Macromolécula que borra y que sonda

Los procesos tales como borrar meridional, borrar septentrional, borrar

occidental se utilizan para transferir la DNA o las proteínas del ARN
sobre una membrana que borra (a menudo después de que
electroforesis del gel) pueden ser manchados por etiqueta radioactivo
y después ser visualizados.

El primer de estos métodos era el borrar meridional en 1975 por

Edward meridional, y se utiliza para descubrir la serie de los
fragmentos de la DNA.

Procedimiento

Hay cuatro pasos dominantes en la técnica el borrar meridional:

En el primer paso, la DNA de la muestra se analiza o se digiere

hacia adentro en pedazos más pequeños usando una enzima de
la restricción.

Después de la digestión, los fragmentos de la DNA se separan

usando electroforesis del gel. El gel de la agarosa se utiliza
generalmente con este fin. La electroforesis muestra varias
bandas que parezcan una mancha debido a la presencia de
varios pequeños fragmentos de la restricción en el gel. El
alcalino entonces se utiliza para desnaturalizar la DNA en únicos
cabos.

Estas bandas entonces se transfieren a la superficie de una

membrana con la ayuda de un gradiente eléctrico que sea
normalmente una hoja de papel llamada el papel secante. La
configuración de los fragmentos de la DNA en el gel sigue siendo lo
mismo después de transferencia al papel secante.

Ahora, una antena compuesta de únicos fragmentos trenzados

de la DNA se introduce en la mancha blanca /negra. Las bases
en la antena de la DNA emparejarán con series complementarias
de la DNA en el gel para formar la DNA doble-trenzada.

El Dr. Edwin Southern desarrolló una de las primeras técnicas que

borraban llamadas la mancha blanca /negra meridional. Esta técnica
descubre series específicas de la DNA y por lo tanto también se llama
una mancha blanca /negra de la DNA.

Usos

La mancha blanca /negra meridional encuentra varios usos en el

laboratorio de biología molecular moderno del día. Algunos de los usos
dominantes de la mancha blanca /negra meridional son :

 identificación de un único gen en un centro común de los

fragmentos de la DNA
 correspondencia del gen
 análisis de configuraciones genéticas de la DNA
 detección de las series específicas de la DNA en un genoma
 estudio de las supresiones del gen, duplicaciones, y mutaciones
que causan diversas enfermedades
  detección de enfermedades genéticas y de cánceres tales como
mutaciones monoclonales de la leucemia y de la célula
falciforme
 descubra la presencia de una familia del gen en un genoma

El borrar septentrional

Esto es una técnica usada para descubrir las moléculas específicas

del ARN presentes dentro de una mezcla del ARN. El borrar
septentrional se emplea en el análisis de una muestra del ARN de un
tipo o de un tejido de la célula para determinar la expresión del ARN
de ciertos genes.

El borrar occidental

El borrar occidental es una técnica para descubrir las moléculas de

proteína específicas dentro de una mezcla de la proteína. Esta mezcla
pudo incluir todas las proteínas que se asocian a un cierto tipo o tejido
de la célula. La técnica puede ayudar a determinar la talla de una
proteína, y cuánto de él se expresa.
MATRICES -los microarrays de una dna

es una colección de sitios de la dna montados en una superficie sólida

tal como una diapositiva del microscopio que se pueda utilizar para
cuantificar simultáneamente niveles de la expresión de la proteína a
través de un gran número de genes. La técnica se puede también
utilizar a diversas diversas regiones genomicas del genotipo.

Clasificación

De acuerdo con la manera de la preparación del arsenal, los

microarrays se dividen en tres tipos:

1. El arsenal observado sobre el cristal: las matrices observadas

son matrices hechas en diapositivas de cristal recubiertas
polivinílico-lisina del microscopio. Esto ofrece el atascamiento de
la DNA de alta densidad usando las espigas ranuradas.
2. matrices Uno mismo-montadas: éstas son matrices de la fibra
óptica hechas por la deposición de la DNA sintetizada en
pequeñas molduras del poliestireno. Las molduras se depositan
en los finales grabados el ácido del arsenal.
3. Matrices sintetizadas "in-situ": estas matrices son hechas por
síntesis química en un substrato sólido. En la síntesis química,
combinan a los grupos de protección photolabile con
fotolitografía para realizar la acción. Estas matrices se utilizan en
el análisis de la expresión, genotyping, y ordenando.
el borrar meridional se utiliza para descubrir la serie de los fragmentos
de la DNA. (v)

El borrar septentrional es una técnica para descubrir las moléculas

de proteína específicas dentro de una mezcla de la proteína.(f)