16/11/2019

A ureia é produzida a partir da amônia por

UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA - UFBA
INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE – ICS
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E BIOFÍSICA
Disciplina: Bioquímica Metabólica para Farmácia – ICS 071
meio de cinco etapas

ciclo da ureia e reações de aa • O carbamoil-fosfato, que funciona como doador ativado de grupos
carbamoila, entra no ciclo da ureia.

14.11.19

Profa. Msc. Ravena Pereira do Nascimento

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Síntese de carbamoil fosfato

Ciclo da uréia

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Como ocorre a regulação do carbamoil-

fosfato-sintetase-I?
• A CPS I é ativada
alostericamente pelo N- arginina
acetilglutamato.
• Aumento na degradação de
aminoácidos geram um
aumento na concentração do
glutamato, que por sua vez é
convertido a Nacetilglutamato.

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Carbamoilfosfato sintetase: Carbamoilfosfato sintetase:

• A reação catalisada pela CPS I envolve três passos: • A reação catalisada pela CPS I envolve três passos:
• 1. Ativação do HCO3- pelo ATP para formar o carboxifosfato. • 2. Ataque nucleofilico do carboxifosfato pelo NH3 para formar
carbamato.

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Carbamoilfosfato sintetase: Carbamoilfosfato sintetase:

• A reação catalisada pela CPS I envolve três passos: • A reação catalisada pela CPS I é irreversível e é o passo limitante do
• 3. Fosforilação do carbamato para formar o carbamoil fosfato. ciclo da uréia.
• Sofre ativação alostérica por Nacetilglutamato.

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Etapa 1: Ciclo da Ornitina-transcarbamoilase

ureia
• Primeiro, o carbamoil-fosfato doa seu • Transfere o grupo carbamoil do carbamoilfosfato para a ornitina,
grupo carbamoila para a ornitina,
formando citrulina, com a liberação de produzindo a citrulina;
Pi.

• A reação e catalisada pela ornitina-

transcarbamoilase. A ornitina não é um
• Ocorre na mitocôndria;
dos 20 aminoácidos encontrados nas
proteínas, mas é um intermediário-chave
no metabolismo do nitrogênio.
• A ornitina entra por meio de um sistema transportador especifico;

• Do mesmo modo a citrulina é transportada novamente ao citosol.

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Etapa 2: ciclo da
ureia Arginino-succinato-sintetase
• Os próximos dois passos trazem o
segundo grupo amino. A fonte é o • Introdução do segundo grupamento amino:
aspartato produzido na mitocôndria por
transaminação e transportado para o
citosol.
• A reação de condensação entre o grupo
amino do aspartato e o grupo ureido
(carbonila) da citrulina forma arginino-
succinato;
• Essa reação citosólica, catalisada pela
arginino-succinato-sintetase, requer ATP
e ocorre via um intermediário citrulil-
AMP

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Etapa 3: ciclo da
ureia Arginino – succinato:
• Arginino-succinato é então clivado pela
arginino-succinase formando arginina e • A arginino - succinase catalisa a formação da arginina e eliminação
fumarato; do fumarato;
• Este último é convertido em malato e a
seguir entra na mitocondria para unir-se
aos intermediÁrios do ciclo do Ácido • A arginina é o precursor imediato da uréia;
citrico.

• Esse passo é a única reação reversível

do ciclo da ureia.
• O fumarato é transformado em oxaloacetato e conduzido para a
gliconeogênese.

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Etapa 4: ciclo da
ureia Destinos do fumarato:
• Na última etapa do ciclo (etapa
➍), a enzima citosólica arginase
cliva a arginina, produzindo
ureia e ornitina.

• A ornitina é transportada para a

mitocôndria para iniciar outra
volta do ciclo da ureia.

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O ciclo da ureia x ciclo do ácido cítrico

• Esses dois ciclos interconectados têm sido
denominados “bicicleta de Krebs”. As vias que
Regulação do ciclo da ureia
unem o ciclo do ácido cítrico ao ciclo da ureia são
conhecidas como lançadeira do aspartato-arginino-
succinato; elas unem efetivamente os destinos dos
grupos amino e dos esqueletos de carbono dos
Disponibilidade de substrato:
aminoácidos.
• A curto prazo:
• As interconexões são bastante elaboradas. Por
exemplo, algumas enzimas do ciclo do ácido cítrico,
como a fumarase e a malato- -desidrogenase,
• Regulação alostérica da Carbamoil fosfato sintetase I (CPS I)
apresentam isoenzimas citosólicas e mitocondriais.
• O fumarato produzido no citosol, seja no ciclo da
• A longo prazo:
ureia, na biossíntese de purinas ou em outros
processos, pode ser convertido em malato • Indução das enzimas do Ciclo
citosólico, utilizado no citosol ou transportado para
a mitocôndria para entrar no ciclo do ácido cítrico. • Dieta altamente proteica
• Esses processos são ainda interligados com a
lançadeira do malato-aspartato, conjunto de • Jejum prolongado
reações que traz equivalentes redutores para a
mitocôndria.
• Esses diferentes ciclos ou processos contam com um
número limitado de transportadores na membrana
mitocondrial interna

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Balanço do ciclo da ureia: Aproveitamento do esqueleto carbônico

• Dois átomos de N (NH3 e aspartato) juntamente com o bicarbonato
são convertidos em um produto não toxico;
• O ciclo “gasta” energia (3 ATP);
• Essa energia provém da oxidação da acetil-CoA formada pela
degradação dos esqueletos carbônicos dos aminoácidos.

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Aproveitamento do esqueleto carbonado

• Existem 20 vias catabólicas diferentes para degradação dos
aminoácidos.
• Essas vias juntas correspondem a apenas 10 a 15% da produção de
energia do corpo, apresentando atividade longe daquela apresentada
pela glicólise e da oxidação dos ácidos graxos.
• As 20 vias catabólicas convergem para formar apenas 5 produtos,
todos eles entram no ciclo do ácido cítrico e podem ser conduzidos
para a gliconeogênese ou para cetogênese, ou podem ser
completamente oxidados até CO2 e H2O.

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UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA - UFBA

Em resumo... INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE – ICS

DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E BIOFÍSICA
Disciplina: Bioquímica Metabólica para Farmácia – ICS 071

• A amônia é altamente tóxica para tecidos animais;

• No ciclo da ureia, a ornitina combina-se com o carbamoil fosfato
(NH3) para formar citrulina;
• Aspartato cede o segundo grupo amino o qual é incorporado na Metabolismo de aminoácidos: reações
citrulina com formação da arginina;
• A arginase catalisa a hidrólise da arginina em ureia e a ornitina é
recuperada; 23.05.19 – T01 e T02
• O ciclo consome 3 ATP e produz fumarato;
• O ciclo da ureia e o ciclo do ácido cítrico estão conectados via
Profa. Msc. Ravena Pereira do Nascimento
fumarato.

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Aminoácidos Degradação oxidativa

três circunstâncias metabólicas diferentes
• 1. Durante a síntese e a degradação normais de proteínas celulares
(renovação proteica, alguns aminoácidos liberados pela hidrólise de
proteínas não são necessários para a biossíntese de novas proteínas,
sofrendo degradação oxidativa.
• 2. Quando uma dieta é rica em proteínas e os aminoácidos ingeridos
excedem as necessidades do organismo para a síntese proteica, o
excesso é catabolizado; aminoácidos não podem ser armazenados.
• 3. Durante o jejum ou no diabetes melito não controlado, quando os
carboidratos estão indisponíveis ou são utilizados de modo
inadequado, as proteínas celulares são utilizadas como combustível.

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Os aminoácidos podem sofrer alguns tipos de

reações...
• Em todas essas condições metabólicas, os aminoácidos perdem seu
AMINAÇÃO
grupo amino para formar a-cetoácidos, os “esqueletos de carbono”
DESAMINAÇÃO
dos aminoácidos. TRANSAMINAÇÃO

• Os a-cetoácidos sofrem oxidação a CO2 e H2O ou, geralmente mais

REAÇÃO DE Aminoácidos
importante, fornecem unidades de três e quatro carbonos que TRANSMETILAÇÃO
DESIDRASE Livres
podem ser convertidas, pela gliconeogênese, em glicose, o
combustível para o cérebro, para o músculo esquelético e para
outros tecidos.
DESCARBOXILAÇÃO
TRANSULFURAÇÃO

TRANSAMIDAÇÃO

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Como os aminoácidos são sintetizados?

• Reação de aminação, duas enzimas:
Reação de aminação
• 1) Glutamato desidrogenase : catalisa a incorporação do
grupamento amino no alfa-cetoglutarato gerando • Aminação do glutamato: enzima = glutamina
glutamato ;
sintetase
• 2) Glutamina sintetase;
• Amônia livre é tóxica;
• Glutamina é a molécula que transporta a
• No fígado, amônia é incorporada originando glutamato. amônia livre como grupos amida.
• Papel mais importante é a remoção de amônia.
• Glutamina: forma de reserva de amônia,
• Localização: mitocôndrias hepáticas utilizada na biossíntese de muitas moléculas
• Coenzimas NAD+ ou NADP+ • 50% dos aminoácidos livres do sangue são
glutamina.

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Aminação do glutamato Aminação do Glutamato

Glutamina sintetase Glutaminase

• O glutamato é ativado pela reação com ATP e forma um intermediário o

gama-glutamilfosfato. O NH4 desloca o grupo fosfato para formar
glutamina

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Glutamato x Glutamina
• GLUTAMINA:
1. A glutamina é o aminoácido livre mais abundante no tecido muscular;
2. Atua como nutriente (energético) para as células imunológicas, a apresenta uma

3.
importante função anabólica promovendo o crescimento muscular.
Este efeito pode estar associado à sua capacidade de captar água para o meio intracelular, o
TRANSAMINAÇÃO
que estimula assim a síntese protéica.
• GLUTAMATO:
1. É o produto da transaminação do α-cetoglutarato, participando então na produção
de metabolitos como o piruvato ou o oxaloacetato, que participam em vias metabólicas como Chegando ao fígado, a primeira etapa no catabolismo da maioria dos L-
a gliconeogênese, a glicólise ou o ciclo dos ácidos tricarboxílicos; aminoácidos é a remoção de seus grupos a-amino, realizada por enzimas
2. É um neurotransmissor excitatório do sistema nervoso, o mais comum em mamíferos. denominadas aminotransferase ou transaminases

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Transaminação Transaminação
É dependente do Pirodoxal fosfato (vitamina B6) como grupo protético das
É a transferência do grupo amino a um α-cetoácido, produzindo o α-cetoácido do aminoácido
original e um novo aminoácido;
transaminases
O piridoxal-fosfato funciona como
AST e ALT carreador intermediário de grupos
amino, no sitio ativo das
aminotransferases.
Reação Reversível
Ele sofre transformações reversíveis
entre sua forma aldeídica, o
piridoxal-fosfato, que pode aceitar
um grupoamino, e sua forma
aminada, a piridoxamina-fosfato,
que pode doar seu grupo amino
A maioria usa piridoxil-5-fosfato (PLP), um derivado da vitamina B6(piridoxina), como uma coenzima. Elas para um a-cetoácido
estão principalmente dentro das células hepáticas(hepatócitos), mas também podem ser encontradas em
coração e rins.

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Transaminação: etapa 1 Transaminação: etapa 2

Alanina ALT Ligação ligação aldimina (base de Schiff)
com o grupo «-amino de um residuo de
Lys

1. O α amino do aminoácido (nucleofílico) ataca o grupo aldeído do PLP que forma uma base Schiff com o
grupo amino do substrato e libera água.
Base de Shiff: é um grupo funcional que contém uma ligação dupla carbono-nitrogênio com o átomo de nitrogênio
conectado a um grupo arila ou alquila mas não há hidrogênio
2. Após a ligação do substrato ao PLP, uma base no sitío ativo da enzima remove o α hidrogênio do
aminoácido, como um próton, e o excedente de elétrons deixados para trás percorre todo o caminho até
o nitrogênio na parte inferior do anel de PLP, invertendo toda a sequência de ligações simples e duplas ao
longo do caminho (tautomerização) .

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Transaminação: etapa 3 Transaminação: etapa 4

hidrólise

4.Neste ponto, temos apenas metade da reação, o nitrogênio ainda está ligado a PLP (PMP) e tem de ser
3. Isto tem o efeito de tornar a ligação entre o α carbono e o α nitorgênio em uma base de Schiff, que é transferido para o α-cetoglutarato
então submetida a hidrólise para libertar piruvato.

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Transaminação Ping-Pong Transaminases

As Transaminases podem ser:
• 1) Alanina transaminase (ALT) – ou transaminase glutâmico-pirúvica (TGP) (fígado) ;
• 2) Aspartato transaminase (AST) – ou transaminase glutâmico-oxalacética (TGO) (fígado coração,
e músculo esquelético);
• 3) Glutamato transaminase (para qualquer aminoácido, amplamente distribuída nos tecidos);

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Importância das reações de transaminação

• O efeito das reações de transaminação é coletar grupos amino de
• Síntese de aminoácidos não-essenciais diferentes aminoácidos, na forma de L-glutamato.
• Formação de α-cetoácidos
• Aspartato Oxalacetato • O glutamato então funciona como doador de grupos amino para
vias biossintéticas ou para vias de excrecão, que levam a eliminação
• Alanina Piruvato de produtos de excreção nitrogenados.
• Glutamato α -cetoglutarato
• As reações catalisadas pelas aminotransferases são livremente
• Biossíntese da Uréia reversíveis, tendo uma constante de equilíbrio de cerca de 1,0 (ΔG9 <
0 kJ/mol).

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DESAMINAÇÃO

• Desaminação – remoção do grupo amino do aminoácido para

formar amônia e um α-cetoácido;

DESAMINAÇÃO • Ps. A amônia será incorporada na ureia

Os grupos amino de muitos a-aminoácidos são coletados, no fígado, na forma do grupo amino de
moléculas de L-glutamato. Esses grupos amino devem ser removidos do glutamato e preparados para
excreção. Nos
-Dois tipos de Desaminação:
hepatócitos, o glutamato e transportado do citosol para a mitocondria, onde sofre desaminação oxidativa, 1) Oxidativa
catalisada pela L-glutamato-desidrogenase
2) Não-Oxidativa

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DESAMINAÇÃO OXIDATIVA DESAMINAÇÃO OXIDATIVA

Desaminação que ocorre em L-aminoácidos Desaminação que ocorre em L-aminoácidos

É catalisada por uma das seguintes enzimas: D-aminoácido oxidase – presente em plantas e parede celular de bactérias;

1.L-aminoácido oxidase • É uma desidrogenase que precisa de FAD como coenzima;

2.D-aminoácido oxidase
• 3.Glutamato desidrogenase – (mamíferos, essa enzima esta presente na matriz mitocondrial. É a única Glutamato desidrogenase – presente na mitocôndria - Alta atividade
enzima que utiliza NAD+ ou NADP+ como aceptor de equivalentes redutores)
• É uma desidrogenase que precisa de NAD+ ou NADP+ como coenzima.
L-aminácido oxidase – presente no fígado e no rim (baixa atividade e é Desamina Glutamato oxidativamente produzindo amônia e regenerando α-
irreversível) É uma desidrogenase que precisa de FMN como coenzima cetoglutarato (que será usado em transaminações);

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DESAMINAÇÃO OXIDATIVA DESAMINAÇÃO OXIDATIVA

• GLUTAMATO DESIDROGENASE:

•A glutamato desidrogenase do fígado de mamíferos tem a capacidade incomum de poder empregar tanto o NAD+
como o NADP+ como co-fator. A glutamato desidrogenase dos vegetais e dos microrganismos são, em geral, específicas
para um ou para outro. A enzima dos mamíferos é regulada alostericamente por ADP ou GTP. Esse padrão de regulação
ainda não foi esclarecido em detalhe.

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DESAMINAÇÃO NÃO OXIDATIVA Transaminação x Desaminação

Catalisada por duas enzimas: • As transaminases convergem os grupo aminas de aminoácidos para
1) Desidrases - desaminação de aminoácidos que contém o grupo glutamato, que, por sua vez é desaminado via glutamato
hidroxil, são eles: serina, e threonina - Necessita da coenzima PLP desidrogenase, produzindo NH4+.
(piridoxamina – vit B6)

A ação combinada de uma aminotransferase e da glutamato- desidrogenase é conhecida como transdesaminação.

Uns poucos aminoácidos contornam a via de transdesaminacao e sofrem diretamente desaminacao oxidativa.

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Transulfuração
•Transferência de enxofre Aminoácido outro Aminoácido
Metionina

Elimina a formação de homocisteína (promove inflamação no organismo) – e

produz cisteína ( síntese de proteínas e glutationa - Cys,Gln e Gly - um importante

TRANSULFURAÇÃO antioxidante, detoxificação do fígado)

CBS = cistationa beta-sintetase;

MTHFR =metileno tetraidofolato
redutase

SAM: s-adenosilmetionina –
cofator nas transferências do
grupo metilo –ADENOSINA
TRIFOSFATO + METIONINA

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TRANSAMIDAÇÃO

• Várias reações biossintéticas conhecidas utilizam glutamina como

fonte principal de grupos amina;
TRANSAMIDAÇÃO • As enzimas que catalisam estas reações:
glutamina Amidotransferases : são enzimas que catalisam a remoção
do grupo amônia de uma molécula de glutamina e sua posterior transferência para um substrato
específico, criando assim um novo grupo carbono-nitrogênio no substrato .

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TRANSAMIDAÇÃO: GLUTAMINA AMIDOTRANSFERASE

Glutamina Amidotransferase:

• Possui dois domínios estruturais: um de ligação à

glutamina e o outro de ligação ao segundo substrato
(aceptor do grupo amino); DESCARBOXILAÇÃO
• Um resíduo Cisteína no sítio da glutamina age como
nucleófilo, clivando a ligação amida do AA e formando uma
ligação covalente glutamil-enzima;

• A glutamina é hidrolisada até glutamato + NH3 dentro da

enzima;

• O NH3 é transferido pelo canal de amônia para o segundo

sítio ativo

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DESCARBOXILAÇÃO DESCARBOXILAÇÃO
Descarboxilação de histidina mediada pela histidina descarboxilase
É a retirada do grupo carboxílico, na forma de CO2;

• Formação da amina correspondente, geralmente exibindo efeitos

fisiológicos. Ex. A descarboxilação de histidina leva á produção de
histamina, uma amina que estimula a secreção gástrica e está
presente em todos os processos alérgico;

• Cofator-PLP;

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DESCARBOXILAÇÃO
• Aminas biogênicas são bases orgânicas de baixo peso molecular com atividade biológica,
produzidas a partir da ação da enzima descarboxilase.
• Microrganismos utilizados na fermentação de alimentos são capazes de produzi-las.
• O consumo desses compostos causam graves efeitos toxicológicos, indesejáveis para a saúde
humana.
TRANSMETILAÇÃO

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TRANSMETILAÇÃO: transferência do grupo metila

TRANSMETILAÇÃO

Metionina, ao reagir com ATP, gera o

composto S-adenosilmetionina (AdoMet).

S-adenosilmetionina é utilizada em
algumas reações como doador de
grupamento metil (CH3)

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As coenzimas do folato são requeridas

para o metabolismo de varios
aminoácidos importantes como a
metionina, cisteína, serina, glicina e
histidina;

A síntese da metionina a partir da

homocisteína é catalisada pela
metionina sintase – uma enzima folato
(como 5-metiltetrahidrofolato) e
também pela vitamina B12;

Portanto uma deficiÊncia de folato e/ou

vitamina B12 pode resultar na diminuição
da síntese de metionina e acumulação de
homocisteína;

O aumento das concentrações de

homocisteína no sangue está
relacionado com a demencia e doenças
cardiovasculares.

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