“Año De La Consolidación Del Mar De Grau”

“UNIVERSIDAD NACIONAL DE
TRUJILLO”
Facultad De Ciencias Biológicas

Escuela Profesional De Biología

ALUMNA: BENITES RUÍZ, STEFANY

CICLO: VI- “A”

MESA: 01

TEMA: “FRAGILIDAD OSMOTICA DEL ERITROCITO Y OBSERVACIÓN

DE ERITROCITOS HUMANOS EN SOLUCIÓN: HIPOTÓNICA, ISOTÓNICA
E HIPERTÓNICA”

DOCENTES:
 DR. JUAN CÉSAR MURO MOREY
 MSC. MANUEL PESANTES VERA
 DR. JOSÉ SALDAÑA JIMENEZ

2016
 FRAGILIDAD OSMOTICA DEL ERITROCITO Y OBSERVACIÓN
DE ERITROCITOS HUMANOS EN SOLUCIÓN: HIPOTÓNICA,
ISOTÓNICA E HIPERTÓNICA
I. INTRODUCCIÓN:

Todas las células, procariotas y eucariotas, están delimitas por una membrana lipídica
que actúa como una barrera de permeabilidad selectiva. En las procariotas la
estructura de la membrana está confinada solamente a la barrera externa que rodea
las células, en cambio en las eucariotas esta estructura es también responsable de la
compartimentalización interna (Latorre ,1996)

La membrana celular separa el interior de la célula con el medio exterior y realiza el

transporte selectivo de sustancias por distintos procedimientos, los cuales se encargan
de conservar las diferencias entre el fluido extracelular y el fluido en el ambiente
intracelular, al ser la membrana más permeable a unas sustancias que a otras. Su
composición varía dependiendo de la función celular, pero siempre está formada por
lípidos, proteínas y en menor proporción, glúcidos (Villamor y Soto, 1993)

El estudio de la fragilidad osmótica de los hematíes valora la resistencia de los

eritrocitos a soluciones de presión osmótica decreciente, en condiciones constantes de
pH y de temperatura. Para ello, se enfrentan los hematíes problema a soluciones
tamponadas de Cloruro de Sodio (NaCl) cuya concentración es decreciente
(soluciones hipotónicas). (Concepción y Puerta, 2005)

Cuando los hematíes están en contacto con soluciones hipotónicas, penetra agua a
través de su membrana y se hinchan. (Lundblad y Macdonald ,2010)

Al hincharse los eritrocitos, una parte de la hemoglobina que contienen puede salir al
exterior a través de los poros de su membrana. Si la entrada de líquido es excesiva,
los hematíes se rompen y dejan libre toda la hemoglobina que engloban (hemólisis).
(Latorre ,1996)

Esta prueba evalúa por tanto la capacidad que tienen los glóbulos rojos de soportar un
incremento de su contenido acuoso (resistencia osmótica eritrocitaria o ROE).
Dentro de una misma sangre, la ROE de los hematíes varía de unos a otros.
(Villamor y Soto, 1993)

El objetivo de esta práctica es la evaluar si existe fragilidad osmótica en los exitositos a

concentraciones dadas y a la ves observar los eritrocitos humanos en soluciones:
hipotónicas, isotónicas e hipertónicas.
II. MATERIALES Y PROCEDIMIENTO

 FRAGILIDAD OSMOTICA DEL ERITROCITO

Preparamos la batería de soluciones de cloruro de sodio (NaCl), a
concentraciones decrecientes:

Seguimos las instrucciones de la tabla y realizamos los 24 tubos con las

cantidades de agua destilada y de suero fisiológico indicadas en cada caso.
Añadimos a cada tubo 3 gota de sangre muestra con ayuda de una pipeta
Pasteur. Agitamos suavemente los tubos sin utilizar agitador, ya que, puede
hemolizar la sangre. Y dejamos reposar por 5-10 minutos después lo
centrifugamos a 2000rpm/ 5 min y observamos.
 OBSERVACIÓN DE ERITROCITOS HUMANOS EN SOLUCIÓN:
HIPOTÓNICA, ISOTÓNICA E HIPERTÓNICA

Extraemos sangre por punción venosa (previa aplicación del torniquete, antisepsia con
torunda de algodón alcoholada), extraer con la jeringa estéril 3 ml. de sangre y
depositarla en un franco con anticoagulante (EDTA). Tomar portaobjetos y dividir cada
uno en dos partes marcando. Hacer una suspensión de glóbulos rojos en las diferentes
soluciones como se indica continuación: franco1(solución isotónica) agregar 3 gotas y
de igual par frasco2 (solución hipertónica) y para el frasco 3(solución hipotónica)
Agregar una gota de las diferentes suspensiones(soluciones) de glóbulos rojos en los
portaobjetos previamente marcados y cubrirlos con cubreobjetos. Anotar la hora en que
se coloca la suspensión de glóbulos rojos y observar inmediatamente al microscopio.
III. RESULTADOS:

Muestra:

Observación:

Preparado:

Coloración:

Aumentos Focales:
Muestra:

Observación:

Preparado:

Coloración:

Aumentos Focales:

Muestra:

Observación:

Preparado:

Coloración:

Aumentos Focales:
IV. COMENTARIO:

Con frecuencia la Ciencia y la Técnica van de la mano, casi todos los avances
científicos han sido el resultado de nuevos avances técnicos, Por medio de métodos
descubiertos hace casi una década que permiten generar plaquetas o glóbulos rojos a
partir de células madre iPS, la empresa trabaja ahora con corporaciones del sector
farmacéutico o químico o la Universidad de Harvard de cara a refinar un sistema de
producción industrial rentable.

La idea es poder comenzar a suministrar de aquí a cuatro años productos basados en

plaquetas sin necesidad de donaciones, base del actual modelo global de
transfusiones.

Este sistema, en vigor desde que el austríaco Karl Landsteiner descubriera los tipos Commented [sgbr1]:
sanguíneos por antígenos en 1900, presenta desde entonces tres grandes problemas,
Commented [sgbr2R1]:
empezando por el del suministro estable.

Puesto que plaquetas y glóbulos rojos solo pueden sobrevivir almacenados un máximo
de 5 y 42 días, respectivamente, el flujo continuo de donaciones es actualmente la
única manera de mantener los bancos abastecidos.

A esto se añade el que los más jóvenes dispensan la mayor parte de la sangre y que
los mayores son el grupo que más la consume, por lo que, en los países más
desarrollados, con sociedades más envejecidas, el suministro tiende a disminuir.

De hecho, la empresa calcula que a este ritmo para 2027 faltarán unos 850.000
donantes para cubrir la demanda mundial. La idea en este sentido es ofrecer en el
futuro productos específicos para aquellos que requieren transfusiones continuas -
como los pacientes de radio o quimioterapia- y tienen grupos “raros” de antígenos
leucocitarios humanos (HLA) que les impiden encontrar fácilmente transfusiones
compatibles.
V DESCRIPCIÓN:

En los primeros tubos no se ha producido la hemólisis, ya que se puede apreciar el

botón rojo en líquido transparente, mientras que, según avanza el número de tubos, el
sobredenante empieza a enturbiarse, por lo que podemos decir que se está o que se
ha producido la hemólisis. En los primeros tubos no hay hemólisis, en los medios se
puede apreciar una hemólisis parcial y en los últimos, la hemólisis es total.

V CONCLUSIÓN:
En conclusión, La prueba de Fragilidad Osmótica es un test que ayuda
a determinar, la susceptibilidad de los eritrocitos a deformaciones, descubriendo la capacidad
del glóbulo rojo en absorber agua sin explotar, probada con diferentes concentraciones de
solución salina, ya sea isoosmoticas, hipotónicas o hipertónicas.

A menor concentración de NaCl se incrementa el porcentaje de hemolisis, debido a que

ingresa agua al eritrocito liberando hemoglobina. La variación del porcentaje de
hemolisis influye directamente con la lectura de las absorbancias.

VI REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

 Concepción J. Puerta B. y Ureña P. (2005). Prácticas de biología molecular.

Bogotá, Colombia.: Pontificia Universidad Javeriana.
 Roger L. Lundblad, Fiona Macdonald. (2010). Manual de Bioquímica y Biología
Molecular. Estados Unidos: CRC Press.
 Ramón Latorre. (1996). Biofísica y Fisiología celular. Sevilla: Editorial
Universidad de Sevilla.
 Pedro Gabriel Martín Villamor y José María Soto Esteban. (1993).
Anatomía y Fisiología. México: Editorial Masson – Salvat.