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Universidad Nacional Autónoma de México

FES Zaragoza

Química Farmacéutico-Biológica

Bioquímica Celular y de Tejidos I

INFORME
“Extracción e identificación de carbohidratos de reserva
en animales y plantas ”

Equipo 8.

Integrantes:

- Cruz Hernández Jesús.


- Domínguez Salmerón Lizeth Marlen.
- Lozano Cisneros Diego.
- Ordaz Morales Jacob Israel.
- Páez Cisneros César Alberto.

Grupo:1452
OBJETIVOS:
✓ Analizar la importancia biológica de los carbohidratos de reserva.
✓ Extraer polisacáridos de muestras diferentes.

✓ Identificar a éstos con la prueba de lugol y benedict, antes y después de su


hidrólisis.

RESULTADOS:

Imagen 1. Resultados del experimento 1 ( Pruebas de glucógeno con lugol, reactivo


de Benedict antes y después de la hidrólisis, testigo positivo de Benedict y testigos
negativos de lugol y de Benedict , de izquierda a derecha.).

Imagen 2. Resultados del experimento 2 (Papa en rodajas con lugol).


Resultados del experimento 3 (Prueba de Lugol y Benedict de almidón contenido en
arroz antes y después de hidrolizar, de izquierda a derecha)

yodo-Lugol Benedict Benedict yodo-Lugol


antes de la antes de la después de la después de la
hidrólisis hidrólisis hidrólisis hidrólisis

Hígado Positivo Negativo Positivo Negativo


(glucógeno)

Papa (almidón) Positivo No aplica No aplica No aplica

Arroz Positivo Negativo Positivo* Negativo


(almidón)

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

En el experimento 2 se observa la presencia de almidón por medio del método yodo-


lugol (método usado para identificar polisacáridos), en el cual el yodo forma un
complejo de una coloración azul-negro con la amilosa del almidón presente en la
papa. Se aprecia en la imagen 2 una coloración azul oscuro en esta, debido a que la
mayor parte de la materia seca de este tubérculo se encuentra formada por el almidón
y otros azúcares, prácticamente alrededor del 75% de la papa está compuesta por
almidón.
Por otro lado en el experimento 1 y 3 se realizó la extracción de glucógeno del hígado
de rata y el almidón del arroz. Hay que resaltar que, en la extracción de glucógeno, el
compuesto aislado presentaba coloración café claro, sin embargo no influyó en las
determinaciones propuestas. Así mismo, se extrajo una cantidad menor a lo esperado
de almidón, que influiría en la prueba de Benedict después de la hidrólisis.
Ambos compuestos aislados fueron sometidos a pruebas de lugol y Benedict. En la
primera, ambos resultaron positivos debido a que tanto el almidón, como el glucógeno
son polímeros de monosacáridos, es decir, polisacáridos que absorben el yodo-lugol
para presentar la coloración. Es preciso aclarar que a pesar de que ambos dieron
positivo en la prueba, no tienen la misma coloración (como se puede observar en la
Imagen 1 e Imagen 3). El glucógeno presentó color rojo/café (debido a la coloración
inicial del glucógeno aislado) mientras que el almidón color azul/negro. Esto se debe
principalmente al tipo de enlaces que contienen las moléculas: El almidón está
conformado de amilosa y amilopectina, cadena lineal (enlace alfa 1-4) y ramificada
(enlace alfa 1-6) respectivamente. La amilosa forma hélices donde se juntan las
moléculas de yodo formando color azul. La amilopectina (al igual que el glucógeno),
al ser cadena ramificada, forma hélices más cortas impidiendo que el yodo se junte
tanto, por lo que presentan color rojo/naranja.
En la prueba de Benedict ambos compuestos resultaron negativos indicando la
presencia de polisacáridos y demostrando la ausencia de azúcares reductores.
Se hidrolizaron ambas sustancias en medio ácido a alta temperatura. Se ocuparon
dichas condiciones a causa de que el enlace glicosídico es más lábil en medio ácido
a la vez que la temperatura elevada aumenta la velocidad de hidrólisis.
Se realizaron de nuevo las pruebas de lugol y Benedict en los compuestos
hidrolizados, obteniendo resultados negativos en lugol y positivos en Benedict.
Los resultados negativos en la prueba de lugol se deben a que, al hidrolizar el
glucógeno y el almidón obtenemos glucosa, monosacárido que, al no tener
ramificaciones ni hélices, no puede absorber lugol por lo que la prueba resulta
negativa.
Los resultados positivos de Benedict después de hidrolizar resultaron en un
precipitado rojizo dado que la glucosa, obtenida de la hidrólisis, es un azúcar
reductora ya que tiene tanto su carbonilo como su -OH del carbono anomérico intacto
y reacciona con el cobre 2+ (Cu2+) contenido en el reactivo de Benedict, reduciéndolo,
formando Cu2O que precipita dando una coloración rojiza.
Es importante mencionar que, como se comentó anteriormente, la cantidad de
almidón extraída fue menos de la esperada, por lo que la prueba de Benedict en
almidón hidrolizado fue poco detectable, predominando aún el color azul gracias a
que la cantidad de glucosa obtenida fue mínima.
CONCLUSIÓN
Se logró extraer y aislar glucógeno de hígado de rata y almidón de arroz. Se comprobó
que los glúcidos contenidos en ambas muestras son polisacáridos gracias a la prueba
de lugol, a la vez, se demostró que la hidrólisis de los compuestos aislados da paso
a glucosa, monosacárido que actuó con el reactivo de Benedict, reduciéndolo. Se
aclaró que la papa contiene almidón gracias a la prueba de lugol.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Aguilar L, Corona MT, García A, Rangel R, Cruz M. Antología para los


laboratorios de Bioquímica Celular y de los Tejidos I y Laboratorio Integral de
Biología I. 2a ed. México: FES Zaragoza, UNAM; 2007.

2. Ramírez M. Carbohidratos [Sede web] UNAM; 2013 [acceso 13 de septiembre


de 2019]. Disponible en:
http://www.fmvz.unam.mx/fmvz/p_estudios/apuntes_bioquimica/Unidad_3.pdf

3. De Vreesse S, Hernández R, Rosas A, Rubio J, Cancáneo G, De la Cueva L.


Carbohidratos [Sede web] UNAM; 2012 [acceso 13 de septiembre de 2019].
Disponible en:
https://e1.portalacademico.cch.unam.mx/alumno/quimica2/unidad2/carbohidr
atos/creditos

4. Anónimo. Carbohidratos [Sede web] ; 2015 [acceso 13 de septiembre de


2019]. Disponible en:
http://biblio3.url.edu.gt/Publi/Libros/2013/Bioquimica/10-O.pdf

CUESTIONARIO

1. ¿Cuáles son las propiedades del glucógeno que se aprovechan para su


extracción?
El glucógeno puede separarse de los monosacáridos y otros compuestos
hidrosolubles por precipitación con alcohol, porque los polisacáridos son mucho
menos solubles en alcohol que los monosacáridos.

2. ¿Cuál es el fundamento de la reacción de Benedict y a que se debe sus


resultados antes y después de la hidrólisis?
La prueba de Benedict nos ayuda al reconocimiento de azúcares reductores, es decir,
aquellos compuestos que presentan su OH anomérico libre, como por ejemplo la
glucosa, lactosa o maltosa o celobiosa, en la reacción de Benedict, se puede reducir
el Cu2+ que presenta un color azul, en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado
por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo aldehído del azúcar
(CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo
correspondiente al óxido cuproso (Cu2O), que precipita de la solución alcalina con un
color rojo-naranja, a este precipitado se lo considera como la evidencia de que existe
un azúcar reductor.
Los resultados se deben a que antes de realizar la hidrólisis tenemos carbohidratos
del tipo polisacáridos que no son azúcares reductores, una vez realizada la hidrólisis
los enlaces de los polisacáridos se comienzan a romper formando un intermediario
oligosacárido que se seguirá descomponiendo hasta llegar al monosacárido que si es
un azúcar reductor.

3. ¿Cuál fue el polisacárido identificado en los experimentos 2 y 3?


Almidón

4. ¿Qué es un azúcar reductor?


Son aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo intacto, y que a través del
mismo pueden reaccionar como reductores con otras moléculas que actuarán como
oxidantes, ya que estos azúcares poseen un -OH libre en su carbono anomérico.

5. ¿Puede un polisacárido ser reductor?¿Por qué?


No debido a que los polisacáridos solo poseen en su estructura un extremo reductor,
por lo tanto es muy difícil que este reaccione.

6. ¿En que otros tejidos se puede encontrar glucógeno?


En músculo y cerebro.

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