Disciplina: Fundamentos de bioquímica

Aula 10: Genoma e sua expressão

Apresentação

Nesta aula, conheceremos os tipos principais de mutação. Entenderemos o processo de transcrição e os mecanismos do
PCR e da síntese de proteínas.

Abordaremos o código genético e a base da biologia molecular relacionada a doenças.

Para nalizar, discutiremos sobre apoptose e carcinogênese.

Objetivos

Entender sobre mutações e seus tipos principais;

Diferenciar os tipos de recombinação ocorrentes no DNA.

Mutação
Entende-se por mutação qualquer modi cação súbita e hereditária no conjunto gênico de um organismo. Outras alterações
podem vir através de recombinação, onde ocorre a troca de fragmentos de DNA, como no crossing-over.

O DNA é transformado em RNA através da transcrição, por meio da enzima RNA polimerase, no núcleo. Para ampli cação de DNA
recorre-se ao método de PCR.  As proteínas são uma cadeia de aminoácidos, são moléculas essenciais para manter a estrutura e
funcionamento de todos os organismos vivos e podem ter diferentes propriedades e funções.

 Adaptado de: www.edodelfo.altervista.org <http://www.edodelfo.altervista.org/> .

Existem dois tipos de mutação do DNA:

Mutação gênica Mutação cromossômica

Alterações num número reduzido de Mutações que alteram de maneira
nucleotídeos da molécula de DNA, visível (ao microscópio), o numero ou a
resultando no aparecimento de um novo estrutura dos cromossomos.
alelo.

Transcrição
Consiste na síntese do RNA, sendo realizada por um complexo enzimático.

Na primeira divisão meiótica ocorre o crossing-over, ou sobrecruzamento de cromátides homólogas, não-irmãs que se encontram
lado a lado, sendo este processo responsável pela variabilidade genética.
  Transcrição.

A transcrição requer regiões homólogas nos dois DNAs que irão se recombinar. Ocorre a formação da junção de Holliday.

Os dois DNAs que irão se recombinar possuem sequências especí cas para essa recombinação. Possuem alto grau de
especi cidade, e ocorre conservação da sequência. Envolve recombinases.

Utiliza transposons, regiões de DNA que podem se transferir de uma região para outra do genoma, deixando ou não uma cópia no
local antigo onde estavam. Envolve uma enzima, denominada transposase.

A principal enzima é a RNA polimerase, que realiza polimerização de RNA a partir de um molde de DNA.O processo ocorre em três
etapas principais: iniciação, alongamento e término. Nos eucariotos a transcrição ocorre no núcleo.

ABERTURA DA HÉLICE DE DNA.



INICIAÇÃO DA CADEIA DE RNA PELA JUNÇÃO DOS

PRIMEIROS DOIS RIBONUCLEOSÍDEOS TRIFOSFATO.
 
ALONGAMENTO DA CADEIA DE RNA NA DIREÇÃO 5’
PARA 3’ PELA ADIÇÃO DE RIBONUCLEOSÍDEO
TRIFOSFATO.


TÉRMINO E LIBERAÇÃO DA POLIMERASE E CADEIA

COMPLETA DE RNA

PCR
A Reação de Polimerização em Cadeia é um método de ampli cação de DNA sem uso de um organismo vivo. O processo ocorre
em três etapas:
  Reação de Polimerização em Cadeia.

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Desnaturação

Anelamento

Extensão

O DNA é extraído, adicionado a ele um mix contendo dNTPs, primers e uma enzima DNA polimerase.

O resultado é analisado em eletroforese.

Essa técnica é utilizada em análises médicas e biológicas, como medicina forense e diagnóstico de doenças hereditárias.

Síntese de proteínas
Ocorre por um processo conhecido como tradução, que ocorre nos ribossomos situados no Retículo Endoplasmático Rugoso
(RER).

O RNAm, que serve de molde para a tradução, é dividido em códons.

O primeiro códon se liga ao sítio um do ribossomo e em seguida ocorre a ligação do anticódon do RNAt carregando o aminoácido
correspondente, para o encadeamento de aminoácidos, formando a proteína.

A imagem a seguir ilustra esse processo.

 Síntese de proteínas.

Código genético
O código genético é a relação entre a sequência de bases do DNA e a sequência correspondente de aminoácidos na proteína.

Forma os modelos hereditários dos seres vivos, contendo a informação que rege a sequência de aminoácidos através do
encadeamento de nucleotídeos.

Segunda Posição
Primeira Posição Terceira Posição
Extremidade 5’ Extremidade 3’
U C A G

Fen Ser Tir Cis U

Fen Ser Tir Cis C
U
Leu Ser FIM FIM A
Leu Ser FIM Trp G

Fen Pro His Arg U

Fen Pro His Arg C
C
Leu Pro Gln Arg A
Leu Pro Gln Arg G

Ile Trn Asn Ser U

Ile Trn Asn Ser C
A
Ile Trn Lis Arg A
Met Trn Lis Arg G
 Val Ala Asp Gli U
Val Ala Asp Gli C
G
Val Ala Asp Gli A
Val Ala Asp Gli G

Biologia molecular das doenças

 Biologia molecular das doenças.

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O sequenciamento do genoma humano ainda não trouxe respostas para questões fundamentais como:

  
Quantos genes temos na Será que são realmente Quantas proteínas são
realidade? 30.000, ou mais? codi cadas por estes genes?

 
Como os genes interagem Quanto os nossos genes
entre si e com o ambiente? determinam a nossa
personalidade e o nosso
comportamento?

Por outro lado, a biologia molecular tem contribuído de maneira signi cativa para a compreensão de como nossos genes
funcionam, quando normais e por que causam doenças quando alterados.
Além disso, o diagnóstico molecular para um número crescente de patologia tem sido fantástico para evitar outros exames
invasivos, identi car casais em risco e prevenir o nascimento de novos afetados (a partir do aconselhamento genético e do
diagnóstico pré-natal).

Entender como nossos genes funcionam é o primeiro passo para o tratamento dessas
patologias.

Mas enquanto buscamos a prevenção e obviamente a cura, temos também um compromisso ético em relação ao uso de testes
genéticos que devem ser discutidos com os consulentes antes de serem realizados.

Dica

Na anemia falciforme, o tipos de mutação que ocorre é a Mutações gênica por substituição de base.

Apoptose

 Apoptose.

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Apoptose é a morte celular programada, diferente da necrose celular, onde a morte celular ocorre de maneira inesperada,
“acidental”.

Ocorre em respostas a gatilhos siológicos no desenvolvimento (remodelamento tecidual), defesa, homeostase, e

envelhecimento.

As células apoptóticas inicialmente sofrem um encolhimento; o citoesqueleto e o envelope nuclear se rompem e as células
perdem as microvilosidades e junções celulares.

As organelas mantêm sua estrutura mas a membrana plasmática se torna altamente convoluta e a célula se rompe formando
pequenos corpos apoptótipos, que são rapidamente fagocitados por macrófagos.

Veja o esquema que diferencia a Necrose da Apoptose:

Apoptose

Sinal
extracelular,
intracelular 


Fagocitose
Nenhuma reação in amatória

Necrose

Danos
mecânicos
e
químicos



Reação in amatória

 Necrose × Apoptose.

Carcinogênese
O termo carcirogênese se refere ao processo de formação do câncer.

O corpo humano é todo formado por células que se organizam em tecidos e órgãos. As células normais se dividem, amadurecem
e morrem, renovando-se a cada ciclo. O câncer se desenvolve quando células anormais deixam de seguir esse processo natural,
sofrendo mutação que pode provocar danos em um ou mais genes de uma única célula.
 1. Célula cancerosa 2. Tecido alterado 3. Invadem tecido vizinho

Tumor

Deprendem-se

Metástase

 Metástase.

As células cancerosas se dividem mais rapidamente do que as normais e geralmente são bem desorganizadas. Com o tempo,
podem se empilhar umas sobre as outras, formando uma massa de tecido chamada tumor. Todo esse processo, em que uma
célula normal se torna um tumor maligno ou câncer, pode levar muitos anos.

Multiplicação descontrolada das células alteradas Acúmulo de células cancerosas Tumor

 Multiplicação de células cancerosas.

Explore mais

Assista aos vídeos:

Mutações <http://www.youtube.com/watch?v=8FfQpwTqpTU> ;

Tradução <http://www.youtube.com/watch?v=DcCnmPeutP4> .