LA DIVISIÓN CELULAR: MITOSIS.

Grajales V, Cardona A, Henao K & Bolaños JA. [a]

Instituto de Educacion y Pedagogia, Licenciatura en Ciencias Naturales y

Educacion Ambiental.

Fecha de práctica: 27 de Julio de 2019

Fecha de entrega: 24 de Agosto de 2019

RESUMEN
En esta práctica se quiere entender el proceso de reproducción en células
eucariotas mediante mitosis, con las raíces formadas de un bulbo de cebolla,
previamente tratadas antes de la práctica. Estas se adicionaron en una solución de
HCl 1N sometidas a un temperatura de 37°C por 20 minutos, luego de esto se
enjuagaron, se colocaron en el portaobjetos, haciendo pequeños cortes del tejido
meristemático apical radical (Allium cepa), para después adicionar gotas de orceína
por 10 minutos. Una vez transcurrido el tiempo se coloca el cubreobjetos y se
observa en el microscopio en todas las resoluciones, calculando el índice
mitótico.
PALABRAS CLAVE: Mitosis, Allium cepa, célula y orceína.
OBJETIVOS
 identificar todo el proceso que realiza una célula vegetal en la mitosis.
 comprender cómo el uso de sustancias químicas puede influir en el ciclo
celular.
 calcular el índice mitótico.
 diferencias cada fase de la mitosis en las muestras.
INTRODUCCIÓN
https://www.ucm.es/data/cont/media/www/pag-56185/05-La%20Mitosis.pdf
Las células pluricelulares eucariotas vegetales y animales, presentan división
celular por mitosis, todas estas se originan a partir de otra misma célula, en el caso
de los animales y plantas nunca se detiene su proceso de división y dura toda la
vida, este ciclo de reproducción es importante ya que permite reponer una célula
vieja o una que ya esté muerta.
citalo como parafra
METODOLOGÍA EXPERIMENTAL
En la práctica de laboratorio realizada, se utilizaron bulbos de Allium cepa, más
conocida como cebolla, que previamente habían sido colocados en agua de 15 a 20
días, con el fin de estimular el crecimiento de raíces. Cuando estas raíces
alcanzaron una longitud de 2 a 3 cm, se cortó el extremo de estas de forma
transversal y se colocaron en una solución fijadora a 4 C°, para usarse en el
laboratorio.
El dia de la práctica, se sacó las raíces de la solución fijadora y se enjuagaron con
abundante agua destilada, con el fin de remover esta solución, luego se quitó el
exceso de agua y se pasaron las raíces a un tubo de microcentrífuga.

Figura 1. tubo de microcentrífuga.

Se agregó HCL 1N (ácido clorhídrico) hasta cubrir completamente la muestra, luego
se incubaron los tubos con las raices a 37C°, durante 20 minutos, para estimular la
actividad mitótica en la célula vegetal.

Figura 2 y 3. recipiente con HCL 1N e incubador a 37° utilizados en la práctica.

Luego se esto se sacaron las raíces de la solución ácida y se enjuagaron de nuevo
con agua destilada, se retiró de nuevamente el exceso de esta. Luego se pasaron
las raíces a un portaobjetos, donde se se cortan las puntas de 3 de las raíces
proporcionadas por el laboratorio en tres partes simétricas , lo que se pretendía, era
prevalecer el tejido meristemático, en otras palabras la punta de la raíz casi cónica
de contorno de romo, donde la actividad mitótica es mayor y permite el crecimiento
primario.
Por último, para preparar la muestra, se agregó una gota del colorante orceína sobre
las raíces previamente cortadas y se dejó actuar este por 10 minutos, esto para que
ralentizar la mitosis y poder observar través del microscopio. Ya transcurrido el
tiempo se cubrió la muestra con un cubreobjetos. Para evitar dejar grumos en la
muestra, se aplasto suavemente con un borrador y proceder con la respectiva
observación a través del microscopio.
Para aumentar la probabilidad de visualizar la división celular de las raíces de Allium
cepa, se utilizaron tres muestras con el mismo procedimiento tal como se muestra
en la figura.

Figura 4. muestras 1, 2 y 3 de raíces de Allium cepa con orceína.

Observación microscópica: se dispuso de un microscopio óptico, Olimpus CH20 y
se observó a través los objetivos 4X, 10X, 40X y 100X, utilizando aceite de
inmersión para mejorar la visualización. Al terminar la observación, se limpio los
lentes utilizados con papel para lentes y por último se calculó el índice mitótico (IM)
empleando la siguiente fórmula.

IM=números de células en mitosis 500 células

RESULTADOS
 Figura 5. División celular

Durante la práctica realizada se observó el proceso de Mitosis en las células de la

cebolla (Allium Cepa). Para una mejor obtención de resultados se trabajó con tres
muestras iguales de Allium Cepa las cuales fueron dispuestas en una única lámina
portaobjetos. En un primera instancia se aprecia, con la ayuda de un microscopio la
cromatina intacta en el interior del núcleo, y la membrana que la recubre; en el
objetivo 100X. Al realizar un barrido por toda el área de la lámina portaobjetos se
encuentra la célula en sus diferentes fases de división celular. En la primera fase,
es decir, la Profase se visualizan débilmente los cromosomas y se halla evidencia
del nucleolo, además se aprecia la formación del huso acromático.
En la segunda fase (Metafase), se percibe una separación de los cromosomas los
cuales buscan ordenarse de manera individual en la placa ecuatorial, también se ve
un cierto nivel de condensación en el DNA. En la tercera fase, Anafase se advierte
cómo las cromátidas de un cromosoma son jaladas hacia los extremos, y su forma
asemeja a la de un pulpo. Ya para culminar se aprecia la Telofase, que es en la cual
las cromátidas han llegado a los polos y forman 2 células hijas genéticamente
idénticas. En la Figura 2 se pueden apreciar las fases anteriormente descritas.
 Figura 6. Fases del proceso Miótico

En la siguiente tabla se aproxima el número de células observadas en sus fases de

mitosis en las muestras de Allium cepa, teniendo en cuenta que en las muestras de
la figura 4, hay aproximadamente una cantidad de 500 células en total , pero se
tienen en cuentan solo las que presentaron mitosis.

FASES Muestra 1, 2 y 3

interfase 200

profase 136

metafase 8

anafase 5

telofase 4

total 353
Tabla 1. Fases mitóticas de cada muestra.

IM=números de células en mitosis 500 células

MUESTRAS NÚMERO DE CÉLULAS CÉLULAS POR ÍNDICE

EN MITOSIS MUESTRA. MITÓTICO
 1, 2 y 3 353 500 0.706
Tabla 2. índice mitótico en raíces de Allium cepa
DISCUSIÓN

falta lo tuyo kevin

¿Qué es el índice mitótico?

El índice mitótico se da a partir de; “una población de células, el coeficiente entre el
número de células que experimentan mitosis (multiplicación de células) y el número
de estas que no experimentan mitosis.”[1] y por consiguiente ayuda a determinar el
porcentaje de células que presentan mitosis en una muestra tal como se realizó en
las tablas 1 y 2, donde se ven reflejados los resultados de la observación.
Discusión de las tablas:
Se aprecia en las tablas antes mencionadas, que la fases predominantes son la
interfase y profase, esto suele ser un patrón común en otras investigaciones tal
como en[2], en la cual se utilizan varios tipo de tinción en las muestras y los
resultados presentaron la misma tendencia, este fenómeno se da a partir de
múltiples factores tales como la temperatura y la tinción utilizada.
Sin el uso de de fuentes externas de químicos como las utilizadas en el laboratorio,
la mitosis “Para completarse, puede requerir desde pocas horas hasta varios días,
dependiendo del tipo de célula y de factores externos como la temperatura o los
nutrientes disponibles.”[4] por esos cuando se usan componentes químicos tales
como el HCL 1N y la orceína, sucede lo siguiente:
“Al agregar el ácido clorhídrico y se deja actuar para que se rompa el núcleo y
aparecen los cromosomas. La Acetorceina fija o detiene la mitosis.”[4] sabiendo que
la función del HCL es; “degradar la pared celular y poder observar mejor las células.
Y cómo se están tomando del ápice de la raíz de la cebolla es para identificar las
fases de la mitosis.” gracias a todos estos factores se es posible observar las
diferentes fases mitóticas en un tiempo menor y con una relativa facilidad, haciendo
posible plasmar estos resultados en las tablas 1 y 2.
 PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
¿Qué tipo de colorante es la orceína? ¿ cual es su composición química?.
 Figura 7. Frasco con la sustancia orceina.
En la prueba de laboratorio, se utilizó el compuesto químico llamado orceína
o orchil, debido a que este se extrae de forma natural de “diversos líquenes
(orchella) que crecen en rocas marítimas en las islas Canarias y Cape Verd
, etc.”[3]
“La orceína es un colorante de color rojo violáceo (púrpura)”[3], además
consta de un olor peculiarmente fuerte, esta es una “sustancia que se utiliza
para teñir y ver las distintas fases de los cromosomas en división celular.” [3]
tal como se hizo con las raíces de la Allium cepa que se observaban sus
células de color morado o púrpura, ya que “Con esta técnica de tinción se
pueden ver los cromosomas impregnados por la orceína acética”[3], como se
ve en la figura 5, en la que los cromosomas son visibles gracias a la tinción,
que permite “observar las diferentes etapas de la mitosis; esto facilita la
visualización de las etapas del ciclo celular”[3]
“Uno de sus componentes el Orcinol se extrae del liquen archil denominado
Roccella tinctoria. La orceína A es un colorante que reblandece las
membranas celulares, mata las células y detiene el proceso de división. La
orceína B completa el proceso de tinción”[3]
su fórmula molecular es C H N O
28 24 2 7

Figura 8. Estructura química de la orceína.

¿Cuál es su efecto sobre la cromatina? ¿Qué diferencia con el DNA?

 La tinción de cromatina con orceína acética durante 10 minutos fue un
procedimiento rápido y efectivo para la coloración de ADN; además, el flameo
de la muestra permitió eliminar el exceso de colorante en el citoplasma y
aumentar el contraste con los cromosomas; mientras que un calentamiento
excesivo de la muestra produce decoloración del preparado. Todo lo anterior
permitió diferenciar claramente las etapas del ciclo celular y una observación
más clara de los cromosomas.
¿Porque se eligió el meristemo radicular de cebolla y no de otro tejido vegetal?
El proceso mitótico puede ser estudiado si se elige un material biológico
constituido por células que se encuentren en continua división, tal como se
presenta en el meristema apical de la raíz de cebolla, aparte de ser de facil
acceso y
¿Qué es meristemo apical radical?
El meristemo radicular se encuentra en una posición subterminal de la raíz,
protegido en su avance a través de la tierra por la cofia o caliptra. En los
meristemos apicales de las raíces se forman 5 tipos de tejidos: epidermis,
estela (vasos y periciclo), tejido fundamental (córtex y endodermis), la
caliptra, y el centro quiescente (Depto. de Biología Funcional y Ciencias de
la Salud, 2018)
¿la mitosis en células vegetales es igual a la presentada en células animales? ¿
Cuales son las diferencias, si las hay?

La Mitosis en células animales se diferencia del proceso de división de las

células vegetales por muchos aspectos, entre ellos se encuentran:

• Durante la Profase, el aparato de Golgi y el retículo endoplásmico se

fragmentan y la envoltura nuclear se dispersa.
• Cuando una célula animal sale de la mitosis, el citoplasma contiene un
solo centros que posee dos centriolos situados en ángulo recto uno del otro.
• Las células vegetales están encerradas en una pared relativamente
rígida, es por ello que deben construir una pared celular dentro de la célula
viva, está luego se encuentra con las paredes laterales existentes y crea una
placa celular, el cual se considera precursor de la pared celular.
• Las células animales presentan centríolos, por lo que se forma un huso
mitótico astral, mientras que en las vegetales es anastral.
• Los cromosomas, en las células animales, se sitúan generalmente en
la periferia de la placa metafásica, mientras que en las vegetales tienden a
ocupar toda la placa ecuatorial.
• Los cinetocoros de los vegetales presentan una morfología esferoidal,
pero en los animales es discoidal y con estructura trilaminar.
 • La división del citoplasma o citocinesis, en las células animales, tiene
lugar por estrangulación, pero la pared celular de los vegetales imposibilita
este procedimiento, formándose un septo o tabique entre las dos células
resultantes.
¿Cuantos cromosomas tiene la cebolla?
La cebolla presenta en su estructura celular cromosomas, los cuales son 8
pares (2n = 16), estos, tienen un gran tamaño y microscópicamente una
morfología bastante definida de sus cromáticas, las cuales son las dos
unidades longitudinales de los cromosomas duplicados que se encuentran
unidos por el centrómero del cromosoma.
¿Cómo se lleva a cabo la división celuar en células de tejidos hematopoyéticos?

Figura 9. Especialización de las células Hematopoyeticas.

¿En qué fase se encuentran los cromosomas más condensados? ¿Los menos
condensados?

Figura 10.Fases de la Mitosis.

Las fases mitóticas de mayor condensación son la Profase y la Metafase, ya que en

ellas el DNA apenas se está desenrollando, por lo tanto los cromosomas
permanecen muy juntos. En cambio durante la Anafase y la Telofase los
cromosomas son
¿ Qué significa la posición ecuatorial de los cromosomas?, y ¿Que la posición de
los cromosomas en los polos?

¿Qué efecto biológico puede provocar el cruzamiento mitótico?

figura 11. Retinoblastoma hereditario

El entrecruzamiento mitótico sucede en la profase y consiste en la
fragmentación de las cromátidas de los cromosomas homólogos, y el
intercambio entre ellas mismas. Esto contribuye a la diversidad genética de
las especies ya que les permite intercambiar genes y ofrecer cierta
variabilidad genética. un ejemplo de ello es la figura 11, donde se observa
como el entrecruzamiento mitótico le permitio a el niño heredar el tumor que
se expresa en los gens de sus parientes.

CONCLUSIÓN
 Fue posible identificar las fases de la mitosis el ciclo celular en la célula
vegetal, empezando desde la búsqueda de información hasta la prueba
realizada en el laboratorio.
 Factores como la temperatura y la tinción pueden influir en mitosis.
  los componentes químicos utilizados como el HCL 1L y la orceina son
esenciales para una observación de las fases mitóticas en un periodo
relativamente corto.

REFERENCIAS

1. Instituto nacional del cáncer. (s.f). Índice mitótico. Obtenido

de www.cancer.gov:https://www.cancer.gov/espanol/publicaciones/diccionari
o/def/indice-mitotico
2. Lallana, H., & Urteaga, O. (2005). optimización de una técnica de tinción para
determinación de efectos citogenéticos en ápices radicales de allium cepa. Revista
Científica Agropecuaria, 63-70.
3. Depto. de Biología Funcional y Ciencias de la Salud. (17 de 12 de 2018). Atlas
de Histología Vegetal y Animal. Obtenido de mmegias.webs.uvigo.es:
https://mmegias.webs.uvigo.es/1-vegetal/v-imagenes-
grandes/meristemo_primario.php
4. Doria , J., Peralta , A., & Paternina, J. (2016). Mitosis en la raíz de la cebolla.
Monteria: Universidad de Córdoba.
5. Mera C., Roa A., Ramírez, S. (2007) "Células madre hematopoyéticas,
generalidades y vías implicadas en sus mecanismos de auto-renovación". Rev.
Cienc. Salud. Bogotá (Colombia) 5 (1): 67-89, abril-junio de 2007 / 67.
6.Karp G. (2008) “Biología Celular y Molecular, Conceptos y Experimentos” 6
edición. Mcgraw Hill. México. 570-573