimiento, azúcar, agua y agar. La
controladas, que junto con las
composición del medio depende de la
fisicoquímicas y nutricionales
especie vegetal y de la etapa del
conducen el desarrollo del explante
proceso de micropropagación.
hacia la formación de una masa
celular amorfa denominada callo, o DESARROLLO
hacia la diferenciación en un tejido MEDIOS DE CULTIVO
organizado que producirá órganos o
El medio de cultivo puede ser solido o
embriones. (1)
liquido (agente gelificante) como el
La micropropagación o difusión agar que es un polisacárido de algas
clonal, es una de las aplicaciones rojas y se vuelve gelatinosa al
crecidamente generalizadas del disolverlo en agua y calentado
cultivo in vitro, a través de la este medio de cultivo tiene que estar
micropropagación, a partir de un trozo esterilizado
(explante) de un vegetal madre, se
CONDICIONES DE TRABAJO
obtiene una clase uniforme, con
plantas genéticamente idénticas, Hay que trabajar en condiciones
denominadas clones. El explante más estériles en cabinas de flujo laminar
MATERIALES DE PARTIDA alcohol puro para evitar o disminuir el
exceso de contaminación, limpiar la
Se puede utilizar semillas o plantas,
superficie de trabajo encender el
órganos.
mechero de gas flamear el
 Explantos, tejidos células y instrumental a utilizar pinzas y bisturí,
protoplasmas esterilizar los embriones con agua
esperar 5 min y seguir esterilizando
OBJETIVOS
con el alcohol hasta concluir con
 Evaluar diferentes medios de todos los embriones , luego depositar
cultivo in vitro en el desarrollo los embriones en el medio de cultivo.
de embrión
RESULTADOS
 Establecer el medio de cultivo
adecuado para el desarrollo in En un frasco se pudo observar que se
vitro de embriones contamino con hongos

MATERIALES Se ha informado que existen más de


8,000 especies de hongos que
 Medio de cultivo
producen enfermedades en las
 Material vegetal (hierba buena,
plantas (2), los cuales se relacionan
estevia, semillas)
con los tejidos externos e internos de
 Alcohol para las manos
las misma .La infección por Fusarium
 Pinzas y bisturí sp. Se va expandiendo lentamente y
 Mechero de gas y alcohol las partes lesionadas se hunden y

PROCEDIMIENTO arrugan, tomando formas de anillos


concéntricos, a medida que el tejido
El estudio se realizó en el laboratorio se va secando. (3) De las lesiones
de PROFAC de la universidad mayor emerge el micelio del hong. Por otro
de san simon donde se Remojaro las lado, Penicillium, considerado un
semillas un dia antes , con un bisturí hongo de postcosecha, produce
sacar el embrión de las semillas de micotoxinas que dañan los frutos,
poroto haba arveja y maíz esterilizar flores y semillas de las plantas Los
las semillas Limpiar las manos con contaminantes pueden introducirse
con el explante, durante la
manipulación en el laboratorio o por
bacterias endofíticas (4). Estos
patógenos endófitos y epifíticos
pueden interferir con el desarrollo del
cultivo de tejidos y competir por los
nutrientes, por lo que las
contaminaciones microbianas en la
base del explante o alrededor de el,
a) explante de segmento nodal,
constituyen una gran problemática en b)Inducción de callo, c)multibrotación.
el cultivo in vitro,. Por otro lado, se ha
informado que estos dos géneros CONCLUSIONES

fúngicos se detectan frecuentemente Se encontró que las células


en el cultivo de tejidos vegetales. (5) desdiferenciadas presentan una
gráfica típica sigmoide con las fases
DISCUSIÓN
de acomodo, exponencial y
La alineación de callo, se indujo a expiración de la celular, resultandoun
partir de explantes detallo con un solo tiempo de duplicación celular (tdc) de
nudo, el estudio de conjunto 6.64 días y una velocidad específica
procedimiento se llevó a extremo por de crecimiento.
triplicado. En las observaciones
realizadas en las primeras triunvirato Los cultivos in vitro de Phaseolus

semanas (21 días) de período, los Vulgaris dividir de explantes de brote

explantes presentaron formación de con las mismas contexto de

células desdiferenciadas (callo), así incubación.

como brotes múltiples, la en la Continuar con la división del material


mayoría de los tratamientos in vitro para la purificación y
utilizados. aislamiento de la curcina.
BIBLIOGRAFÍA
1 Cultivo In Vitro de Células y Tejidos
. Vegetal. [Online]. Available from:

https://www.intagri.com/articulos/nu
tricion-vegetal/cultivo-in-vitro-de-
celulas-y-tejidos-vegetal.

2 Agrios GNPp. Ed. Elsevier


. Academic Press; 2005.

3 Altan F, Bürün BySN“. Fungal


. contaminants observed during

micropropagation of Lilium
candidum; 2010.

4 Castro IyCA. Manejo de plagas y


. enfermedades en el cultivo de la

papa. Chile: Ed. Imprenta Austra ;


2011.

5 Chandra JRyCS. K. “Endogenous


. microbial contamination during In

vitro culture of sweet potato


(Ipomoea batatas Lam):
identification and prevention”:
Journal of Agricultural Technology;
2011.

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