UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITANA

Unidad Cuajimalpa
Licenciatura en Biología Molecular
Fisiología Molecular
Cuestionario #12 GPCR
Equipo Siena:​​ Castañeda Rodríguez Samanta, Gil López Yunnuet Merari,
González Cruz Ana Michel, Herrera Torres Ana Karen.
Fecha de entrega: ​29 de octubre de 2018

15-74​​ ¿Qué es cíclico del AMP cíclico?

Se refiere al anillo de átomos formado por el átomo de fósforo,

sus dos átomos de oxígeno y los carbonos en las posiciones 3’,
4’ y 5’ del azúcar ribosa.

15-75 ​Explique por qué el AMP cíclico debe ser hidrolizado rápidamente en una célula para
permitir una señalización rápida.
La rápida descomposición mantiene baja la concentración intracelular de AMPc. Cuanto
más bajos son los niveles de AMPc, más grande y más rápido es el aumento alcanzado tras
la activación de la adenilil ciclasa, lo que hace que el AMPc sea nuevo.

15-76 ​Está intentando purificar la adenilato ciclasa de cerebro. El ensayo se basa en la

conversión del ​α-32​
​ P-ATP en cAMP. Puede detectar fácilmente la actividad en homogenados
de cerebro estimulados con isoproterenol, el cual se une a los receptores β-adrenérgicos, pero
la enzima pierde su actividad cuando cofactores de bajo peso molecular son eliminados por
diálisis. ¿Qué molécula sencilla cree que se pueda unir de nuevo al homogenado dializado
para restaurar la actividad?
Como los receptores ​β-​adrenérgicos se acoplan a la adenilato ciclasa mediante una
proteína G, se podría añadir la GTP. La activación del receptor por el isoproterenol
estimula la proteína G para intercambiar el GDP unido por GTP libre. Sin GTP libre, la
proteína G no se activa, por lo tanto, no se puede activar la adenilato ciclasa.

15-77 ​Proponer tipos específicos de mutaciones en el gen que codifica la subunidad

reguladora de la proteína quinasa dependiente de cAMP (PKA) que puedan conducirla a un
estado siempre activo o siempre inactivo.
Cualquier mutación que genere una subunidad reguladora incapaz de unirse a la
subunidad catalítica produciría una PKA permanentemente activa. Cuando la subunidad
catalítica no está unida a la subunidad reguladora, está activa. Dos tipos generales de
mutación en la subunidad reguladora podrían producir una PKA permanentemente
inactiva. Una subunidad reguladora que se alteró de modo que pudiera unirse a la
subunidad catalítica, pero no a la AMP cíclica, no liberaría la subunidad catalítica, lo que
dejaría a la PKA permanentemente inactiva. De manera similar, una subunidad
reguladora mutante que podría unirse a AMPc, pero no sufrir el cambio conformacional
necesario para liberar la subunidad catalítica, inactivará permanentemente la PKA.

15-78 ​Durante un maratón, los corredores gastan considerablemente sus reservas internas de
glucógeno (carbohidrato) y de triglicéridos (lípido) como combustible para la contracción
muscular. Al principio, la energía proviene sobre todo de los carbohidratos y se utilizan
cantidades crecientes de lípidos a medida que la carrera avanza. Si los corredores terminan
sus reservas musculares de glucógeno antes de que acaben la carrera, entonces padecen lo que
se conoce como “el muro”, un estado de bajo rendimiento que aparece como consecuencia de
que los ácidos grasos que provienen de la degradación de los triglicéridos no pueden ser
transportados a los músculos de manera lo bastante rápida como para mantener el máximo
esfuerzo. Un truco que los corredores de maratón utilizan para evitar “el muro” es beber una
taza cargada de café aproximadamente una hora antes de la carrera. El café contiene cafeína,
la cual es un inhibidor de la fosfodiesterasa del AMP cíclico. ¿De qué manera supone que la
inhibición de esta enzima ayuda a evitar “el muro”?
La degradación del glucógeno y los triglicéridos dependen de las vías de señalización de
AMPc. Al inhibir la fosfodiesterasa de AMPc, la cafeína aumenta los niveles de AMPc
para promover la degradación tanto de glucógeno en el músculo y el hígado, como de
triglicéridos en las células grasas. El degradar los triglicéridos para liberar ácidos grasos a
inicios en un maratón, los corredores disminuyen su dependencia en la oxidación de
carbohidratos en esa etapa, preservando así los carbohidratos para su uso durante toda la
carrera.

15-79 ​¿Cómo finaliza una respuesta mediada por el Ca​2+​ que es desencadenada por el IP​3​?
La respuesta finaliza mediante varios mecanismos, el primero cuando el IP​3 desfosforilado
a IP​2 mediante una fosfatasa de lípidos específica, el segundo es mediante la fosforilación
de IP​3 ​a IP4​ por una quinasa de lípidos específica y el tercero es la salida de Ca2+
​ hacia el
exterior de la célula.

15-80 ¿Por qué cree que las células utilizan el Ca​2+ (concentración intracelular de 10​-7 M)
para la señalización antes que el Na​+ que es más abundante (concentración intracelular de
10​-3​ M)?.
Debido a que la concentración intracelular de ​Ca2+ ​ ​es tan baja, una afluencia de
relativamente pocos iones ​Ca​ c​ onduce a grandes cambios en su concentración citosólica.
2+

Por lo tanto, se puede lograr un aumento de 10 veces en ​Ca​2+ e​ levando la concentración de

Ca2+​ ​en el rango micromolar, lo que requeriría la entrada de relativamente pocos iones en
el citosol. Por el contrario, muchos más iones Na+​ ​necesitarian ingresar al citosol para
cambiar su concentración en la misma cantidad. En el músculo, se puede lograr un
cambio de más de 10 veces en el C ​ a2+
​ ​en microsegundos mediante la liberación de C
​ a2+
​ d​ e
las reservas intracelulares del retículo sarcoplásmico.

15-81 El EGTA es un quelante del Ca​2+ con alta afinidad y especificidad. ¿Cómo repercutirá
una microinyección de EGTA en la en la degradación del glucógeno hepático inducida por el
glucagón? ¿Cómo repercutiría en la degradación inducida por la vasopresina?
El EGTA al quelar el Ca2+ interfiere con las vías de señalización que usan el Ca​2+ como
segundo mensajero. El glucagón desencadena la degradación del glucógeno en el hígado a
través de una vía de AMP cíclico, por lo tanto, la microinyección de EGTA no lo afectará.
La vasopresina señala la degradación del glucógeno mediante una vía de Ca2+ ​ ,​ por lo
tanto, se bloquearía por el EGTA.

15-82 La fosforilasa quinasa integra señales procedentes de vías de señalización dependientes

de AMP cíclico y dependientes de Ca​2+ que controlan la degradación del glucógeno en
células del hígado y musculares (Figura 15-15). La fosforilasa quinasa se descompone de 4
subunidades. Una es la proteína quinasa que cataliza la incorporación del fosfato a la
glucógeno fosforilasa, activandola para llevar a cabo la degradación del glucógeno. Las otras
tres subunidades son proteínas reguladoras que controlan la actividad de la subunidad
catalítica. Dos de ellas tienen sitios que se fosforilan por la PKA, la cual se activan por AMP
cíclico. La tercera subunidad es la calmodulina, la cual se une a Ca​2+ cuando la concentración
citosólica aumenta. Estas subunidades reguladoras controlan el equilibrio entre las
conformaciones activa e inactiva de la subunidad catalítica. ¿De qué forma esta distribución
permite a la fosforilasa quinasa actuar como un interruptor para las distintas vías que
estimulan la degradación del glucógeno?
El tiempo que pasa la subunidad quinasa
catalítica en su conformación depende de la
medida en que se modifiquen sus
subunidades reguladoras. Cada modificación
por fosforilación o por unión de Ca2+
empuja el equilibrio hacia la conformación
activa de la subunidad quinasa, es decir,
aumentan el tiempo empleado en el estado
activo. Al sumar las entradas de múltiples
vías de esta manera, la fosforilasa quinasa
integra las señales que controlan la
degradación del glucógeno.

15-83 La CaM-quinasa II es un extraordinario mecanismo molecular de memoria. ¿Cómo

puede la CaM-quinasa II “recordar” a su exposición a Ca​2+​/calmodulina y por qué al final se
“olvida”?
Cuando la CaM-quinasa II se expone a Ca2+ ​ /calmodulina,
​
se convierte en una proteína
quinasa activa y se fosforila (entre otros objetivos). En su estado fosforilado, la
CaM-quinasa II permanece activa incluso en ausencia de Ca​2+,​ prolongando así la
duración de la actividad de la quinasa más allá de la de la señal de activación inicial de
​ ​. Su autofosforilación le permite "recordar" su exposición a Ca2+
Ca2+ ​ /calmodulina.
​

Finalmente, se "olvida" cuando una proteína fosfatasa elimina el fosfato, interrumpiendo

su actividad.

15-84 ​Los segmentos externos de las células fotorreceptoras de tipo bastón pueden ser
desprendidos y asilados para ser utilizados en el estudio de los efectos que tienen las
moléculas pequeñas sobre la transducción visual, debido a que los extremos rotos de cada
segmento permanecen abiertos. ¿Cómo esperaría que se viera afectada la respuesta visual en
función de las siguientes adiciones?
A. Un inhibidor de la fosfodiesterasa del GMP cíclico
Evitaría la reducción de GMPc que normalmente se produce en respuesta a la
activación de la rodopsina por la luz, altos niveles de GMPc mantendría los canales
de cationes abiertos, evitando la hiperpolarización de la membrana que es esencial
para la respuesta visual.
B. Un análogo no hidrolizable del GTP
Permitiría la activación prolongada de la transducina en respuesta a la rodopsina
activada, esto mantendrá alta la fosfodiesterasa de GMPc, causando una
disminución prolongada de GMPc y una hiperpolarización prolongada de la
membrana, así como una respuesta visual prolongada.
C. Un inhibidor de la quinasa específica de la rodopsina
Prolongaría la respuesta visual al aumentar la vida útil de la señalización de la
forma activada de la rodopsina, la quinasa específica de rodopsina agrega un
fosfato a la cola citoplasmática de la rodopsina, inhibiendo la interacción de la
rodopsina activada con la transducina.

15-85 Las personas afectadas por la enfermedad de Oguchi manifiestan una forma hereditaria
de ceguera nocturna. Después de un destello de luz intensa estas personas recuperan su visión
nocturna (adaptándose a la oscuridad) muy lentamente. La visión nocturna depende casi
exclusivamente de las respuestas visuales de las células fotorreceptoras de tipo bastón. ¿Qué
aspecto de la respuesta visual en las células bastón de estos pacientes cree que es defectuoso?
¿Qué genes en el caso de ser defectuosos, causan la aparición de la enfermedad de Oguchi?
Se cree que la enzima rodopsina quinasa es la causante de que la activación y
recuperación de los fotorreceptores sea lenta después de la exposición a la luz. Se asocia
con mutaciones en el gen SAG que codifica para la arrestina y en el gen GRK1 que
codifica para la quinasa rodopsina.

15-86 ​En las células musculares, la adrenalina se une a los receptores β-adrenérgicos para
iniciar una cascada de señalización que conduce a la degradación del glucógeno (Figura
15-16). En qué puntos de esta vía se amplifica la señal?
La señal se amplifica en tres puntos durante la cascada de señalización, el primer punto es
el cambio de GDP a GTP mediante la unión del ligando con el receptor, el segundo punto
es la activación de la adenilato ciclasa mediante ATP para la producción de cAMP, el
tercer punto es la activación de las PKA dependientes de cAMP que se disocia en dos
subunidades que activan a la glucógeno fosforilasa que estimula la degradación del
glucógeno.

15-87 Un rasgo crítico de las cascadas de señalización es que deben inactivarse con rapidez
tan pronto la señal extracelular desaparece. Examine la cascada de señalización de la Figura
15-16. Describa de qué forma cada componente
de esta vía de señalización recupera su estado
inactivo cuando la adrenalina es retirada.
El receptor β-adrenérgico se apaga por el
cambio conformacional que ocurre cuando la
adrenalina ya no está unida. La subunidad Gα
se vuelve inactiva cuando se hidroliza el GTP a
GDP, esto le permite volver a asociarse con las
subunidades βγ. La adenilato ciclasa se vuelve
inactiva cuando Gα se disocia. El AMPc se está
convirtiendo en AMP por la fosfodiesterasa de
AMPc. Sin la síntesis continua, el AMP cíclico
regresa a su nivel preestimulado.

REFERENCIAS:

● Alberts B, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K y Walter P. Biología molecular de

la célula. 5a ed. Barcelona: Omega; 2010.
● Aller E, Ayuso C, Millán JM. Orphanet: Oguchi disease. 2011; [Internet]. Disponible
en:​https://www.orpha.net/consor4.01/www/cgi-bin/OC_Exp.php?lng=EN&Expert=75
382​[​Consultado 2018 Oct 28].
● Khani SC, Nielsen L, Vogt TM. Biochemical evidence for pathogenicity of rhodopsin
kinase mutations correlated with the Oguchi form of congenital stationary night
blindness. Proceedings of the National Academy of Sciences. 1998;95(6):2824–7
● Lodish H, Berk A, Matsudaira P, Kaiser CA, Krieger M, Scott MP, Zipursky SL y
Darnell J. Biología Celular y Molecular. 5a ed. Buenos Aires: Médica Panamericana;
2011.