Laboratorio

Técnicas Inmunológicas- Serológicas

‘’Contrainmunoelectroforesis’’
Contrainmunoelectrofluorescencia
¿Qué es?

Inmunofluorescencia indirecta

Técnica que consiste en la difusión de antígeno(+) y anticuerpo(-) en geles

sometidos a un campo eléctrico, hasta formar complejos inmunes que pueden ser
visualizados.

Se reconoce el complejo Antígeno anticuerpo, utilizando otro anticuerpo.

Contrainmunofluorescencia
Ventajas:

- Fácil y rápida ejecución(hasta 1h.)

- Libre de falsos positivos

Desventajas:

- No sirve como método de urgencia,(se necesitan de 48 a 72 hrs para su

interpretación)
Técnica
Fijación del material biológico en el agar.

Permeabilización de la membrana para el ingreso de los anticuerpos.

Bloqueo para impedir reacciones inespecíficas de los anticuerpos con el material biológico.

Inmunodetección.

Se suele utilizar un gel de agarosa al 1% con un grosor cercano al milímetro (permite el libre paso y separación de las proteínas, pero es lo
suficientemente estrecho como para impedir el paso de los complejos antígeno-anticuerpo), y un pH en torno al 8,6 ( en este pH los
anticuerpos son prácticamente inmóviles) Se trabaja en una bañera de electroforesis de tipo horizontal.

En la placa estarán los antígenos, se agrega los anticuerpos del paciente que están presentes en su sangre, se añaden anticuerpos
específicos marcado con fluorocromo que se añadirán a los complejos anteriormente formado.

Se observan las placas en un microscopio de fluorescencia. Los complejos de inmunoprecipitación se pueden ver en el mismo gel de
agarosa