UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÂNDIA

INSTITUTO DE GENÉTICA E BIOQUÍMICA

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM GENÉTICA E BIOQUÍMICA

ANÁL ISE SIG MO IDAL DA CURVA DA LACT AT EM IA EM T EST E

INCREMENT AL: NOVO S H O RIZONT ES

Estudante: Guilherme Gularte De Agostini

Orientador: Nilson Penha-Silva

UBERLÂNDIA, MG
2011
 UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÂNDIA
INSTITUTO DE GENÉTICA E BIOQUÍMICA
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM GENÉTICA E BIOQUÍMICA

ANÁL ISE SIG MO IDAL DA CURVA DA LACT AT EM IA EM T EST E

INCREMENT AL: NOVO S H O RIZONT ES

Estudante: Guilherme Gularte de Agostini

Orientador: Nilson Penha-Silva

Tese apresentada à Universidade Federal

de Uberlândia como parte dos requisitos
para obtenção do título de doutor em Ge-
nética e Bioquímica (área de Bioquímica)

UBERLÂNDIA, MG
2011

ii
 UNIVERSIDADE FDERAL DE UBERLÂNDIA
INSTITUTO DE GENÉTICA E BIOQUÍMICA
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM GENÉTICA E BIOQUÍMICA

ANÁL ISE SIG MO IDAL DA CURVA DA LACT AT EM IA EM T EST E

INCREMENT AL: NOVO S H O RIZONT ES

Estudante: Guilherme Gularte de Agostini

Comissão examinadora

Presidente: Prof. Dr. Nilson Penha-Silva [UFU]

Examinador: Prof. Dr. Vilmar Baldissera [UFSCAR]
Examinador: Profª Dra Nádia Carla Cheik [UFU]
Examinador: Profª Dra Françoise Vasconcelos Botelho [UFU]
Examinador: Prof. Dr. Emerson Silami Garcia [UFMG]

Data da defesa: 10/05/2011

As sugestões da Comissão Examinadora e as Normas do PPGGB para o formato

da tese foram contempladas.

Prof. Dr. Nilson Penha-Silva

Orientador
iii
DEDICATÓRIA

Aos meus pais e irmãos;

A minha esposa, Fernanda, e aos amigos.

iv
AGRADECIMENTOS

Ao estimado Prof. Dr. Nilson Penha-Silva, pela orientação acadêmica e pe-

lo seu exemplo de humildade, paciência e dedicação aos estudos e à pesquisa
científica;

Aos meus Pais, Jairo de Agostini e Marlene Gularte de Agostini, pela edu-
cação e os ensinamentos no decorrer da vida;

Aos meus queridos irmãos, Jairo De Agostini Filho, Leonardo Gularte De

Agostini e Isabel Maria Gularte De Agostini, por todos os momentos vividos jun-
tos;

A minha esposa mais linda do mundo, Fernanda Barbosa Gattini Fabbri, e

a sua família, pelo amor e incentivo para que eu pudesse concretizar mais essa
etapa.

Aos Professores e amigos João Elias Dias Nunes, Guilherme Moraes Pu-
ga, Marcos Luiz Ferreira Neto, Cristiano Lino Monteiro de Barros, Élcio Mateus,
Nádia Carla Cheik, Eduardo Henrique Rosa Santos, Fernando Nazário, Claudio
Nunes da Silva e Heitor Santos Cunha, Gilmar da Cunha Souza dentre outros,
pelo apoio na busca deste desafio.

À memória dos professores e amigos Sérgio Pepato e José Carlos de Oli-

veira, os quais me incentivaram muito no início desta estrada;

Aos demais professores e aos funcionários da FAEFI-UFU, pelos momen-

tos vividos juntos;

Ao Programa de Pós-Graduação em Genética e Bioquímica da Universida-

de Federal de Uberlândia e aos seus respectivos professores, pela minha forma-
ção acadêmica;

E a todos os outros que, direta ou indiretamente, contribuíram para a reali-

zação desse trabalho;

Deixo aqui os meus sinceros agradecimentos.

v
APOIO

COORDENAÇÃO DE APERFEIÇOAMENTO DE PESSOAL DE NÍVEL

SUPERIOR

UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLÂNDIA (UFU)

vi
SUMÁRIO

Página
Abreviaturas ................................................................................................................. ix
Lista de figuras e tabelas ............................................................................................. x
Apresentação................................................................................................................ xii

Capítulo 1: Fundamentação teórica ........................................................................ 1

Bases bioquímicas da produção do lactato durante o exercício ................................. 2
Teoria hipóxia dependente da origem do lactato muscular.......................................... 2
Teoria hipóxia independente ou teoria multifatorial da origem do lactato muscular 4
Bioquímica do exercício induz acidose metabólica ..................................................... 5
Lactato, H+ e redução do desempenho ....................................................................... 7
Cinética da formação e remoção do lactato durante o exercício de intensidade
constante e de intensidade crescente ......................................................................... 8
Exercício de intensidade constante e a resposta do lactato sanguíneo ...................... 9
Exercício de intensidade crescente e a resposta do lactato sanguíneo ...................... 10
Exercício “progressivo” de intensidade constante até a exaustão e a resposta do
lactato sanguíneo ........................................................................................................ 11
Importância da avaliação do lactato sanguíneo durante o exercício: limiar de lactato
e máxima fase estável de lactato ................................................................................ 13
Determinação da máxima fase estável de lactato (MFEL) ......................................... 14
Métodos de predição da MFEL em um único dia ........................................................ 15
Predição da MFEL pela determinação da Intensidade do OBLA ou 4 mM ................. 15
Predição da MFEL pela determinação da intensidade do limiar anaeróbio individual. 17
Predição da MFEL pela determinação da intensidade do Dmax e do Dmax modificado. 19
Predição da MFEL pela determinação da intensidade do lactato mínimo ................. 20
Efeito da temperatura no desempenho aeróbio .......................................................... 21
Estudos em esforços de intensidade máxima ............................................................. 22
Estudos em esforços de intensidade sub-máxima ...................................................... 23
Hipótese da temperatura central crítica ....................................................................... 24
Mecanismos da indução de fadiga por hipertermia ..................................................... 25
Proposição de um novo método para avaliação da endurance aeróbia ...................... 26
Referências …………………………………………………………………………………. 28

vii
Capítulo 2: Analysis of different methods for lactate threshold identification in
resistance exercise: a novel method proposition ………....................................... 39
Abstract ………………………………………………………………………………........... 40
Introduction ………………………………………………………………………………….. 41
Method ………………………………………………………………………………………. 42
Results ………………………………………………………………………………………. 44
Discussion …………………………………………………………………………………… 44
Conclusion …………………………………………………………………………………… 47
Practical applications ……………………………………………………………………….. 47
References …………………………………………………………………………………... 51

Capítulo 3: W-X50, a new method to determine aerobic endurance ..................... 54

Abstract ………………………………………………………………………………........... 55
Introduction ………………………………………………………………………………….. 56
Method ………………………………………………………………………………………. 57
Results ……………………………………………………………………………………….. 61
Discussion …………………………………………………………………………………… 61
Conclusion …………………………………………………………………………………… 64
Practical Applications……………………………………………………………………… 64
References ………………………………………………………………………………….. 70

Capítulo 4: Effect of temperature variation on the intensity of the MLSS and of

the X50 in cycloergometer ……………………………………………………………….. 73
Abstract ………………………………………………………………………………........... 74
Introduction ………………………………………………………………………………….. 75
Method ……………………………………………………………………………………….. 76
Results ………………………………………………………………………………………. 79
Discussion …………………………………………………………………………………… 80
Conclusion …………………………………………………………………………………… 81
Practical application ………………………………………………………………………… 81
References ………………………………………………………………………………….. 88

viii
ABREVIATURAS

[lac] Concentração de lactato

BP Blood pression (pressão sanguínea)

CGM Central governor model (modelo de governo central)

CP Creatine phosphate (creatina fosfato)

DC Débito cardíaco

Dmax Ponto da curva de lactatemia, em protocolo incremental, que exibe a

distância máxima da linha entre a menor e a maior concentração de
lactato

EMG Electromyography (eletromiografia)

EPI Epinefrine (adrenalina)

Glc Glicose

Glc6P Glucose 6-phosphate (glicose 6-fosfato)

H+ Próton ou cátion do hidrogênio

HR Heart rate (frequência cardíaca)

IAT Individual anaerobic threshold (limiar anaeróbio individual)

IIa e IIx Fibras glicolíticas

LDH Lactato Desidrogenase

LL Limiar de lactato

MFEL Máxima fase estável de lactato (maximal lactate steady state)

ix
MLSS Maximal lactate steady state (máxima fase estável de lactato)

OBLA Onset of blood lactate accumulation (início do acúmulo de lactato,

arbitrariamente estabelecido como 4 mM)

Pmax Potência aeróbia máxima

pO2 Pressão parcial de oxigênio

x
LISTA DE FIGURAS E TABELAS

Página
Figura 1.1: Comportamento da lactatemia para exercícios de 40 minutos
de duração com diferentes intensidades ................................... 09
Figura 1.2: Comportamento da lactatemia para exercícios incrementais
até a exaustão voluntária .......................................................... 11
Figura 1.3: Comportamento da lactatemia para cada intensidade realiza-
da até a exaustão ...................................................................... 12
Figura 1.4: Teste incremental para determinação da intensidade do OBLA
(seta) ......................................................................................... 16
Figura 1.5: Teste incremental para determinação do IAT. Notar a utiliza-
ção da tangente da recuperação até a fase crescente do lacta-
to durante o teste ....................................................................... 18
Figura 1.6: Teste incremental para determinação do D max. Notar a utiliza-
ção da linha perpendicular entre a concentração inicial e final
da lactatemia ............................................................................. 19
Figura 1.7: Teste incremental para determinação do lactato mínimo. Notar
o diferente formato da cinética da lactatemia, em virtude da
carga de hiperlactatemia induzida ............................................. 20
Figura 2.1: Lactate threshold determination for one subject by the 5 me-
thods: lactate quotient (A); OPLA (B); OBLA 4 mM (C); visual
inspection (D) and X20 (E) ………………………………………… 48
Tabela 2.1: Mean values results from the resistance exercise intensity at
the lactate threshold (% 1 RM) indentified from all the five me-
thods ………………………………………………………………… 49
Figura 2.2: Limits of agreement between X20, QL and IV using Bland &
Altman method …………………………………………………….. 50
Tabela 3.1: Power (Watts) of exercise intensities given by W-X50, W-
MLSS, W-OBLA and W-Peak .................................................... 66
Tabela 3.2: Pearson correlation coefficients (r) between W-X50, W-MFEL,
W-OBLA and W-Peak ................................................................ 67
Figura 3.1: Dependence of lactate concentration on exercise intensity in

xi
 an incremental test. W-X50 represents the intensity of exercise
when the variation in lactate concentration reached 50% of the
maximum concentration of lactate (Lmax) ................................... 68
Figura 3.2: Limit of agreement between W-MLSS and W-X50, using the
technique proposed by Bland and Altman ................................. 69
Tabela 4.1: Values (mean ± standard deviation) of power (W) correspond-
ing to the incremental test in the two temperatures . 83
Tabela 4.2:V Values of the correlation coefficients of Pearson (r) between
MLSS, W-X50 and W-Peak at 22 °C ……………………………. 84
Tabela 4.3: Values of the correlation coefficients of Pearson (r) between
MLSS, W-X50 and W-Peak at 40 °C ……………………………. 85
Figura 4.1 Concordance threshold between W-MLSS and W-X50 at 22
°C, using Bland Altman technique ……………………………….. 86
Figura 4.2 Concordance threshold between W-MLSS and W-X50 at 40
°C, using Bland Altman technique ……………………………….. 87

xii
APRESENTAÇÃO

A avaliação do desempenho físico sempre foi fator primordial para subsidi-

ar a prescrição do treinamento, com a finalidade de aprimorar as marcas esporti-
vas. Entretanto, muitas vezes a complexidade dos testes ou o número de sessões
necessárias para realizá-los inviabiliza a avaliação, o que compromete a qualida-
de do treinamento e o desempenho físico, além de aumentar o risco de lesões.
Desta forma, torna-se necessária a aplicação de testes que sejam válidos, sensí-
veis, mas também práticos, para que sua rotina no controle do estado do treina-
mento seja aceitável.
O presente trabalho propõe uma nova análise da curva da lactatemia, com a
utilização de parâmetros que foram designados como X20 e X50 para verificar as
intensidades do limiar de lactato (LL) em exercício resistido e da máxima fase es-
tável de lactato (MFEL) em exercícios dinâmicos cíclicos não resistidos, além de
discutir o efeito da temperatura no desempenho aeróbio.
O capítulo 1 apresenta a fundamentação teórica sobre as causas da pro-
dução de lactato e sua relação com a fadiga muscular, além de discutir os efeitos
da temperatura no desempenho aeróbio submáximo e máximo.
O capítulo 2 propõe a utilização do parâmetro X20 para determinação do
LL em exercício resistido e compara este método com outros normalmente utiliza-
dos.
O capítulo 3 propõe a utilização do X50 como método válido para determi-
nar a intensidade da MFEL.
O capítulo 4 apresenta um teste da validade do X50 com base na variação
da temperatura no desempenho submáximo.
O capítulo 5 analisa a influência de um ambiente hipertérmico sobre o de-
sempenho aeróbio à intensidade do VO2 máximo, bem como as possíveis causas
da fadiga nesta intensidade.

xiii
Capítulo 1

Fundamentação Teórica

1
Bases bioquímicas da produção de lactato durante o exercício

Os termos ácido láctico e lactato são utilizados como sinônimos [BROOKS,

1985], embora não o sejam, pois eles têm propriedades químicas diferentes. O
ácido láctico é um ácido orgânico forte e em pH fisiológico ele rapidamente se
dissocia, com a liberação do anion lactato e de um próton. O ácido láctico é um
ácido de Brönsted-Lowry e o lactato é sua base conjugada.
Durante o exercício de alta intensidade, o ácido láctico acumula-se como re-
sultado de sua produção exceder a remoção. A produção de ácido láctico e, con-
sequentemente, de seu ânion, o lactato, é dependente da demanda metabólica
local, onde o piruvato formado pela glicólise poderá ser convertido em lactato e/ou
em acetil-CoA. A demanda metabólica é aumentada pela intensidade do exercí-
cio, aumentando o consumo muscular de ATP e provocando acúmulo de seus
metabólitos. Alterações nas concentrações de ADP, AMP, Pi, aceleram o fluxo
glicolítico em direção à formação de lactato, o qual tem seu aumento relacionado
com a elevação da intensidade do exercício. Diversos autores utilizaram o exercí-
cio progressivo (incremental) na tentativa de elucidar as reais causais do acúmulo
do lactato durante o exercício e, apesar de haver muita controvérsia, podemos
relacioná-las de modo geral, como acúmulo de lactato dependente ou não da hi-
póxia [WELTMAN, 1995] ou disóxia [CONNETT et al., 1990].

Teoria hipóxia-dependente da origem do lactato muscular

Segundo Wasserman [1986], o acúmulo de lactato pode ser causado por um

desequilíbrio entre suprimento e requerimento de oxigênio no músculo exercitado.
Essa teoria tem foco na produção de lactato e coloca ênfase mínima na sua taxa
de remoção. A diminuição do fornecimento de oxigênio à mitocôndria reduz o es-
tado redox do citoplasma, proporcionando acúmulo de NADH +H+. A elevada con-
centração de NADH+H+ no citoplasma estimula a enzima lactato desidrogenase
(LDH) a formar lactato [KATZ e SAHLIN, 1988]. Diversos trabalhos que induziram
aumento da lactatemia por diminuição da entrega de oxigênio à mitocôndria servi-
ram de base para esta teoria. Em um estudo realizado por Trinay e colaboradores
[1971] foi descrita diminuição de 15 a 20% dos sítios de ligação de oxigênio na
2
hemoglobina em decorrência da ligação de monóxido de carbono (CO), o que po-
deria ser uma causa do acúmulo plasmático de lactato. Além disso, Woodson
[1978] constatou maior lactacidemia em indivíduos com anemia isovolumétrica em
comparação a indivíduos normais para mesma carga de esforço.
Três principais evidências apareceram para refutar a idéia de que é neces-
sária hipóxia muscular para que ocorra maior produção de lactato [KATZ e
SAHLIN, 1988].
(I) Connett e colaboradores [1985] mostraram que a pressão parcial de oxi-
gênio (pO2) é maior que a pO2 mitocondrial crítica (pO2 crítica). Em mitocôndrias
isoladas, a pO2 crítica estimada está entre 0,1 e 0,5 mmHg. Por meio de estimula-
ção elétrica muscular, numa freqüência de estimulação de 1/s e 4/s, não foi en-
contrada pO2 mitocondrial menor que 2 mmHg durante o estado estável ou na
transição do repouso para o exercício. Essas freqüências de contrações muscula-
res requisitaram 10 e 70% do consumo máximo de oxigênio respectivamente. A
concentração de lactato aumentou de 1 mmol/L em repouso para 2 mmol/L na
freqüência de 1/s e para 6 mmol/L na freqüência de 4/s.
(II) Embora a causa da produção de lactato tenha sido atribuída à limitação
na oferta de O2 à cadeia de transporte de elétrons, altas taxas de lactato são pro-
duzidas mesmo com aumento no consumo de oxigênio pelo músculo gastrocnê-
mio. Assim, a produção muscular de lactato não seria causada por limitação de
oxigênio na cadeia respiratória [JÖBSIS e STAINSBY, 1968].
(III) Richardson e colaboradores [1998], usaram ressonância magnética para
determinar a saturação da mioglobina (estimar a pO 2 intra muscular) durante um
exercício progressivo unilateral. Os resultados demonstraram que o aumento do
efluxo de lactato associado à elevação da intensidade de exercício não foi rela-
cionado à limitação da fosforilação oxidativa pela oferta inadequada de oxigênio.
Algumas evidências sugerem que a fosforilação oxidativa não é diretamente
limitada pela disponibilidade de oxigênio [RICHARDSON et al., 1998]. À medida
que a pO2 diminui, grandes aumentos na relação [NADH]/[NAD+] e
[ADP].[Pi]/[ATP] são necessários para manter a respiração celular em níveis ade-
quados para suprir a demanda aeróbia de ATP. Entretanto, o aumento na relação
[NADH]/[NAD+] e ([ADP].[Pi]/[ATP]) numa situação de baixa pO2 é um potente es-

3
tímulo para acelerar a atividade glicolítica e, por conseqüência, a produção de
lactato [GLADDEN, 1996].
Embora pareça que haja consenso de que a falta de oxigênio levaria a au-
mento na produção de lactato, uma pergunta ainda não foi devidamente respon-
dida: existiria hipóxia mitocondrial durante a realização de um exercício submáxi-
mo? Dessa forma, o acúmulo de lactato poderia ser causado por outros fatores
que não a limitação da oferta de oxigênio na cadeia de transporte de elétrons.

Teoria hipóxia independente ou teoria multifatorial da origem do lactato

muscular

Segundo Gladden [1996], diversos fatores isolados ou relacionados podem

estar envolvidos na elevação da lactatemia em resposta a elevação da intensida-
de do exercício. Segundo Parolin e colaboradores [1999], a produção muscular de
lactato depende da competição pelo piruvato e pelo NADH+H+ entre a enzima
LDH (lactato desidrogenase), por um lado, e o complexo PDH (piruvato desidro-
genase) e a lançadeira de poder redutor do NADH+H+, por outro. Como a LDH
está no citoplasma e catalisa uma reação próxima do equilíbrio, o aumento da
intensidade do exercício eleva a atividade da glicólise, acelerando a formação de
piruvato e NADH+H+. O aumento na formação no citoplasma dos substratos da
LDH eleva a formação de lactato.
O aumento progressivo da atividade simpática durante a elevação da inten-
sidade do exercício também pode proporcionar aumento da lactatemia. Segundo
Stainsby e Brooks [1990], quando a concentração de adrenalina (EPI) aumenta
em combinação com a elevação da intensidade do exercício, a glicólise é estimu-
lada, causando tanto aumento na produção muscular de lactato como remoção
diminuída em outros tecidos, resultando num aumento líquido de lactato sangüí-
neo. Segundo Hargreaves [1995] e Weltman [1995], como o sistema beta-
adrenérgico é forte estimulador da glicogenólise muscular, infusões de EPI, au-
mentam a lactatemia tanto em repouso quanto durante o exercício. Por outro lado,
o bloqueio do receptor beta-adrenérgico resulta em diminuição da lactatemia
[WELTMAN, 1995].

4
 Outra possível contribuição para o aumento da lactatemia durante o exercí-
cio seria o recrutamento das unidades motoras que inervam as fibras glicolíticas
(IIa e IIx) [BROOKS et al., 2000]. Segundo estes autores, a tendência para produ-
ção de lactato pelas fibras musculares aumenta na mesma ordem do padrão de
recrutamento. Independente do tipo de contração, as fibras musculares do tipo IIa
e IIx são recrutadas em exercícios de alta intensidade, sendo essas mesmas fi-
bras as mais prováveis para produzir lactato.

Bioquímica do exercício induz acidose metabólica

Há aproximadamente 90 anos tem sido descrito que durante o exercício in-

tenso, o aumento do lactato muscular e sanguíneo e a coincidente diminuição do
pH em ambos tecidos é explicada pela produção de ácido láctico [ROBERGS et
al., 2004]. Essa condição, chamada de acidose láctica [LASKI e WESSON, 2002],
induz à conclusão de que a produção de lactato seja a causa da acidose em e-
xercício de alta intensidade.
O pK do ácido láctico é 3,7. Como o pH muscular se aproxima de 7,0 duran-
te o repouso e de 6,0 durante exercício de alta intensidade, o ácido láctico muscu-
lar está quase completamente desprotonado em ambas as condições (repouso e
exercício). A perda do próton faz com que a molécula fique com uma carga nega-
tiva livre, atraindo assim um íon de carga positiva (sódio ou potássio) para formar
um sal [ROBERGS et al., 2004].
Segundo Robergs e colaboradores [2004], o balanço de prótons no músculo
esquelético pode ser influenciado por três sistemas: (1) fosfagênios, (2) glicólise
mais reação da LDH (glicólise anaeróbica) e (3) respiração mitocondrial.
O estoque celular de creatina fosfato (CP) atua na célula em poucos segun-
dos para produzir ATP. Essa reação alcaliniza a célula, consumindo o próton pro-
veniente da hidrólise do ATP por reação com o grupo funcional amino da creatina
[ROBERGS et al., 2004].
A produção de duas moléculas de piruvato via glicose (Glc) ou glicose-6-
fosfato (Glc6P) leva à liberação líquida de 2 prótons (provenientes da dissociação
das duas moléculas de ácido pirúvico), mas quando a Glc6P é formada via glico-
genólise haveria liberação líquida de apenas um próton. Desta forma a utilização
5
de glicogênio muscular seria menos acidificante ao meio celular que a utilização
de glicose sanguínea [ROBERGS et al., 2004].
Ainda segundo Robergs e colaboradores [2004], como a liberação líquida do
par de íons H+ (por molécula de Glc ou Glc-6P) antecede à formação de piruvato
e lactato, a acidificação não seria proporcionada pela formação de lactato. Este
argumento é frágil, porque embora os dois prótons tenham sido anteriormente
associados a outros intermediários da glicólise, esses intermediários foram todos
consumidos com a formação de lactato ao final do processo. Embora esses dois
prótons estejam dissociados das duas moléculas de lactato, a mistura prótons +
lactato está em equilíbrio com o ácido láctico.
Também segundo Robergs e colaboradores [2004], após a formação de pi-
ruvato, a LDH catalisa a formação de lactato, removendo dois prótons do par de
NADH+H+ necessário para converter piruvato em lactato, de tal forma que essa
reação produziria alcalose celular e não acidose. Entretanto, numa destinação
mitocondrial dos dois prótons do par de NADH + H + proveniente da glicólise, os
dois prótons seriam eficientemente consumidos pelo sistema de lançadeira de
poder redutor do NADH + H+ para a mitocôndria, o que também produziria alcalo-
se celular e não acidose.
Embora a acidose seja causada pelo metabolismo citoplasmático, ela pode-
ria também estar relacionada com a taxa mitocondrial de síntese de ATP. O me-
tabolismo mitocondrial funciona liberando prótons e elétrons dos substratos, pro-
duzindo CO2, H2O e ATP. Os prótons são requeridos para redução do O 2 molecu-
lar e a conversão de ADP e Pi em ATP. Mecanismos de transporte conectam o
metabolismo citoplasmático ao mitocondrial. A capacidade da mitocôndria em re-
ceber prótons e elétrons retarda a dependência do metabolismo glicolítico e da
CP para geração do ATP. Essencialmente o metabolismo mitocondrial funciona
como um depósito de prótons para utilização na fostorilação oxidativa. A acidose
metabólica ocorre quando a taxa de hidrólise do ATP (demanda) excede a taxa na
qual o ATP é gerado na mitocôndria [ROBERGS et al., 2004].
Nos últimos anos, extenso debate sobre o tema tem sido travado [BÖNING
et al., 2005; ROBERGS et al., 2005; KEMP, 2005; BENEKE, 2008; BÖNING e
MAASSEN, 2008; GLADEN, 2008; JONES, 2008; LINDINGER e

6
HEIGENHAUSER, 2008; MILLER, 2008; MOLL e GROSS, 2008; PRAKASH,
2008; ROBERGS, 2008; SAHLIN, 2008; STRINGER e WASSERMAN, 2008].
Recentemente, Marcinek e colaboradores [2010] realizaram um estudo para
testar a relação entre a produção de lactato e acúmulo de H+, em músculos is-
quêmicos de ratos. Seus resultados demonstraram alta correlação entre a gera-
ção de H+ e o acúmulo de lactato. Esta relação entre a produção glicolítica de H+
e o aumento do lactato foi confirmada por análise das reações envolvidas na gli-
colíse in vivo. Esses dados suportam a associação da acidose lática em condi-
ções onde há elevada concentração de lactato.

Lactato, H+ e redução do desempenho

O acúmulo de lactato no músculo e no sangue foi historicamente responsabi-

lizado por ser o maior responsável pela fadiga muscular [FITTS, 1994], devido
principalmente à elevada correlação inversa entre sua concentração e o declínio
da força. Em exercício de alta intensidade, a lactatemia pode atingir valores pró-
ximos de 30 mM, com reduções de 0,5 unidades no pH [SAHLIN et al., 1978]. En-
tretanto, esse relacionamento temporal entre acúmulo de lactato e fadiga tem sido
questionado.
Chase e Kushmerick [1988] reportaram que o pico de tensão tetânica no
músculo psoas de coelhos não foi afetado diretamente pelo anion lactato. Ao
mesmo tempo, o estreito relacionamento entre elevação do lactato e diminuição
do pH sugere que a acidose poderia ser a causa da fadiga. Embora estudos inici-
ais indicassem que a diminuição do pH afetava negativamente a produção de for-
ça devido a alterações no aparato contrátil, no ciclo do cálcio e na diminuição da
atividade enzimática [FITTS, 1996; HARGREAVES, 1995], estudos conduzidos
em situações fisiológicas mais realistas demonstram que esses efeitos são pe-
quenos. De fato, experimentos que reportaram diminuição da força em pH ácido
numa temperatura de 10 ºC, não conseguiram reproduzir a queda da força em
temperatura próxima da humana [PATE et al., 1995]. Resultados similares foram
encontrados por [WESTERBLAD et al., 1997; KRISTENSEN et al., 2005; ZHANG
et al., 2006]. Além disso, a acidificação intracelular pode ter efeito benéfico no
desempenho por reduzir a condutância da membrana ao cloro. Isso propicia a
7
continuação da propagação do potencial de ação, mesmo em situações de adver-
sidades iônicas, que ocorrem no exercício intenso [NIELSEN et al., 2001;
PEDERSEN et al., 2004, 2005]. A ausência de qualquer efeito deletério no de-
sempenho em pH ácido em temperaturas fisiológicas oferece excelente explica-
ção da falta de correlação temporal entre produção de força e pH, quando huma-
nos estão em recuperação de contrações fatigantes [SAHLIN & REN, 1989].
Assim sendo, embora íons H+ provenientes de moléculas de ácido láctico se
acumulem no músculo em alguns tipos de fadiga, eles parecem não ser a causa
da fadiga, no mínimo em mamíferos em temperaturas fisiológicas [ALLEN et al.,
2008].
Apesar de existirem várias pesquisas e debates sobre o assunto, ainda res-
tam diversos pontos a serem esclarecidos completamente sobre o metabolismo
do lactato durante o exercício. Dentre eles: (a) quais a(s) causa(s) da produção
e/ou acúmulo de lactato durante o exercício, (b) quais a(s) causa(s) da acidose
durante o exercício de alta intensidade, e (c) qual a relação entre acúmulo de lac-
tato, acidose e fadiga muscular.
Apesar de todas estas dúvidas, há consenso de que em determinada inten-
sidade de exercício a lactatemia aumenta de forma abrupta, de tal forma que deve
haver um limiar de intensidade a partir do qual a concentração sanguínea de lac-
tato aumenta abruptamente durante um teste incremental. Entretanto, a intensi-
dade em que esse limiar de lactato (LL) ocorre ainda é tema de grande controvér-
sia, seja em relação à nomenclatura do fenômeno ou em relação a seus métodos
de avaliação [WELTMAN, 1996].

Cinética da formação e remoção do lactato durante o exercício de intensida-

de constante e de intensidade crescente

A cinética da alteração da lactatemia é influenciada por diversos fatores co-

mo a duração e a intensidade do exercício, a temperatura ambiente, o nível inicial
de glicogênio, a massa muscular ativa. Dentre esses, o efeito da duração e da
intensidade do exercício serão discutidos abaixo.

8
Exercício de intensidade constante e a resposta do lactato sanguíneo

Durante exercício de baixa intensidade, há pequeno aumento inicial na lacta-

temia oriundo da anaerobiose muscular, causada pela inércia da cadeia transpor-
tadora de elétrons em promover a fosforilação oxidativa, de tal forma que há me-
nor consumo de O2 que o necessário para atender a demanda exigida de ATP.
Essa diferença no consumo de O2 em relação à demanda energética é chamada
de déficit de O2. Após este breve aumento inicial, a lactatemia retorna aos valores
basais.
Entretanto, em intensidade de exercício elevada o lactato exibe aumento
sustentado até o final do exercício. Desta forma, torna-se nítido que existe uma
intensidade de exercício onde a concentração de lactato aumenta no início e de-
pois se estabiliza, mantendo-se constante até o final do exercício (Figura 1.1).
Essa intensidade representa uma condição de equilíbrio de estado estacionário,
situação em que a taxa de formação de lactato é igual a sua taxa de remoção,
tendo sido denominada de máxima fase estável de lactato (MFEL) [BOSQUET et
al., 2002].

Figura 1.1: Comportamento da lactatemia para exercícios de 30 minutos de duração com diferentes intensi-
dades. Cada curva representa uma intensidade, que aumenta da curva inferior para a curva superior. A In-
tensidade de 250W representa a MFEL (MLSS). Adaptado de Heck et al. 1985.

Apesar de a MFEL representar uma situação de equilíbrio estacionário da

lactatemia, nem todos os parâmetros fisiológicos estão em equilíbrio na intensida-
de de exercício da MFEL. Baron e colaboradores [2003] submeteram 8 voluntá-
9
rios treinados a 30 minutos de exercício em cicloergômetro na intensidade da
MFEL. Nenhuma variação ocorreu na lactatemia, no estado redox e na concen-
tração de bicarbonato entre o décimo e o trigésimo minuto, indicando que os vo-
luntários estavam realmente na intensidade da MFEL. Entretanto, a pressão de
dióxido de carbono arterial e o pH foram significativamente diferentes neste tem-
po. Além disso, a freqüência respiratória e a cardíaca aumentaram significante-
mente até o final do exercício, não exibindo então uma fase estável dentro de
uma perspectiva fisiológica mais ampla. Isso deve significar que a MFEL repre-
senta uma situação de equilíbrio estacionário apenas do lactato, mas não um
completo estado de equilíbrio estacionário fisiológico.

Exercício de intensidade crescente e a resposta do lactato sanguíneo

O teste incremental é um procedimento padrão para determinar respostas

fisiológicas submáximas e máximas ao exercício. Apesar de ser amplamente di-
fundido no mundo, ainda não há padronização na sua execução. Com isso, o tipo
de protocolo utilizado na sua realização influencia no diagnóstico do desempenho.
Por exemplo, quando ocorre alteração na carga inicial, na duração de cada está-
gio ou no incremento de cargas, os valores da lactatemia podem diferir considera-
velmente [WELTMAN et al., 1995].
Entretanto, independente do tipo de protocolo incremental utilizado, a lacta-
temia permanece invariável ou exibe discreto aumento linear com o acréscimo
inicial de cargas, passando a exibir comportamento exponencial em determinada
intensidade do exercício (Figura 1.2). O ponto em que ocorre essa mudança de
comportamento da lactatemia de invariável ou linear para exponencial é denomi-
nada de limiar de lactato (LL) [OYONO-ENGUELLE et al., 1990].

10
Figura 1.2: Comportamento da lactatemia para exercícios incrementais até a exaustão voluntária. A seta indica o ponto de
inflexão na curva da lactatemia.

Entretanto, duas críticas podem ser feitas à exponencialidade da lactatemia

em exercícios incrementais. A exponencialidade da lactatemia durante um teste
incremental deve estar relacionada à soma das concentrações de lactato entre os
diferentes estágios, proporcionada pela insuficiência de tempo para difusão com-
pleta do lactato produzido em cada estágio [YOSHIDA, 1984]. Além disso, o for-
mato exponencial indica tendência ao infinito da lactatemia, o que pode causar
um erro de interpretação, uma vez que, a concentração máxima de lactato obtida
em diferentes testes máximos não se altera em um mesmo indivíduo [BLONDEL
et al., 2001; RENOUX et al., 2000; LEPRETRE et al., 2004], de tal forma a deter-
minar um platô na lactatemia em testes retangulares com carga fixa elevada ou
sob elevada intensidade de exercício.

Exercício progressivo de intensidade constante até a exaustão e a resposta

do lactato sanguíneo

Como visto anteriormente, durante o exercício de baixa intensidade, há

pequeno aumento inicial na lactatemia. Após este breve aumento inicial, a lacta-
temia retorna aos valores basais. Na intensidade da MFEL, a concentração de
lactato aumenta no início e depois se estabiliza, mantendo-se constante até o final
11
do exercício [BOSQUET et al., 2002]. Entretanto, quando a intensidade do exercí-
cio torna-se maior que a da MFEL, a lactatemia exibe aumento sustentado até o
final do exercício. Em intensidades entre 90 a 130% do VO 2 max, realizadas até a
exaustão, os valores máximos da lactatemia para cada uma dessas intensidades
não são diferentes. Além disso, valores semelhantes são encontrados para a con-
centração de lactato no ponto de exaustão de um teste incremental [BLONDEL et
al., 2001; RENOUX et al., 2000; LEPRETRE et al., 2004], indicando que indepen-
dentemente do protocolo utilizado, cada indivíduo possui uma concentração má-
xima de lactato em intensidades do consumo máximo de oxigênio (VO2 max) ou
próximas dele. Desta forma, quando os valores máximos da concentração de lac-
tato de cada teste até a exaustão são utilizados numa forma gráfica, ocorre um
platô na lactatemia em intensidades superiores a 90%. Uma vez que a lactatemia
se eleva até a MFEL e permanece então estável até o final do teste, os valores
máximos de lactato obtidos em cada teste até exaustão em intensidades abaixo
da MFEL até supra VO2 max são melhor ajustados por uma curva sigmoidal (Figura
1.3).

Figura 1.3: Comportamento da lactatemia para cada intensidade durante 30 minutos ou até a exaustão (menor 30 min).
Reparar o formado sigmóide da curva. Adaptado de Blondel et al., 2001; Renoux et al., 2000; Lepretre et al., 2004.

12
Importância da avaliação do lactato sanguíneo durante o exercício: limiar de
lactato e máxima fase estável de lactato

Inicialmente o limiar anaeróbio foi proposto com o intuito de identificar criteri-

osamente uma intensidade de exercício, que não necessitasse levar indivíduos
cardiopatas ao máximo [WASSERMAN e MACILROY, 1964]. Entretanto, nos últi-
mos anos aumentou o interesse em medir o LL e a MFEL em populações atléticas
[BENEKE, 1995; BILLAT, 1996]. Isso é proveniente de estudos que encontraram
baixas correlações entre o VO2 max e o desempenho, principalmente quando atle-
tas com elevado VO2 max são comparados entre si [HAGBERG e COYLE, 1983].
Além disso, o desempenho aeróbio de atletas treinados pode continuar a melho-
rar mesmo após o VO2 max se estabilizar com o treinamento.
Embora as competições não sejam realizadas em velocidades constantes, a
velocidade associada à MFEL juntamente com aquela correspondente ao VO 2 max,
é determinante na prescrição do treinamento para atletas de resistência [BILLAT
et al., 2003]. A intensidade da MFEL permite a predição da velocidade de corrida
de 30-60 minutos, assim como a intensidade de exercício para todos os esportes
de resistência, os quais são baseados na locomoção humana, (triathlon, remo,
ciclismo, natação, dentre outros) [BENEKE, 1995; BENEKE et al., 2000; BILLAT,
1996]. Se a MFEL permite a predição do desempenho em exercícios com duração
de 30 a 60 minutos, alguns autores têm proposto estimar a intensidade da MFEL
em ciclistas treinados mediante contra-relógios de 5 e 40 km. Harnish et al. [2001]
relataram que a intensidade da MFEL correspondeu a 92% da velocidade média
do contra-relógio de 5 km e não foi significativamente diferente da velocidade mé-
dia do contra-relógio de 40 km.
Além disso, a intensidade da MFEL é também comumente utilizada em trei-
namentos. O uso da intensidade da MFEL como estímulo de treino foi primeira-
mente demonstrada por Billat e colaboradores [2004], os quais mensuraram au-
mentos no tempo até a exaustão de 44 para 63 minutos ou aumentos na distância
de 10 km para 16 km sustentados na intensidade da MFEL. Tal resultado expres-
sivo foi demonstrado com seis semanas de treinamento na intensidade da MFEL.
Além disso, a intensidade do VO2 max teve aumento de 4%.
13
 Philp e colaboradores [2007] utilizaram a intensidade da MFEL como estímu-
lo de treinamento. Um grupo realizou treino contínuo em sua intensidade e o outro
grupo treinou de forma intervalada durante 4 semanas. Os resultados demonstra-
ram que a intensidade da MFEL aumentou em 8% no grupo que fez treinamento
contínuo e 5% no grupo que treinou de forma intervalada. A intensidade do VO2
máximo aumentou em 10% no grupo contínuo e em 6% no intervalado, indicando
que a intensidade da MFEL é um potente estímulo para aumentar os parâmetros
submáximos e máximos do desempenho. Além disso, a sensação subjetiva do
esforço nesta intensidade não é máxima, o que facilita sua execução [SVEDALH
and MACINTOSH, 2003].
Esses achados suportam a idéia que os melhoramentos no desempenho de
endurance são significantemente correlacionados com o desvio do LL para direita
ou com o aumento da intensidade da MFEL. Apesar de outros fatores influencia-
rem o desempenho de endurance (Sistema Nervoso Central) adaptações metabó-
licas periféricas são altamente relacionadas e necessárias para a melhoria do de-
sempenho de endurance [MIDGLEY et al., 2007].

Determinação da máxima fase estável de lactato

A determinação da intensidade da MFEL consiste no aumento da intensida-

de de exercício até que a [Lac] aumente continuamente durante a realização de
exercício de intensidade constante (Figura 1.1). A mensuração da intensidade da
MFEL demanda vários dias de testes retangulares, com acréscimo de intensidade
a cada dia. O critério mais comumente utilizado para se considerar, que determi-
nada intensidade corresponde à MFEL é a variação na lactatemia de, no máximo,
1 mM entre os tempos de 10 e 30 minutos de exercício [HECK et al., 1985]. A
MFEL é o método mais preciso para determinação da intensidade de exercício
onde ocorre o equilíbrio entre a produção e a remoção do lactato, sendo então
considerado como padrão ouro.
Apesar de ser grande a relevância da avaliação da intensidade da MFEL, o
maior problema de sua determinação consiste no envolvimento de vários dias de
testes. Isso faz com que os voluntários compareçam ao laboratório várias vezes,
o que pode não ser compatível com o planejamento do treinamento, além do ele-
14
vado custo financeiro. Esses fatores diminuem sua praticidade [PALMER et al,
1999]. Assim sendo, métodos incrementais foram criados com a finalidade de de-
terminar a intensidade da MFEL em um único dia.

Métodos de predição da MFEL em um único dia

Na tentativa de reduzir o tempo gasto para a avaliação da intensidade da

MFEL, diversos testes que identificam o início do acúmulo do lactato no sangue
foram criados e comparados com a intensidade da MFEL. Billat [1996] e depois
Bacon e Kern [1999] validaram um protocolo que permite a estimativa imediata da
MFEL utilizando apenas dois testes de intensidades submáximas com duração de
20 minutos em corredores fundistas. Estes dois testes foram realizados entre 60 e
90% da potência correspondente ao VO 2 max e foram separados por 40 minutos de
repouso passivo. A intensidade dos dois testes de 20 minutos foi escolhida sendo
uma intensidade abaixo e outra acima da concentração fixa de 4 mM (OBLA) de-
terminado em um teste progressivo que também mediu o VO 2 max. A validade des-
te método foi questionada devido o mesmo ser baseado em cinética linear de ele-
vação da lactatemia, enquanto segundo Hughson e colaboradores [1987] e tam-
bém Oyono-Enguelle e colaboradores [1990], essa cinética seria exponencial.
Apesar da praticidade, este protocolo não tem sido muito utilizado em estudos
científicos.

Predição da MFEL pela determinação da intensidade do OBLA ou 4 mM

O ponto de início do acúmulo de lactato no sangue, cuja abreviação em in-

glês é OBLA (onset of blood lactate accumulation) foi definido como a intensidade
de exercício em que a concentração de lactato atinge 4 mM durante um teste in-
cremental [SJODIN et al., 1981]. Sua determinação é realizada por meio de teste
incremental com a utilização da interpolação linear para determinar a intensidade
de exercício correspondente a 4 mM.

15
Figura 1.4: Teste incremental para determinação da intensidade do OBLA (seta). Notar a utilização da técnica de interpola-
ção linear nas concentrações abaixo e acima de 4 mM. Adaptado de Kinderman et al., 1979.

A base teórica do OBLA foi desenvolvida por Kinderman e colaboradores

[1979], os quais reportaram que atletas de elite poderiam sustentar uma intensi-
dade de exercício associada a uma concentração sanguínea de lactato de 4 mM
por um tempo mínimo de 45 a 60 minutos. Entretanto, foi ignorado o fato de que
sob intensidade constante, a lactatemia é diferente daquela obtida em teste in-
cremental. Além disso, embora o valor de 4 mM represente a média de lactato do
grupo, houve grande variabilidade entre os atletas. Desta forma, a determinação
da MFEL pelo OBLA ignora o princípio da individualidade biológica [MACINTOSH
et al., 2002]. Um exemplo disso é a grande amplitude na concentração de lactato
(3 a 9 mM) encontrada quando testes são realizados na intensidade da MFEL.
Desta forma, o problema maior do OBLA reside na insensibilidade das diferenças
fisiológicas [MACINTOSH et al., 2002].
Muitos fatores podem afetar a cinética da produção e remoção de lactato
durante o exercício. Segundo [SCHNEIDER et al., 2000], a própria massa muscu-
lar ativa é um fator que pode influenciar diretamente a concentração estacionária
de lactato. De Agostini [2000] verificaram a existência do LL em exercício resistido
em voluntários treinados e não treinados no exercício Leg Press (grande massa
muscular ativa) e na rosca direta (pequena massa muscular ativa). O LL encon-
trado pela técnica do quociente de lactato determinou intensidade média de 30%
de 1 RM. O valor máximo da lactatemia encontrado no exercício rosca direta foi
16
inferior a 4 mM, indicando que o OBLA não seria válido neste exercício. Além da
massa muscular envolvida, outros fatores como o nível de treinamento e a dispo-
nibilidade de glicogênio também alteram a intensidade do OBLA.
Há evidências para refutar a idéia de usar a intensidade de exercício no
OBLA para predizer a intensidade na MFEL. Em alguns casos, não foi encontrado
relacionamento significativo entre a intensidade no OBLA e a na MFEL [AUNOLA
e RUSKO, 1992] e em remadores a intensidade no OBLA foi significativamente
maior que a intensidade na MFEL [BENEKE, 1995].

Predição da MFEL pela determinação da intensidade do limiar anaeróbio in-

dividual

O limiar anaeróbio individual (IAT), proposto por Stegmann e colaboradores

[1981], foi um dos primeiros métodos realizados em um único dia para determinar
a intensidade de exercício na MFEL. Teoricamente, a intensidade de exercício no
IAT é representativa da maior intensidade de exercício onde a taxa de produção
de lactato seria igual à de remoção. Diferentemente dos outros testes incremen-
tais, o IAT necessita também da cinética de recuperação do lactato. Após a de-
terminação do lactato de exercício e de recuperação (até 10 minutos) e a criação
da curva (lactato x carga), uma linha horizontal é criada na lactatemia final do e-
xercício até a de recuperação (Figura 1.5). A partir deste ponto, a tangente para
baixo é criada com a fase de aumento da concentração de lactato. O ponto de
intersecção da curva de aumento da lactatemia com a linha tangente é denomi-
nada de IAT. Essencialmente, o IAT representa um modelo de difusão derivado
da cinética do lactato obtida durante teste incremental e sua recuperação
[STEGMANN et al., 1981].

17
Figura 1.5: Teste incremental para determinação do IAT. Notar a utilização da tangente da recuperação até a fase crescen-
te do lactato durante o teste. A SETA indica o encontro entre a tangente com a lactatemia, demonstrando a intensidade do
IAT. Adaptado de Stegmann et al., 1981.

O modelo do IAT assume que a taxa e o gradiente de difusão são máximos

no final do teste incremental e que ambos diminuem durante a recuperação. Além
disso, também pressupõe que a taxa de declínio da lactatemia durante a recupe-
ração passiva representa a habilidade de remoção do lactato. Entretanto, em vo-
luntários onde a taxa de remoção do lactato é rápida, a intersecção da tangente
ocorrerá em grande concentração de lactato, representando elevada intensidade
de exercício [SVEDALH e MACINTOSH, 2003].
Além disso, alteração na carga inicial do teste, na duração dos estágios e na
intensidade final produz significativas mudanças na intensidade do IAT
[MCLELLAN, 1985; MCLELLAN et al., 1991; URHAUSEN et al., 1993]. Em con-
trapartida, sob condições idênticas, a reprodutividade do IAT é alta [MCLELLAN e
JACOBS, 1993]. Atletas de endurance têm sido capazes de suportar 30 minutos
até a exaustão na intensidade do IAT em ciclismo e 45 minutos em corrida na es-
teira [URHAUSEN et al., 1993]. Em outros trabalhos os voluntários não consegui-
ram manter a concentração de lactato estável na intensidade do IAT [MCLELLAN
e JACOBS, 1993]. A grande vantagem deste método é sua individualização e sua
capacidade de realização em um único dia. Além disso, o teste do IAT não exige
necessariamente exaustão, embora concentração de lactato maior que 6 mM seja

18
recomendada [URHAUSEN et al., 1993]. Como preditor da MFEL, a relação entre
IAT e MFEL é variável. Segundo BENEKE [1995], o IAT ocorre em maior intensi-
dade de exercício, enquanto que Urhausen e colaboradores [1993] demonstraram
que o IAT é válido para estimar a MFEL, embora nem sempre as duas intensida-
des coincidam em todos os voluntários.

Predição da MFEL pela determinação da intensidade do Dmax e do Dmax modi-

ficado

Cheng e colaboradores [1992] determinaram a maior distância perpendicular

da curva da lactatemia até a linha que conecta a concentração inicial e a final do
lactato e a denominaram com D max. Na tentativa de eliminar a influência da carga
inicial, Bishop e colaboradores [1998] modificaram o Dmax conectando a linha do
primeiro aumento da [lactato] com a lactatemia da carga final.

Figura 1.6: Teste incremental para determinação do D max. Notar a utilização da linha perpendicular entre a concentração
inicial e final da lactatemia. A carga de exercício que correspondente à concentração de lactato mais distante desta linha e
demonstrada pela SETA é considerada como intensidade da MFEL pelo método D max. Adaptado de Cheng et al., 1992.

A determinação da MFEL pelo Dmax é dependente da intensidade inicial do

teste, além da capacidade de resistir à exaustão dos voluntários, uma vez que o
Dmax é dependente também da concentração de lactato da última carga. Segundo

19
Bishop e colaboradores [1998], o Dmax modificado mostrou alta correlação com o
desempenho de contra-relógio de 1 hora em ciclistas do gênero feminino.

Predição da MFEL pela determinação da intensidade do lactato mínimo

Tegtbur e colaboradores [1993] propuseram a intensidade do lactato mínimo

para predizer a MFEL. O teste consiste na aplicação de uma carga supramáxima
para elevar a lactatemia. Após 8 minutos de descanso passivo com a finalidade
de promover o equilíbrio entre as concentrações muscular e plasmática de lactato,
é iniciado o teste incremental. Nos primeiros estágios de baixa intensidade, a lac-
tatemia começa a diminuir, indicando ocorrência de mais remoção do que produ-
ção de lactato. Entretanto, em determinada intensidade, a concentração de lactato
passa a aumentar, o que ocorre até a exaustão voluntária. A intensidade de exer-
cício correspondente à menor concentração de lactato durante o teste incremental
é denominada de intensidade do lactato mínimo e é utilizada para predizer a
MFEL.

Figura 1.7: Teste incremental para determinação do lactato mínimo. Notar o diferente formato da cinética da lactatemia, em
virtude da carga induzida de hiperlactatemia. A SETA indica a intensidade do exercício que coincide com a menor concen-
tração de lactato é denominada de lactato mínimo. Adaptado de Tegtbur et al., 1993.

A intensidade do lactato mínimo é representativa da intensidade da MFEL,

uma vez que o relacionamento entre as duas foi verificado por meio da aplicação
20
de 2 testes de corrida (8 km) com intensidade constante, uma acima e outra abai-
xo do estado estável de lactato [TEGTBUR et al., 1993].
O trabalho de Tegtbur e colaboradores [1993] foi o único que utilizou um tes-
te incremental com acidose prévia. Esse tipo de protocolo alterou o formato expo-
nencial conhecido das curvas da lactatemia para formato em U. Segundo Foxdal
e colaboradores [1996] e Carter e colaboradores [1999], sua reprodutividade é
dependente do protocolo, uma vez que variações na duração dos estágios, nos
incrementos de cargas e na escolha da carga inicial do teste incremental, alteram
sua intensidade. Entretanto, Macintosh e colaboradores [2002] afirmaram que a
intensidade do lactato mínimo é confiável e válida para predizer a intensidade da
MFEL.
Algumas vantagens deste método são: (1) a utilização de indução de a aci-
dose prévia como teste para avaliar a potência anaeróbia; (2) a realização de todo
o teste em apenas um único dia; (3) utilização de um modelo matemático, o que
elimina a subjetividade do teste; e (4) o fato da intensidade do lactato mínimo não
ser influenciada pela depleção de glicogênio [SVEDAHL e MACINTOSH, 2003].
Uma desvantagem é o elevado esforço realizado para induzir a acidose, o que
limita sua utilização em diversas populações [CARTER et al., 1999].

Efeito da temperatura no desempenho aeróbio

O aumento da temperatura corporal durante o exercício é uma adaptação

fisiológica benéfica ao desempenho, uma vez que melhora a força contrátil, o a-
porte de oxigênio aos músculos ativos, a atividade enzimática, dentre outros fato-
res [NYBO, 2008]. Entretanto, em ambiente quente, onde a produção interna de
calor ultrapassa a capacidade de removê-lo, a hipertermia torna-se fator indutor
da fadiga. O aumento na temperatura de 21 para 26 °C durante a realização do
exercício causa grande estresse fisiológico [NIELSEN et al., 1997] e, sob essas
condições, o desempenho em relação à produção de potência e ao tempo até a
exaustão é comprometido [HARGREAVES & FEBBRAIO, 1998; KAY et al., 2000].

21
Estudos em esforços de intensidade máxima

Um dos primeiros trabalhos realizados neste assunto foi o de Pirnay e cola-

boradores [1970], o qual avaliou o VO2MÁX de 8 voluntários sob exposição prolon-
gada ao (1) calor (em temperatura ambiente de 46 °C) e (2) a um ambiente ter-
moneutro (temperatura ambiente de 16 °C). Os resultados demonstraram redução
de 25% no VO2MÁX e na carga máxima de trabalho. Entretanto, não houve diferen-
ça significativa no VO2MÁX, quando os voluntários realizaram o teste de forma a-
guda nestas temperaturas, sem exposição controlada.
Saltin e colaboradores [1972] submeteram 4 voluntários até a exaustão nas
intensidades de 90, 100 e 115% do consumo máximo de oxigênio em ambiente
neutro e hipertérmico (40 °C). O tempo até a exaustão foi reduzido em 90%, le-
vemente reduzido em 100%, e inalterado em 115% do VO2 max.
Nybo e colaboradores [2001] verificaram o efeito da hipertermia com e sem
desidratação na cinética do VO2 max. Os resultados demonstraram que em exercí-
cio de alta intensidade ocorreu significante redução do desempenho devido à ele-
vação da temperatura da pele e da temperatura central. A prevenção da desidra-
tação não evitou a redução do VO2 max.
Gonzales-Alonso e Calbet [2003] avaliaram 8 voluntários com a finalidade de
verificar quais fatores limitam o VO 2 max em ambiente neutro e hipertérmico. Os
resultados demonstraram que o estresse térmico em ambiente quente reduziu o
VO2 max em 8% e o tempo até a exaustão em 28%. A causa provável dessa redu-
ção foi a dilatação dos vasos cutâneos, o que desvia o débito cardíaco da muscu-
latura ativa para a pele, reduzindo assim o fluxo sanguíneo muscular e a entrega
e utilização de oxigênio na periferia. Além disso, a dilatação dos vasos cutâneos
pode aumentar o volume sanguíneo na pele, reduzindo o retorno venoso e o débi-
to cardíaco máximo.
Rowel e colaboradores [1966] demonstraram que, durante exercício intenso
no calor, o débito cardíaco (DC) foi reduzido em 1,2 L/min em relação ao grupo
controle. Essa redução deve ter sido o fator responsável pela diminuição obser-
vada de 0,25L/min no VO2 max.
Numerosos estudos examinaram a influência da desidratação em relação ao
VO2 max. Em ambiente normotérmico, pequeno déficit de água (< 3%) não altera o
22
VO2 max, entretanto, grandes perdas hídricas promovem reduções significantes no
VO2 max [BUSKIRK et al., 1958]. Já em ambientes hipertérmicos, pequenos ou
moderados déficit de água promovem grande redução no VO2 max. Desta forma,
pode-se concluir que ocorre diminuição desproporcional do VO 2 max em relação ao
déficit de água [SAWKA et al., 2001] e, com isso, o estresse promovido pelo calor
ambiental possui claro efeito potencial na redução do VO2 max proporcionada pela
desidratação [SAWKA et al., 2001].

Estudos em esforços de intensidade sub-máxima

O desempenho submáximo também é reduzido pela elevação da temperatu-

ra ambiente. Em provas de maratona, o tempo final aumenta em 1 minuto para
cada 1 °C de aumento na temperatura do ar entre 8 e 15 °C [ZHANG et al., 1992].
Galloway e Maughan [1997] submeteram voluntários até a exaustão em bicicleta
ergométrica em 4 temperaturas diferentes (4, 11, 21 e 31 °C). Os voluntários re-
sistiram 45% mais tempo à temperatura de 11 °C em relação à de 31 °C. Diversos
outros trabalhos demonstraram redução do desempenho aeróbio prolongado em
intensidades de 40 a 80% do VO2 max acima de 1 hora de duração [GONZALEZ-
ALONSO et al., 1999; NYBO et al., 2001].
Entretanto, a exposição à temperatura de 43 °C reduziu o tempo de esforço
até a exaustão em 25%. Ao mesmo tempo, a desidratação de 2,5% também re-
duziu o desempenho em 25%. Desta forma, a somatória dos dois efeitos juntos,
poderia reduzir drasticamente o desempenho de endurance [SAWKA et al., 2001].
Diversos trabalhos verificaram o efeito da desidratação na atividade submá-
xima de média e longa duração. Armstrong e colaboradores [1985] estudaram o
efeito do déficit hídrico no desempenho de corrida de média e longa duração. A
desidratação promoveu diminuição de 2% na massa corporal e de 11% no volume
plasmático. Houve 5% de redução do desempenho nas distâncias superiores a 5
km e de 3% na distância de 1500 m. Além deste trabalho, outros autores também
encontraram reduções no desempenho submáximo causados pela desidratação
[BELOW et al., 1995].
É bem conhecido que a desidratação aumenta a temperatura central como
conseqüência de sua ação no sistema cardiovascular e termoregulatório. Entre-
23
tanto, ainda há dúvida se a elevação da temperatura central induzida pelo exercí-
cio ocorre em função da carga absoluta ou da carga relativa de trabalho
[GONZÁLEZ-ALONSO et al., 2008]. As potências aeróbias máximas (Pmax) alcan-
çadas em testes incrementais nos estados hidratado e desidratado nos mesmos
indivíduos foram de 250 e 200 W, respectivamente. Desta forma, a carga de 125
W, que representa 50% da Pmax no estado hidratado, equivale a 63% daquela do
estado desidratado. Assim, o aumento da temperatura central na condição desi-
dratada poderia ser interpretado como conseqüência da elevação da temperatura
central na mesma carga relativa, o que não é verdade, apesar da carga absoluta
ser a mesma.
Segundo Kenney e Johnson [1992], a magnitude na qual o exercício induz
aumento da temperatura central é dependente do esforço relativo e não do abso-
luto; assim, a idéia de que a elevação da temperatura central é conseqüência di-
reta da taxa de produção de calor pode não ser verdadeira. Entretanto, segundo
González-Alonso e colaboradores [2008], a carga absoluta de trabalho determina
a quantidade de calor produzida pelo exercício e a carga absoluta determina a
capacidade de dissipar o calor do corpo. Como o treinamento pode diminuir a
carga relativa, o mesmo ajuda a aumentar a dissipação do calor produzido, fa-
zendo com que atletas elevem menos a temperatura corporal em relação a não
treinados para mesma carga absoluta de exercício.

Hipótese da temperatura central crítica

A obtenção de uma temperatura corporal central crítica tem sido proposta

como fator limitante do exercício submáximo prolongado [NIELSEN et al., 1993].
Segundo o mesmo autor, evidências indicam que quando a temperatura central
atinge 40 °C instala-se a fadiga. MacDougall e colaboradores [1974] mostraram
que humanos tornam-se exaustos quando atingem 39,4 °C de temperatura cen-
tral, mesmo com variadas taxas de aumento de calor. González-Alonso e colabo-
radores [1999] demonstraram que voluntários treinados entram em fadiga a 40 °C
de temperatura central e 41 °C de temperatura muscular. Essas temperaturas co-
incidem com freqüência cardíaca máxima e com percepção de esforço acima de
19 na escala de Borg.
24
 O conceito de que uma temperatura central crítica absoluta exista como fator
principal para desencadear a fadiga é combatido por estudos que manipulam a
temperatura central em exercícios máximos e supra-máximos [NYBO et al., 2001].
Recentemente, trabalhos demonstraram que quando a exaustão ocorre em tem-
peraturas centrais de 39 a 40 °C, ela é precedida por grandes reduções no fluxo
sanguíneo sistêmico, cerebral e muscular, promovendo redução do aporte de oxi-
gênio e do metabolismo aeróbio nos músculos ativos [GONZÁLEZ-ALONSO e
CALBET, 2003; MORTENSEN et al., 2005]. Essas alterações sugerem que a inte-
ração entre a hipertermia e o estresse cardiovascular, em vez de uma temperatu-
ra crítica absoluta, determina a fadiga em exercícios (1) prolongados sub-
máximos e (2) de alta intensidade e curta duração [GONZÁLEZ-ALONSO et al.,
2008].

Mecanismos da indução de fadiga por hipertermia

Há no mínimo 3 possibilidades pela qual a hipertermia local e sistêmica pode

direta ou indiretamente prejudicar a capacidade de realização do exercício aeró-
bio. A primeira é que a elevação da temperatura muscular poderia prejudicar dire-
tamente a função mitocondrial e a taxa metabólica dos músculos ativos. A segun-
da é que a elevação da temperatura cerebral poderia reduzir a excitabilidade cen-
tral e diminuir a ativação muscular voluntária [NIELSEN et al., 2001]. E a terceira
possibilidade é que a elevação da temperatura do miocárdio e o estresse térmico
sistêmico poderiam indiretamente diminuir o funcionamento da bomba cardíaca e
reduzir o DC e o fluxo sanguíneo para a massa muscular ativa, comprometendo o
metabolismo muscular [GONZÁLEZ-ALONSO & CALBET, 2003; MORTENSEN et
al., 2005].
Diversos trabalhos evidenciam que alterações funcionais em muitos siste-
mas, incluindo músculo esquelético, coração e Sistema Nervoso Central (SNC)
são associados com a indução da fadiga por hipertermia. Neste sentido, a exaus-
tão é precedida por disfunção desses sistemas em resposta ao estresse térmico,
cardiovascular e metabólico, antes da temperatura central atingir um nível crítico
elevado [GONZÁLEZ-ALONSO e CALBET, 2003; NIELSEN et al., 2001;
GONZÁLEZ-ALONSO et al., 1999].
25
Proposição de um novo método para avaliação da endurance aeróbia

Testes incrementais têm recebido algumas críticas devido a sua dependên-

cia com o protocolo utilizado [CARTER et al., 1999; SVEDAHL & MACINTOSH,
2003; TOKMAKIDIS et al., 1998], além de depender de um único ponto de quebra
na curva da lactatemia [BENTLEY, 2001; BENTELEY, 2007]. Em adição, Yoshida
[1984], demonstrou que a cinética de difusão do lactato pode confundir o resulta-
do de um teste incremental devido à duração de cada estágio não coincidir com o
tempo necessário para completa distribuição do lactato no sangue. Devido a estas
críticas, a aplicação prática destas medidas deve ser vista com cautela [FAUDE et
al., 2009]. Billat e colaboradores [1996] sugeriram a estimativa da MFEL pela apli-
cação de duas cargas de 20 minutos nas intensidades de 65 e 85% da velocidade
aeróbia máxima (VAM), separadas por 40 minutos de recuperação passiva. A va-
lidade deste método também foi questionada, uma vez que o mesmo foi baseado
numa cinética linear de aumento da concentração de lactato em relação à intensi-
dade do exercício, enquanto acredita-se que o padrão de aumento da lactatemia
seja exponencial [HUGSON et al., 1987; OYONO-ENGUELLE et al., 1990].
O modelo de aumento exponencial do lactato sanguíneo também é forte-
mente criticado, uma vez que essa exponencialidade é decorrente da soma das
concentrações observadas entre os estágios subseqüentes do teste incremental,
devido ao incompleto tempo de difusão da célula para o sangue [YOSHIDA,
1984]. Além disso, a natureza exponencial de uma curva indica que a variável
tende a aumentar até o infinito, o que não é verdade para o lactato, uma vez que
a própria catálise pela LDH vai-se saturar com o aumento da oferta de piruvato
pela glicólise. Desta forma, a análise da curva da lactatemia como exponencial
deve levar a erro de interpretação.
Por outro lado, quando as mesmas intensidades utilizadas no teste incre-
mental são realizadas até a exaustão, uma a cada dia, nenhuma diferença é no-
tada na concentração máxima de lactato para cada intensidade, acima de 90% do
VO2 max, e estes valores não diferem dos encontrados na exaustão de um teste
incremental [BLONDEL et al., 2001; RENOUX et al., 2000; LEPRETRE et al.,
2004], indicando que independentemente do protocolo utilizado, cada indivíduo
possui uma concentração máxima de lactato em intensidades do VO 2 max ou pró-
26
ximas dele. Além disso, nas cargas inferiores a intensidade da MFEL (baixa inten-
sidade), há pequeno aumento inicial na lactatemia. Após este breve aumento, a
concentração de lactato retorna aos valores basais. Na intensidade da MFEL, a
concentração de lactato aumenta no início e depois se estabiliza, mantendo-se
constante até o final do exercício [BOSQUET et al., 2002].
Quando cada concentração máxima de cada teste em diferentes intensida-
des é utilizada para criação de um gráfico único, a cinética da lactatemia exibe
formato sigmóide. Numa sigmóide, o X50 representa a intensidade de exercício
onde a lactatemia atinge 50% de seu acúmulo máximo. Nesse ponto ocorre alte-
ração da natureza da curva de exponencial para hiperbólica, dando a curva com-
pleta sua característica sigmoidal. Esse padrão de saturabilidade no comporta-
mento da lactatemia coincide com o perfil de funcionamento da enzima LDH, res-
ponsável por sua formação do lactato.
É com base nestas considerações que o presente trabalho objetiva analisar
as curvas da lactatemia em protocolos incrementais a partir de ajustes estatísticos
não lineares para sigmóides, com a utilização das intensidades de exercício em
X20 e X50 para avaliar o desempenho aeróbio e a proposição de X50 como novo
método para determinar a intensidade da MFEL.

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38
Capítulo 2

ANALYSIS OF DIFFERENT METHODS FOR LACTATE THRESHOLD

IDENTIFICATION IN RESISTANCE EXERCISE: A NOVEL METHOD
PROPOSITION

39
ANALYSIS OF DIFFERENT METHODS FOR LACTATE THRESHOLD
IDENTIFICATION IN RESISTANCE EXERCISE: A NOVEL METHOD
PROPOSITION

ABSTRACT

The aim of the present study was to compare five methods of lactate thre-
shold (LT) identification in resistance exercise (RE). Eight healthy males, non se-
dentary (25.6 ± 6.61 years old, 78.6 ± 3.48 kg of body weight) performed an in-
cremental test in leg press resistance exercise until the voluntary exhaustion. The
initial workload was 10% of one maximal repetition (1RM), with 5% of increment
each stage. The stages were consisted of 1 min with 1 min of rest between them.
Blood samples of 25 l, were collected for blood lactate concentration ([Lac]) anal-
ysis. Five methods for LT intensity identification in RE were compared with each
other: Lactate quotient (LQ); fixed point of 4 mM (OBLA); visual inspection (VI);
1mM of [Lac] above the baseline (OPLA); and the novel method, proposed by our
study, consisted in 20% of the maximum [Lac] during the incremental test (X 20). It
was possible to identify the LT using all the five methods. However, the ANOVA
showed significant difference between the OBLA and all the methods, and this
suggest that this method overestimates the exercise intensity at the LT. Based in
our results, we concluded that the X20 was not statistically different from the QL, IV
and OPLA. Morever the incremental protocol with 1 minute of exercise bout, 1
minute of rest between the bouts and increment of 5% of the 1RM, was valid for
LT identification using all the methods.

Key-words: Incremental protocol, one maximal repetition, voluntary fatigue

40
INTRODUCTION

Since the first studies from Hollman and Hettinger, and the “Anaerobic Thre-
shold” introduction by Wasserman and Mcllory [31], many studies proposed differ-
ent methods to evaluate the lactate kinetics during different modes of exercise
[2,7,9,11,13,14,24,25,27]. Although this threshold has consistence and was vali-
dated, the choice of the initial workload/intensity, the incremental stages duration,
and/or the effort increment, can modify this parameter determination. Therefore,
some authors criticized these protocols and their validity [6,16,26,29]. Moreover,
according to Shephard and Astrand [23], a specific criterion for the lactate inflec-
tion point determination, specially in exercises that use a larger muscle mass, is
very hard to identify. So this could explain the differences found in some studies
regarding the methods of determination of lactate threshold. Tokmakidis and col-
leagues [29] compared several methods for LT identification and showed that al-
though all the methods studies by their study are correlated, their results could not
find an unique LT point.
In spite of the lack of agreement among the studies regarding an exact LT
determination criteria, the LT has an important significance. The LT represents an
exercise intensity corresponding to a substantial and nonlinear increase in blood
lactate concentration [Lac], which represents an anaerobic metabolism contribu-
tion acceleration due the increase of the exercise intensity [15].
All these studies aforementioned were performed in dynamic and non-
resistance exercises, and only a few studies were performed to analyze the [Lac]
kinetics during an incremental test in resistance exercises (RE) [1,17,18,22,23].
Although these studies used different protocols in the incremental test, they identi-
fied the LT in this kind of exercise, with similar [Lac] behavior during incremental
test as in the other kind of exercises. Interestingly all the studies identified the LT
in RE around 30-40% of one maximum repetition (1RM).
Nevertheless, only two methods were used in these studies for LT identifica-
tion and some of them used a large amount of increment (10% of 1RM) during the
incremental test, which may decrease the test sensibility to identify the LT. So the
aims of this study were: a) to use a progressive exercise protocol with smaller in-
crements and higher sensitivity to identify the LT during incremental test in RE; b)
41
to suggest a new method to identify the exercise intensity at the LT, comparing it
with four other methods already described in the literature.

METHODS

Experimental approach to the problem

An incremental test in the leg press was performed 30 min after the individual
1RM identification, to verify if the incremental test protocol sensitivity for LT inten-
sity identification in RE. This intensity was identified using four methods already
suggested and by a novel method proposed in this study.

Subjects
Eight healthy male non smokers (25.6 ± 6.6.yr of age and 78.7 ± 3.5 kg of
body mass), performed an incremental test in RE until the voluntary exhaustion.
The resistance exercise used was the 45º leg press (GNSport) which was chosen
because it involves more than one joint in the execution of the movement [10]. All
the participants were instructed not to exercise or ingest alcohol or caffeine for at
least 24 hours before all the tests, and to ingest the last meal at least 2 hours be-
fore performing each test. They were tested after read and sign an informed con-
sent form.

Procedures
The 1 RM test performed according to Brown and Weir [5], was followed by
the incremental test in RE after 30 min of rest. The initial intensity was fixed at
10% of 1 RM for all participants, with 5% of 1 RM of increment until the voluntary
exhaustion. The stages consisted of 1min with 1 min of rest interval between each
bout. The resting interval was used for blood collection, and also to change and/or
add the weights on the exercise machine. The exercise pace was always estab-
lished in 20 repetitions per minute, and it was controlled by noise signals. The test
finished when the participants could not perform the correct number of repetitions
per stage, within the time established in this study. All the participants could per-
form the exercise tests, and the tests were performed within two weeks.
42
Measurements of blood lactate concentrations:
At rest and after each stage during the incremental test, 25 μL capillary blood
sample was taken from the ear lobe and placed in Eppendorf tubes containing 50
μL of NaCl 1%, for blood lactate analysis (YSI 1500 STAT, Yellow Spring Instru-
ments, OH, USA). The [Lac] are shown in mmol/L.
Lactate threshold determination:
Four methods, previously described in the literature, were used for LT inten-
sity determination, using the [Lac] kinetics during the incremental test in resistance
exercise as describe below (Figure 2.1):

****Here Figure 2.1****

a) The Lactate quotient (LQ), that represents the [Lac] value divided per the
respective workload, and identifying an minimum point plotting the LQ and
the workload (%1RM) [30];
b) OBLA - [Lac] fixed point of 4 mM during the incremental test [11,24];
c) Visual inspection (VI) of the workload just before an substantial and nonli-
near increase in [Lac] during the incremental test [13];
d) OPLA - An exercise intensity that causes an [Lac] increase of 1 mM above
the baseline [9].

Besides these methods, our study suggested a fifth method for LT identifica-
tion, the X20. This method identifies an exercise intensity correspondent to 20% of
the maximal [Lac], which is usually found in the last stage of the incremental test.
The X20 was identified by the software Origin 6.0 (Microcal Inc.) from the depen-
dent line between the [Lac] and exercise intensity, showed by the Boltzman equa-
tion:
Li  L m
L  Lm (1),
1  e(x  x 50 )/dx
where Li e Lm represent the lowest and the highest [Lac] value respectively, X 50 is
the exercise intensity at the middle transition point of the curve, and dx represents
the variation amplitude of the exercise intensity correspondent to the [Lac] incre-
ment.

43
Statistical analyses

The descriptive statistics are expressed as mean ± standard deviation (SD). The
ANOVA one-way was used for the methods comparison using the Tukey as a
post-hoc. The agreements between variables were analyzed by the Bland and
Altman method [3]. The significance level was p<0.05.

RESULTS

Table 1 shows the relative values ± SD of the exercises intensities at the LT

(% 1 RM) for each of the five methods used in this study.

****Here Table 2.2****

There was a significant difference between the OBLA and all the other me-
thods.

Figure 2.2 illustrates the means values between the X20 and IV (a) and X20
and LQ (x axis) plotted with the individuals difference between the methods (y
axis), according with Bland and Altman [3] technique. The mean differences ±
agreement limits, between the methods, were 1.7 ± 11.7% of 1 RM between VI
and X20, and of 3.6 ± 11.2% of 1 RM between the methods LQ and X20.

****Here Figure 2.3****

DISCUSSION

The main finding of our study was that the protocol with stages of 1 min bouts
of exercise and 1 min of resting interval between them, and increment of 5% of 1
RM, was valid for the LT exercise intensity identification using the LQ, VI, X 20 and
OPLA methods. According to the [Lac] kinetics during the incremental test it was
44
possible to LT determination using all the methods that we studied. The mean val-
ues were between a minimum of 33.13 ± 5.30% of 1 RM for LQ and a maximum
value of 43.76 ± 6.36% of 1 RM, using the OBLA. Barros and colleagues [1] com-
pared the LT intensity determined in two different exercise intensities in both
trained and untrained subjects. There was no statistical difference between these
groups, showing the LT results between 28.00  6.32% of 1 RM and 32.22 
6.66% of 1 RM for untrained and trained participants respectively. Our results
showed the LT intensity of 33.13 ± 5.30% of 1 RM (LQ) and 35.00 ± 6.55% of 1
RM (VI), using the same methods as Barros and colleagues [1]. Although the
workload increment of 10% of 1 RM, used by the aforementioned study, had de-
creased the test protocol sensitivity for LT identification, there was no difference
between these methods in both studies. Oliveira and colleagues [18] and Moreira
and colleagues [17] improved the test sensibility using a protocol with 5% of 1 RM
of increment in the stages close to the LT (initial stage of 10% followed by 20, 25,
30, 35, 40, 50, 60, 70, 80, and 90% of 1 RM), and they found results between 36.6
± 1.4% and 31.2% of 1 RM (18), and between 29.9% ± 8.5% 1 RM and 36.7 ±
5.6% of 1 RM [17]. Although the participants from the Moreira and colleagues [17]
study were type 2 diabetics, the LT results that was found, were close to the range
that were found in our study. Apparently, the shorter rest interval between the
bouts during the incremental test used in this study (1min, instead of 2 min used
by the other studies), did not have any effect in change the LT identification.
Puga and colleagues [21,22] compared different methods used for LT identi-
fication in RE using the QL and VI methods in the leg press and elbow flexion ex-
ercises, in both trained and untrained participants. They found no statistical differ-
ences between the VI and QL applying a polynomial model using all the stages,
the 5 initial stages and three stages (below, above and at LT). These results cor-
roborate our results, indentifying the LT around 30 and 40% of 1RM, even though
performed with 10% of 1RM increments, in two kinds of exercise and in different
participants training levels.
Those results are in agreement with Villiger and colleagues [30] results,
whose suggested that during a dynamic resistance muscular action, the metabolic
demand is aerobic only in workloads above 30% of 1RM. Moreover, Tesch and

45
Karlsson [27], results showed no [Lac] increases in workload below 25% of 1RM,
but only above it.
The main reason suggested by some authors to explain why the LT occurs in
workload around 30% of 1 RM in resistance exercise, is hemodynamic effects,
because in this exercise intensity, the intramuscular pressure is higher than the
capillary pressure, so causing vessels colapse, decreasing the oxygen delivery
leading to hypoxemia and to a larger contribution of the anaerobic glycolytic meta-
bolism [12,19,30]. Petrofsky and Herdershot (20) showed in their experiment, that
increasing the arterial pressure above the intramuscular levels, that the endurance
time was increased in exercise intensities until 60% of 1 RM. Based on their re-
sults the authors suggested that a higher capillary pressure results in an appropri-
ate oxygen delivery to the mitochondria and thus, the initial time of the anaerobic
metabolism was delayed.
Several methods have beem suggested to evaluate the exercise intensity at
the LT [26,29], however only two (LQ and VI) were used and compared in resis-
tance exercise [1,17,18, 21,22]. Although these studies did not find a coincident LT
intensity point, there were no statistical differences between them. When we used
the X20, the LT intensity was 36.73 ± 6.71% of 1 RM, and it was not different from
the other methods used. Moreover, these results were within the agreement limits
of two standard deviations above and below, according to the Bland and Altman
[3] technique, when comparing the X20 individual results with the LQ and VI indi-
vidual results, as showed in figure 2.
The X20 used all the [Lac] kinetics to establish the exercise intensity corres-
ponding to 20% of the [Lac] between the baseline and maximum values. This me-
thod is based in a mathematical model, so it became useful for LT identification,
because the exercise intensity determination is not affected by the researcher
“feeling” or experience.
From the five methods used in this study, only the OBLA was significantly
higher than the others methods. Similar results were found by De Agostini [8], who
found the LT intensity by the OBLA higher than the LQ and VI in both trained and
untrained subjects. It is possible that the resistance muscle contraction can
change the fixed [Lac] to express the LT in this kind of exercise. Moreover when
comparing different kinds of exercises (leg press or elbow flexion) the [Lac] at the
46
LT is altered, and the [Lac] at the exhaustion workload is completely different. Our
laboratory found that during the elbow flexion resistance exercise, the [Lac] at the
exhaustion workload was less than 4 mM (unpublishad data). This can be ex-
plained by the lower muscle mass used in this exercise, which produce less lac-
tate and use smaller upper limbs muscles comparing with the muscles used by the
lower limb exercises.

CONCLUSION

We concluded that the exercise protocol with one minute of stage and one
minute of rest interval between each stage, and increment of 5% of 1 RM, is valid
to LT exercise intensity determination in resistance exercise. The OBLA method
did not show similar results as the others methods, so is not appropriate to LT
identification in resistance exercise. The protocol suggested by our study ap-
peared to be a valid and good method to LT identification in this kind of exercise.

PRACTICAL APPLICATIONS

Several ultra endurance sports, such as IRONMAN ® triathlon, adventures

races, cycling, marathon and ultra-marathon, etc, need appropriate local muscular
performance maintenance. So the local aerobic endurance increases and an initial
fatigue delay are the goal of many endurance exercise training programs using
resistance exercise. The LT intensity found around 30% of 1RM, suggests a great
aerobic metabolism contribution in this exercise intensity, suggesting that exercise
intensity should be prescribed for endurance athletes who are willing to improve
their local muscular endurance.
Furthermore, as suggested by Moreira and colleagues (17), the exercise in-
tensities close to the LT, identified in the resistance exercise, can be very impor-
tant for exercise training prescription for special populations such as (diabetics,
sedentary, cardiac diseases). Exercises performed above the LT or above the
range between 30 and 40% of 1 RM, lead to larger cardiovascular and endocrine-
metabolic stress, which is a very important tool to be considered in the security-
benefit relationship for resistance exercise prescription.
47
Figure 2.1: Lactate threshold determination for one subject by the 5 methods: lactate quotient (A), OPLA (B), OBLA 4 mM
(C), visual inspection (D), and X20 (E).

48
Table 2.1: Mean values results from the resistance exercise intensity at the lactate
threshold (% 1 RM) indentified from all the five methods.
QL OBLA OPLA VI X20
Mean 33.13 43.76* 38.75 35.00 36.73

SD 5.30 6.36 8.76 6.55 6.71

QL = Lactate Quotient; OBLA = fixed point of 4 mM; VI = visual inspection of the

inflection point; OPLA = [lact] 1mM above the baseline; X20 = 20% of the maxi-
mum [Lac] during the incremental test. * p<0.05 in relation of QL, OPLA, VI and
X20.

49
Figure 2.2: Limits of agreement between X20 and IV (A) and QL (B) using Bland and Altman method.

50
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53
Capítulo 3

W-X50, a new method to determine aerobic endurance

54
W-X50, a new method to determine aerobic endurance

Abstract

This study was designed to analyse the curve of lactate in response to in-
cremental exercise as a sigmoid.To this end, 25 male volunteers, aged 23.2 ± 2.1
years old, 71.6 ± 6 1 kg body mass, 180 ± 10 cm tall, underwent an incremental
test to determine the X50; they also underwent submaximal constant load tests to
determine maximal lactate steady state (MLSS). The exercise intensity in Watts at
X50 (W-X50) was determined based on the dependence between the concentra-
tion of lactate and exercise intensity, which were analyzed in a sigmoid function
(Boltzmann function). The results showed that the intensities of W-X50 (162.16 ±
33.59 Watts) and W-MLSS (157.80 ± 31.55 Watts) were not significantly different
at p <0.05. In addition, W-X50 has a higher correlation with the W-MLSS (r = 0.8,
p<0.05) and the W-peak (r = 0.92, p <0.05) than does the OBLA (r = 0, 77, p <0.05
for W-MLSS; r = 0.79, p <0, 05, W-peak). Based on these results, one can con-
clude that (1) lactate kinetics can be analyzed in the form of a sigmoid; (2) X50
intensity can be used to determine the W-MLSS.

Key-words: aerobic endurance, incremental protocol, one maximal repetition, vo-

luntary exhaustion

55
INTRODUCTION

The Maximal Lactate Steady State (MLSS) [17] became widely used in the
diagnosis of the performance of various endurance events, mainly due to the
strong correlation found with activities lasting between 30 and 60 minutes [9], but
the requirement for several days of tests restricts its practicality [15, 26]. Several
studies have been performed to validate this measure using a single day test, with
fixed or incremental load [3, 13, 14, 17, 19, 20, 28, 29, 30, 32]. TOKMAKIDIS [33]
compared several methods for determining lactate threshold using a single day
test (visual profile of the lactate curve; concentration 4 mM (OBLA), 1 mM above
the baseline, log-log curve, 45o tangent to the exponential regression) and al-
though they all correlate (r> 90), the results failed to demonstrate a single intensity
related to the threshold. Moreover, the parameters of the incremental test will af-
fect the outcome, including magnitude of increment, duration of each step [12, 31,
33]. Therefore, all of these techniques will detect an intensity of exercise that is
reasonably close to the lactate threshold, but individual variability results in discre-
pancies when each measurement is compared with the lactate threshold (or more
practically, MLSS).

Using another approach, Billat et al. [8], suggested that MLSS could be estimated
by applying two loads of 20 minutes flat out to 65% and 85% of maximal aerobic
velocity (MAV), separated by 40 minutes of complete rest. The validity of this
method was also questioned because it is based on the linear kinetics of the in-
crease in blood lactate, whereas it is believed that the increase in blood lactate is
exponential [18, 25]. However, both exponential kinetics of blood lactate as the
existence of a break point on his curve has not been fully elucidated in the litera-
ture [6, 7].

In addition, Yoshida [34] showed that the diffusion kinetics of lactate may
confuse the results of an incremental test because the duration of each stage does
not coincide with the time taken to complete distribution of lactate (as determined
for 2 and 4 mM concentrations). The exponentiality of lactate curve during an in-
cremental test may be related to the sum of the concentrations observed between
subsequent stages, due to insufficient time for complete diffusion between charges

56
[34]. Furthermore, the exponential nature of the curve indicates a trend towards
infinite increase in blood lactate, which could lead to an error in its interpretation.
Due to these criticisms, the kinetic model of the exponential increase in blood lac-
tate has been harshly criticised [15].

To give a new insight into the kinetics of lactate in the incremental tests, our
laboratory aims to analyze the kinetics of blood lactate curve a sigmoid form.
When load testing sets on separate days are performed until exhaustion in the
same intensities used in the incremental test, no difference in maximum lactate
was found at intensities above 90% VO 2 max, as well as supra-maximal intensities
(100% - 130% VO2 max) [11, 22, 27]. These data suggest that possibly every indi-
vidual has a maximum concentration of lactate. Furthermore, when plotted the
maximum concentration of lactate every fixed load test to exhaustion, the kinetics
of lactate show sigmoid shape. The point of half-transition of the sigmoid curve of
the lactate concentration would represent exercise intensity where there is the be-
ginning of the slowdown in accumulation of lactate with the same intensity, reach-
ing the plateau in the lactate concentration in intensity near the maximum. In the
incremental test, the sigmoid is not seen probably because the sum of the concen-
trations of lactate per stage. Thus, we hypothesized that the MLSS can be pre-
dicted through an analysis of the sigmoid curve of the lactate produced by incre-
mental test.

Based on these findings, this study aims to (1) analyze the kinetics of lactate
as a sigmoid in an incremental test and (2) determine the exercise load at the
point of half-transition of the sigmoid (W-X50) as a new method for assessment of
exercise intensity at the MLSS (W-MLSS).

METHOD

Experimental Approach to the Problem

In the present study, we recruited male students of physical education for

performing an incremental test and submaximal several tests of 30 minutes dura-
tion. To test our hypotheses, Blood samples were taken for blood lactate analysis
to determine the intensity of the X50, OBLA and MLSS. To obtain reliable meas-

57
ures for OBLA and MLSS, an incremental test and load fixed design was selected
according to proposed recommendations (9,7). All tests were performed in the
morning, within an environmental chamber (Rüssels ®) in order to control the tem-
perature (22 °C).

Subjects

Twenty-five healthy, physically active men (23.2 ± 2.1 years, 71.6 ± 6.1 kg,
180 ± 10 cm, with VO2max between 40 and 60 ml kg-1min-1) underwent an incre-
mental test to determination of W-X50 and OBLA and several sub-maximal load
fixed tests to determination of MLSS. This study was approved by the Ethics
Committee in Research of the Federal University of Minas Gerais (COEP 355/05)
and complied with all rules established by the National Health Council (Res.
196/96) for research involving human subjects.

Procedures

The volunteers took 4-5 visits to the laboratory for this study. The first visit
was to perform the incremental test and the other visits to determine MLSS. The
volunteers were instructed not to drink beverages with caffeine or alcohol and not
to perform vigorous physical activity 24 hours prior to each test, besides having at
least 8 hours of sleep the night before the test. In addition, the volunteers were
required to ingest 500 ml of water two hours before testing [1], time required to
ensure the state hydrated and empty the bladder. All tests were performed in the
morning, between 8 and 10 hours, within an environmental chamber (Rüssels ®) in
order to control the temperature (22 °C).

Incremental Test

The incremental test began with a power of 60 W, with an increase of 15 W

every three minutes, held in fixed cadence at 60 rpm. The end of the test was de-
termined by voluntary exhaustion or inability to maintain the 60 rpm. Blood sam-
ples (25 μl ) were collected from the earlobe at the end of each stage.

The peak power (W-Peak) was calculated according to the equation pro-
posed by Kuipers et al. [21]:
58
where W 1 is the power of the last complete stage, W 2 is the power corresponding
to the increments of each stage, and t is the time (given in seconds) taken for the
incomplete step.

Maximal Lactate Steady State (MLSS) Test

The MLSS tests were performed every 48 hours, with initial load corre-
sponding to concentration of 3.5 mM lactate obtained in the incremental test. An
increase of 15 watts was added to the exercise load of each submaximal test to
destabilise blood lactate (increase greater than 1 mM in blood lactate concentra-
tion between the tenth and thirtieth minutes). The submaximal test was also per-
formed at a temperature of 22 °C. Samples of 25 µl blood were collected before
the start of the exercise session at every five minutes until the end of each sub-
maximal test (30 min).

Determination of W-X50

The relationship between exercise intensity and blood lactate was analyzed
by sigmoid regression (Boltzmann function) using the software Origen-Pro 7.5 (Mi-
crocal, Northampton, MA) given by the following equation:

L min  L max
L  L max (1)
1  e (XX50 )/dX

The Lmin and Lmax represent the minimum and maximum concentrations of
lactate and were used for determination of blood lactate equivalent to 50% of max-
imum (L50). The exercise intensity in watts equivalent to L50 was determined as
WX50.

To analyze the quality of the curve adjustments was used the sum of square
residual (SRQ) and the mean squared error (MSE) of the waste. While the SRQ
was obtained by summing the squared difference between measured values and
predicted lactate, the MSE was obtained by SRQ corrected by the difference be-
59
tween the number of points contained in the curve and the degrees of freedom for
each mathematical function.

Figure 1 illustrates the typical kinetics of lactate in an incremental test to a

voluntary, which were used to determine the value of W-X50.

**Figure 1, HERE**

Determination of Onset of Blood Lactate Accumulation (OBLA)

In the same incremental test, the intensity of exercise at the onset of blood
lactate accumulation (OBLA) (W-OBLA) was determined by linear interpolation
from the fixed point of 4 mM.

Determination of Maximal Lactate Steady State (MLSS)

The exercise intensity at MLSS (W-MLSS) was determined by the greatest

power at which blood lactate remained stable (without increasing by more than 1
mM during the last twenty minutes of the test) [9, 17].

Analysis of Blood Lactate

Measurements of blood lactate were made using a lactimeter YSL 2300

STAT (Yellow Springs, OH, USA). The lactate concentration was always ex-
pressed in mM.

Statistic Analysis

All descriptive results are reported as mean ± standard deviation (SD). The
assumption of normality was verified using Kolmogorov-Smirnov‟s test. The rela-
tionship between blood lactate and exercise intensity was determined by sigmoidal
regression, using the OriginPro 7.5 program (Microcal, Northampton, MA). The
quality of the fitting curve was analyzed using the sum of the squared residuals
(SSR), which was obtained by summing the squared difference between meas-
ured values and values predicted by the sigmoidal regression curve. The deter-
mined parameters (W-MLSS, W-OBLA, W-PEAK and W-X50) were always ex-
60
pressed as mean ± standard deviation. Student‟s t-test for dependent variables
was used to compare the values of W-MLSS with the values of W-X50 and of W-
OBLA. Differences between values were considered significant when p<0.05. The
Wilcoxon test was used to compare the concentrations of lactate in the W-X50 and
W-MLSS. The Pearson test was used to verify the correlation between W-MLSS,
W-OBLA, W-PEAK and W-X50. The significance level was p <0.05. The level of
agreement was analyzed using the technique proposed by Bland and Altman [10],
considering the MLSS as the gold standard.

RESULTS

The values of SSR and r for the relation between lactate concentration and
exercise intensity, as examined by the Boltzmann function, were 1.97 ± 1.09 and
0.96 ± 0.01, respectively, indicating that the ratio of lactate concentration versus
exercise intensity can also be analyzed in the sigmoid.

The values (mean and standard deviation) of W-X50, W-MLSS, W-OBLA

and W-Peak are shown in Table 1.

**TABLE 1, HERE**

The lactate concentrations at exercise intensities of W-X50 and W-MLSS

were 5.53 ± 1.18 and 5.84 ± 1.84 mM, respectively. There were no statistically
significant differences between those values (p<0.05).

Table 2. Pearson correlation coefficients (r) between W-X50, W-MFEL, W-OBLA

and W-Peak.

**TABLE 2, HERE**

Significant correlations were observed between W-X50, W-MLSS, W-OBLA

and W-Peak. (Table 2), with the agreement between W-MLSS and W-X50 con-
firmed by the technique by Bland and Altman [10] (Figure 2).

**FIGURE 2, HERE**

61
DISCUSSION

Although widely accepted the use of kinetics in the exponential curve analy-
sis of lactate in the incremental tests [18, 25], as seem above, the results of this
study also indicated that the same curve can be analyzed in the form sigmoid.
Nevertheless, many factors must be responsible for the absence of sigmoidal be-
haviour in the variation of blood lactate as a function of exercise intensity.

The feeling of unbearable stress can lead the individual to stop the test
even before it reaches the metabolic exhaustion associated with the production of
lactate [16, 24]. Variables related to the type of protocol used in the incremental
test, such as the duration of each stage and the variation of power between stages
can alter the kinetics of blood lactate formation and removal. The lactate produced
in the previous stage can influence the concentration in the subsequent step. The
proper diffusion kinetics of lactate may confuse the results of an incremental test
because the duration of each stage does not coincide with the time taken for com-
plete diffusion of lactate, especially for concentrations of 2 and 4 mM [34].

In a sigmoid correlation analysis, blood lactate would tend to level off at the
exercise load at which the volunteer reaches exhaustion, creating a plateau from
intensities close to VO2 max. Indeed, several studies conducted rectangular tests
to exhaustion at supra-threshold to supra-maximal intensities (90 to 140%). Re-
sponse values were compared among themselves and with the values obtained in
respective incremental tests; the maximum individual concentration of lactate did
not differ between the intensities, indicating that regardless of the protocol used,
each individual has a maximum concentration of lactate [11, 22, 27]. This agrees
with the hypothesis that the kinetics of lactate production should be expressed as
a sigmoid curve.

Different types of evidence presented in this paper show that the midpoint
of the sigmoidal curve of dependence between lactate and exercise intensity (X50)
may represent the maximal lactate steady state (MLSS). First, there was no sig-
nificant difference between W-X50 and W-MLSS, with both higher than the intensi-
ties OBLA (Table 1). Furthermore, there was a strong correlation between W-X50,
W-MLSS and W-Peak (Table 2). Although OBLA is a valid method for determining
62
the MLSS, it has been strongly questioned because several studies have demon-
strated that lactate concentration at MLSS is not the same in all subjects, ranging
from 2 to 10 mM. Based on these data, it was suggested that MLSS determination
should be performed by individualized approaches rather than using fixed bLa
threshold concepts [15]. The difference between the method OBLA and the X50 to
determine the MLSS, is that the determination of the intensity of the X50 takes into
consideration all the data of lactate, in addition to respecting the individuality, since
each individual has a different concentration of lactate in the X50.

Second, blood lactate levels did not differ significantly between W-X50 (5.53
± 1.18 mM) and W-MLSS (5.84 ± 1.84 mM). The classic study of HECK et al. [17]
showed that the mean lactate concentration in the intensity of MLSS is 4mM rang-
ing from 3.0 to 5.5 mM. Although the lactate concentration at the MLSS intensity is
not related to performance, it appears to be dependent on the muscle mass in-
volved. Beneke [4] and Beneke and Duvillard [5] found that lactate concentration
at MLSS is dependent on the motor pattern of exercise, finding that the lactate
concentration was lower in rowers (3.1 mM) when compared with cyclists (5.4 mM)
and speed skaters (6.6 mM) (no significant difference between cyclists and ska-
ters). Based on this data the authors suggest individualised assessments to de-
termine the MLSS. Our results were similar to those of Beneke [4] for blood lactate
at MLSS and W-X50 for cyclists.

The possibility of using W-X50 to predict the W-MLSS is a discovery of

great importance because it allows the determination of MLSS in a single day, as
the major problem in the conventional determination of this parameter is the re-
quirement for several days of tests [26].

One limitation of this study was that the volunteers did not carry out a test to
exhaustion in MLSS and X50 intensity. Baron et al. [2] demonstrated with a sam-
ple of 11 volunteers that the time to exhaustion at W-MLSS was 55 ± 8.5 min.
Mognoni et al. [23] found a mean time to voluntary exhaustion at W-OBLA of 38.2
minutes and a final lactate concentration of 5.3 ± 2.3 mM, working with a sample
of 20 individuals out of 34 eligible volunteers, suggesting that the W-OBLA overes-
timated the W-MLSS.

63
 Despite the practical importance of the equivalence between W-X50 and W-
MLSS observed in this study, the origin of this agreement must be evaluated in
further studies on the subject.

Based on these results, it can be concluded that the intensity of MLSS can
be identified in a single day by using the intensity of X50 obtained through analysis
of the sigmoid curve of lactate, confirming our hypothesis.

PRACTICAL APPLICATIONS

Assessment of aerobic endurance through the blood lactate responses is

extremely important for the practice of cyclic aerobic training (running, cycling, tri-
athlon, rowing). Among the possibilities for use of blood lactate to assess aerobic
performance, the intensity of the maximum lactate steady state (MLSS) (gold
standard) is one of the most relevant, since its gain reflects increased aerobic ca-
pacity. The determination of this intensity is essential for training prescription,
since it has a high correlation with the cyclical performance of exercises lasting
between 30 and 60 minutes [9]. However, its practicality is questioned because of
the involvement of several days of testing at submaximal its realization [26].

Thus, the discovery of this work to predict the intensity of the MLSS through
the use of W-X50, is extremely valuable, since it is determined in a single day of
incremental test. This increases the practicality of the test, reducing the need for
multiple days of assessment, which helps coaches and athletes. That helps
another fact of using the X50, is that the value is found through a mathematical
formula, so does not need the presence experienced evaluators to determine the
strict point of it occurrence.

The W-X50 also has high practicality in conducting re-tests during the sea-
son, due only be necessary to carry out an incremental test, thus facilitating the
verification of changes in performance. Several other tests have also been vali-
dated for predicting the MLSS in a single day, however, all were heavily criticized
because of the dependence of the protocol [12, 31, 33]. Another great advantage
of predicting the MLSS by W-X50 is that the latter uses the entire data in their de-
termination, thereby respecting individual differences in blood lactate concentra-

64
tion, unlike other widely used method in the evaluation and monitoring of training,
the OBLA, which called for exercise intensity where lactate concentration reached
4mM as the MLSS intensity. The use of any fixed point, without observing all of the
data, violates the principle of biological individuality, thus treating all subjects as
equal. This is not true, because each individual responds differently to exercise
stress.

65
Table 3.1: Power (Watts) of exercise intensities given by W-X50, W-MLSS, W-
OBLA and W-Peak.
Parameter Mean SD P*
a
W-X50 162.16 33.59
b
W-MLSS 157.80 31.55
a,b
W-OBLA 144.30 37.32
a,b
W-Peak 205.80 32.26
*Differences represented by the same letter were statistically significant (Student‟s
t-test, N=25, p<0.01).

66
Table 3.2: Pearson correlation coefficients (r) between W-X50, W-MFEL, W-OBLA
and W-Peak.*
W-X50 W-MLSS W-OBLA W-Peak
W-X50 - 0.80 0.79 0.92
W-MLSS 0.80 - 0.77 0.87
W-OBLA 0.79 0.77 - 0.83
W-Peak 0.92 0.87 0.83 -
*All correlations were statistically significant (p<0.01, N=25).

67
Figure 3.1: Dependence of lactate concentration on exercise intensity in an incremental test. W-X50 represents the inten-
sity of exercise when the variation in lactate concentration reached 50% of the maximum concentration of lactate ([Lact] max)

n=24.

68
Figure 3.2: Limit of agreement between W -MLSS and W-X50, using the technique proposed by Bland and Altman.

69
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72
Capítulo 4

Effect of temperature variation on the intensity of the MLSS and of the X50 in
cycloergometer

73
Effect of temperature variation on the intensity of the MLSS and of the X50 in
cycloergometer

Abstract

The aim of this study was to analyse the curve of lactate in response to incre-
mental exercise as a sigmoid and verify if this response is sensible in hot environ-
ment to determine the maximal lactate steady state in a single day test in this envi-
ronment. Eight volunteers (age: 24.2 ± 2.5, Weight: 74.99 ± 7.4, height: 178.7 ±
4.0; and VO2 Max: 48.07 ± 4.63) performed two incremental tests (initial load of 60
W with 15 W increase every three minutes) until voluntary exhaustion, at two dif-
ferent temperatures: warm environment (40 °C) and temperate environment (22
°C), as well as several submaximal tests to determine the MLSS at both tempera-
tures. The exercise intensity was analyzed in a sigmoid function (Boltzmann func-
tion) to determine the watts based on the dependence between exercise intensity
and the lactate concentration to find the half point of its concentration (X-50). The
results showed that the intensities of W-X50 and W-MLSS were not significantly
different (p>0.05) at 22°C (181.4±30,1W and 180.0±32.1W, respectively) and at 40
°C (155.8±27.0W and 148.1±32.5W, respectively), however they were different
(p<0.05) when analysing between different environments. Therefore, the W-X50
can be used to valid and sensible method to predict the W-MLSS and assessment
of submaximal aerobic performance in thermoneutral and hyperthermic environ-
ments.

Key-words: Hot, Hyperthermia, Lactate, exhaustion

74
Effect of temperature variation on the intensity of the MLSS and of the X50 in
cycloergometer

Introduction

Aerobic endurance performance is the determination of the highest constant

exercise intensity that can be maintained for a longer period of time without a con-
tinuous rise in blood lactate (bLa). This performance can be measured through
changes in the maximal lactate steady state (MLSS) or the intensity of MLSS (W-
MLSS) [15]. The determination of the W-MLSS is essential for training prescrip-
tion, since it has a high correlation with the cyclical performance of exercises last-
ing between 30 and 60 minutes [4]. Furthermore, the use of its intensity as a train-
ing stimulus was recently demonstrated by Billat et al. [4], who reported an in-
crease in time to exhaustion from 44 to 63 minutes after six weeks of training at
MLSS intensity. However, the need for several days of testing to determine the W-
MLSS limits its practicality [23]. In an attempt to resolve this problem, several
protocols of incremental tests have been created [19; 2; 16; 10; 24; 15; 7; 25; 27].
Despite the validity of these tests, changes in the initial intensity, changes in the
duration of each stage, in the delta or changes in the increment of load can alter
the supposed intensity corresponding to the W-MLSS [6; 26; 28].

Recently, our laboratory proposed a new incremental test to predict the in-
tensity of the MLSS (W-MLSS), named W-X50. In our experiment, 25 volunteers
performed an incremental test (to determine X50) and several submaximal tests
(to determine MLSS). Our results showed that the intensities of W-X50 (162.16 ±
33.59) and W-MLSS (157.80 ± 31.55) were not Significantly different at p <0.05. In
addition, W-X50 has a higher correlation with the W-MLSS (r = 0.8, P <0.05) and
the W-peak (r = 0.92, p <0.05) than does the OBLA (r = 0, 77, p <0.05 for W-
MLSS, r = 0.79, p <0, 05, W-peak).

Several methods have been validated for predicting the MLSS in one day
[19; 2; 16; 10; 24; 15; 7; 25; 27], but none have been validated in a hot environ-
ment, using the MLSS as Gold Standard. It is know that when the internal heat

75
production exceeds the removal capacity, hyperthermia becomes an inducing fac-
tor of fatigue (1). The increase in temperature from 21 to 26 °C during the course
of exercising causes great physiological stress on the body [21; 8] and under
these conditions, the performance regarding power output and time to exhaustion
are compromised [9; 13; 17; 18].

However, despite being valid and strongly correlated with the W-MLSS, there
wasn't any conducted study to verify the behavior of the W-X50 in other situations.
Thus, this study aims to investigate the Influence of heat in the MLSS and the W-
W-X50.

Method

Experimental design

Eight male volunteers were leaded to do two incremental tests until volunta-
ry exhaustion and various submaximal tests. Both incremental and submaximal
tests were performed at two different temperatures: warm environment (40 °C)
(P40 °C) and temperate environment (22 °C) (P22 °C), all tests with a relative humidity
(RH) of 50%. The incremental test was used to determine the W-X50, while the
submaximal tests to determine MLSS. This study was approved by the Research
Ethics Committee of the Federal University of Minas Gerais (COEP 355/05) and
complied with all rules established by the National Health Council (Res. 196/96) on
research involving humans.

Volunteers and the testing protocols

Eight volunteers (age: 24.2 ± 2.5 Weight: 74.99 ± 7.4, height: 178.7 ± 4.0;
and VO2 Max: 48.07 ± 4.63), were instructed not to consume drinks containing
caffeine and alcohol and not to perform any vigorous physical activity 24 hours
prior to each test. It was also requested that they ingest 500 mL of water two hours
before each test.All tests were performed in the morning (between 8 and 10

76
hours), at random within an environmental chamber (Russels®) to ensure temper-
ature control (22 and 40 °C) with an interval of five days between them. In addi-
tion, clothing was standardized for all experimental conditions.

The initial power was 60 W, which was increased by 15 W every three mi-
nutes until volitional exhaustion. The cadence was maintained at a fixed 60 rpm.

Submaximal tests were performed for 30 minutes every 24 hours, with initial
loads (obtained by each incremental test) corresponding to the lactate concentra-
tion of 3.5 mM. The load increases 15 watts in each submaximal test until the loss
of stability of lactate (increase > 1 mM in the lactate concentration from the 10th to
30th minute). It is noteworthy that in all the subjects, the intensity of the W-MLSS
was higher than the initial intensity of the first submaximal test, which was deter-
mined by the concentration of 3.5 mM.

Submaximal tests were conducted inside an environmental chamber (Rus-

sels ®) to maintain the temperature (22 or 40 °C).

Determination of W-X50, W-MLSS and Power Peak (W-Peak)

The W-X50 was determined from the dependence between the concentra-
tion of lactate and exercise intensity, adjusted to the sigmoid function
(Boltzmann function) given by the equation:

Li  L m
L  Lm (1),
1  e (XX50 )/dX

where Li and Lm represent the lowest and the highest plateau of lactate, respec-
tively, and X50 is the exercise intensity where lactate concentration reaches a
50% increase in relation to the highest plateau.

MLSS intensity was determined by the greatest power in which the blood
lactate did not increase above 1 mM during the twenty final minutes of the test [15;
3; 4].

77
 The W-peak was calculated using the equation proposed by Kuipers et al.
[20]:

W-Peak = W 1 + (W 2 . t / 180) (2),

where W1 is the power of the last complete stage, W2 is the power corresponding
to load increment of each stage and t is the time in seconds of duration of the in-
complete state.

Collection and analysis of blood

To determine the X50, blood samples of 25 µL were collected from the ear-
lobe before the test and at the last 15 s of each stage for later analysis of the lac-
tate (YSL 2300 STAT, Yellow Springs, OH, USA).

To determine the intensity of the MLSS, 25 µL blood samples were col-

lected before the start of the test and every five minutes until the end of the 30 mi-
nutes of testing.

Statistical analysis

All descriptive results are reported as mean ± standard deviation (SD).

Kolmogorov-Smirnov‟s test verified the assumption of normality. Sigmoidal regres-
sion, using the OriginPro 7.5 program (Microcal, Northampton, MA), determined
the relationship between blood lactate and exercise intensity. The quality of the
fitting curve was analyzed using the sum of the squared residuals (SSR), which
was obtained by summing the squared difference between measured values and
the values predicted by the sigmoidal regression curve.

The determined parameters (W-MLSS, W-X50 and W-PEAK in both tem-

peratures) were always expressed as mean ± standard deviation. The Student's t
test for independent variables was used to compare each variable at two different
temperatures and to compare the MLSS with the W-X50. Differences between the

78
values were considered significant when p<0.05. We also performed Pearson's
correlation between the variables of W-MLSS, W-X50 and W-Peak. The level of
agreement was analyzed using the technique proposed by Bland and Altman
(1986), considering the MLSS as the gold standard.

Results

Table 2 shows the power values, in Watts, obtained for W-MLSS, W-X50
and W-Peak, at 22 and 40 °C.

[***Table 4.1 here***]

The values of W-MLSS, W-X50, W-Peak obtained at 22 degrees C were

significantly different (p < 0.01) when compared with the values obtained at 40 de-
grees C. But the values of W-MLSS were not significantly different from the values
of W-X50 obtained both at 22 degrees C (p = 0.72) and at 40 degrees C (p =
0.27).

Tables 3 and 4 show the Pearson coefficients (r) obtained in the correlation
analyses between the values of W-MLSS, W-X50 and W-peak, determined at 22
degrees C and 40 degrees C, respectively.

[***Table 4.2 here***]

[***Table 4.3 here***]

Figures 1 show the threshold of concordance Between the W-W-X50 and the
MLSS for the temperature 22 C (-1.35W, 95% CI = -22.07 to + 19.37).

[***Figure 4.1 here***]

Figures 1 show the threshold of concordance Between the W-W-X50 and the
MLSS for the temperature 40 C (-7.67W, 95% CI = -43.72 to + 28.38).

79
 [***Figure 4.2 here***]

Discussion

The aim of this study was to assess the sensitivity of W-X50 as a method
for determining the maximal steady state of lactate in a single day of testing, using
the W-MLSS as the gold standard. To achieve this goal, lab tests with thermoneu-
tral (22 °C) and hyperthermic (40 °C) environment were used to provoke changes
in the submaximal and maximal aerobic performances.

The change in temperature from 22 °C to 40 °C produced decreases in the

W-MLSS and the W-Peak (Table 2), i.e., in the submaximal and maximal aerobic
performances, respectively. These results are in agreement with several other
studies, which showed that performance in the submaximal and maximal efforts
decrease in hyperthermic environments [9; 13; 17; 18, 22]. The literature well de-
scribes that exercise performed in the heat promotes early accumulation of muscle
and blood lactate [12; 29, 11; 14], which would result in the anticipation of the W-
MLSS and the W-Peak.

The main contribution of this study was the possibility of determining the W-
MLSS and the prediction of the W-Peak through W-X50 in a single day of incre-
mental testing.

The results presented in Table 2 showed no significant differences between

the W-X50 and the W-MLSS at both temperatures used. Furthermore, significant
correlation occurred between the W-X50 and the W-MLSS at both 22 degrees and
40 degrees C (Tables 3 and 4). Moreover, as demonstrated by figures 1 and 2,
there was agreement between the methods. The findings showed that the average
difference between the intensity of the MLSS and the W-X50 was not significant
(1.35 W and 7.67 W) respectively for 22 C and 40 C with 95% CI, suggesting that
W-X50 is a valid parameter in the evaluation of submaximal aerobic performance.

Another finding of this study was the very strong and significant correlation
observed between the W-X50 and the W-Peak at the two temperatures used, indi-
cating that the W-X50 can also be used as a method of predicting the W-Peak.

80
 Although there are several methods for determining the W-MLSS and lac-
tate threshold in a single day of incremental testing [19; 2; 16; 10; 24; 15; 7; 25;
27], they have been targets of much criticism, because changes in the level of the
initial load, changes in the duration of each stage and changes in the intensity of
workload increase promote changes in the determination of the W-MLSS and lac-
tate threshold. According to Carter et al. [6], the lactate minimum test is strongly
influenced by the initial velocity, suggesting that it does not provide a good esti-
mate of the W-MLSS. Tests that use fixed point ignore the fact that under a con-
stant speed, the fixed rate of lactate is not the same during the incremental test as
compared to the rectangular test [26]. Although the IAT in identical conditions is
highly reproducible (r = 0.98), changes in the intensity of the initial test or the dura-
tion of stages [26], produces significantly different results.

The method proposed in this paper to predict the W-MLSS is valid, sensitive
and has high practicality, since it can be accomplished in a single day of incremen-
tal test. Moreover, it is not influenced by the evaluator and uses the entire data of
lactate to obtain the exercise intensity in the MLSS. However, the results of this
study were restricted to the effect of increased temperature in the determination of
X50. Further research should be conducted to verify the dependence of W-X50 in
response to aerobic training in different types of protocol.

Conclusions

Based on the results of this work, we can conclude that the W-X50 can
be used to valid and sensitive method to predict the W-MLSS and assessment of
submaximal aerobic performance in thermoneutral and hyperthermic environ-
ments.

Practical Applications

In this present study, we used the variation of ambient temperature to test the
sensitivity of the W-X50 compared to MLSS (gold standard). The possibility of us-
81
ing W-X50 to predict the W-MLSS is a discovery of great importance because it
allows the determination of MLSS in a single day, as the major problem in the
conventional determination of this parameter is the requirement for several days of
tests [23]. Another fact that helps the using of X50, is that the value is found
through a mathematical formula, so does not need the presence experienced eva-
luators to determine the strict point of it occurrence.

In addition, the test performed on a single day to predict the intensity of

MLSS, none was conducted in a hot environment, which makes the W -X50 the
only proven method to be used in this situation. The possibility of using the W-X50
in an incremental test helps coaches and athletes having a precise data for their
training program with just one-day test instead of losing about one training week
for testing.

82
Table 4.1: Values (mean ± standard deviation) of power (W) corresponding to the
incremental test in the two temperatures.

22 °C 40 °C
W-MLSS 180.00  32.07 148.12  32.50*
W-X50 181.35  30.05 155.79  27.04*
W-Peak 226.87  30.46 198.75  25.03*
* p<0.01 between temperatures.

83
Table 4.2: Values of the correlation coefficients of Pearson (r) between MLSS, W-
X50 and W-Peak at 22 °C.
W-MLSS W-X50 W-Peak
W-MLSS - 0.94* 0.92*
W-X50 0.94* - 0.98*
W-Peak 0.92* 0.98* -
* p < 0.01.

84
Table 4.3: Values of the correlation coefficients of Pearson (r) between MLSS, W-
X50 and W-Peak at 40 °C.
W-MLSS W-X50 W-Peak
W-MLSS - 0.82* 0.80*
W-X50 0.82* - 0.96*
W-Peak 0.80* 0.96* -
* p < 0.01.

85
Figure 4.1: Concordance threshold between W -MLSS and W-X50 at 22 °C, using Bland and Altman technique.

86
Figure 4.2: Concordance threshold between W -MLSS and W-X50 at 40 °C, using Bland and Altman technique.

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