Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Peter Beyer
University of Freiburg, Center for Applied Biosciences, D-79104 Freiburg, Germany and the
Institute for Plant Sciences, Swiss Federal Institute of Technology, CH-8092 Zurich, Switzerland
Abstract
Pentru a obține provitamina A (β-caroten) pe cale biosintetică în endospermul de orez, s-a introdus într-un
singur efort de transformare combinat codificarea cADN pentru phytoen sintaza (psy) și lycopen β-ciclaza (β-
lcy) ambele din Narcissus pseudonarcissus, și ambele sub controlul promotorului de glutelină specific
endospermului, împreună cu o desaturază fitoenă bacteriană (crtI, de la Erwinia uredovora sub control promotor
constitutiv 35S) .
Această combinație acoperă cerințele pentru sinteza β-carotenului și, asa cum s-a sperat, a fost obtinut
endospermul de orez galben purtator β-caroten in generatia T0.
Experimente suplimentare au arătat că nu este necesară prezența β-lcy, deoarece psy și crtI singure au fost
capabile să conducă sinteza β-carotenului, precum și formarea de xantofile ulterioare în aval.
Explicații plauzibile pentru această constatare sunt că aceste enzime din aval sunt exprimate constitutiv în
endospermul de orez sau sunt induse de transformare, de exemplu prin produse formate enzimatic.
Rezultatele utilizând N. pseudonarcissus ca sistem model au condus la dezvoltarea unei ipoteze,
conform căreia trans-licopenul sau derivatul de trans-licopen acționează ca un inductor într-un fel de mecanism
de feedback care stimulează genele carotenogene endogene.
Orezul este alimentul major de bază pentru sute de milioane de oameni. Este în general consumat în forma
sa măcinată, cu straturi exterioare (pericarp, tegmen și straturi aleurone) îndepărtate.
Motivul principal al măcinării este eliminarea stratului de aleuron bogat în ulei, care devine rânced la
depozitare, în special în zonele tropicale și subtropicale. Ca rezultat, partea comestibilă a boabelor de orez
constă din endospermă, umplută cu granule de amidon și corpuri de proteine, dar nu are mai multe substanțe
nutritive esențiale pentru menținerea sănătății, cum ar fi carotenoidele care arata activitatea provitaminei A.
Astfel, dependența de orez, ca bază alimentară primară, contribuie la deficiența de vitamina A, o problemă
serioasă de sănătate publică în cel puțin 26 de țări, inclusiv în regiunile foarte populate din Asia, Africa și
America Latină.
O intervenție complementară la strategiile existente pentru reducerea deficiențelor de vitamina A în țările cu
cele mai mari riscuri este de a fortifica majoritatea alimentelor de bază, orez, cu provitamina A prin creșterea
plantelor. Acest lucru poate fi realizat numai prin tehnologii recombinante, mai degrabă decât prin creșterea
convențională, datorită lipsei oricărui soi de orez care produce această provitamină în endospermă. Atât pentru
că transformarea orezului este bine stabilită, cât și datorită faptului că întreaga cale biosintetică carotenoidă a
fost recent identificată molecular, a fost posibil să se introducă calea biosintetică a provitaminei A (β-caroten)
complet în endospermul de orez prin inginerie genetică.
Pentru a institui calea către formarea a β-carotenului, este necesar să se completeze patru enzime de plante, și
anume fitozen sintaza, desaturaza fitoene, desaturaza ζ -carotenă (desaturazele care catalizează introducerea a
două duble legături, fiecare) și lycopen β-ciclaza. Alternativ, efortul de transformare poate fi simplificat prin
reducerea numărului de enzime necesare și utilizarea unei desaturaze carotene bacteriene capabile să introducă
toate cele patru legături duble necesare (Figura 1).
FIGURA 2
Semințele de F0 mature din linii transformate și de la plantele de control au fost uscate în aer, deshidratate și,
pentru a izola endospermul, lustruite cu hârtie de șmirghel timp de 8 ore intr un agitator (shaker).
În cele mai multe cazuri, endospermele transformate au prezentat o culoare galbenă evidentă, indicând formarea
carotenoidului.
Exemple de linii de orez galben noi obținute utilizând PMI ca o genă marker selectabilă.
Continuarea lucrărilor în curs are drept scop creșterea cantității de provitamină A prin identificarea blocajelor
metabolice care limitează blocajele în Orezul de Aur.
Noi transformări sunt în curs de desfășurare folosind diferiți promotori specifici endospermelor, o genă crtI
optimizată cu codon și gene de cale timpurie a așa-numitei căi nonmevalonate a biosintezei izoprenoide. Sunt în
curs de desfășurare alte lucrări de demonstrare a conceptului care vizează măsurarea și îmbunătățirea
biodisponibilității și bioeficacității provitaminei A.
O altă abordare vizează unificarea liniilor de orez bogate in fier cu linii de provitamină A, deoarece este
cunoscut faptul că provitamina A este capabilă să mărească biodisponibilitatea fierului.
Nu este de așteptat ca Orezul de Aur să furnizeze 100% din vitamina A în dietă, ci să imbogateasca continutul
pentru a ajunge la suficientă vitamină A.
Desigur, o prioritate ridicată pentru cercetare este o evaluare a biodisponibilității și bioeficacității pro-vitaminei
A conținute în orezul de aur.
Această cercetare a fost puternic împiedicată în trecut de necesitatea producerii unei cantități suficiente de
cereale care să fie utilizate în studiile de hrană în sistemele de model acceptate (porci, viței și dihori) în sere de
siguranță din Europa și restricții care interzic încercări în afara serelor.