Metoda de determinare a conţinutului total de substanţe polifenolice
Conţinutul de substanţe polifenolice s-a determinat după metoda Folin
Ciocalteau [170] modificată la catedra “Tehnologia conservării” U.T.M. [171]. Produsul omogenizat (m = 1g ± 0,01g) se trece cantitativ într-un balon conic , dotat cu refrigerent ascendent, prin intermediu 15 cm3 alcool etilic 95 % fierbinte şi se menţinea la fierbere timp de 10 minute în baie cu apă pentru extracţia polifenolilor. Apoi proba se filtrează prin filtru de sticlă. Filtratul se acumula într-un balon cotat de 25 cm3 şi serveşte pentru determinarea conţinutului de substanţe polifenolice sumare. Din proba filtrată se ea 1 ml şi se transferă într-un balon cotat de 100 ml la care se adaogă 1 ml reactiv Folin – Ciocalteau. Peste 3 minute se adaogă 5 ml Na2CO3 şi se aduce la cotă cu apă distilată. Proba obţinut[ se lasă în repaus 30 minute la întuneric, apoi se determină densitatea optică la lungimea de undă 750 nm la spectrofotometrul CФ - 46. Soluţia martor se pregăteşte în felul următor: 1 ml alcool etilic + 1 ml Folin – Ciocalteau, peste 3 minute + 5 ml Na2CO3 + apă distilată până la 100 ml. Interpretarea rezultatelor Conţinutul total de substanţe polifenolice (Xpt), exprimate în mg/100g se determina după formula:
aVR X pt 100 (2.9) m
unde: a - cantitatea substanţelor polifenolice determinată după curba de etalonare
trasată după tanină, mg/ml; V - volumul total de filtrat după extracţie, în ml; R- coeficientul de diluare; m - masa probei pentru cercetare, în g;