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Dr Awa Ba Diallo
Laboratoire de Bactériologie-Virologie
CHU Aristide Le Dantec
Objectifs
• Connaître les caractères communs des espèces de
la famille des Vibrionaceae
• Connaitre les caractères bactériologiques de Vibrio
cholerae
• Décrire la physiopathologie du choléra
• Décrire les étapes du diagnostic bactériologique
• Connaitre les antibiotiques à tester sur une souche
de Vibrio cholerae
• Connaitre les modalités de la prévention du choléra
au sein d’une communauté
Plan
• Définition et Classification
– Famille des Vibrionaceae
– Vibrions d’intêret médical
• Vibrion cholerae
• Définition-historique
• Caractéres bactériologiques
• Epidémiologie
• Physiopathologie
• Pouvoir pathogène
• Diagnostic biologique
• Traitement
• Autres Vibrions
Vibrionaceae
• 3 grands groupes
– Vibrio responsable du Choléra: V. cholerae O1
– Vibrio non cholérique ( VNC)= Vibrion non
agglutinable (NAG) ou Vibrio non O1
– Vibrio halophiles
Vibrionaceae
Famille Vibrionaceae
définie par 7 caractères Communs:
– Bacilles à Gram négatif droits ou incurvés
– Mobiles grâce à un flagelle polaire ou Mixte
– Poussant en aérobiose et anaérobiose
– Non exigeants
– Fermentant les glucides
– NAR (+)
– Possédant une cytochrome-oxydase
Les Vibrio d’intérêt médical
• V. cholerae
- espèce de Vibrio comportant ~ 200
sérogroupes O mais seuls sérogroupes O1
et O139 ----> formes graves de choléra
et des pandémies
- V. parahaemolyticus, V. vulnificus
V. mimicus, V. fluvialis, V. alginolyticus
Intérêt
• Clinique
- Fuite d’eau+ sels = choléra
- Déshydratation sévère
• Epidémiologique
- Maladie hydrique
- Maladie des “mains sales”
- Problème de santé publique
• Pas de vaccin pour arreter une épidémie
Classification
• Famille: Vibrionaceae
• Genre: Vibrio
• Espèces : Nombreuses
• Sérogroupes: ≥ 200
• Sérotypes: 3
• Biotypes:2
• Principales espèces
- Vibrio cholerae
- Vibrio parahaemolyticus
- Vibrio alginolyticus
• Sérogroupes
oSupport sérogroupage: AgO
- O1 à O200
oSouches responsables du choléra
- O1 : Principale
- O139 : Secondaire
• Sérotypes : au nombre de 3
Ogawa- Inaba- Hikojima
Support sérotypage: protéines paroi
• Biotypes: Au nombre de 2
V. cholerae el tor
V. cholerae cholera ou (classique)
Support biotypage: nutrition
o à caractère épidémique
o d’origine bactérienne
o extrêmement contagieuse
o strictement adaptée à l’homme
Une maladie bien connue…
Coloration de Gram
Bacille à Gram (-) isolé, parfois groupé
par 2 ou plus,
Forme: incurvé en virgule
Asporulé
Acapsulé
2. Morphologie
Bacille à Gram négatif incurvé (en virgule)
ciliature polaire
2. Caractères culturaux
• Bouillon d’enrichissement
Eau peptonée alcaline: EPA
Eau peptonée salée alcaline: EPSA
3. Caractères biochimiques
Caractères de famille
• Oxydase (+)
• Fermente le glucose
• NAR (+)
Caractères de genre
oGélatinase (+)
o Mannitol (+)
o Lactose (-)
o Gaz (-)
o Uréase (-)
o SH2 (-)
oLDC (+) ; ODC (+); ADH (-)
Caractères orientant vers Vibrio cholerae
o ONPG (+)
o Saccharose (+)
o Indole(+)
o Citrate Simmons (+)
o VP variable+/-
o Croissance sur milieu non salé
Caractères biochimiques
– Différenciation en biovars
– 2 biotypes de V. cholerae : cholerae et El Tor
Biotypes
• Entérotoxine
– Diarrhée
– Vomissements
Support toxine = plasmide
Epidémiologie
1. Habitat du vibrion
Réservoirs de germes: 2 niches écologiques
– Homme malade, convalescent, porteur « sain »
– Patients atteints de formes frustes ou inapparentes =
réservoir important transmission de la maladie.
– Germe retrouvé dans les selles (106-108 bactéries/ml)
et vomissements
Autres réservoirs = environnement souillé
• Eaux: égouts, eau douce ou salée, puits, rivière
fleuve, mollusques crustacées…..)
• Aliments: fruits et légumes
Epidémiologie
2. Modes de transmission
– Contamination par voie orale à partir du milieu
extérieur souillé par fèces des malades
– Vecteurs
Mains: maladies des « mains sales », Péril fécal
Eau: maladie « hydrique »
Aliments: fruits et légumes
3. Répartition géographique
Pays ou régions dans le pays ayant eu des épidémies de choléra entre 1991-2004
Pays avec des cas importés durant la même période
L’épidémie de choléra au Sénégal
Dernière : 1996 21 601 cas et 272 décès
Début épidémie Oct 2004 50,2% cas à Diourbel
Source IP Dakar
Epidémiologie
Berceau du choléra= Inde
Type endémique en Asie du Sud-Est et région du
delta du Gange
Réservoir potentiel: Fleuve de Gange
Afrique:
- Type épidémique : régions sèches, mortalité
élevée
- Type endémique: régions humides
Conditions pour qu’une épidémie se
développe dans une région
- Présence de vibrions cholériques, apportés par
l’homme, ou présents dans l’environnement
aquatique
mesures exceptionnelles au
niveau national ou international
tout cas diagnostiqué
mesures préventives immédiates et
une enquête épidémiologique
Physiopathologie
Lit de cholérique
Pouvoir Pathogène
• Incubation courte : 2 – 5 jours
Cyanose du
visage
Yeux excavés
Diagnostic biologique
• diagnostic d'urgence bactériologique =
coproculture.
Miieux de transport
Gélose Cary Blair
Diagnostic biologique
Premier cas
– Examen microscopique direct des selles (mobilité à
l'état frais et Gram) résultat présomptif.
– Mise en culture : milieux d'enrichissement et/ou des
milieux sélectifs:
• EPHA (eau peptonée hypersalée alcaline),
• GN (gélose nutritive),
• TCBS (Thiosulfate-Citrate-Bile-Saccharose).
– Colonies suspectes : anti-sérum polyvalent anti-O : 1
– Si agglutination : identification présomptive de Vibrio
cholerae sérogroupe O : 1.
Sur Gélose Nutritive Alcaline
Colonie de type S
– Rondes, lisses, régulières
– Taille moyenne
– Légèrement opaque
Sur TCBS
Colonie de type S,
couleur jaune due à a fermentation
du saccharose
Sérogroupage
Caractères biochimiques de V. cholerae
Diagnostic biologique
• Autres cas :
– Examen microscopique direct des selles (mobilité à l'état
frais et Gram) résultat présomptif.
– Mise en culture : milieux d'enrichissement et/ou des
milieux sélectifs.
– Colonies suspectes : sérum polyvalent anti-O : 1
– Si agglutination, identification présomptive de Vibrio
cholerae sérogroupe O : 1.
– Sérums monospécifiques sérovar Inaba, Ogawa ou
Hikojima.
Diagnostic indirect
–Sans intérêt à la période aiguë mais
enquête épidémiologique
(diagnostic rétrospectif)
Mesures de prophylaxie
• Mesures d'hygiène: individuelle et collective pour
contrôler dissémination
• Vaccination:
– Vaccin classique: (bactérie tuée) protection ≈ 50-
60% sujets vaccinés pour 6 mois. N'empêche pas le
portage.
– Nouveau vaccin administrable par voie orale :
protection à 95% pour biotype classique et 65%
pour Eltor
• Vaccin oral inactivé: bactérie tuée + sous unité B (Ac-anti
O1 et Ac-anti O139)
• Vaccin vivant oral: CVD 103 HgR avec gène de la SUA
• Vaccin atténué de V. cholerae O139
• Chimioprophylaxie: antiseptiques intestinaux plutôt
que antibiotiques
Eléments de thérapeutiques
• Réhydratation et Correction acidose : essentiel du
traitement.
• Antibiothérapie
– élimination rapide des vibrions
– Tétracycline (doxycycline), ou sulfamide pendant 2
ou 3 jours.
– Guérison confirmée par négativation des
coprocultures.
Autres vibrions
Vibrions non agglutinables (NAG) ou Vibrions non
cholériques (VNC).
– Syndromes cholériformes sans gravité.