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i
ii
AGRADECIMIENTOS
AL INSTITUTO NACIONAL DE INVESTIGACIONES FORESTALES, AGRÍCOLAS Y

PECUARIAS (INIFAP), CAMPO EXPERIMENTAL ZACATEPEC, MORELOS
POR EL FINANCIAMIENTO DE LA PRESENTE TESIS DE INVESTIGACIÓN, LA CUAL

FORMA PARTE DEL
PROYECTO:
“IDENTIFICACIÓN DE RESISTENCIA A POKKA BOENG (Fusarium spp.) Y CARBÓN

(Ustilago scitaminea) EN VARIEDADES DE CAÑA DE AZÚCAR”
FONDOS FISCALES 2012, NÚMERO 15422020477:
iii
AGRADECIMIENTOS
A mi alma mater la Universidad Autónoma Chapingo y al
Departamento de Parasitología Agrícola por brindarme la
oportunidad de cursar mis estudios de preparatoria y licenciatura bajo
su modelo educativo.
Al jurado examinador del presente trabajo por su tiempo y atención:
Dra. Marianguadalupe Hernández Arenas, Dr. Santos Gerardo Leyva
Mir, Dr. Cristian Nava Díaz, Dr. Guillermo Mondragón Pedrero y
especialmente al M.C. Juan Manuel Tovar Pedraza por todo su apoyo
y consejos.
A mis amigas Angelina Olvera Julio y Veronica Ruiz Machuca, por
su invaluable amistad y por el tiempo y experiencias compartidos.
A mi pareja Hernán Cortés Gómez por todos estos años de apoyo.
iv
DEDICATORIA
Para la familia Rosas Guevara. A mi padre Santiago Rosas Vázquez; en
especial a mi madre Clara Guevara Martínez por su apoyo
incondicional; y a mis hermanos Santiago, Alejandro y Guadalupe
por su apoyo para que yo pudiera concluir este proyecto de vida.
Para mi pareja Hernán Cortés Gómez por su tiempo, apoyo y
comprensión que me ha brindado siempre.
v
ÍNDICE GENERAL
ÍNDICE GENERAL .................................................................................................. 1

ÍNDICE DE CUADROS ........................................................................................... 2
ÍNDICE DE FIGURAS ............................................................................................. 2
RESUMEN .............................................................................................................. 3
ABSTRACT............................................................................................................. 4
I. INTRODUCCIÓN .............................................................................................. 5
II. REVISIÓN DE LITERATURA ........................................................................... 6
2.1. IMPORTANCIA DE LA CAÑA DE AZÚCAR EN EL MUNDO ........................................ 6
2.2. IMPORTANCIA DE LA CAÑA DE AZÚCAR EN MÉXICO ........................................... 7
2.3. ENFERMEDADES FUNGOSAS EN CAÑA DE AZÚCAR ............................................ 9
2.3.1. Carbón (Sporisorium scitamineum Sydow) ............................................. 9
2.3.2. Roya común (Puccinia melanocephala Syd. & P. Syd)......................... 11
2.3.3. Roya naranja [Puccinia kuehnii (W. Krüger) E.J. Butler] ....................... 12
2.3.4. Pudrición roja de la nervadura (Colletotrichum falcatum Went) ............ 13
2.3.5. Pokkah-boeng o cogollo retorcido ..................................................... 14
2.3.5.1. Historia ........................................................................................... 15
2.3.5.2. Síntomas ........................................................................................ 15
2.3.5.3. Agente causal ................................................................................. 17
2.3.5.3.1. Fusarium verticillioides ............................................................. 17
2.3.5.3.2. Fusarium subglutinans ............................................................. 17
2.3.6. Manejo de Pokkah-boeng .................................................................. 18
III. MATERIALES Y MÉTODOS .......................................................................... 18
3.1. COLECTA DE MUESTRAS ................................................................................. 18
3.2. AISLAMIENTO DE HONGOS ............................................................................... 19
3.3. ALMACENAMIENTO DE AISLADOS ..................................................................... 20
3.4. CARACTERIZACIÓN CULTURAL ......................................................................... 20
3.5. CARACTERIZACIÓN MORFOLÓGICA ................................................................... 21
3.6. CARACTERIZACIÓN MOLECULAR ...................................................................... 22
IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN.................................................................... 23
4.1. CARACTERIZACIÓN CULTURAL Y MORFOLÓGICA ............................................. 23
4.2. CARACTERIZACIÓN MOLECULAR ................................................................... 26
4.3. ESPECIES DE FUSARIUM SPP. PRESENTES EN LAS REGIONES PRODUCTORAS DE
CAÑA DE AZÚCAR EN MÉXICO ................................................................................. 27
V. CONCLUSIONES........................................................................................ 31
LITERATURA CITADA ......................................................................................... 33
1
ÍNDICE DE CUADROS
Página
Cuadro 1. Superficie sembrada y rendimiento de caña de azúcar en los principales

estados productores en México durante el 2012…………………........................5
Cuadro2. Relación de colectas de Fusarium spp. en los estados de Veracruz,

Morelos, Oaxaca y Puebla (2012). ……………………………………………………..5
Cuadro 3. Incidencia de especies de Fusarium spp. en Veracruz, Morelos, Oaxaca

y Puebla…………………………………………………………………………………..28
ÍNDICE DE FIGURAS
Figura 1. Síntomas de Pokkah-boeng………………………………………...….......14
Figura 2. Fusarium proliferatum………………………….….…………………......….22
Figura 3. Fusarium verticillioides………….…………..………………………….……23
Figura 4. Dendrograma generado utilizando el análisis UPGMA……………........24
2
Caracterización cultural, morfológica y molecular de aislados de Fusarium
spp. asociados a caña de azúcar en México.
RESUMEN
V.R. Guevara ; M.G. Hernández-Arenas2; S.G. Leyva Mir3
1
Con el objetivo de identificar las especies y genotipos de Fusarium spp. presentes
en zonas cañeras de México, se analizaron un total de 70 aislados de Fusarium
spp. procedentes de Veracruz, Morelos, Oaxaca y Puebla. Trozos de tejido
enfermo fueron lavados y desinfectados con NaClO al 3% por 3 min, sembrados
en PDA e incubados a 25±1°C. La caracterización morfológica y cultural de los
monospóricos se realizó en PDA y CLA. Se realizó la extracción de ADN y
amplificación de los ITS1 e ITS4 por PCR; el producto amplificado se purifico y
secuencio en Macrogen (Corea). Las secuencias fueron comparadas con la base
de datos del National Center for Biotechnology Information (NCBI), después se
alinearon con ClustalW del programa Mega5. Para el dendrograma se utilizaron
secuencias de F. commune y la matriz de datos alineada se agrupó utilizando el
análisis estadístico UPGMA. Las especies identificadas a nivel morfológico y
molecular fueron Fusarium proliferatum (Teleomorfo: Gibberella intermedia) y
Fusarium verticillioides (Teleomorfo: Gibberella moniliformis) siendo F. proliferatum
la especie más frecuentemente aislada (95.7%). Existe una amplia variabilidad en
síntomas y comportamiento morfológico de las colonias provenientes de Morelos,
Oaxaca, Puebla y Veracruz.
Palabras clave: Pokkah-boeng, caña de azúcar, Fusarium proliferatum, Fusarium
verticillioides, México.
3
Cultural characterization, morphological and molecular isolates of Fusarium
spp. associated with sugarcane in Mexico.
ABSTRACT
V.R. Guevara ; M.G. Hernández-Arenas2; S.G. Leyva Mir3
1
With the objective of identifying the species and genotypes of Fusarium spp.
present in sugarcane areas of Mexico, analyzed a total of 70 isolates of Fusarium
spp. from Veracruz, Morelos, Oaxaca and Puebla. Pieces of diseased tissue
washed and disinfected with 3% NaClO for 3 min, were planted on PDA and
incubated at 25 ± 1 ° C. The morphological and cultural monosporic held in PDA
and CLA. Extraction was performed and DNA amplification by PCR ITS1 and ITS4
primers, the amplified product was purified and sequenced in Macrogen (Korea).
The sequences were compared with the database of the National Center for
Biotechnology Information (NCBI), after aligned with the ClustalW of the program
Mega5. For dendrogram used sequences of F. commune and aligned data matrix
was pooled using UPGMA statistical analysis. The species identified morphological
and molecular level were Fusarium proliferatum (Teleomorph: Gibberella
intermedia) and Fusarium verticillioides (Teleomorph: Gibberella moniliformis)
being F. proliferatum the most frequently isolated species (95.7%). There is a wide
variability in symptoms and morphological behavior of the colonies from Morelos,
Oaxaca, Puebla and Veracruz.
Key words: Pokkah-boeng, sugarcane, Fusarium proliferatum, Fusarium

verticillioides, Mexico.
4
I. INTRODUCCIÓN
En México, la industria azucarera es una de las más importantes, debido a su
relevancia económica y social en el campo. Actualmente, genera más de dos
millones de empleos, tanto en forma directa como indirecta y se desarrolla en 15
entidades federativas y 227 municipios con un valor de la producción de 30 mil
millones de pesos (SAGARPA, 2013).
Hasta el año 2008, la producción de caña de azúcar presentó una tendencia
ascendente, que se interrumpió en la zafra 2008/2009 debido, entre otros, a los
siguientes factores:
 Clima: principalmente menor cantidad de lluvia en la mayor parte del país,
en la época de maduración de la caña.
 Precios: el uso de fertilizantes se encareció sobre todo en los meses de
junio y julio de 2008.
 Envejecimiento del campo cañero: debido a que el rejuvenecimiento del
campo se ubicó en promedio en 12‐13%, siendo el óptimo un 20% anual.
En caña de azúcar, como en otros cultivos, las enfermedades representan
factores limitantes a la producción. Las enfermedades deben ser oportuna y
eficientemente identificadas y diagnosticadas para su eficiente control (Chavarría,
2006).
Entre las enfermedades foliares, el Pokkah-boeng o cogollo retorcido causado por
el hongo Fusarium verticillIioides y/o Fusarium subglutinans es una de las más
5
frecuentes enfermedades y está prácticamente en todas las áreas productoras de
caña de azúcar del mundo (Raid, 2012). Puede causar graves pérdidas en
variedades comerciales susceptibles con un rango de incidencia que oscila del 1-
90% (Vishwakarma et al. 2013).
Las variedades de caña de azúcar utilizadas en México no han mostrado
tolerancia a ésta enfermedad que adquiere cada vez más importancia en nuestro
país debido a los daños ocasionados.
Es por ello que los objetivos del presente trabajo fueron los siguientes:
1) Aislar e identificar las especies de Fusarium spp. presentes en las principales
zonas productoras de caña de azúcar de Veracruz, Morelos, Oaxaca y Puebla.
2) Caracterizar cultural, morfológica y molecularmente los aislados de Fusarium
spp. presentes.
3) Analizar la relación filogenética existente entre especies de aislados de
Fusarium spp. identificados.
II. REVISIÓN DE LITERATURA
2.1. Importancia de la caña de azúcar en el mundo
La caña de azúcar es un cultivo cuyo centro de origen es Nueva Guinea, desde
donde se esparció a Asia, a las islas del Pacífico y posteriormente al resto del
mundo. A fines del siglo XV fue traída a América por Cristóbal Colón (Rosas et al.
2010).
6
La caña de azúcar que trajo Colón en 1493 a La Hispañola (ahora República
Dominicana), y que después Cortés introdujo a Santiago Tuxtla, Veracruz en
1523-24, fue conocida durante varios siglos como “caña criolla”, la misma que
Linneo clasificó por primera vez con el nombre de Saccharum officinarum en 1753
(Flores, 2001). Su expansión por el territorio mexicano puede explicarse no solo
por haber encontrado condiciones favorables de clima, suelo y ambiente, sino
también por un incremento sostenido en la demanda por parte de los colonos, que
alentó sustancialmente el crecimiento de la producción (Rodríguez, 1994).
Actualmente los principales países productores de esta gramínea son Brasil con
una producción de 670,757, 958 millones de ton de caña de azúcar; en segundo
lugar está la India con 347, 870 millones de ton; le sigue China con 124, 170, 500
millones de ton; Tailandia con 96,500 millones de ton; Pakistán con 58,038
millones de ton y México ocupa el sexto lugar con 50, 946, 483 millones de ton
(FAOSTAT, 2013).
2.2. Importancia de la caña de azúcar en México
En México la industria azucarera es históricamente una de las más importantes,
debido a su relevancia económica y social en el campo; genera más de dos
millones de empleos, tanto en forma directa como indirecta; se desarrolla en 15
entidades federativas (Cuadro 1) y 227 municipios con un valor de la producción
de 30 mil millones de pesos (SAGARPA, 2013).
Cuadro 1. Superficie sembrada y rendimiento de caña de azúcar en los principales
estados productores en México durante el 2012.
7
Estado Superficie sembrada Total nacional (%) Rendimiento
(miles de Ha) (ton ha -1)
Veracruz 279,944 34.98 64.3
Jalisco 79,591 9.94 97.9
San Luis Potosí 72,568 9.06 66.5
Oaxaca 70,593 8.82 69.3
Tamaulipas 61,825 7.72 57.1
Tabasco 36,960 4.61 33.0
Nayarit 34,739 4.34 78.4
Chiapas 30,962 3.86 90.5
Quintana Roo 30,141 3.76 59.8
Sinaloa 24,706 3.08 81.0
Puebla 18,474 2.30 123.7
Morelos 16,974 2.12 117.7
Colima 16,431 2.05 90.0
Michoacán 13,971 1.74 79.9
Campeche 12,337 0.015 No hay dato*
TOTAL 53,347.7 73.98
*Situación al 31 de diciembre de 2012.
Fuente: SIAP (2013)
Veracruz a pesar de ser el principal productor de caña de azúcar obtiene
rendimientos de 64.3 ton ha -1 valor que está por debajo del rendimiento promedio
nacional (SIAP, 2013).
La producción de caña de azúcar mostró una tendencia ascendente que se
interrumpió en la zafra 2008/2009, debido a factores climáticos, encarecimiento de
insumos agrícolas aunado al envejecimiento del campo cañero. En los últimos
años, nuevamente se observa una tendencia ascendente. En la zafra nacional
2011/2012 se industrializó un total de 703, 761 ha con rendimiento promedio de

8
65.7 ton ha-1. Se obtuvo un total de 46, 231, 229 ton de caña que a su vez
produjeron 5, 048, 469 ton de azúcar (SAGARPA, 2013).
Entre las acciones que propone la SAGARPA (2013) para incrementar la
producción nacional de caña de azúcar se menciona, entre otras, la investigación
y generación de nuevas variedades así como el fomento a la sanidad.
2.3. Enfermedades fungosas en caña de azúcar
El cultivo de la caña de azúcar, a nivel mundial, es afectado por diversas
enfermedades causadas por hongos, entre las que destacan: la roya común
(Puccinia melanocephala Sydow), la roya naranja [Puccinia kuehnii (W. Krüger)
E.J. Butler], la pudrición roja de la nervadura (Colletotrichum falcatum Went), el
carbón (Sporisorium scitamineum Sydow) y el Pokkah-boeng (Fusarium
verticillioides, Sheldon) (Ramírez y Nass, 2005).
2.3.1. Carbón (Sporisorium scitamineum Sydow)
El carbón de la caña de azúcar se observó por primera vez en Sudáfrica en 1877.
Esta enfermedad es causada por el hongo Sporisorium scitamineum (Syd.) (sin.
Ustilago scitaminea Sydow & P. Sydow) y ha mostrado suma importancia en casi
todos los países productores de caña de azúcar. Excepto en Australia donde la
enfermedad solo está presente en una zona de producción menor en el oeste de
éste país (Comstock y Lentini, 2005).
El síntoma más reconocible de una planta infectada por carbón es la aparición de
un "látigo de carbón” que es una curva de crecimiento, del grosor de un lápiz,
9
color gris a negro que se desprende de la parte superior de la planta de caña
afectada. Estos "látigos" surgen de la yema terminal o de brotes laterales en los
tallos infectados. Pueden variar en longitud desde unos pocos centímetros a varios
metros de largo. Se compone en parte del tejido de la planta huésped y en parte
del tejido del hongo y comienza a emerger a partir de caña infectada de 2-4 meses
de edad, el crecimiento máximo se produce en el sexto o séptimo mes. Otros
síntomas del carbón pueden ser evidentes antes de ver el látigo característico. Por
ejemplo, las nervaduras de las hojas son erectas antes de que surja el látigo, las
plantas afectadas pueden generar gran cantidad de brotes más delgados y erectos
con pequeñas hojas estrechas. Las plantas que crecen en condiciones de estrés
son más propensas a desarrollar el carbón. El clima seco y caluroso de primavera
favorece la enfermedad (Comstock y Lentini, 2005).
El uso de variedades resistentes es la mejor forma de control del carbón de la
caña. También se debe cuidar el uso de semilla libre de la enfermedad, la cual se
consigue sometiendo la semilla a tratamiento hidrotérmico. Sin embargo, puede
resultar no practico a gran escala y su eficacia depende de la variedad (Comstock
y Lentini, 2005).
En el programa de mejoramiento genético de caña de azúcar en México, los
genotipos susceptibles son eliminados, ya que no existe un método de control
eficiente una vez que se ha presentado la enfermedad en las plantaciones
comerciales.
10
2.3.2. Roya común (Puccinia melanocephala Syd. & P. Syd)
El primer brote grave de la roya común de la caña de azúcar causada por Puccinia
melanocephala Syd. & P. Syd. se reportó en la India en 1907. Se informó por
primera vez en Sudáfrica en 1941 en la variedad Co301 y ahora está presente en
casi todas las áreas cañeras del mundo (Ramouthar, 2009). En Sudáfrica ahora
se describe como una enfermedad importante de la caña de azúcar, causando
pérdidas de rendimiento de hasta 26% en las variedades susceptibles
(Ramouthar, 2009).
Las condiciones optimas para la germinación y el desarrollo de las urediniosporas
del hongo son: humedad relativa mayor al 98 %, entre 20 y 25 °C de temperatura
y nueve horas de humedad de roció (Ramouthar, 2009).
Los primeros síntomas de la infección por roya común son pequeñas y alargadas
manchas amarillas visibles en ambos lados de las hojas. Las manchas se vuelven
de color marrón rojizo en las variedades susceptibles en un periodo de 3-4 días,
se alargan y al plazo de 10-14 días se convierten en pústulas maduras. Los
síntomas característicos son pústulas café rojizas presentes en la superficie
abaxial de las hojas, las cuales miden de 2-20 mm de largo por 1-3 mm de ancho
distribuidas de forma paralela a los haces vasculares. En hojas severamente
infectadas las pústulas coalescen y llegan a formar áreas necróticas. (Raid y
Sullivan, 2000).
Actualmente, el método más fiable y económico para el control de la roya común
es el uso de variedades resistentes (Ramouthar, 2009).
11
2.3.3. Roya naranja [Puccinia kuehnii (W. Krüger) E.J. Butler]
La roya de la caña de azúcar (Saccharum spp. híbrida), causada por Puccinia
kuehnii [(W. Krüger) E.J. Butler], es una enfermedad relativamente nueva en el
hemisferio occidental que reduce considerablemente los rendimientos en los
genotipos de caña de azúcar susceptibles (Zhao et al. 2011).
Los primeros síntomas son manchas amarillentas pequeñas y alargadas en el haz
y envés de la lámina foliar. A medida que crecen se vuelven de color marrón a
pardo anaranjado o rojo-marrón, y desarrollan un tenue, pero definido, halo
clorótico. Miden entre 2 y 10 mm de longitud, pero en ocasiones alcanzar los 30
mm. Rara vez son de más de 1-3 mm de ancho. Los síntomas se observan hacia
la parte apical de la hoja. Las pústulas, que producen esporas, por lo general se
desarrollan en el envés de la hoja. Ciertos cultivares, sin embargo, pueden tener
algunas pústulas en la superficie superior (Raid y Comstock, 2006).
Las urediniosporas de P. kuehnii tienen engrosamiento apical, son más pálidas
en color y generalmente con pocas paráfisis y presenta escasas teliosporas. Las
urediniosporas de P. melanocephala son más pequeñas, de coloración marrón,
poros más prominentes sin engrosamiento apical, abundantes paráfisis y
teliosporas. Las características de la superficie de la urediniosporas también son
diferentes, las de P. melanocephala presentan espinas distanciadas entre si de
1,0-1,5 de forma regular, mientras que las de P. kuehnii son más espaciadas y
distribuidas de manera irregular (Magarey, 2000).
12
Aunque una serie de productos químicos están registrados para el control de
enfermedades foliares en la caña de azúcar no es rentable su uso. El mejor
método para el control de la roya de la caña es cultivar variedades resistentes. Sin
embargo, la resistencia no ha sido estable o duradera en ciertas variedades,
presumiblemente a causa de las variantes de óxido (Raid y Comstock, 2006).
2.3.4. Pudrición roja de la nervadura (Colletotrichum falcatum Went)
Colletotrichum falcatum Went, puede atacar cualquier parte de la planta de caña
de azúcar, ya sea tallo, hojas, brotes y raíces. Completa su ciclo de vida en la hoja
de la caña de azúcar y por lo general no representa una amenaza grave. La fase
más perjudicial de esta enfermedad se produce cuando el patógeno ataca el tallo
ya que dependiendo de la edad de éste, el momento de la infección y la
susceptibilidad del genotipo de caña, es que produce diferentes tipos de síntomas
(Duttamajumder, 2008).
Los síntomas típicos en el tallo son manchas blancas en contraste con áreas
necróticas (rojo oscuro). Tejidos internodales y nodales necróticos aparecen
cuando el cultivo está en la etapa final del ciclo productivo. En las primeras etapas
de la infección, es difícil reconocer la presencia de la enfermedad en el campo, ya
que la planta no muestra ningún síntoma. En una etapa posterior, coloración
oscura en la corteza del tallo a menudo se hace evidente cuando los tejidos
internos se han visto gravemente dañados y están totalmente podridos. Esto es
más pronunciado en el tallo de genotipos de color claro. Al final, los tallos o la
13
planta afectada mueren. En la plantación se puede observar en manchones o el
daño total (Duttamajumder, 2008).
Los esquejes usados como semilla pueden portar el patógeno que se va a
desarrollar dependiendo de las condiciones ambientales. Esto afecta a la
germinación y el establecimiento inicial del cultivo. El tipo de los síntomas varía
dependiendo de las condiciones meteorológicas imperantes (Duttamajumder,
2008).
El uso de variedades resistentes es el método más eficaz para la prevención y
control. Los factores que determinan la resistencia a la pudrición roja no se
entienden completamente. Hay dos tipos de la resistencia: (1) morfológica, lo que
puede prevenir o retardar el proceso de infección, y (2) fisiológica, en el que las
células vivas de la planta de suprimir o prevenir patógeno crecimiento. La
incidencia de la pudrición roja de la nervadura puede reducirse a través de las
buenas prácticas culturales, como la compensación de campos de exceso de
basura y drenaje eficiente (Raid, 2006).
2.3.5. Pokkah-boeng o cogollo retorcido
Entre las enfermedades foliares, el Pokkah-boeng o cogollo retorcido causado por
el hongo Fusarium verticilloides y/o Fusarium subglutinans está presente en la
mayoría, sino en todas, las áreas productoras de caña de azúcar del mundo (Raid,
2012) y puede causar graves pérdidas en variedades comerciales susceptibles
con un rango de incidencia del 1-90% (Vishwakarma et al. 2013).
14
2.3.5.1. Historia
El Pokkah-boeng fue descrito originalmente en Java, India y es un término
Javanese que significa malformación o distorsión del cogollo (Raid, 2012). Se
reportó por primera vez en Java por Walker en 1886 y más tarde por Edgerton en
1955 y por Martin y colaboradores en 1961(VSI, 2013).
El Pokkah-boeng se convirtió en una enfermedad importante de caña de azúcar en
Java con la propagación de la variedad comercial POJ 2878 y se investigó
extensamente en ese país por Bolle durante 1927-1937 (VSI, 2013).
2.3.5.2. Síntomas
Los primeros síntomas de la enfermedad son áreas cloróticas en la base de las
hojas jóvenes (Figura 1A), distorsión (arrugamiento y enrollamiento) (Figura 1C) y
acortamiento de las hojas afectadas (Figura 1B), y en casos severos, muerte del
tallo (Whittle y Irawan, 2000; Raid, 2012).
La base de las hojas afectadas es frecuentemente mas estrecha que la de las
hojas sanas (Figura 1A). En las hojas maduras, dentro de las partes cloróticas, se
desarrollan manchas y líneas irregulares rojizas. En las áreas rojizas a veces se
desarrollan orificios que no tienen arreglo definido. Este tejido rojizo puede formar
lesiones “escalera”, frecuentemente con cortes oscuros. Las nervaduras de las
hojas también pueden llegar a estar cloróticas y desarrollar áreas irregulares
necróticas de color rojizo (Whittle y Irawan, 2000; Raid, 2012).
15
En ocasiones la infección del cogollo desciende dentro del tallo con líneas café
rojizas y se pueden encontrar largas y severas depresiones en los entrenudos
mezcladas con lesiones que dan la apariencia de corte de cuchillo. Estas lesiones
a veces atraviesan la corteza causando curvatura y distorsión del tallo. En la
mayoría de etapas avanzadas del Pokkah-boeng el cogollo (punto de crecimiento)
de las plantas muere (referido como “pudrición de punta”) (Figura 1C). La
severidad de los síntomas varía de acuerdo a la susceptibilidad de la variedad y
a las condiciones ambientales que determinan el desarrollo del patógeno (Whittle y
Irawan, 2000; Raid, 2012).
Figura 1. Síntomas de Pokkah-boeng. A) área cloróticas en base de hojas jóvenes y base

estrecha; B) acortamiento de las hojas afectadas; y C) distorsión (arrugamiento y enrollamiento)
de hojas afectadas y “pudrición de punta”.
16
2.3.5.3. Agente causal
López et al. (1998) y Raid (2012) reportaron a Fusarium verticillioides (Nirenberg)
[sin. F. moniliforme (Shledon)] y a Fusarium subglutinans ( sin. F. moniliforme
var. subglutinans) en Cuba y Florida, EE. UU., respectivamente, como los
causantes de esta enfermedad y López y López (2000) reportaron a F.
verticillioides como la especie más frecuentemente aislada en Cuba.
2.3.5.3.1. Fusarium verticillioides
Fusarium verticillioides en un hongo ampliamente distribuido cuyo estado
teleomorfico corresponde a la especie Gibberella fujikuroi ( Leslie y Summerell,
2006). Es de gran importancia económica, pues entre sus hospedantes comunes
figuran maíz, arroz, caña de azúcar, esparrago y plátano, a los que ocasiona
ahogamiento, pudriciones y otras anormalidades. En maíz es bien conocida la
pudrición del tallo y mazorca, en caña de azúcar induce la pudrición del tallo o
Pokkah-boeng y en arroz la enfermedad de Bakanae o gigantismo, provocado por
la giberelina que en esta planta produce F. verticillioides (Romero, 1993) y en
espárrago produce la pudrición de la corona (Leslie y Summerell, 2006).
2.3.5.3.2. Fusarium subglutinans
Fusarium subglutinans cuyo estado teleomorfico es Gibberella fujikuroi es más
común en las zonas frías donde el maíz se cultiva y se asocia a la pudrición del
tallo y podredumbre de la mazorca de maíz y puede ser transmitido por semilla.
Este patógeno puede persistir en los residuos de maíz, ya sea en la superficie del
17
suelo o enterrados en un campo durante al menos 21 meses. Varias cepas
genéticamente distintas de F. subglutinans pueden ser recuperados a partir de una
sola planta de maíz (Leslie y Summerell, 2006).
2.3.6. Manejo de Pokkah-boeng
El desarrollo de variedades de caña de azúcar está relacionado con el hecho de
que la caña de azúcar es un monocultivo, que se mantiene sin rotación y sin
barbecho por muchos años lo que permite que las plagas y enfermedades se
adapten y por consiguiente, los daños a las plantaciones se acumulen. Así el
desarrollo de nuevas variedades permite aumentar la producción de sacarosa, y
enfrentar grandes desafíos como nuevas plagas y la pérdida de fertilidad de los
suelos (Rosas et al. 2010).
En el caso de Pokkah-boeng para el control químico se usa carbendazim al 0.1%
(1gramo por litro de agua); oxicloruro de cobre al 0.2% (2 gramos por litro de
agua); o mancozeb al 3% (3 gramos por litro de agua) para reducir la enfermedad
del Pokkah boeng (VSI, 2013). Sin embargo, la única medida de control eficiente
es el uso de variedades resistentes (Lyrene et al. 1977; Comstock y Lentini 2005;
Raid, 2012).
III. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1. Colecta de muestras
18
En el periodo de enero a diciembre de 2012, se realizaron una serie de colectas
de hojas de caña de azúcar con síntomas de Pokkah-boeng en parcelas
comerciales establecidas en los estados de Veracruz, Morelos, Oaxaca y Puebla.
Cada punto de muestreo se geo-referenció con ayuda de un GPS (Garmin®, Etrex
Legend Hcx). Las muestras, se colocaron en bolsas de polietileno debidamente
etiquetadas para su fácil identificación y se transportaron en una hielera al
Laboratorio de Sanidad Vegetal del Instituto Nacional de Investigaciones
Forestales Agrícolas y Pecuarias (INIFAP) Campo Experimental Zacatepec en
Zacatepec, Morelos.
3.2. Aislamiento de hongos
A partir de tejidos de caña de azúcar con síntomas típicos de Pokkah-boeng se
cortaron trozos de la zona de transición entre tejido sano y enfermo. Los trozos se
lavaron y desinfestaron por inmersión en una solución de hipoclorito de sodio
(NaClO) al 3% por tres minutos y se enjuagaron con agua destilada estéril por el
mismo periodo de tiempo, tres veces consecutivas; finalmente se colocaron sobre
papel absorbente estéril para retirar el exceso de humedad. Posteriormente, se
colocó cinco trozos de tejido medio de cultivo papa-dextrosa-agar (PDA) y se
incubaron a 25±1°C.
Tres días después, los crecimientos de hongos se purificaron por la técnica de
punta de hifa en una nueva caja Petri con PDA, las cuales se incubaron a 25±1°C
hasta que se observó la presencia de macroconidios (10-15 días después).
19
Para la obtención de cultivos monospóricos se colocaron 10 mL de agua destilada
estéril en las cajas Petri con el hongo completamente desarrollado; se agitaron
ligeramente para facilitar el desprendimiento de los conidios y el líquido se extrajo
nuevamente con una pipeta Pasteur para depositarla en un tubo de ensaye de 100
mL. A partir de esta solución madre, se realizaron diluciones de 1:10 hasta obtener
una concentración de 1 x 103 conidios mL-1 contabilizando con una cámara de
Neubauer. Posteriormente, se depositó una gota de la última dilución en medio
PDA, distribuyéndola homogéneamente en la superficie con ayuda de una varilla
de vidrio, y se incubó a 25±1°C. A los tres días se seleccionó un conidio
individual germinado de cada aislado y se transfirió para su incremento a una caja
Petri con medio PDA manteniéndola en incubación.
3.3. Almacenamiento de aislados
Se obtuvieron 70 aislados monospóricos que fueron conservados al extraer los
conidios de los monospóricos con 10 ml de agua destilada estéril y depositarlos
en un tubo para centrifuga (EPPENDORF®, EE.UU.) de 5 mL y se almacenaron a
-20°C.
3.4. Caracterización cultural
La descripción cultural de los 70 aislados se realizó a partir de los cultivos
monospóricos de cada aislado en medio PDA, ya que este es el medio reportado
como el más adecuado para observar estas características según López y López,
(2004) y Leslie y Summerell (2006). Se incubaron a temperatura ambiente (26
°C±1 °C) por 30 días con alternancia de 12 horas luz/oscuridad natural. Se
20
evaluaron características de la colonia como son: crecimiento radial promedio por
día (cm /día) y pigmentación.
3.5. Caracterización morfológica
Para la observación y análisis de las características macroscópicas de Fusarium
spp., se empleó el medio CLA (Agar Hoja de Clavel) de acuerdo a la metodología
de López y López (2004) y Leslie y Summerell ( 2006) .
Para preparar el medio de cultivo CLA, se cortaron trozos de 5 mm 2 de hojas de
clavel, las cuales se empaquetaron en aluminio y se secaron en estufa a 70 °C±
1°C por 3 horas con 30 minutos. Una vez secas se enviaron al Instituto Nacional
de Investigaciones Nucleares (ININ) para esterilizar con irradiación gama (2.5
megarads).
Este medio se preparó de la siguiente forma: agua agar al 2% (20 gramos de agar
en 1000 mL de agua destilada estéril) y se colocaron de 10 a 12 piezas de hojas
de clavel estériles por caja Petri. Posteriormente, cada aislado monosporico, se
transfirió a una caja Petri con medio de cultivo CLA que se incubaron a
temperatura ambiente (26±1° C) por 20 días. Al vigésimo día se realizaron las
preparaciones para observar las variantes morfológicas correspondientes.
Preparaciones semipermanentes con lactofenol se prepararon para la
caracterización de conidios. En un microscopio compuesto (Nikon SMZ800®,
EE.UU) con cámara digital instalada y usando el objetivo de 40X, se tomaron
21
fotografías para realizar la caracterización cualitativa (forma) y cuantitativa (largo
por ancho) de 25 macroconidios y 25 microconidios de cada aislado.
3.6. Caracterización molecular
La extracción del DNA, se realizó a partir de micelio de colonias cultivadas en
medio PDA y con el uso del DNeasy Plant Mini Kit de QIAGEN ® de acuerdo al
protocolo sugerido por el fabricante. Mientras que, la amplificación de la región ITS
se realizó con el uso de los iniciadores ITS1 (secuencia 5”
TTCGTAGGTGAACCTGCG G3”) e ITS4 (secuencia 5”
GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG3”) mediante la reacción en cadena de la
polimerasa (PCR) utilizando un termociclador My Cycler termal cycler (BiO RAD®).
Múltiples reacciones se llevaron a cabo en un volumen final de 25 µl de mix de
reactivos PROMEGA®. Cada tubo contenía 5µl de buffer 1X, 1.5µl de MgCll de
MgCl2, 0.5µl de dNTP¨”S, 2 µl de ITS1, 2µl de ITS4, 0.2 µl de Taq polimerasa
(1U/µl), 11.8 µl de H2O y 2µl de ADN.
Las condiciones de amplificación consistieron en una desnaturalización de 95°C/5
min, seguida de 35 ciclos de 95°C/45 s, 57°C/45 s y 72° C/60 s, y una extensión
final de 72°C/5 min. Los productos de PCR se separaron por electroforesis en gel
de agarosa (2%) y se visualizó por tinción con bromuro de etidio.
El producto amplificado se purificó y secuenció en Macrogen (Corea). Las
secuencias se compararon con la base de datos del Centro Nacional de
Información sobre Biotecnología (National Center for Biotechnology Information)
NCBI. El análisis de las secuencias se llevo a cabo al alinearlas con ClustalW.
22
Para el dendrograma se utilizaron secuencias de F. commune y la matriz de datos
alineada se agrupó utilizando el análisis estadístico UPGMA en Mega5.
IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1. Caracterización cultural y morfológica
De los 70 aislados analizados en este estudio, 67 (95.7 %) presentaron colonias
con abundante micelio aéreo de blanco a purpura (Figuras 2A-D) y con
pigmentación variable desde blanco hasta rojo oscuro (Figuras 2E-H),
características que coincidieron con lo reportado por Leslie y Summerell, (2006)
para F. proliferatum en medio de cultivo PDA. El crecimiento micelial radial fue de
0.43-1.1 cm día-1 el cual fue un dato similar a lo que reportaron Jahan et al.
(2013) para el caso de F. proliferatum.
Con respecto al crecimiento de los 67 aislados en medio de cultivo CLA,
únicamente 20 (29.8 %) esporularon y formaron microconidios no septados
(Figura 2J) de 6.1-15.3×1.5-3.1µm en falsas cabezas (Figuras 2K y 2L);
macroconidios con célula apical curvada y célula basal en forma de pie, de 21.6-
60.1×1.8-4.6 µm, de 3-5 septos transversales (Fig.2I); clamidosporas ausentes.
Los datos anteriores coincidieron con los descritos por Pavlovic et al. (2009) para
el caso de F. proliferatum.
23
Figura 2. Fusarium proliferatum. Variabilidad en el tipo de micelio (2A-D) y
pigmentación (2E-H); microconidios (2I); falsas cabezas (2J) y macroconidios
(2K).
De los 70 aislados analizados solo 3 (4.3%) presentaron las siguientes
características en medio de cultivo PDA: micelio blanco, violeta y hasta púrpura
(Figuras 3A-C), pigmentación de naranja a casi negro (Figuras 3D-F) lo cual
coincidió con lo señalado por Leslie y Summerell (2006), para Fusarium
verticillioides. Se observó un crecimiento micelial radial de 0.66-0.9 cm día-1 dato
similar a lo reportado por Hirata et al. (2001) para la misma especie.
De los 3 aislados solamente 2 de ellos (66.6%) produjeron microconidios sin
septos (Figura 3G), en monofialides (Figura 3H), de 6.7-19.0 × 1.4-4.8 µm;
24
macroconidios (Figura 3I) de 3 septos transversales, con célula apical ligeramente
curvada y célula basal en forma de pie (Figura 3K) de 24.2-31.8 × 2.0- 3.1 µm;
clamidosporas ausentes. Esto coincide con la descripción de Fusarium
verticilloides reportada por Hirata et al. (2001) en fruta de plátano importada de
México en Japón.
Figura 3. Fusarium verticillioides. Variación de micelio (3A-C) y de

pigmentación (3D-F); microconidios (3G); falsas cabezas (3H) y macroconidios
(3I).
25
4.2. Caracterización molecular
Figura 4. Dendrograma generado utilizando el análisis UPGMA, basado la región parcial del
gen 18 S, ITS1, 5.8s, ITS2 y región parcial del 28 S. Se utilizó la secuencia de Fusarium
proliferatum y Fusarium verticillioides como referencia y a F. commune como grupo externo. 26
El análisis de la región ITS confirmó la identificación morfológica. Los 67 aislados
fueron agrupados con Fusarium proliferatum y dos con Gibberella moniliformis
(Figura 4). Una secuencia no fue incluida en el análisis filogenético debido a que
resultó ser muy corta después de la secuenciación.
Las especies del genero Fusarium asociadas a plantas de caña de azúcar con
síntomas de Pokkah-boeng en las regiones productoras de Veracruz, Morelos,
Oaxaca y Puebla fueron Fusarium proliferatum y Fusarium verticillioides Ambas
especies ya han sido reportadas como patógenos de la caña de azúcar. La
variación genética que existe entre los aislados de cada especie está presente
pero de modo que no representa la formación de grupos interespecíficos, de modo
que en este trabajo se encontró que únicamente estas dos especies están
asociadas a la enfermedad descrita como Pokkah-boeng.
Para confirmar estos resultados será necesario realizar pruebas de patogenicidad
como una segunda etapa del proyecto del que forma parte este trabajo de
investigación.
4.3. Especies de Fusarium spp. presentes en las regiones

productoras de caña de azúcar en México
En el cuadro 2 se observan la relación de colectas de Fusarium spp. realizadas
en los estados de Veracruz, Morelos, Oaxaca y Puebla en el año 2012.
Cuadro 2. Relación de colectas de Fusarium spp. en los estados de Veracruz,
Morelos, Oaxaca y Puebla (2012).
27
ESTADO CLAVE ALTITUD LATITUD LONGITUD ESPECIE
Veracruz F14 19°01' 06.09" 96°37'15.22” Fusarium proliferatum
Morelos F37 951 18°42'28.0" 99°22'32.8" Fusarium proliferatum
Morelos A 25 912 18°37'23.3" 99°09'41.8" Fusarium proliferatum
Morelos A26 912 18°37'23.3" 99°09'41.8" Fusarium proliferatum
Morelos A 14 884 18°35'00.2" 99°11'49.2" Fusarium proliferatum
Morelos A7 897 18°34'58.5'' 99°11'50.2'' Fusarium verticilloides
Morelos A8 879 18°34'54.9'' 99°11'49.4'' Fusarium proliferatum
Morelos F 16 921 18° 39' 13.9" 99° 11' 55.2" Fusarium proliferatum
Morelos F 17 921 18° 39' 13.9" 99° 11' 55.2" Fusarium proliferatum
Morelos F18 921 18° 39' 13.9" 99° 11' 55.2" Fusarium proliferatum
Morelos F20 921 18° 39' 13.9" 99° 11' 55.2" Fusarium proliferatum
28
Morelos F41 1168 18°42'58.4" 98°56'32.1" Fusarium verticilloides
Morelos F40 1165 18°42'57.0" 98°56'35.6" Fusarium verticilloides
Morelos F15 1171 18°43'36.5'' 98°59'39.8'' Fusarium proliferatum
Morelos A17 Fusarium proliferatum
Oaxaca F29 17°57'51.2" 96°05'16.0" Fusarium proliferatum
Oaxaca A30 Fusarium proliferatum
Puebla P1 1348 18.6317 98.3668 Fusarium proliferatum
Puebla P5 1338 18°37'53.8" 98°21'55.6" Fusarium proliferatum
29
En el estado de Morelos se aisló e identificó a F. proliferatum (Teleomorfo :
Gibberella intermedia) y F. verticilloides (Teleomorfo: G. moniliformis) y en los
estados de Oaxaca, Puebla y Veracruz se encontró a F. proliferatum lo cual
colocó a dicha especie como la mas frecuentemente aislada en las regiones
muestreadas en este estudio (95.7%) (Cuadro 3).
El estado con mayor variabilidad de especies es Morelos al presentar el total de
especies aisladas e identificadas en el presente estudio. En el cuadro 3 se
observa la incidencia de especies de Fusarium spp. en Veracruz, Morelos, Oaxaca
y Puebla.
Cuadro 3. Incidencia de especies de Fusarium spp. en Veracruz, Morelos, Oaxaca
y Puebla.
Origen Fusarium proliferatum Fusarium verticillioides Total
Veracruz 1.43 % 1.43 %
Morelos 69.99 % 4.3 % 74.29 %
Oaxaca 11.43 % 11.43 %
Puebla 12.85 % 12.85 %
Total 95.7 % 4.3 % 100 %
30
En el presente estudio, basados en la combinación de caracterización morfológica
y amplificación de la región ITS del rDNA, se identificó a F. proliferatum y F.
verticilloides (con 95.7% y 4.3% de incidencia, respectivamente) como las
especies presentes en las zonas productoras de caña de azúcar en Veracruz,
Oaxaca, Puebla y Morelos, México, lo cual coincidió con lo reportado por
McFarlane et al. (2009) quien encontró a Fusarium proliferatum en solo una área
geográfica (Midlands del Norte, Sudáfrica) y en la variedad más usada en dicha
área (N12); y con Mohammadi et al. (2012) quien reportó a Fusarium verticillioides
aislado de plantas de caña de azúcar afectadas por Pokkah-boeng en Irán.
Asimismo, la especie mas frecuentemente aislada en las regiones productoras de
caña de azúcar en México fue F. proliferatum (95.7%) lo cual se contrapone a lo
reportado por López y López (2000) y Mohammadi et al. (2012) quienes
reportaron a F. verticilloides como la especie predominantemente aislada de caña
de azúcar con síntomas de Pokkah-boeng en Cuba e Irán, respectivamente.
V. CONCLUSIONES
En este estudio se aisló e identificó a F. proliferatum y F. verticilloides como las
especies asociadas a síntomas de Pokkah-boeng, presentes en las zonas
productoras de caña de azúcar en Veracruz, Oaxaca, Puebla y Morelos, México.
La especie mas frecuentemente aislada en las regiones productoras de caña de
azúcar en México fue F. proliferatum con frecuencia de 95.7% total; distribuido de
la siguiente manera: 1.43% en Veracruz, 69.99% en Morelos, 11.43% en Oaxaca y
31
12.85% en Puebla. Fusarium verticillioides se aisló solamente en el estado de
Morelos con incidencia de 4.3% respecto al total.
La colonia de Fusarium proliferatum presentó abundante micelio aéreo de blanco a
purpura con pigmentación variable, desde blanco hasta rojo oscuro; crecimiento
micelial radial de 0.43-1.1 cm día-1. Formó microconidios no septados de 6.1-
15.3×1.5-3.1µm en falsas cabezas; macroconidios con célula apical curvada y
célula basal en forma de pie, de 21.6-60.1×1.8-4.6 µm, con 3-5 septos
transversales; clamidosporas ausentes.
La colonia de Fusarium verticillioides desarrolló micelio blanco, violeta y hasta
púrpura con pigmentación de naranja a casi negro; crecimiento micelial radial de
0.66-0.9 cm día-1. Formó microconidios sin septos en monofialides de 6.7-19.0 ×
1.4-4.8 µm; macroconidios de 3 septos transversales, con célula apical
ligeramente curvada y célula basal en forma de pie de 24.2-31.8 × 2.0- 3.1 µm;
clamidosporas ausentes.
El análisis de la región ITS confirmó las especies del genero Fusarium asociadas a
plantas de caña de azúcar con síntomas de Pokkah-boeng en las regiones
productoras de Veracruz, Morelos, Oaxaca y Puebla.
La especie que presentó mayor variabilidad morfológica, cultural y genética fue
Fusarium proliferatum lo cual puede ser indicativo de cepas con diferentes
virulencias hacia determinados genes de resistencia lo que afecta directamente el
desarrollo de una estrategia de manejo general.
32
LITERATURA CITADA
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37

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AL INSTITUTO NACIONAL DE INVESTIGACIONES FORESTALES, AGRÍCOLAS Y

POR EL FINANCIAMIENTO DE LA PRESENTE TESIS DE INVESTIGACIÓN, LA CUAL

“IDENTIFICACIÓN DE RESISTENCIA A POKKA BOENG (Fusarium spp.) Y CARBÓN

FONDOS FISCALES 2012, NÚMERO 15422020477:

A mi alma mater la Universidad Autónoma Chapingo y al

Departamento de Parasitología Agrícola por brindarme la

oportunidad de cursar mis estudios de preparatoria y licenciatura bajo

Al jurado examinador del presente trabajo por su tiempo y atención:

Dra. Marianguadalupe Hernández Arenas, Dr. Santos Gerardo Leyva

Mir, Dr. Cristian Nava Díaz, Dr. Guillermo Mondragón Pedrero y

especialmente al M.C. Juan Manuel Tovar Pedraza por todo su apoyo

A mis amigas Angelina Olvera Julio y Veronica Ruiz Machuca, por

su invaluable amistad y por el tiempo y experiencias compartidos.

A mi pareja Hernán Cortés Gómez por todos estos años de apoyo.

Para la familia Rosas Guevara. A mi padre Santiago Rosas Vázquez; en

especial a mi madre Clara Guevara Martínez por su apoyo

incondicional; y a mis hermanos Santiago, Alejandro y Guadalupe

por su apoyo para que yo pudiera concluir este proyecto de vida.

Para mi pareja Hernán Cortés Gómez por su tiempo, apoyo y

comprensión que me ha brindado siempre.

ÍNDICE GENERAL .................................................................................................. 1

Cuadro 1. Superficie sembrada y rendimiento de caña de azúcar en los principales

Cuadro2. Relación de colectas de Fusarium spp. en los estados de Veracruz,

Cuadro 3. Incidencia de especies de Fusarium spp. en Veracruz, Morelos, Oaxaca

Figura 1. Síntomas de Pokkah-boeng………………………………………...….......14

Figura 2. Fusarium proliferatum………………………….….…………………......….22

Figura 3. Fusarium verticillioides………….…………..………………………….……23

Figura 4. Dendrograma generado utilizando el análisis UPGMA……………........24

Con el objetivo de identificar las especies y genotipos de Fusarium spp. presentes

en zonas cañeras de México, se analizaron un total de 70 aislados de Fusarium

spp. procedentes de Veracruz, Morelos, Oaxaca y Puebla. Trozos de tejido

enfermo fueron lavados y desinfectados con NaClO al 3% por 3 min, sembrados

en PDA e incubados a 25±1°C. La caracterización morfológica y cultural de los

monospóricos se realizó en PDA y CLA. Se realizó la extracción de ADN y

amplificación de los ITS1 e ITS4 por PCR; el producto amplificado se purifico y

secuencio en Macrogen (Corea). Las secuencias fueron comparadas con la base

de datos del National Center for Biotechnology Information (NCBI), después se

alinearon con ClustalW del programa Mega5. Para el dendrograma se utilizaron

secuencias de F. commune y la matriz de datos alineada se agrupó utilizando el

análisis estadístico UPGMA. Las especies identificadas a nivel morfológico y

molecular fueron Fusarium proliferatum (Teleomorfo: Gibberella intermedia) y

Fusarium verticillioides (Teleomorfo: Gibberella moniliformis) siendo F. proliferatum

la especie más frecuentemente aislada (95.7%). Existe una amplia variabilidad en

síntomas y comportamiento morfológico de las colonias provenientes de Morelos,

Oaxaca, Puebla y Veracruz.

Palabras clave: Pokkah-boeng, caña de azúcar, Fusarium proliferatum, Fusarium

present in sugarcane areas of Mexico, analyzed a total of 70 isolates of Fusarium

incubated at 25 ± 1 ° C. The morphological and cultural monosporic held in PDA

and molecular level were Fusarium proliferatum (Teleomorph: Gibberella

intermedia) and Fusarium verticillioides (Teleomorph: Gibberella moniliformis)

variability in symptoms and morphological behavior of the colonies from Morelos,

Oaxaca, Puebla and Veracruz.

Key words: Pokkah-boeng, sugarcane, Fusarium proliferatum, Fusarium

En México, la industria azucarera es una de las más importantes, debido a su

relevancia económica y social en el campo. Actualmente, genera más de dos

millones de empleos, tanto en forma directa como indirecta y se desarrolla en 15

entidades federativas y 227 municipios con un valor de la producción de 30 mil

millones de pesos (SAGARPA, 2013).

Hasta el año 2008, la producción de caña de azúcar presentó una tendencia

ascendente, que se interrumpió en la zafra 2008/2009 debido, entre otros, a los

 Clima: principalmente menor cantidad de lluvia en la mayor parte del país,

en la época de maduración de la caña.

 Precios: el uso de fertilizantes se encareció sobre todo en los meses de