UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA Y TEXTIL

Departamento Académico de Cursos Electivos

BIOQUÍMICA Y MICROBIOLOGÍA
“MEDIOS DE CULTIVO”
INTEGRANTES:
- ARGUMÉ SANDOVAL, JOSÉ BENJAMIN
- BARZOLA YAUCE, NICK RENZO
- CARHUAPOMA LA SERNA, JOSE
- HUAMANI HURTADO, JAMIL ALBERTO

DOCENTES:
- PhD. NIETO JUAREZ, JESSICA
- Ing. ROJAS OROSCO, JANET

LIMA – PERÚ,
2019
 ÍNDICE
1. OBJETIVOS ........................................................................................................................ 3
2. FUNDAMENTO TEÓRICO .............................................................................................. 3
2.1. MEDIOS DE CULTIVO ................................................................................................ 3
2.3. TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO ............................................................................. 4
3. PARTE EXPERIMENTAL ................................................................................................ 4
3.1. Identificación de bacterias y hongos. ......................................................................... 4
a) Observaciones ............................................................................................................... 6
b) Discusión de resultados ................................................................................................. 6
c) Conclusiones ................................................................................................................. 6
d) Recomendaciones. ......................................................................................................... 6
4. BIBLIOGRAFÍA ................................................................................................................. 7
5. APLICACIÓN INDUSTRIAL ........................................................................................... 7

Ilustración 1 Bacterias en el celular .............................................................................................. 5

Ilustración 2 Bacterias en el aliento/boca ..................................................................................... 5
Ilustración 3 Bacterias en el ambiente .......................................................................................... 5
Ilustración 4 Cultivo de hongo ...................................................................................................... 6

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1. OBJETIVOS
 Familiarizarnos con los distintos tipos de medios de cultivo, su
presentación, su utilidad en específico y la preparación adecuada en
laboratorio.
 Aprender el procedimiento de cultivo de microorganismos, así como de la
esterilización.
 Identificar adecuadamente las colonias cultivadas en base a sus
características físicas (color, forma, tamaño, etc.).
2. FUNDAMENTO TEÓRICO
2.1. MEDIOS DE CULTIVO
Para permitir el crecimiento de microorganismos en el laboratorio, es necesario
aportarles un medio con nutrientes y condiciones fisicoquímicas adecuadas para
su desarrollo. El medio de cultivo es aquel que contiene agua y una serie de
nutrientes, necesarios para su metabolismo.
Normalmente se utilizan placas de Petri con agar más nutrientes específicos
(según el microorganismo que se desea aislar), aunque también existen medios
de cultivo en tubo.
No todos los microorganismos son cultivables en el laboratorio, pero sí una
enorme cantidad de ellos tal como bacterias y hongos. Debido a esto es mejor
hablar de microorganismos. La gran diversidad metabólica que tiene este
conjunto de organismos explica la amplia variedad de medio de cultivo en el
mercado.
2.2. COMPONENTES DEL MEDIO DE CULTIVO
Es importante primero resaltar que existen microorganismos con requerimientos
especiales para su desarrollo, que se añadirán al medio en caso necesario. Pero
de forma general los medios de cultivo están compuestos por:
 Una fuente de carbono: Normalmente azucares sencillos como, por ejemplo,
glucosa, lactosa, etc., pero existen también algunos que usan CO2 (en este
caso serían autótrofos, al igual que las plantas).
 Una fuente de nitrógenos: Se suelen usar proteínas parcialmente
hidrolizadas, peptonas.
 Otros componentes, como Na+, K+, vitaminas, etc.
 Amortiguadores de pH del medio de cultivo dentro de un rango adecuado
para el crecimiento de los microorganismos. Por ejemplo, suelen usarse
como tampones los fosfatos disódicos (Na2HPO4) o monosódicos
(NaH2PO4).
Existen preparados comerciales (infusiones o extractos) obtenidos a partir de
tejidos animales como cerebro, corazón o hígado. Y a veces se usan también
fluidos corporales como la sangre animal. Todos estos estos productos contienen
los componentes básicos mencionados necesarios para el crecimiento de
organismos.
Un componente importante que permite elaborar medio de cultivo sólidos es el
agar, un polisacárido procedente de algas marinas que tiene la particularidad de

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 fundirse en torno a 100°C y gelificar alrededor de 40°C. Si se tiene en cuenta
que los microorganismos suelen crecer en torno a 37°C, es necesario que el
agente gelificante se mantenga sólido a esta temperatura.
2.3. TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO
Según la proporción de agar, existen tres tipos:
 Líquidos (caldos). No contiene ningún agente gelificante, por lo que los
microorganismos crecen por todo el medio. El crecimiento en este medio es
mucho más rápido puesto que permite la movilidad de los mismos a la vez
que acceden de forma más fácil a los nutrientes.
 Sólidos. Tienen una proporción de agar de, aproximadamente, el 1.%. El
crecimiento se desarrolla en la superficie del medio. Estos medios pueden
depositarse en placas de Petri o tubos de ensayo.
 Semisólidos. Son aquellos que contienen una proporción de agar inferior al
0.5. Se utilizan para pruebas bioquímicas y de movilidad. (Cuevas, 2016)
Según su utilidad, en microbiología existen cuatro tipos:
 Nutritivos. Permiten el crecimiento de la mayoría de los microrganismos,
por ser muy generales. Como ejemplo de este tipo de medios están el agua
de peptona y el caldo de tripticasa – soja.
 De enriquecimiento. Contienen componentes adicionales (además de los
básicos) para permitir el desarrollo de microorganismos exigentes, que no
crecería en un medio general.
 Selectivos. Presentan algún componente que impide el desarrollo de
microorganismos no deseados y solo el que se desee cultivar lo haga con
mayor facilidad. Por ejemplo, el agar MacConkey que contiene cristal
violeta, que inhibe el crecimiento de bacterias grampositivas y hongos,
facilitando el crecimiento de bacterias gramnegativas.
 Diferenciales. Contiene sustancia que ponen en manifiesto alguna
característica del microrganismo en análisis. (Cuevas, 2016)
En laboratorio se empleó dos tipos de cultivos deshidratados:
 Agar papa dextrosa: Medio más empleado para el crecimiento de
hongos filamentosos y levaduras. Según la proporción de agar es
considerado como un medio sólido y por su utilidad, como no selectivo
(pueden crecer especies bacterianas y fúngicas).
 Agar nutriente: Medio usado normalmente para todo tipo de bacteria.
Según la proporción de agar es considerado como un medio sólido y por
su utilidad, como no selectivo.
3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Identificación de bacterias y hongos.

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Ilustración 1 Bacterias en el celular

Ilustración 2 Bacterias en el aliento/boca

Ilustración 3 Bacterias en el ambiente

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 Ilustración 4 Cultivo de hongo

a) Observaciones
 En la ilustración 1 se pudo distinguir 3 colonias diferentes, diferenciadas por
color. 6 amarillos, 7 translucidos y 21 blancos. TOTAL: 34 ufc/placa
 En la ilustración 2 se puede observar 3 colonias diferentes por su color. 3 naranjas,
2 blancos y 2 amarillos. TOTAL: 7 ufc/placa
 En la ilustración 3 podemos distinguir 3 colonias diferentes por su color y forma.
4 amarillos, 5 mostazas, 2 blancos circulares y 3 blancos irregulares. TOTAL: 14
ufc/placa
 En el cultivo de hongo, podemos ver que los micelios ya han crecido alrededor de
la porción de hongo.

b) Discusión de resultados
 En el celular se pueden encontrar staphylococcus, streptococcus, salmonella, E.
Coli. Estas pueden ser los tipos que observamos en el cultivo.
 En la boca comúnmente se encuentra las bacterias de las caries, que producen
caries y periodontitis, y bacterias gramnegativos que provocan el mal aliento.
 En el cultivo del medio ambiente es muy difícil determinar que bacterias pueden
haber. Pero podemos observar que hay algunas colonias presentes en el cultivo
del celular o en el aliento. Las posibilidades son infitinas, pero podemos decir que
puede haber staphylococcus.
 En el cultivo del hongo, al ver que solo hay micelios alrededor de la fracción,
podemos decir que hubo una buena práctica para este cultivo, ya que no esta
contaminado. Ahora, el hecho de que se forme poco no es algo fuera de lo común,
ya que los hongos se reproducen de manera más lenta que las bacterias.

c) Conclusiones
 Por cantidad, intensidad del color y forma, podemos decir que el cultivo con mas
bacterias es proveniente del celular. Es decir, el celular alberga más bacterias que
el medio ambiente o que la propia boca humana. En segundo lugar está el
ambiente, y luego le sigue la boca.
d) Recomendaciones.

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Para mejorar este laboratorio se puede cambiar un poco la dinámica en los cultivos,
ejemplo.
 Para el cultivo del ambiente, estos se deben hacer con una mascarilla simple y en
un lugar lejano de la mesa de trabajo, ya que el hecho de que haya tantas personas
circulando, puede que algunas bacterias de la boca lleguen a la caja Petri y con
ello no podremos comparar de mejor manera los cultivos.
 Para la boca, se puede pasar algodón por los dientes y utilizar el algodón para el
cultivo, posteriormente el alumno debe cepillarse la boca y repetir el proceso, así
después de una semana podremos observar las diferencias.

4. BIBLIOGRAFÍA
Burguet, N. (2013). Control de calidad de los medios de cultivo utilizados en el monitoreo
ambiental de las áreas clasificadas de producción. Revista Cubana de Higiene y
Epidemología, 155-160.

Cuevas, L. B. (2016). Microbiología clínica. España: Síntesis.

5. APLICACIÓN INDUSTRIAL
Control de calidad de los medios de cultivo utilizados en el monitoreo
ambiental de las áreas clasificadas de producción.
Los medios de cultivo constituyen la herramienta fundamental en los laboratorios
de Microbiología. Desde la época de Koch hasta hoy en día se ha incrementado
enormemente el arsenal de medios de cultivo con que cuentan los microbiólogos.
La responsable directa de tal incremento de los medios de cultivo es la expansión
de la microbiología desde la medicina hacia la agricultura, la alimentación y la
industria farmacéutica.
Teniendo en cuenta que los medios de cultivo seguirán jugando un papel
importante en las investigaciones microbiológicas durante el presente siglo, es
necesario tomar todas las medidas que garanticen su correcta preparación y
esterilización. Se debe controlar su calidad con el fin de comprobar si estos
cumplen con sus especificaciones y si la metodología empleada en su preparación
es satisfactoria.
Laboratorios Liorad es un conjunto de instalaciones tecnológicas y de facilidades
auxiliares, destinadas a la producción de parenterales líquidos y liofilizados.
Dispone de un departamento de control de la calidad en el que se encuentra
ubicado el laboratorio de microbiología que utiliza diferentes medios de cultivo
para realizar el monitoreo ambiental de las áreas clasificadas donde se realiza la
producción de los parenterales. Los medios de cultivo, una vez preparados, deben
someterse a un programa mínimo de análisis que asegure su aceptación, lo que
garantiza la validez de los resultados de los ensayos. Teniendo en cuenta lo
anterior, se realizó este trabajo con el objetivo de exponer los resultados de la
verificación de la calidad de los medios de cultivo utilizados en el monitoreo
ambiental. (Burguet, 2013)

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Comentario:
El objetivo del articulo encontrado fue exponer los resultados de la verificación
de la calidad de los medios de cultivo utilizados en el monitoreo ambiental. La
evaluación fue ejecutada con el empleo de cepas patrones de referencia. El método
empleado aparece descrito en farmacopea. Del total de medios de cultivos
preparados, a 637 lotes se les realizo el control de calidad al 99,21% de las
muestras.
Los resultados arrojan que el 99,37% de las muestras analizadas fue aprobado
como listo para su uso y solo el 0,62% resulto no conforme por deficiencias en su
preparación. Se comprobó la calidad de los medios de cultivo elaborados en el
laboratorio de control microbiológico.
Como conclusión se obtiene que la verificación de los medios de cultivo garantiza
la validez de los ensayos donde estos son empleados.