DETERMIANCIÓN DE VITAMINA C POR ESPECTROFOTOMETRÍA
Blas Damian, Marcelo
Escuela Profesional de Ingeniería Agroindustrial, EPIA, Universidad Nacional del Santa, Nuevo Chimbote, Perú
I. INTRODUCCIÓN
Es posible encontrar una combinación
temperatura y tiempo de pasteurización que
minimice la degradación de vitamina “C”.
Considerando que uno de los constituyentes que se
encuentra en gran cantidad en la naranja, es la
vitamina C, se hace necesario encontrar métodos
adecuados de conservación que eviten la degradación
u oxidación de la misma debido a que esta es muy
inestable a los procesos de tratamientos térmicos, luz,
oxigeno, pH, trazas de metal, etc.
El instrumento utilizado en la espectrometría
ultravioleta-visible se llama espectrofotómetro UV-
I.
Vis. Mide la intensidad de luz que pasa a través II.
de
una muestra (I), y la compara con la intensidad de luz
antes de pasar a través de la muestra (Io). La relación
I / Io se llama transmitancia, y se expresa
habitualmente como un porcentaje (%T) [1]
Por otro lado [b] manifiesta que la espectrofotometría
UV-visible es una técnica analítica que permite
determinar la concentración de un compuesto en
solución, se basa en que las moléculas absorben las
radiaciones electromagnéticas y a su vez que la
cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de
la concentración.
El ácido ascórbico presente en forma natural en
muchas frutas y verduras, es una vitamina esencial
para los humanos. Propiedades como fijar radicales
libres y control del pardeamiento, hacen que esta
vitamina sea uno de los aditivos más empleados en la
industrial de los alimentos. Su determinación basada
en sus propiedades fisicoquímicas se realiza por
de diferentes técnicas analíticas. El uso de la
espectroscopía Ultravioleta-Visible (UV-Vis),
para la determinación del ácido ascórbico, es
ampliamente utilizada en investigaciones con
alimentos, pues este ácido presenta transiciones
electrónicas fuertes en la región UV, facilitando su
identificación y cuantificación por esta técnica. [2]
El objetivo de esta práctica se basó en cuantificar
vitamina C en muestras de alimentos por
espectrofotometría.
II. MATERIALES Y MÉTODOS
Los materiales que se usaron fueron: naranjas de
la misma especie, cubetas del Espectrofotómetro,
filtros del Espectrofotómetro 480, 520 y 540 nm,
papel filtro y Tissue, pipetas, fiolas
Preparación de reactivos
Los reactivos que utilizamos en la práctica fueron
hechos con anticipación por el ingeniero a cargo
del laboratorio. Pero para preparar una solución de
ácido oxálico al 0.4% lo que se hace es pesar 4
gramos de ácido oxálico la llevamos a una fiola de
1L y aforamos con agua destilada. Para preparar la
solución madre se debe pesar 100mg de ácido
ascórbico y se lleva
 a una fiola de 100ml y se afora con una solución
de ácido oxálico al 0.4%. Para la preparación del
colorante se tiene que pesar 12 mg de 2,6
diclorofenolindofenol llevar a una fiola y aforar
con 1000ml de agua destilada, la recomendación
que se da es de forrar la botella de color oscuro y
mantener en refrigeración. Para la preparación del
estándar de trabajo se tomó 1, 2, 3 , 4 y 5 ml de la
III. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
La tabla N°1 nos muestra los datos obtenido con
respecto a la preparación de la curva estándar.
Observando la figura 1 la cual nos muestra la
variación
Tabla 1. Absorbancia de solución de ácido ascórbico

solución madre y se llevó a una fiola de 10 0ml y [C] mg L1 L2 L1-L2

se aforo con una solución de ácido oxálico al 1 0.2424 0.0546 0.1878
0.4%. 2 0.2338 0.0555 0.1783
3 0.2272 0.0412 0.186
Preparación de la Curva Estándar 4 0.2285 0.034 0.1945
Empezamos tomando 4 tubos de prueba y los
5 0.2458 0.0377 0.2081
enumeramos del 1 al IV, al primer tubo le
agregamos 10 ml de agua destilada, al segundo 1
0.21
ml de ácido oxálico al 0.4%, al tercer tubo 1 ml de
0.205 y = 0.0057x + 0.1739
estándar de trabajo (ET) N°1 + 9 ml. Y finalmente 0.2 R² = 0.6437

1 ml del estándar del trabajo. Luego ajustamos la 0.195

0.19
absorbancia a 0 y añadimos 9 ml del colorante al 0.185
tubo II. 0.18
0.175
0 1 2 3 4 5 6
Preparación de la Muestra
Ilustración 1. Absorbancia de solución de ácido ascórbico
Empezamos preparando 50 g de muestra con 350 ml
Aquí tenemos nuestro grafico tomando los 5
de ácido oxálico al 0.4% y filtramos luego
puntos leídos, teniendo en cuenta el error en el
determinamos L1 y en el tubo III colocamos 1 ml.
primer tubo por fallas en la práctica. [3]
de filtrado (muestra) más 9 ml de agua ajustar al
cero la absorbancia, después el tubo IV colocamos
1 ml. de filtrado (muestra) más 9 ml de colorante y
registramos la absorbancia L2 después de 15
segundos.
 En la tabla N°2 vemos los datos en la lectura de la IV. CONCLUSION
muestra de zumo de naranja  Observamos que el efecto de la temperatura se
vio presente en la degradación de vitaminas.
Muestra L1 L2 L1-L2
El contenido de vitamina C en las frutas y
Naranja 0.2169 0.0199 0.197
verduras varía dependiendo del grado de
madurez, el menor cuando están verdes,

L1-L2 aumenta su cantidad cuando está en su punto

0.21
y luego vuelve a disminuir; por lo que la fruta
y = 0.0098x + 0.1575 madura Ha perdido parte de su contenido de
0.2
R² = 0.9803
0.19 vitamina C.
0.18  La vitamina C se oxida rápidamente y por
0.17 tanto requiere de cuidados al momento de
0 1 2 3 4 5 6
exponerla al aire, calor y agua. Por tanto
Ilustración 2. Absorbancia vs concentración
cuanto menos calor se aplique, menor será la
pérdida de contenido. En los jugos, la
En esta segunda figura vemos nuestra ecuación en
oxidación afecta por exposición prolongada
0.9803 siendo más exacta pero no tomamos en
con el aire y por no conservarlos en recipientes
cuenta la primera lectura.
oscuros.

En esta Tabla N°3 reemplazamos a la ecuación.

REFERENCIAS
L1_L2 X(mg/100ml) X(g/100ml)
0.197 4.031 57.5801749 [1] Brunatti y De Nápoli (2009) Vitamina C UV-
Visible. Cumplimiento de la Ley de Lambert-
En esta tabla podemos observar que valor de L1-L2 Beer
está dentro del rango permitido para la concentración [2] Sánchez (1999) Vitamina C UV-VIS aplicada
de ácido ascórbico por mg de muestra. al estudio del color. Ciencias Químicas.
Sánchez( 19999) menciona que la vitamina C se Universidad de Sevilla, España.
puede reconocer mediante la coloración azul, donde [3] Nieves et al. (2015) Vitamina C Espectros de
a mayor coloración, menor concentración de absorción y cuantificación colorimétrica de
vitamina C. biomoléculas. Universidad de córdoba.