Pretratamiento con ultrasonido en extracción de compuestos bioactivos de

mesocarpio de chontaduro (Bactris gasipaes) usando CO2 supercrítico

Pretreatment with ultrasound in extraction of bioactive compounds from
mesocarp of peach palm fruit (Bactris gasipaes) using supercritical CO2
Jairo Velásquez-García1, Deivis J. Gutierrez1, Margarita M. Andrade-Mahecha1 y Hugo A. Martínez-Correa1

RESUMEN
El objetivo de esta investigación fue estudiar el efecto de la
aplicación de ultrasonido como pretratamiento en la extrac-
ción de compuestos bioactivos de mesocarpio de chontaduro
(Bactris gasipaes), mediante la técnica de extracción con fluidos
supercríticos (FSC). Los frutos fueron lavados, desinfectados
sometidos a cocción, separación de mesocarpio, secado y
molienda para obtención de harina. Las extracciones fueron
realizadas aplicando ultrasonido como pretratamiento (EUS) y
una extracción control (ET), donde el rendimiento, estabilidad
y actividad antioxidante fueron evaluados. EUS no aumentó
el rendimiento pero sí disminuyó el tiempo de extracción.
Los extractos presentaron mayor estabilidad a temperatura de
congelación y protegido de la luz. La actividad antioxidante au-
mentó significativamente con el pretratamiento. Los resultados
muestran que la aplicación de ultrasonido como pretratamiento
favorece la funcionalidad del extracto obtenido.
Palabras clave: actividad antioxidante, carotenoides,
compuestos bioactivos, fluidos supercríticos, SEM.
ABSTRACT
The aim of this research was to study the effect of the ap-
plication of ultrasonic as pretreatment on the extraction of
bioactives from mesocarp of chontaduro (Bactris gasipaes) by
supercritical fluids (FSC). To do so, the fruits were washed,
cooked, and then the mesocarp was dried and ground. Ex-
tractions were performed applying ultrasonic as pretreatment
(EUS) and extraction without pretreatment (ET); yield, stability
and antioxidant activity were evaluated. EUS did not increase
performance, but decreased the time of extraction instead. The
extracts presented greater stability at temperature of freezing
and protected from light; further, the antioxidant activity was
significantly increased with the pretreatment. The results show
that the application of ultrasonic as pretreatment favors the
functionality of the extract obtained.
Key words: antioxidant activity, carotenoids, ultrasonic,
bioactive compounds, supercritical fluids, SEM.

Introducción inconveniente es la limitación en la extracción de compuestos

La extracción mediante la técnica de fluidos supercríticos
(FSC) es una técnica que involucra el concepto termodiná-
mico de fluido supercrítico. Se define como aquella sustancia
que se encuentra a condiciones de presión y temperatura por
encima de su punto crítico, y exhibe propiedades intermedias
de gas y líquido (Pasquali et al., 2006). El rendimiento de la
extracción con FSC depende de la temperatura y presión
de operación, las cuales modifican la densidad del solvente,
así como de tratamientos previos que faciliten la extracción
con la aplicación de ultrasonido o microondas. El solvente
de mayor uso para la extracción con fluidos supercríticos en
el dióxido de carbono (CO2), debido a que puede separarse
fácilmente del extracto y es relativamente sencillo llegar a
su punto crítico con un bajo consumo energético, su único
polares (Cavero et al., 2006). El chontaduro (Bactris gasi-
paes) es un fruto cultivado en zonas tropicales húmedas de
América, con altitudes inferiores a los 1.000 msnm, con una
precipitación anual de 2.000 a 5.000 mm y una temperatura
promedio de 22°C (Leterme et al., 2005), presenta un conte-
nido elevado de carotenoides, principalmente β-caroteno, el
cual tiene actividad antioxidante gracias a su capacidad de
capturar radicales libres.
El objetivo de esta investigación fue estudiar el efecto de
la aplicación de ultrasonido como tratamiento previo a la
extracción de compuestos bioactivos de mesocarpio de
chontaduro (Bactris gasipaes) mediante la técnica de ex-
tracción con fluidos supercríticos (FSC) en el rendimiento,
estabilidad y actividad antioxidante de los extractos.

ISSN: 0120-9965        Fecha de recepción: 14-06-2016 Aceptado para publicación: 21-09-2016 Doi: 10.15446/agron.colomb.v34n1supl.58458

1
Grupo de Investigación en Procesos Agroindustriales (GIPA), Departamento de Ingeniería, Universidad Nacional de Colombia. Palmira (Colombia).
hamartinezco@unal.edu.co

Agronomía Colombiana 34(1Supl.), S1370-S1373, 2016

Materiales y métodos
Materia prima y preparación de la muestra
Frutos de chontaduro (Bactris gasipaes) fueron adquiridos
en el mercado local (Cali, Colombia). Los frutos fueron
lavados y sometidos a cocción por 30 min a 98±2°C. El
mesocarpio fue retirado y deshidratado en un secador de
bandejas a 42°C por 14 h. Luego de dejarlo seco, fue molido
y empacado en bolsas herméticas protegidas de la luz y
almacenadas a -10°C hasta su uso.
Extracción mediante la técnica de
fluidos supercríticos (FSC)
La extracción de aceite de mesocarpio de chontaduro fue
realizada con un equipo de extracción con FSC (Waters SFE
100, USA) (Fig. 1) usando dióxido de carbono como solvente
(CO2) a 60°C y 300 bar. Dos tratamientos fueron evaluados. El
primero, fue una extracción con FSC aplicando ultrasonido
(15 min, 60 W de potencia, 20°C) como pretratamiento (EUS)
y realizada con ayuda de un sonificador (Branson 450, USA).
El segundo, fue una extracción sin pretratamiento (ET). Las
extracciones fueron realizadas con un flujo de CO2 de 10 g/
min hasta alcanzar la estabilidad y una carga inicial de 20
g en el vaso extractor. El rendimiento de la extracción fue
calculado mediante la relación entre el peso del extracto ob-
tenido y el peso seco del material cargado en el vaso extractor.
Pruebas de estabilidad de extractos
Los extractos fueron diluidos en una solución glicerina
USP- etanol en una proporción 3:1 (0,6 g de extracto/150
mL de solución). La estabilidad de los extractos obtenidos
evaluada a diferentes temperaturas (21, 5 y -10°C) y luz
(oscuridad y luz fluorescente 25 W). La estabilidad de las
V1
R
C1
CH
R
T1
FIGURA 1. Equipo de extracción supercrítica (Waters SFE-100).
Velásquez-García, Gutierrez, Andrade-Mahecha y Martínez-Correa: Pretratamiento con ultrasonido en extracción de compuestos bioactivos de mesocarpio...
muestras fue analizada mediante un barrido en un rango de
longitud de onda de 400 a 600 nm. El efecto en la estabilidad
fue estudiado al día 3 de la experimentación.
Actividad antioxidante
La actividad antioxidante (AA%) se obtuvo por medio de una
solución de DPPH, método descrito por Mensor et al. (2001)
y calculada como porcentaje de inhibición relacionada con la
muestra control que representa un porcentaje de oxidación
de 100%. El análisis estadístico fue realizado con SPSS 20
mediante una prueba t-student para muestras relacionadas.
Las muestras de harina de mesocarpio de chontaduro
fueron analizadas por microscopía electrónica de barrido
(SEM) antes y después del pretratamiento con ultrasonido.
Resultados y discusión
La cinética de extracción se presenta en la figura 2. EUS
alcanzó la estabilidad del proceso en 100 min, mientras que
ET se estabilizó en 160 min. El rendimiento de ambos tra-
tamientos fue similar, alcanzando un valor cercano a 0,08
g de extracto/g de materia seca. La reducción del tiempo de
EUS se debe al efecto del ultrasonido, el cual produce un
fenómeno de cavitación que lleva finalmente a la ruptura de
células del tejido biológico, liberando consigo los compues-
tos bioactivos (Rawson et al., 2011) con lo cual se facilita el
contacto de CO2 con los componentes del mesocarpio y con
esto su extracción. Espinosa-Pardo et al. (2014) evaluaron
diferentes condiciones de extracción, donde encontraron
que a 60°C y 300 Bar el rendimiento global alcanzó 0,05 g
de extracto/g de materia seca.
EPR
V3
V2
T2
T3
V4
V5
S1371
 0,09 favoreció la conservación de los extractos seguido de la
0,08 temperatura de refrigeración, los extractos mantenidos a
(g extracto/g materia seca)
0,07 temperatura ambiente disminuyeron su absorbancia en un
0,06 70% aproximadamente. La figura 3B presenta el efecto de
Rendimiento

0,05 la luz sobre los extractos, la exposición prolongada de los

0,04 ET extractos a una fuente lumínica acelera su degradación, lo
0,03 que se relaciona con lo reportado por Ramírez et al. (2009)
EUS
0,02
en extractos de mora de castilla, donde el almacenamiento
0,01
a condiciones de refrigeración y completa oscuridad favo-
0
0 50 100 150 200 250 300
reció su conservación.
Tiempo (min)
Los resultados de AA% fueron de 6,82±0,098% para
FIGURA 2. Cinética de extracción de compuestos bioactivos de chon-
taduro. el extracto EUS y 5,87±0,057% para el extracto ET. La
AA% fue significativamente mayor en el extracto con
El barrido presentó mayor absorbancia en un rango 450 a pretratamiento (T-student P≤0,05), los valores encontra-
470 nm; Durán y Moreno (2000) también reportaron un dos son similares a los expresados por Espinosa-Pardo
rango de 420 a 480 nm y lo relacionaron con la presencia et al. (2014) quienes encontraron AA% en un rango 5 a
de carotenoides. En la figura 3A se presenta el efecto de la 8% en extractos de chontaduro obtenidos con FSC. La
temperatura sobre los extractos, no se presentó un efecto AA% es significativamente mayor en el extracto de US
batocrómico, que sería indicador de la formación de diver- debido al efecto del ultrasonido expresado por Rawson
sos compuestos causados por la degradación de los carote- et al. (2011), debido a la ruptura de tejidos celulares que
noides. El almacenamiento a temperaturas de congelación aumentan la disponibilidad de compuestos bioactivos

a 1,0 b 0,8
0,8 ET A
0,6
Absorbancia

Absorbancia

0,6 ET R ET L
0,4
0,4 ET C ET O
0,2 0,2
US A US L
0 US R 0 US O
400 500 600 400 500 600
US C
Longitud de onda (nm) Longitud de onda (nm)

FIGURA 3. Estabilidad de los extractos: (a) efecto de la temperatura (A: ambiente, 25°; R: refrigeración, 10°C; C: congelación, -10°C); (b) efecto de
la exposición a la luz.

a b

FIGURA 4. Efecto del pretratamiento con ultrasonido en harina de mesocarpio de chontaduro: (a) sin pretratamiento, (b) con pretratamiento.

S1372 Agron. Colomb. 34(1Supl.), 2016

para ser extraídos mediante FSC. Jatunov et al. (2010)
encontraron que los frutos de chontaduro con elevado
contenido de β-caroteno presentan mayores AA%, a
su vez manifestaron que la actividad antioxidante de
extractos de chontaduro es consecuencia del contenido
de β-caroteno que se encuentra en un rango de 26,2 a
47,9% de los carotenoides totales. Por otra parte, la expo-
sición de β-caroteno a ultrasonido y a una temperatura
de 60°C conduce a la aparición de diferentes isómeros
que pueden influir en el aumento de AA%. La figura 4
muestra el efecto de la aplicación de ultrasonido median-
te SEM en la estructura de las partículas de mesocarpio
de chontaduro.
Conclusiones
La aplicación de ultrasonido como pretratamiento no au-
mentó el rendimiento de la extracción pero disminuyó el
tiempo de operación. Los extractos presentaron una mayor
absorbancia en un rango de 450 a 460 nm, característica
propia de los carotenoides principalmente el β-caroteno.
Los extractos demostraron ser susceptibles a degradación
a temperatura ambiente y a exposición prolongada a la luz.
Mientras el almacenamiento a temperaturas de congelación
y protegidos de la luz presentó una mayor conservación
de los extractos. La AA% del extracto de EUS fue signifi-
cativamente superior al extracto ET, esto es un indicador
del efecto favorable de la aplicación de ultrasonido como
pretratamiento en extracciones con FSC.
Literatura citada
Cavero, S., M. García-Risco, F. Marín, L. Jaime, S. Santoyo,
F. Señoráns, G. Reglero y E. Ibañez. 2006. Supercritical
fluid extraction of antioxidant compounds from oregano
Velásquez-García, Gutierrez, Andrade-Mahecha y Martínez-Correa: Pretratamiento con ultrasonido en extracción de compuestos bioactivos de mesocarpio...
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S1373