ASBESTOS Y OTRAS FIBRAS por PCM 7400

FÓRMULA: Varios MW: varios CAS: ver sinónimos RTECS: Varios

MÉTODO: 7400, número 2 EVALUACIÓN: COMPLETA Número 1: Rev. 3 el 15 de mayo de 1989

Número 2: 15 de agosto de 1994

OSHA 0.1 fibra de asbesto (> 5 µm de largo) / cc; 1 f / cc, 30 minutos de excursión; PROPIEDADES sólido, fibroso, cristalino, anisotrópico
carcinógeno

MSHA: 2 fibras de amianto / cc

NIOSH: 0.1 f / cc (fibras> 5 µm de largo), 400 L; carcinógeno
ACGIH 0,2 f / cc de crocidolita; 0,5 f / cc de amosita; 2 f / cc de crisotilo y otros
asbestos; carcinógeno

SINÓNIMOS [CAS #]: actinolita [77536-66-4] o ferroactinolita [15669-07-5]; amosita [12172-73-5]; antofilita [77536-
67-5]; crisotilo [12001-29-5]; serpentina [18786-24-8]; crocidolita [12001-28-4]; tremolita [77536-68-6]; anfíboles de amianto
[1332-21-4]; fibras cerámicas refractarias [142844-00-6]; vidrio fibroso

MUESTREO MEDICIÓN

DECHADO: FILTRAR TÉCNICA: MICROSCOPIA LIGERA, CONTRASTE DE FASE

(Membrana de éster de celulosa de 0,45 a 1,2 µm, 25 mm;

cubierta conductora en cassette) ANALITO fibras (conteo manual)

TASA DE FLUJO*: 0.5 a 16 l / min PREPARACIÓN DE LA

MUESTRA: acetona - colapso / triacetina - método de inmersión

VOL-MIN *: 400 L @ 0.1 fibra / cc [2]
- MAX *: (paso 4, muestreo)
REGLAS DE

* *Ajuste para dar 100 a 1300 fibra / mm² CONTEO: descrito en la versión anterior de este método
como reglas "A" [1,3]
ENVÍO: rutina (paquete para reducir el shock)

EQUIPO: 1. microscopio de contraste de fase positivo

ESTABILIDAD 2. Rejilla Walton-Beckett (campo de visión de 100 µm)
DE MUESTRA: estable Tipo G-22
3. diapositiva de prueba de cambio de fase (HSE / NPL)

Espacios en blanco:2 a 10 espacios en blanco por juego

CALIBRACIÓN: Diapositiva de prueba HSE / NPL

EXACTITUD
DISTANCIA: Área de filtro de 100 a 1300 fibras / mm²
Rango estudiado: 80 a 100 fibras contadas
LOD ESTIMADO: Área de filtro de 7 fibras / mm²
PARCIALIDAD: ver EVALUACIÓN DEL MÉTODO
PRECISIÓN (): 0,10 a 0,12 [1]; ver EVALUACIÓN DEL MÉTODO
PRECISIÓN GLOBAL ( ): 0.115 a 0.13 [1]

EXACTITUD: ver EVALUACIÓN DEL MÉTODO

APLICABILIDAD: El rango de trabajo cuantitativo es de 0.04 a 0.5 fibra / cc para una muestra de aire de 1000 L. La LOD depende del volumen de muestra y la
cantidad de polvo interferente, y es <0.01 fibra / cc para atmósferas libres de interferencias. El método da un índice de fibras en el aire. Se utiliza principalmente para
estimar las concentraciones de asbesto, aunque PCM no diferencia entre el asbesto y otras fibras. Use este método junto con la microscopía electrónica (p. Ej.,
Método 7402) para obtener ayuda en la identificación de fibras. Fibras <ca. 0.25 µm de diámetro no será detectado por este método [4]. Este método puede usarse
para otros materiales como el vidrio fibroso mediante el uso de reglas de conteo alternativas (ver Apéndice C).

INTERFERENCIAS Si el método se usa para detectar un tipo específico de fibra, cualquier otra fibra en el aire puede interferir ya que se cuentan todas las partículas que cumplen los criterios

de conteo. Las partículas en forma de cadena pueden aparecer fibrosas. Los altos niveles de partículas de polvo no fibroso pueden oscurecer las fibras en el campo de visión y aumentar el

límite de detección.

OTROS METODOS: Esta revisión reemplaza el Método 7400, Revisión # 3 (con fecha 15/5/89).

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REACTIVOS EQUIPO:

1. Acetona, * grado reactivo. 1. Muestra: monitor de campo, cassette de tres piezas de 25 mm con aprox.
2. Triacetina (triacetato de glicerol), grado reactivo. Capucha de extensión de 50 mm conductora eléctricamente y filtro de
éster de celulosa, tamaño de poro de 0,45 a 1,2 µm y almohadilla de
* *Ver PRECAUCIONES ESPECIALES. respaldo. NOTA 1: Analice filtros representativos para fibra

fondo antes de usar para verificar la claridad y el fondo.

Deseche el lote del filtro si la media es ≥ 5 fibras por 100
campos de retícula. Estos se definen como espacios en
blanco de laboratorio. Las verificaciones de garantía de
calidad proporcionadas por el fabricante en los espacios en
blanco del filtro son normalmente adecuadas siempre que
los espacios en blanco se analicen como se describe a
continuación. NOTA 2: la extensión eléctricamente
conductora

La capucha reduce los efectos electrostáticos. Muela

la cubierta cuando sea posible durante el muestreo.
NOTA 3: Utilice filtros de tamaño de poro de 0.8 µm para

muestreo personal Se recomiendan los filtros de

0,45 µm para el muestreo cuando se realiza el
análisis TEM en las mismas muestras. Sin embargo,
su mayor caída de presión impide su uso con
bombas de muestreo personales. NOTA 4: se han
propuesto otros casetes

que exhiben una uniformidad mejorada del depósito de

fibra en la superficie del filtro, por ejemplo, muestreador
de campana (Envirometrics, Charleston, SC). Estos
pueden usarse si se muestra que dan concentraciones
medidas equivalentes a la muestra indicada
anteriormente para la aplicación.

2. Bomba de muestreo personal, batería o aspiradora alimentada por

línea, de capacidad suficiente para cumplir con los requisitos de
caudal (consulte el paso 4 para conocer el caudal), con tubos de
conexión flexibles.
3. Alambre, multicatenario, calibre 22; 1 ″ abrazadera de manguera para
conectar el cable al casete.
4. Cinta, retráctil o adhesiva.
5. Diapositivas, vidrio, extremo esmerilado, pre-limpiadas, 25- × 75 mm.

6. Cubreobjetos, 22- × 22 mm, No. 1½, a menos que el

fabricante del microscopio especifique lo contrario.

7. Laca o esmalte de uñas.

8. Cuchillo, acero quirúrgico # 10, hoja curva.
9. Pinzas.

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EQUIPO (continuación):

10. Sistema de vaporización instantánea con acetona para limpiar los

filtros en los portaobjetos de vidrio (consulte la ref. [5] para ver
las especificaciones o las instrucciones del fabricante para
dispositivos equivalentes).
11. Micropipetas o jeringas, de 5 µl y de 100 a 500 µl.

12. Microscopio, contraste de fase positiva (oscuro), con filtro

verde o azul, iris de campo ajustable, ocular de 8 a 10 × y
objetivo de fase de 40 a 45 × (aumento total de
aproximadamente 400 ×); apertura numérica = 0,65 a 0,75.

13. Rejilla, tipo Walton-Beckett con campo circular de 100 µm de

diámetro (área = 0.00785 mm²) en el plano de la muestra
(Tipo G-22). Disponible en Optometrics USA, PO Box 699,
Ayer, MA 01432 [teléfono (508) -772-1700], y McCrone
Accessories and Components, 850 Pasquinelli Drive,
Westmont, IL 60559 [teléfono (312) 887-7100].

NOTA: La retícula está hecha a medida para cada

microscopio. (Ver APÉNDICE A para el procedimiento de
pedido personalizado).
14. Diapositiva de prueba de contraste de fase HSE / NPL, Mark II.
Disponible en Optometrics USA (dirección arriba).

15. Telescopio, centrado del anillo de fase ocular.

16. Micrómetro de platina (divisiones de 0.01 mm).

PRECAUCIONES ESPECIALES: La acetona es extremadamente inflamable. Tome precauciones para no encenderlo. El calentamiento de acetona en
volúmenes superiores a 1 ml debe realizarse en una campana extractora de laboratorio ventilada utilizando una fuente de calor sin llama y sin chispas.

MUESTREO:

1. Calibre cada bomba de muestreo personal con una muestra representativa en línea.
2. Para reducir la contaminación y mantener el cassette firmemente unido, selle el pliegue entre la base del cassette y la cubierta con una
banda retráctil o cinta adhesiva de color claro. Para el muestreo personal, fije el cassette de cara abierta (sin tapa) a la solapa del
trabajador. La cara abierta debe estar orientada hacia abajo.

NOTA: La cubierta debe estar conectada a tierra eléctricamente durante el muestreo del área, especialmente en condiciones
de baja humedad relativa. Use una abrazadera de manguera para asegurar un extremo del cable (Equipo, Artículo 3) a la cubierta del monitor.
Conecte el otro extremo a una conexión a tierra (es decir, una tubería de agua fría).
3. Envíe al menos dos espacios en blanco (o el 10% del total de muestras, lo que sea mayor) para cada conjunto de muestras. Maneje los campos en
blanco de una manera representativa del manejo real de las muestras asociadas en el conjunto. Abra los casetes en blanco de campo al mismo tiempo
que otros casetes justo antes del muestreo. Almacene las tapas y casetes superiores en un área limpia (por ejemplo, una bolsa o caja cerrada) con las
tapas superiores de los casetes de muestreo durante el período de muestreo.

4. Muestra a 0.5 L / min o mayor [6]. Ajustar el caudal de muestreo, (L / min) y tiempo, t ( min), para producir
una densidad de fibra, , de 100 a 1300 fibras / mm² (3,85 × 10⁴ a 5 × 10⁵ fibras por filtro de 25 mm con filtro efectivo

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área de recolección = 385 mm²) para una precisión óptima. Estas variables están relacionadas con el nivel de acción (la mitad del
estándar actual), (fibras / cc), del aerosol fibroso que se muestrea mediante:

NOTA 1: El propósito de ajustar los tiempos de muestreo es obtener una carga de fibra óptima en el filtro.
La eficiencia de recolección no parece ser una función del caudal en el rango de 0.5 a 16 L / min para las fibras de asbesto [7]. Las fibras
de diámetro relativamente grande (> 3 µm) pueden presentar una pérdida de aspiración significativa y un depósito de entrada. Una
velocidad de muestreo de 1 a 4 l / min durante 8 h es apropiada en atmósferas que contienen aprox. 0.1 fibra / cc en ausencia de
cantidades significativas de polvo sin asbesto. Las atmósferas polvorientas requieren volúmenes de muestra más pequeños (≤400 L) para
obtener muestras contables. En tales casos, tome muestras cortas y consecutivas y promedie los resultados durante el tiempo total de
recolección. Para documentar exposiciones episódicas, use caudales altos (7 a 16 l / min) en tiempos de muestreo más cortos. En
atmósferas relativamente limpias, donde las concentraciones de fibra objetivo son mucho menores que 0.1 fibra / cc, use volúmenes de
muestra más grandes (3000 a 10000 L) para lograr cargas cuantificables. Sin embargo, tenga cuidado de no sobrecargar el filtro con polvo
de fondo. Si ≥50% de la superficie del filtro está cubierta de partículas, el filtro puede estar demasiado sobrecargado para contar y sesgará
la concentración de fibra medida. NOTA 2: las regulaciones de OSHA especifican un volumen de muestreo mínimo de 48 L para una
excursión

medición, y una tasa de muestreo máxima de 2.5 L / min [3].

5. Al final del muestreo, vuelva a colocar la tapa superior y los tapones finales.
6. Envíe las muestras con una cubierta conductora unida en un contenedor rígido con material de embalaje para evitar empujones o daños.

NOTA: No use espuma de poliestireno sin tratar en el contenedor de envío porque las fuerzas electrostáticas
puede causar pérdida de fibra del filtro de muestra.

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA:

NOTA 1: El objetivo es producir muestras con un fondo liso (no granulado) en un medio con
índice de refracción ≤ 1.46. Este método colapsa el filtro para facilitar el enfoque y produce montajes permanentes (1–10 años) que
son útiles para el control de calidad y la comparación entre laboratorios. El "bloque caliente" de aluminio o técnicas similares de
vaporización instantánea pueden usarse fuera del laboratorio [2]. También se pueden usar otras técnicas de montaje que cumplan
con los criterios anteriores (por ejemplo, el procedimiento de campana extractora de laboratorio para generar vapor de acetona
como se describe en el Método 7400, revisión del 15/5/85, o la técnica de montaje de campo no permanente utilizada en P & CAM
239 [ 3,7–9]). A menos que se conozca el área efectiva de filtración, determine el área y registre la información referenciada con el
número de identificación de la muestra [1,9–11].

NOTA 2: El exceso de agua en la acetona puede ralentizar la limpieza del filtro y provocar que el material
Lavó la superficie del filtro. Además, los filtros que han estado expuestos a altas humedades antes de la limpieza
pueden tener un fondo granulado.
7. Asegúrese de que los portaobjetos de vidrio y los cubreobjetos estén libres de polvo y fibras.
8. Ajuste el reóstato para calentar el "bloque caliente" a aprox. 70 ° C [2].
NOTA: Si el "bloque caliente" no se usa en una campana extractora, debe descansar sobre una placa de cerámica y aislarse
de cualquier superficie susceptible al daño por calor.
9. Monte un corte de cuña del filtro de muestra en un portaobjetos de vidrio limpio.
a. Cortar cuñas de ca. 25% del área del filtro con una cuchilla de acero quirúrgica de hoja curva que utiliza un movimiento de balanceo para evitar el
desgarro. Coloque la cuña, con el polvo hacia arriba, sobre el portaobjetos. NOTA: La electricidad estática generalmente mantendrá la cuña en el
tobogán.
segundo. Inserte el portaobjetos con cuña en la ranura de recepción en la base del "bloque caliente". Coloque inmediatamente la punta de una micropipeta
que contenga aprox. 250 µL de acetona (use el volumen mínimo necesario para limpiar consistentemente las secciones del filtro) en el puerto de
entrada de la tapa de PTFE en la parte superior del "bloque caliente" e inyecte el

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Acetona en la cámara de vaporización con una presión lenta y constante sobre el botón del émbolo mientras mantiene la pipeta firmemente en su
lugar. Después de esperar de 3 a 5 segundos para que se despeje el filtro, retire la pipeta y deslice de sus puertos.

PRECAUCIÓN: Aunque el volumen de acetona utilizado es pequeño, tome precauciones de seguridad. Trabajar en un
área bien ventilada (p. ej., campana extractora de laboratorio). Tenga cuidado de no encender la acetona. El uso continuo de este
dispositivo en un espacio sin ventilación puede producir concentraciones explosivas de vapor de acetona.

do. Usando la micropipeta de 5 µL, coloque inmediatamente 3.0 a 3.5 µL de triacetina en la cuña. Baje suavemente un cubreobjetos limpio sobre la
cuña en un ligero ángulo para reducir la formación de burbujas. Evite el exceso de presión y el movimiento de la cubierta de vidrio.

NOTA: Si se forman demasiadas burbujas o la cantidad de triacetina es insuficiente, el cubreobjetos puede

desprenderse en unas pocas horas. Si queda un exceso de triacetina en el borde del filtro debajo del cubreobjetos, puede
producirse una migración de fibra.
re. Marque el contorno del segmento del filtro con un rotulador de vidrio para ayudar en la evaluación microscópica.
mi. Pegue los bordes del cubreobjetos al portaobjetos con laca o esmalte de uñas [12]. El recuento puede continuar inmediatamente
después de completar la limpieza y el montaje.
NOTA: Si la limpieza es lenta, caliente el portaobjetos en una placa calefactora (temperatura de la superficie 50 ° C) hasta 15
min para acelerar la limpieza. Caliente con cuidado para evitar la formación de burbujas de gas.

CALIBRACIÓN Y CONTROL DE CALIDAD:

10. Ajustes del microscopio. Siga las instrucciones del fabricante. Al menos una vez al día, use el telescopio ocular (o lente Bertrand, para algunos
microscopios) suministrado por el fabricante para garantizar que los anillos de fase (diafragma anular y elementos de desplazamiento de
fase) sean concéntricos. Con cada microscopio, mantenga un libro de registro en el que registre las fechas de las limpiezas de microscopios
y los principales servicios.

a. Cada vez que se examina una muestra, haga lo siguiente:

(1) Ajuste la fuente de luz para una iluminación uniforme en todo el campo de visión en el iris del condensador. Utilizar
Iluminación de Kohler, si está disponible. Con algunos microscopios, la iluminación puede tener que configurarse con óptica de
campo brillante en lugar de óptica de contrato de fase. (2) Centrarse en el material en partículas a examinar.

(3) Asegúrese de que el campo iris esté enfocado, centrado en la muestra y abierto solo lo suficiente para
iluminar el campo de visión.
segundo. Verifique periódicamente el límite de detección de cambio de fase del microscopio para cada combinación de analista / microscopio:

(1) Centre la diapositiva de prueba de contraste de fase HSE / NPL debajo del objetivo de fase. (2) Ponga los
bloques de líneas ranuradas en foco en el área de la retícula.
NOTA: La diapositiva contiene siete bloques de surcos (ca. 20 surcos por bloque) en forma descendente
orden de visibilidad. Para el conteo de asbestos, la óptica del microscopio debe resolver completamente las líneas
ranuradas en el bloque 3, aunque pueden parecer algo débiles, y las líneas ranuradas en los bloques 6 y 7 deben ser
invisibles cuando se centran en el área de la retícula. Los bloques 4 y 5 deben ser al menos parcialmente visibles pero
pueden variar ligeramente en visibilidad entre microscopios. Un microscopio que no cumple con estos requisitos tiene una
resolución demasiado baja o demasiado alta para el conteo de fibras.

(3) Si la calidad de la imagen se deteriora, limpie la óptica del microscopio. Si el problema persiste, consulte el
fabricante de microscopios.
11. Documente la precisión del laboratorio para cada contador para replicar los conteos de fibra.
a. Mantener como parte del programa de garantía de calidad del laboratorio un conjunto de diapositivas de referencia que se utilizarán diariamente
[13]. Estos portaobjetos deben consistir en preparaciones de filtro que incluyen una gama de cargas y niveles de polvo de fondo de una
variedad de fuentes, incluidas muestras de campo y de referencia (p. Ej., PAT, AAR, muestras comerciales). El Oficial de Garantía de Calidad
debe mantener la custodia de las diapositivas de referencia y debe proporcionar a cada mostrador un mínimo de una referencia

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diapositiva por día laboral. Cambie las etiquetas en las diapositivas de referencia periódicamente para que el contador no se familiarice
con las muestras.
segundo. A partir de recuentos ciegos de repetición en diapositivas de referencia, calcule la precisión intra e intercontador del laboratorio. Obtenga
valores separados de la desviación estándar relativa () para cada matriz de muestra analizada en cada uno de los siguientes rangos: 5 a 20 fibras
en 100 campos de retícula,> 20 a 50 fibras en 100 campos de retícula y> 50 a 100 fibras en 100 campos de retícula . Mantenga gráficos de control
para cada uno de estos archivos de datos.

NOTA: Se ha demostrado que ciertas matrices de muestra (p. Ej., Fibrocemento) dan poca precisión
[9]
12. Prepare y cuente los campos en blanco junto con las muestras de campo. El informe cuenta en cada campo en blanco. NOTA 1: La identidad de los
filtros en blanco debe ser desconocida para el contador hasta que todos los recuentos hayan sido
terminado.
NOTA 2: Si un campo en blanco produce más de 7 fibras por 100 campos de retícula, informe posible
contaminación de las muestras.
13. Realice recuentos ciegos por el mismo contador en el 10% de los filtros contados (diapositivas etiquetadas por una persona que no sea
el contador). Use la siguiente prueba para determinar si un par de conteos por el mismo contador en el mismo filtro debe ser rechazado
debido a un posible sesgo: descarte la muestra si el valor absoluto de la diferencia entre las raíces cuadradas de los dos conteos (en
fibra / mm² ) excede
where = promedio de las raíces cuadradas de los dos recuentos de fibra (en fibra / mm²) y where es la desviación estándar
relativa dentro del contador para el rango de recuento apropiado (en fibras) determinado en el paso 11. Para ver discusiones más completas,
consulte la referencia [13].
NOTA 1: Dado que el conteo de fibras es la medición de fibras colocadas al azar que se pueden describir
mediante una distribución de Poisson, una transformación de raíz cuadrada de los datos del recuento de fibras dará como resultado datos
distribuidos aproximadamente normalmente [13].
NOTA 2: Si esta prueba rechaza un par de cuentas, vuelva a contar las muestras restantes en el conjunto y pruebe
las nuevas cuentas contra las primeras cuentas. Descarte todos los recuentos emparejados rechazados. No es necesario utilizar esta
estadística en recuentos en blanco.
14. El analista es una parte crítica de este procedimiento analítico. Se debe tener cuidado para proporcionar un ambiente cómodo y no
estresante para el conteo de fibras. Se debe utilizar una silla de diseño ergonómico, con el ocular del microscopio situado a una altura
cómoda para ver. La iluminación externa debe establecerse en un nivel similar al nivel de iluminación en el microscopio para reducir la
fatiga ocular. Además, los contadores deben tomar descansos de 10 a 20 minutos del microscopio cada una o dos horas para limitar la
fatiga [14]. Durante estos descansos, se deben realizar ejercicios para los ojos y la parte superior de la espalda / cuello para aliviar la
tensión.

15. Todos los laboratorios que participan en el conteo de asbesto deben participar en un programa de pruebas de aptitud, como el Programa de Pruebas
Analíticas de Competencia (PAT) AIHA-NIOSH para el asbesto e intercambiar muestras de campo con otros laboratorios de manera rutinaria para
comparar el desempeño de los contadores.

MEDICIÓN:

16. Centre el portaobjetos en la platina del microscopio calibrado debajo de la lente del objetivo. Enfoca el microscopio en el
plano del filtro.
17. Ajuste el microscopio (Paso 10).
NOTA: La calibración con el portaobjetos de prueba HSE / NPL determina el diámetro mínimo de fibra detectable
(ca. 0.25 µm) [4].
18. Reglas de conteo: (igual que las reglas P & CAM 239 [1,10,11]: ver ejemplos en el APÉNDICE B).
a. Cuente cualquier fibra de más de 5 µm que se encuentre completamente dentro del área de la retícula. (1) Cuente solo las fibras de
más de 5 µm. Mida la longitud de las fibras curvas a lo largo de la curva. (2) Cuente solo las fibras con una relación de longitud a
ancho igual o mayor que 3: 1.
segundo. Para fibras que cruzan el límite del campo de la retícula:
(1) Cuente como ½ fibra cualquier fibra con solo un extremo dentro del área de la retícula, siempre que
la fibra cumple los criterios de la regla a anterior.

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(2) No cuente ninguna fibra que cruce el límite de la retícula más de una vez. (3) Rechace y no cuente
todas las demás fibras.
do. Cuente los haces de fibras como una fibra a menos que se puedan identificar fibras individuales observando ambos extremos de una fibra.

re. Cuente suficientes campos de retícula para producir 100 fibras. Cuente un mínimo de 20 campos. Pare en 100 campos de retícula
independientemente del conteo.
19. Comience a contar desde la punta de la cuña del filtro y avance a lo largo de una línea radial hasta el borde exterior. Cambie hacia arriba o
hacia abajo en el filtro y continúe en la dirección inversa. Seleccione los campos de retícula al azar al apartar la vista del ocular
brevemente mientras avanza la etapa mecánica. Asegúrese de que, como mínimo, cada análisis cubra una línea radial desde el centro
del filtro hasta el borde exterior del filtro. Cuando un aglomerado o burbuja cubre ca. 1/6 o más del campo de retícula, rechace el campo
de retícula y seleccione otro. No informe los campos de retícula rechazados en el número total contado. NOTA 1: Al contar un campo de
retícula, escanee continuamente un rango de planos focales moviendo el

perilla de enfoque fino para detectar fibras muy finas que se han incrustado en el filtro. Las fibras de diámetro pequeño
serán muy débiles, pero son una contribución importante al recuento total. Un tiempo de conteo mínimo de 15 s por campo es
apropiado para un conteo preciso. NOTA 2: Este método no permite la diferenciación de fibras en función de la morfología. A
pesar de que
algunos contadores experimentados son capaces de contar selectivamente solo fibras que parecen ser asbestiformes, actualmente no
existe un método aceptado para garantizar la uniformidad de juicio entre laboratorios. Por lo tanto, corresponde a todos los
laboratorios que utilicen este método informar el recuento total de fibras. Si se produce una contaminación grave de las fibras que no
son de asbesto en las muestras, se deben usar otras técnicas, como la microscopía electrónica de transmisión, para identificar la
fracción de fibras de asbesto presente en la muestra (consulte el Método NIOSH 7402). En algunos casos (es decir, para fibras con
diámetros> 1 µm), microscopía de luz polarizada (como en el Método NIOSH

7403) puede usarse para identificar y eliminar las fibras no cristalinas que interfieren [15].
NOTA 3: No cuente en los bordes donde se cortó el filtro. Muévase al menos 1 mm desde el borde. NOTA 4: Bajo ciertas
condiciones, la carga electrostática puede afectar el muestreo de fibras. Estas
Los efectos electrostáticos son más probables cuando la humedad relativa es baja (inferior al 20%) y cuando el muestreo se
realiza cerca de la fuente de aerosol. El resultado es que se reduce la deposición de fibras en el filtro, especialmente cerca del
borde del filtro. Si se observa dicho patrón durante el conteo de fibras, elija los campos lo más cerca posible del centro del filtro
[5]. NOTA 5: Los recuentos deben registrarse en una hoja de datos que proporcione, como mínimo, espacios en los que

registre los recuentos para cada campo, el número de identificación del filtro, el nombre del analista, la fecha, el total de fibras contadas, el total
de campos contados, el recuento promedio, la densidad de fibra y los comentarios. El recuento promedio se calcula dividiendo el recuento total
de fibras por el número de campos observados. La densidad de fibra (fibras / mm²) se define como el recuento promedio (fibras / campo)
dividido por el área de campo (retícula) (mm² / campo).

CÁLCULOS E INFORMES DE RESULTADOS

20. Calcule e informe la densidad de fibra en el filtro, (fibras / mm²), dividiendo el recuento promedio de fibras
por campo de retícula, , menos el recuento medio de campos en blanco por campo de retícula, , por la retícula
área de campo, (aprox. 0.00785 mm²):

, fibras / mm².

NOTA: Recuentos de fibra por encima de 1300 fibras / mm² y conteos de fibra de muestras con> 50% del área del filtro
cubierto con partículas debe informarse como "incontable" o "probablemente sesgado". Otros recuentos de fibra fuera del
rango de 100-1300 fibras / mm² deben informarse como que tienen "variabilidad mayor que óptima" y como "probablemente
sesgados".
21. Calcular y reportar la concentración, (fibras / cc), de fibras en el volumen de aire muestreado, (L), usando
el área efectiva de recolección del filtro, (aprox. 385 mm² para un filtro de 25 mm):

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NOTA: Verifique y ajuste periódicamente el valor de , si necesario.

22. Informe las desviaciones estándar relativas intralaboratorio e interlaboratorio (del Paso 11) con cada conjunto de resultados.

NOTA: La precisión depende del número total de fibras contadas [1,16]. Desviación estándar relativa
está documentado en las referencias [1,15–17] para recuentos de fibras de hasta 100 fibras en 100 campos de retícula. La comparabilidad de los
resultados entre laboratorios se analiza a continuación. Como primera aproximación, use 213% por encima y 49% por debajo del recuento como
los límites de confianza superior e inferior para los recuentos de fibra superiores a 20 (Figura 1).

EVALUACIÓN DEL MÉTODO:

Revisiones de métodos:

Este método es una revisión de P & CAM 239 [10]. Un resumen de las revisiones es el siguiente:
1. Muestreo:
El cambio de un filtro de 37 mm a un filtro de 25 mm mejora la sensibilidad para volúmenes de aire similares. El cambio en los caudales
permite tomar muestras de 2 m³ de turno completo, siempre que el filtro no esté sobrecargado con partículas no fibrosas. La eficiencia de
recolección de la muestra no es una función del caudal en el rango de 0.5 a 16 L / min [10].

2. Técnica de preparación de muestra:

La técnica de preparación de vapor acetona-triacetina es una técnica de montaje más rápida y permanente que el método de dimetil
ftalato / dietil oxalato de P & CAM 239 [2,4,10]. La técnica de "bloqueo en caliente" de aluminio minimiza la cantidad de acetona
necesaria para preparar cada muestra.
3. Medida:
a. La retícula de Walton-Beckett estandariza el área observada [14, 18, 19].
segundo. El portaobjetos de prueba HSE / NPL estandariza la óptica del microscopio para la sensibilidad al diámetro de la fibra [4,14].
do. Debido a imprecisiones pasadas asociadas con recuentos bajos de fibra, la carga mínima recomendada se ha incrementado a 100
fibras / mm² de área de filtro (un total de 78.5 fibras contadas en 100 campos, cada una con un área de campo = 0.00785 mm²). Los
niveles más bajos generalmente resultan en un Sobreestimar el recuento de fibra en comparación con los resultados en el rango
analítico recomendado [20]. Las cargas recomendadas deben rendir dentro del mostrador
en el rango de 0,10 a 0,17 [21-23].

Comparabilidad interlaboratorio:

Un estudio de colaboración internacional involucró a 16 laboratorios que utilizan portaobjetos preparados de las industrias de cemento de asbesto,
molienda, minería, textil y material de fricción [9]. Las desviaciones estándar relativas () variaron con el tipo de muestra y el laboratorio. Los rangos
fueron:

Reglas Intralaboratorio Interlaboratorio En general

AIA (Reglas de NIOSH A) * 0,12 a 0,40 0.27 a 0.85 0,46

CRS modificado (Reglas NIOSH B) † 0.11 a 0.29 0,20 a 0,35 0.25

* *Según las reglas de AIA, solo se cuentan las fibras que tienen un diámetro inferior a 3 µm y no se cuentan las fibras unidas a partículas mayores

de 3 µm. Las reglas de NIOSH A son similares a las reglas de AIA.

† Ver Apéndice C.

Un estudio de NIOSH realizado con muestras de campo de asbesto dio intralaboratorio en el rango de 0.17 a
0.25 y un interlaboratorio de 0.45 [21]. Esto concuerda bien con otros estudios recientes [9,14,16].

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En este momento, no hay medios independientes para evaluar la precisión general de este método. Una medida de confiabilidad es estimar
qué tan bien el recuento de una sola muestra concuerda con el recuento medio de un gran número de laboratorios. La siguiente discusión
indica cómo se puede llevar a cabo esta estimación en función de las mediciones de la variabilidad interlaboratorio, y muestra cómo los
resultados de este método se relacionan con la precisión de recuento teóricamente alcanzable y con la medición intra e interlaboratorio.
(NOTA: La siguiente discusión no incluye estimaciones de sesgo y no debe tomarse para indicar que las muestras ligeramente cargadas
son tan precisas como las cargadas correctamente).

Teóricamente, el proceso de contar fibras distribuidas aleatoriamente (Poisson) en una superficie de filtro dará una que depende del
número, , de fibras contadas:

Así es 0.1 para 100 fibras y 0.32 para 10 fibras contadas. El actual encontrado en una serie de estudios es
mayor que estos números teóricos [17, 19-21].

Un componente adicional de variabilidad proviene principalmente de diferencias subjetivas entre laboratorios. En un estudio de diez
contadores en un programa continuo de intercambio de muestras, Ogden [15] encontró que este componente subjetivo del intralaboratorio es
aproximadamente 0.2 y estimó el total en términos de:

Ogden encontró que el intervalo de confianza del 90% de los recuentos intralaboratorios individuales en relación con las medias fueron +2 y −1.5.
En este programa, una muestra de cada diez era una muestra de control de calidad. Para los laboratorios que no participan en un programa
intensivo de garantía de calidad, el componente subjetivo de la variabilidad puede ser mayor.

En un estudio de resultados de muestras de campo en 46 laboratorios, la Asociación de Información de Asbestos también encontró que la
variabilidad tenía un componente constante y uno que dependía del conteo de fibra [14]. Estos resultados dieron un componente
interlaboratorio subjetivo de (sobre la misma base que Ogden's) para el campo
muestras de ca. 0,45. Se obtuvo un valor similar para 12 laboratorios que analizaron un conjunto de 24 muestras de campo [21]. Este valor cae
ligeramente por encima del rango de (0.25 a 0.42 para 1984–85) encontrado para 80 referencias
laboratorios en el programa NIOSH PAT para muestras generadas en laboratorio [17].

Varios factores influyen para un laboratorio determinado, como el rendimiento de conteo real de ese laboratorio y el tipo de
muestras que se analizan. En ausencia de otra información, como la de un programa de garantía de calidad entre laboratorios
que utiliza muestras de campo, el valor del componente subjetivo de variabilidad se elige como 0.45. Se espera que los
laboratorios lleven a cabo los programas de garantía de calidad interlaboratorios recomendados para mejorar su desempeño y
así reducir el.

Las desviaciones estándar relativas anteriores se aplican cuando se ha determinado la media de la población. Sin embargo, es más útil para los
laboratorios estimar el intervalo de confianza del 90% en el recuento medio a partir de un solo recuento de fibras de muestra (Figura 1). Estas
curvas asumen formas similares de la distribución de conteo para resultados interlaboratorio e intralaboratorio [16].

Por ejemplo, si una muestra produce un recuento de 24 fibras, la Figura 1 indica que el recuento medio entre laboratorios estará dentro del rango de
227% por encima y 52% por debajo de ese valor el 90% del tiempo. También podemos aplicar estos porcentajes directamente a las concentraciones en
el aire. Si, por ejemplo, esta muestra (24 fibras contadas) representaba un volumen de 500 L, entonces la concentración medida es 0.02 fibras / mL
(suponiendo 100 campos contados, filtro de 25 mm, área de campo de recuento de 0.00785 mm²). Si esta misma muestra fuera contada por

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En un grupo de laboratorios, hay un 90% de probabilidad de que la media caiga entre 0.01 y 0.08 fibra /
mL. Estos límites deben informarse en cualquier comparación de resultados entre laboratorios.

Tenga en cuenta que el 0,45 utilizado para derivar la Figura 1 se utiliza como una estimación para un grupo aleatorio de laboratorios. Si varios laboratorios
pertenecientes a un grupo de garantía de calidad pueden demostrar que su interlaboratorio es
más pequeño, entonces es más correcto usar ese más pequeño . Sin embargo, la estimación de 0,45 se utilizará en
La ausencia de dicha información. Tenga en cuenta también que se ha encontrado que puede ser mayor para ciertos tipos de muestras, como el
asbesto cemento [9].

Muy a menudo, la concentración estimada en el aire de un análisis de asbesto se usa para comparar con un estándar regulatorio. Por ejemplo,
si uno está tratando de demostrar el cumplimiento de un estándar de 0.5 fibras / ml usando una sola muestra en la que se han contado 100
fibras, entonces la Figura 1 indica que el estándar de 0.5 fibras / ml debe ser 213% más alto que la concentración de aire medida . Esto indica
que si uno mide una concentración de fibra de 0,16 fibra / ml (100 fibras contadas), entonces el recuento medio de fibra por un grupo de
laboratorios (de los cuales el laboratorio de cumplimiento podría ser uno) tiene un 95% de posibilidades de ser inferior a 0,5 fibras / ml; es decir,
0.16 + 2.13 × 0.16 = 0.5.

Se puede ver en la Figura 1 que el componente de Poisson de la variabilidad no es muy importante a menos que el número de fibras contadas sea
pequeño. Por lo tanto, una aproximación adicional es simplemente usar + 213% y -49% como los valores de confianza superior e inferior de la
media para un recuento de 100 fibras.

Intervalo de confianza del 90% en el recuento medio

[componente subjetivo (0.45) + componente de Poisson]
Porcentaje relativo al recuento de muestras individuales

El recuento medio de probabilidad del 95% está por debajo de este nivel

El recuento medio de probabilidad del 95% está por encima de este nivel

Número de fibras contadas en una sola muestra

Figura 1. Precisión interlaboratorio de conteos de fibra.

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Las curvas en la Figura 1 están definidas por las siguientes ecuaciones:

donde = desviación estándar relativa interlaboratorio subjetiva, que está cerca del total
entre laboratorios cuando se cuentan aproximadamente 100 fibras, = fibras totales
contadas en la muestra, = límite de confianza inferior del 95% y = límite de confianza superior
del 95%.

Tenga en cuenta que el rango entre estos dos límites representa el 90% del rango total.

Referencias

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para la evaluación de fibras de asbesto en el aire, Departamento de Salud, Educación y Bienestar de EE. UU., Publ. (NIOSH) 79-127 (1979).

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169-171, 199 (1986).
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a asbesto, tremolita, antofilita y asbesto de actinolita; Reglas finales, 29 CFR Parte 1910.1001 Modificado el 20 de junio de 1986.

[4] Rooker, SJ, NP Vaughn y JM LeGuen. "Sobre la visibilidad de las fibras por contraste de fase
Microscopía," Amer Ind. Hyg. Asoc. J., 43, 505-515 (1982).
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[6] Johnston, AM, AD Jones y JH Vincent. "La influencia de los factores aerodinámicos externos
sobre la medición de la concentración de fibras de asbesto en el aire por el método del filtro de membrana " Ana. Occup.
Hyg., 25, 309-316 (1982).
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Amianto," Ana. Occup. Hyg., 21, 259–272 (1980).
[8] Jankovic, JT, W. Jones y J. Clere. "Técnicas de campo para limpiar los filtros de éster de celulosa utilizados en
Muestreo de asbesto " Appl. Ind. Hyg., 1, 145-147 (1986).
[9] Crawford, NP, HL Thorpe y W. Alexander. "Una comparación de los efectos de contar diferentes
Reglas y relaciones de aspecto sobre el nivel y la reproducibilidad de los recuentos de fibras de asbesto ", Parte I: Efectos sobre el nivel (Informe
No. TM / 82/23), Parte II: Efectos sobre la Reproducibilidad (Informe No. TM / 82/24), Instituto of Occupational Medicine, Edimburgo, Escocia
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Educación y Bienestar, Publ. (NIOSH) 77-157-A (1977).
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Publ. (NIOSH) 77-169 (1976); según enmendado en la declaración de NIOSH en la audiencia pública de OSHA, 21 de junio,
1984
[12] Asociación Internacional de Asbestos, AIA Salud y Seguridad Método técnico recomendado # 1
(RTMI). "Concentraciones de fibra de amianto en el aire en los lugares de trabajo mediante microscopía óptica" (Método de filtro de membrana),
Londres (1979).
[13] Abell, M., S. Shulman y P. Baron. "La calidad de los datos de recuento de fibra" Appl. Ind. Hyg., 4, 273–285
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[14] "Un estudio de la precisión empírica de las mediciones de concentración de asbesto en el aire en el
Lugar de trabajo mediante el método de filtro de membrana ”, Asociación de Información sobre Asbestos, Informe del Comité de Monitoreo del
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[15] McCrone, W., L. McCrone y J. Delly, "Polarized Light Microscopy", Ann Arbor Science (1978). [16] Ogden, TL "La reproducibilidad de los
recuentos de fibra", documento de investigación ejecutiva sobre salud y seguridad 18
(mil novecientos ochenta y dos).
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Programa de pruebas analíticas de competencia (PAT) de NIOSH " A.m. Ind. Hyg. Asoc. J., 47, 259-266 (1986). [18] Chatfield, EJ
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Comisión de Asuntos de Salud y Seguridad que surgen del uso de asbesto en Ontario, Estudio No.
9, 180 Dundas Street West, Piso 22, Toronto, Ontario, CANADÁ M5G 1Z8.
[19] Walton, WH "La naturaleza, los peligros y la evaluación de la exposición ocupacional al asbesto en el aire
Polvo: una revisión " Ana. Occup. Hyg., 25, 115-247 (1982).
[20] Cherrie, J., AD Jones y AM Johnston. "La influencia de la densidad de fibra en la evaluación de
Concentración de fibra utilizando el método de filtro de membrana ". A.m. Ind. Hyg. Asoc. J., 47 8), 465-74 (1986).
[21] Barón, Pensilvania y S. Shulman. "Evaluación del analizador de imágenes Magiscan para fibra de asbesto
Contando." A.m. Ind. Hyg. Asoc. J., ( en prensa).
[22] Taylor, DG, PA Baron, SA Shulman y JW Carter. "Identificación y conteo de asbesto
Fibras " A.m. Ind. Hyg. Asoc. J. 45 ( 2), 84–88 (1984).
[23] "Riesgos potenciales para la salud de los terminales de visualización de video", Informe de investigación de NIOSH, junio de 1981. [24] "Métodos
de referencia para medir las fibras minerales artificiales en el aire (MMMF)", OMS / EURO
Comité Técnico para Monitorear un MMMF de Evaluación en el Aire, Organización Mundial de la Salud, Copenhague (1985).

[25] Criterios para un estándar recomendado ... Exposición ocupacional al vidrio fibroso, Departamento de EE. UU.
de Salud, Educación y Bienestar, Publ. (NIOSH) 77-152 (1977).

MÉTODO ESCRITO POR:

Paul A. Baron, Ph.D., NIOSH / DPSE.

APÉNDICE A. CALIBRACIÓN DE LA GRÁFICA WALTON-BECKETT

Antes de ordenar la retícula Walton-Beckett, se debe realizar la siguiente calibración para obtener un área de conteo () de 100 µm
de diámetro en el plano de la imagen. El diámetro, (mm), del recuento circular
El área y el diámetro del disco deben especificarse al ordenar la retícula.

1. Inserte cualquier retícula disponible en el ocular y enfoque para que las líneas de la retícula sean nítidas y claras.

2. Establezca la distancia interpupilar adecuada y, si corresponde, restablezca el ajuste de la cabeza binocular para que el aumento
permanezca constante.
3. Instale el objetivo de fase de 40 a 45 ×.
4. Coloque un micrómetro de platina en la platina del objeto del microscopio y enfoque el microscopio en las líneas graduadas.

5. Mida la longitud de la cuadrícula ampliada de la retícula, (µm), utilizando el micrómetro de etapa.

6. Retire la retícula del microscopio y mida la longitud real de la cuadrícula, (mm) Esto puede mejor
se logrará utilizando un escenario equipado con verniers.
7. Calcule el diámetro del círculo, (mm), para la retícula Walton-Beckett:

Ejemplo: Si = 112 µm = 4.5 mm, y = 100 µm, entonces = 4.02 mm.

8. Verifique el diámetro del campo, (rango aceptable 100 µm ± 2 µm) con un micrómetro de etapa al recibirlo
de la retícula del fabricante. Determine el área de campo (rango aceptable 0.00754 mm² a
0,00817 mm²).

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APÉNDICE B. COMPARACIÓN DE NORMAS DE CONTEO

La figura 2 muestra una retícula de Walton-Beckett como se ve a través del microscopio. Las reglas se discutirán a medida que se apliquen a los
objetos etiquetados en la figura.

Figura 2. Rejilla Walton-Beckett con fibras.

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Estas reglas a veces se denominan reglas "A":

Objeto Contar Discusión

1 1 fibra Las fibras de asbesto ópticamente observables son en realidad haces de fibrillas finas. Si las fibrillas parecen ser del
mismo paquete, el objeto se cuenta como una sola fibra. Sin embargo, tenga en cuenta que todos los objetos que
cumplan los criterios de longitud y relación de aspecto se cuentan independientemente de si parecen o no amianto.

2 2 fibras Si las fibras que cumplen los criterios de longitud y relación de aspecto (longitud> 5 µm y relación
longitud-ancho> 3 a 1) se superponen, pero no parecen ser parte del mismo paquete, se cuentan como
fibras separadas.

3 1 fibra Aunque el objeto tiene un diámetro relativamente grande (> 3 µm), se cuenta como fibra según las reglas. No
hay límite superior en el diámetro de la fibra en las reglas de conteo. Tenga en cuenta que el ancho de la fibra
se mide en la sección compacta más ancha del objeto.

44 1 fibra Aunque las fibrillas finas y largas pueden extenderse desde el cuerpo de una fibra, estas fibrillas se consideran
parte de la fibra si parecen haber sido originalmente parte del paquete.

55 No cuente Si el objeto tiene ≤ 5 µm de largo, no se cuenta. 6 6

1 fibra Una fibra parcialmente oscurecida por una partícula se cuenta como una fibra. Si los extremos de la fibra que
emanan de una partícula no parecen ser de la misma fibra y cada extremo cumple con los criterios de longitud y
relación de aspecto, se cuentan como fibras separadas.

77 ½ fibra Una fibra que cruza el área de la retícula una vez se cuenta como ½ fibra.
8 No cuente Ignorar las fibras que cruzan el límite de la retícula más de una vez. 9 9
No cuente Ignorar las fibras que se encuentran fuera del límite de la retícula.

APÉNDICE C. REGLAS DE CONTEO ALTERNATIVAS PARA FIBRAS SIN ASBESTOS

Otras reglas de conteo pueden ser más apropiadas para la medición de tipos específicos de fibra sin asbesto, como el vidrio fibroso. Estos
incluyen las reglas "B" que figuran a continuación (del Método NIOSH 7400, Revisión # 2, con fecha 15/08/87), el método de referencia de la
Organización Mundial de la Salud para la fibra mineral artificial [24] y el documento de criterios de vidrio fibroso NIOSH método [25]. El límite del
diámetro superior en estos métodos impide la medición de fibras no torácicas. Es importante tener en cuenta que los límites de relación de aspecto
incluidos en estos métodos varían. NIOSH recomienda el uso de la relación de aspecto 3: 1 en el conteo de fibras.

Se enfatiza que la hibridación de diferentes conjuntos de reglas de conteo no está permitida. Informe específicamente qué conjunto
de reglas de conteo se utilizan con los resultados analíticos.

Reglas de conteo "B"

1. Solo cuenta termina de fibras Cada fibra debe tener más de 5 µm y menos de 3 µm de diámetro.
2. Cuente solo los extremos de las fibras con una relación de longitud a ancho igual o mayor que 5: 1.
3. Cuente cada extremo de fibra que cae dentro del área de la retícula como un extremo, siempre que la fibra cumpla con las reglas 1 y 2 anteriores. Agregue
extremos divididos al recuento según corresponda si el segmento de fibra dividida también cumple con los criterios de las reglas 1 y 2 anteriores.

4. Cuente los extremos visiblemente libres que cumplen con las reglas 1 y 2 anteriores cuando la fibra parece estar unida a otra partícula,
independientemente del tamaño de la otra partícula. Cuente el extremo de una fibra oscurecida por otra partícula si la partícula que cubre el
extremo de la fibra tiene menos de 3 µm de diámetro.

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5. Cuente los extremos libres de las fibras que emanan de grandes grupos y haces hasta un máximo de 10 extremos (5 fibras), siempre que cada
segmento cumpla con las reglas 1 y 2 anteriores.
6. Cuente suficientes campos de retícula para producir 200 extremos. Cuente un mínimo de 20 campos de retícula. Pare en 100 campos de retícula,
independientemente del conteo.
7. Divida el conteo final total entre 2 para obtener el conteo de fibra.

APÉNDICE D. LÍMITES EQUIVALENTES DE DETECCIÓN Y CUANTITACIÓN

Densidad de fibra en el filtro * Concentración de fibra en el aire, f / cc

Fibras por 100 campos Fibras / mm² Muestra de aire de 400 L Muestra de aire de 1000 L

200 255 0.25 0,10

100 127 0,125 0,05

LOQ 80.0 102 0,10 0,04

50 64 0,0625 0,025

25 32 0,03 0,0125

20 25 0,025 0,010

10 12,7 0,0125 0.005

8 10,2 0,010 0.004

LOD 5.5 77 0.00675 0.0027

*A
* sume un área efectiva de recolección de filtro de 385 mm², y un área de campo = 0.00785 mm², para filtros relativamente “limpios” (poca partícula

aparte de las fibras).

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