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FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA
CARRERA DE INGENIERÍA QUÍMICA
1. DATOS GENERALES:
NOMBRES: CÓDIGOS:
GRUPO No.: 01
2018/10/16 2019/01/29
2. OBJETIVOS:
2.1. GENERAL:
2.2. ESPECÍFÍCOS:
Identificar las propiedades que debe poseer el sustrato para el buen crecimiento del
hongo Pleorotus Ostreatus.
Enunciar las usos y beneficios del cultivo y producción del hongo Pleorotus
Ostreatus.
Detallar los resultados obtenidos de los análisis de laboratorio realizados al hongo
Pleorotus Ostreatus
3. METODOLOGÍA:
Primera etapa._ Activación de pleurotus.
Preparar agar Saboraud
Inocular los granos de trigo en Agar Saboraud
Incubar durante 15 días a 37°C
Segunda etapa.- Masificación
Limpiar los granos de trigo para eliminar cualquier partícula ajena.
Lavarlos previamente para eliminar impurezas con abundante agua.
Sumergir en agua fría durante24 horas a temperatura ambiente con la finalidad de alcanza
el 80 % de humedad.
Escurrir para eliminar el exceso de agua el pH está en el rango de 6.2.
Colocar los granos de trigo en una solución de Venomil al 0.02% por diez minutos y se
procede a escurrir en forma exhaustiva.
El grano húmedo colocar en frascos de boca ancha hasta las ¾ partes del mismo
Esterilizar a 121 grados Celsius durante 45 minutos (autoclave)
Posteriormente agitar los frascos con la finalidad de separar los granos y favorecer la
aireación e hidratación homogénea.
Colocar el micelio de P.ostreatus, obtenidos en las cajas, 5 cuadrículas de 1 cm2 por frasco
Incubar a una temperatura de 28 a 30°C en un armario y en la obscuridad hasta la
incubación completa del micelio del grano.
Mantener las condiciones ambientales entre 25 – 28 grados Celsius y humedad de 70 – 80
% y realizar periódicamente ventilación y regadíos con agua corriente a las fundas con la
finalidad de mantener la humedad adecuada.
Cosechar la biomasa fúngica.
4. MATERIALES, SUSTANCIAS, REACTIVOS Y EQUIPOS:
4.1 MATERIALES:
Lámparas de alcohol
Frascos de vidrio (nescafé)
Bolsas plásticas
Espátula
Papel aluminio
Bisturí
Papel empaque
Liguas
4.2. SUSTANCIAS:
Micelio
Cebada
Tamo de avena
Agua destilada
4.3.REACTIVOS:
Alcohol
Agar sabouraud
Sulfato de sodio
Ácido sulfúrico
Ácido bórico 4%
0,1N ácido clorhídrico
Indicador mixto
Hexano
Lugol
Molish
Seliwanoff
4.4 EQUIPOS:
Estufa
Esterilizador
Macro Kendall
Equipo de Sockler
Equipo de humedad
5. MARCO TEORICO Y REFERENCIAL:
5.1. Marco Teórico:
TECNICA DE CULTIVO
Existen varias formas de realizar el cultivo de este hongo. A continuación, se describe el
método más clásico, señalando que se pueden introducir en el mismo toda una serie de
variantes, siempre que se respeten las bases mínimas necesarias para el desarrollo de estos
organismos. Los resultados finales, a partir de las diferentes modalidades de cultivo, parecen
análogos, aunque falta información experimental suficiente para afirmarlo con seguridad en
estos momentos.
Cualquier método de cultivo se fundamenta en reproducir artificialmente y a gran escala el
proceso que se verifica en la naturaleza. Lógicamente, si se apoya el proceso natural,
imitando y forzando sus condiciones, podemos llegar a obtener, en plazo breve y con
seguridad, lo que requiere largos períodos de tiempo y acontecimientos más o menos
fortuitos. El cultivo se basa en el propio ciclo de estos hongos. La parte fértil y comestible,
Llamada seta o carpóforo, alberga las esporas, que en cierto modo equivalen a las semillas.
Estas esporas germinan al caer sobre sustancias celulósicas, dando lugar a unos filamentos,
llamados hifas, que se desarrollan y entrecruzan formando una red. Esta red o cuerpo
vegetativo básico es el micelio, forma del hongo que es la que inicia el cultivo. A partir del
micelio y sobre algunos nudos de sus entrecruzamientos, surgen los nuevos carpóforos o
setas, cerrándose así el ciclo. Pasamos, pues a describir el método tomando como sustrato de
cultivo trozos de madera, lo cual no excluye el que se puedan utilizar para tal fin desechos
vegetales de cualquier tipo cuyo contenido en celulosa y lignina sea elevado.
CUIDADOS CULTURALES
Además del emplazamiento y de los riegos, de los cuales ya hemos hablado, y que conviene
cortar periódicamente si se retrasa la salida de las setas, es necesario adoptar las siguientes
medidas.
Evitar la presencia de gasterópodos tales como caracoles y babosas. Su eliminación
se puede realizar, bien a mano en las pequeñas explotaciones, bien tratando el suelo
con cualquier producto comercial de los que habitualmente se emplean en
horticultura.
Evitar la presencia, en lo posible, de cochinillas de la humedad.
Evitar al máximo las heladas por la grave incidencia de éstas sobre las setas recién
nacidas. Para ello es conveniente tapar los troncos, en las noches que este riesgo
exista, con materiales adecuados.
CONSERVACION
El Pleurotus ofrece múltiples ventajas, en cuanto a su mantenimiento y conservación,
respecto a otras setas de consumo frecuente, tales como Boletos, Níscalos (Lactarius
deliciosus), setas de cardo (Pleurotus eryngii), etc., puesto que no se pudre ni agusana
fácilmente. Su conservación en frigorífico, en el espacio de las verduras, no ofrece problema,
si bien sufre una elevada merma en peso. Con un sencillo método de conservación se puede
mantener en perfecto estado durante largo tiempo. En el fondo de un frasco de vidrio de boca
ancha y cierre hermético se extiende una capa de sal gruesa de medio centímetro. Sobre la
sal se coloca una capa de setas y sobre ésta otra de sal; y así sucesivamente. La capa superior
debe ser de sal.
Una variante del método consiste en utilizar agua salada en vez de emplear la sal
directamente, en frasco previamente esterilizado al baño maría. También pueden hacerse
conservas naturales, igual que las confeccionadas con tomate o pimiento. Dos métodos
interesantes de conservación son la liofilización y el desecado natural. El producto liofilizado
tiene aplicación posterior mezclado con pastas de sopa. La desecación natural es muy
sencilla. Se forman ristras de setas, unidas por un cordel a modo de rosario, y se exponen al
aire libre en lugar seco. Una vez desecadas se mantienen en ese estado indefinidamente. Para
su empleo, se deben poner en agua dos horas antes del guiso, para que recupere así la seta
sus propiedades (hay una escasa pérdida de calidad).
(GARCIA, 2019)
TAMO
Es el residuo del grano trillado y aventado de la cáscara de Avena.
Uso: Se usa exclusivamente para elaborar alimentos balanceados de animales de crianza.
(INDUSTRIALMOLINERA, 2019)
6. PROCEDIMIENTO:
Se esterilizo el ambiente
para la siembra del Las cajas petri se sometio
El agar se mantuvo en un
pleurotus ostreatus es al proceso de esterilizaion
ambiente caliente
decir dejando un en el autoclave
ambiente caliente
Se coloco el agar
Se coloco el agar
calculando la mitad d la Se abrio la caja petri con
calculando la mitad d la
palca y se la esparcio en la mucho cuidado y mucha
palca y se la esparcio en la
misma se espero a q se asepcia
misma
solidifique
Se realizo el seguimiendo
y observacion de las cajas
FIN
petri al tercer y quinto dia
de la siembra
Etapa 2: Masificación
Se colocó el micelio de P.
Los frascos se llevó a Después de embrar se
ostreatus, obtenidos de
incubar a una sello con papel de
las cajas petri (5
temperatura entre 25- empaque y se aseguro
cuadriculas de 1cm2 por
30°C con ligas
frasco)
Se observó diariamente
los cammbios y
crecimientos del hongo FIN
durante un mes
aproximadamente
Etapa 3: Preparación de Sustrado
Se condigui tamo de
avena para utilizalo Este sustrato se lo
INICIO
como sustrato para humedecio
sembra el P. Ostreatus
Al hongo se realixo
analisis de: proteína, Se extrajo los hongos y
FIN
carbohidratos, grasas y se los hizo secar
humedad
6.2. OBSERVACIONES:
Tabla: Observaciones Generales
Cajas Petri Frascos Sustrato
Semana 1 Se contamino una No hubo El micelio empezó
caja Petri contaminación a cubrir todo el
tamo de avena
Semana 2 No hubo Se contamino 3 3 fundas que
contaminación frascos contenía el
sustrado con el
hongo dejo de
crecer y se desechó
Semana 3 No hubo No hubo En una funda el
contaminación contaminación hongo creció en
forma de corales
Semana 4 No hubo El micelio estaba La cosecha de
contaminación listo para sembrar hongos sirvió para
en el sustrato realizar los 4
análisis: humedad,
carbohidrato,
proteína y grasas.
7. RESULTADOS
Tabla N°1: Resultados de la humedad del Pleurotus ostreatus
Porcentaje de humedad (%)
91.804
FUENTE: ORBEA, Karla. Lab. Biotecnología, ESPOCH 2019
COLOR CARACTERISTICAS
8. DISCUSIÓN
El estudio de los factores nutricionales del Pleurotus ostreatus se realizaron en seis pruebas,
la primera prueba fue para determinar el porcentaje del hongo, la cual arrojo un resultado de
91.804 %, según Norma Salas (2004), en su investigación científica titulada: “Estudio del
valor nutricional y propiedades fisicoquímicas y bioquímicas de Pleurotus Ostreatus”,
menciona: “La humedad relativa es de 95%”, según los resultados obtenidos en el laboratorio
de la ESPOCH, podemos observar una diferencia de 4%, esto puede a que el hongo utilizado
para realizar la muestra tenía 1 día de cosecha, y tal vez esto influenció para que pierda algo
de humedad. Sin embargo es un resultado confiable ya que la diferencia de humedad no es
grande.
La cuarta prueba es del análisis de grasa en porcentaje del pleurotus, en la prueba de Soxhlet
se obtuvo un resultado de 0,1244 %, según Salas (2004): “El contenido de grasas de las
distintas especies de Pleurotos oscila entre 1.8 y 9.4 % en peso seco y en promedio se
considera un 2.85 %”, el resultado obtenido difiere del teórico, por lo tanto se sugiere realizar
otro método, como usar el cromatografía.
9. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:
7.1. CONCLUSIONES
Se determinaron las condiciones necesarias para el crecimiento y producción del
hongo Pleorotus Ostreatus mediante el uso de tamo de avena, las cuales fueron para
la siembra del micelio entorno completamente estéril así como el sustrato de avena
remojado por 24 horas, esterilizado con solución de venomil y con un % de humedad
estándar y para el trasplante del micelio al sustrato de tamo de avena sustrato
esterilizado y hervido con cal, humedad constante, temperatura entre 25°C Y 27 °C
y poca luz, realizado así con las setas cosechadas las pruebas de grasa, proteína,
humedad y carbohidratos.
Los usos y beneficios obtenidos de las setas del Pleorotus Ostreatus son muy variadas
tales como aplicaciones nutracéuticas como alimentos funcionales ya que son ricos
en fibra dietética, es un alimento nutritivo, bajo en grasa, con alto contenido de agua
y aplicaciones preventivas a nivel terapéutico como agentes antitumorales e
inmunoestimulantes naturales
En los análisis de laboratorio los resultados obtenidos fueron los siguientes:
%Humedad=91,804; %Grasa=0,1244; %Proteína muestra (1) =4,9, %Proteína
muestra (2) =0,525; PROTEÍNAS “REACCIÓN DE MOLISH=presencia de
carbohidrato por cambio de coloración de blanco a rosa pálido”, “REACCIÓN DE
SELIWANOFF= formación de precipitado indicando la presencia de una cetosa “,
REACCIÓN DE LUGOL= coloración amarilla sin la presencia de polisacárido.
7.2. RECOMENDACIONES
10. BIBLIOGRAFÍA:
10.1. Citas
(Salas, 2004)
(Paredes, 2010)
(García, 2019)
10.2 Bibliografía
10.3 Internet
11. ANEXOS:
RESUMEN
La práctica sobre “INOCULACIÓN DE PLEUROTUS OSTREATU” realizada en el Laboratorio
de Biotecnología de la ESPOCH, se llevó a cabo en dos etapas, la primera consistía en la activación
del Hongo ya mencionado en lo cual se preparó un medio de cultivo en este caso con agar Saboraud
y se inoculó con granos de trigo en el Agar y se dejó en incubación durante un periodo de tiempo
de 15 días con una temperatura de 37C aproximadamente. La segunda etapa fue la Masificación
del Hongo este proceso consistió en limpiar los granos de trigo para eliminar cualquier partícula
ajena, se lavó previamente para eliminar impurezas con abundante agua seguido de esto se
sumergió en agua fría durante 24 horas a temperatura ambiente con la finalidad de alcanza el 80
% de humedad, se escurrió para eliminar el exceso de agua del frasco utilizado para la reproducción
del Hongo, el pH está en el rango de 6.2. Se colocó los granos de trigo en una solución de Venomil
al 0.02% por diez minutos y se procedió a escurrir en forma exhaustiva. El grano húmedo se colocó
en frascos de boca ancha hasta las ¾ partes del mismo y se esterilizó a 121 grados Celsius durante
45 minutos (autoclave). Posteriormente se agitó los frascos con la finalidad de separar los granos
y favorecer la aireación e hidratación homogénea. El micelio de P. ostreatus fue colocado,
obtenidos en las cajas, 5 cuadrículas de 1 cm2 por frasco. Se incubó a una temperatura de 28 a 30°C
en un armario y en la obscuridad hasta la incubación completa del micelio del grano. Sus
condiciones ambientales son de 25 – 28 grados Celsius y humedad de 70 – 80 % y comprobar
periódicamente ventilación y regadíos con agua corriente a las fundas con la finalidad de mantener
la humedad adecuada. Finalmente se cosechó en tamo de avena y se esperó su cosecha del hongo
ya mencionado.
DESCRIPTORES
INOCULACIÓN//HUMEDAD//AMBIENTE//HONGO//MASIFICACIÓN//
ANEXO I: Preparación de cajas Petri
a) b) c)
d) e) f)