UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

CARRERA DE INGENIERÍA QUÍMICA
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL

PRACTICA 6

CÁMARA DE NEUBAUER

RESUMEN / PALABRAS CLAVE

1. OBJETIVOS
 Determinar la concentración de microorganismos por el método cámara de
Neubauer
2. TEORÍA
2.1.Cámara de Neubauer
“La cámara Neubauer, también conocida como hemocitómetro, consta de un cubreobjetos
de cuarzo y un portaobjetos de un grosor mayor a los de uso común. En la parte superior
del portaobjetos se encuentran cuatro canales longitudinales y uno transversal central. En
la parte superior e inferior del canal transversal están grabadas dos rejillas de 9 mm de
superficie, las cuales están a su vez subdivididas en una cuadrícula más pequeña. Usando
el objetivo de 10x de un microscopio óptico, se enfoca de forma que en el campo se cubra
un cuadrado cuya área corresponda a 1 mm; generalmente se trabaja con el cuadro central.
El área del cuadro central es de 1 mm2 y se encuentra subdividida en 25 cuadrados. Cada
uno de estos cuadrados mide 0,2 mm de lado por lo que el área de cada uno será de 0,04
mm2. Al colocar el cubreobjetos sobre el portaobjetos se tiene una profundidad de 0,1mm,
de forma que el volumen contenido en cada uno de los cuadrados grandes será 0,1 mm
(1,0 mm2 x 0,1 mm = 0,1 mm3)” (Morales,2004, p.90)
2.2.Para que sirve cada cuadrante de la cámara de Neubauer
 “Neubauer improved cuadrícula doble, con o sin pinzas: La cuadrícula de recuento
muestra 9 cuadrados grandes, cada uno de 1 mm2. Los 4 cuadrados grandes de las
esquinas señalados con una "L" están divididos en 16 cuadrados con aristas de 0,25 mm.
Se utilizan para el recuento de leucocitos. El cuadrado grande central está dividido en
25 cuadrados medianos con aristas de 0,2 mm estando cada cuadrado mediano
subdividido en 16 cuadrados pequeños con aristas de 0,05 mm y una superficie de
0,0025 mm2.
 Neubauer cuadrícula doble, con o sin pinzas: Se utilizan para el recuento de
leucocitos. El cuadrado grande central está dividido en 16 cuadrados medianos con
aristas de 0,2 mm estando cada cuadrado mediano subdividido en 16 cuadrados
pequeños con aristas de 0,05 mm y una superficie de 0,0025 mm2. Los 5 cuadrados
medianos señalados con una "E" se utilizan para recuento de eritrocitos y de
trombocitos. La superficie de recuento de los cuadrados medianos está delimitada por
la línea exterior de las tres líneas.
 Thoma cuadrícula doble, con o sin pinzas: La cuadrícula corresponde al cuadrado
grande central de la cámara Neubauer. La superficie de los cuadrados pequeños es de
0,0025 mm2 cada uno. Debido a que no existen cuadrados grandes exteriores, el sistema
de cámaras Thoma sólo se utiliza para recuento de eritrocitos y de trombocitos” (Brand,
2010, p. 2).
3. PARTE EXPERIMENTAL
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3.1. Material y Equipos

 Microscopio
 Cámara de Neubauer
 Vaso de precipitación
 Jeringuilla de insulina

3.2. Sustancias y reactivos

 Alcohol.
 Levadura
 Azúcar

3.3. Procedimiento
Preparación de la muestra:
1- Lavar la cámara y el cubre con agua destilada y alcohol 96%.
2- Secar bien con papel suave.
3- Poner el cubreobjetos encima de la cámara.
4- Homogeneizar removiendo bien el cultivo en donde residen las levaduras.
5- Tomar 10 micro litros de la levadura activada en la jeringuilla de insulina
6- Poner la punta de la jeringuilla en una de las dos ranuras de la cámara y, por
capilaridad, las levaduras se distribuirán en la cámara.
7- Si se crea una cámara de aire repetir la operación desde el principio.
8- Fijar la cámara de recuento en la platina del microscopio para realizar la observación
microscópica.
9- Esperar unos minutos antes de contar para que las levaduras se depositen en la cámara.
Preparativos del microscopio:
El enfoque del microscopio se empieza con el objetivo de menor aumento que
posteriormente pasaremos a uno de más. Se centra el objetivo del microscopio a ojo en el
centro teórico de la cruz de la cámara, luego se coloca el objetivo lo más cerca posible
del cubreobjetos, pero sin tocarlo y posteriormente se irá alejándolo hasta que la imagen
sea lo más clara y nítida posible. Se aconseja trabajar a 400 aumentos.
4. Parte Experimental
4.1 Datos Experimentales.

Tabla 4.1-1
Datos de conteo de microorganismos

Cuadrante Número de Número de

microorganismos microorganismos
sección 1 sección 2
1
2
3
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4
Total

4.2. Cálculos.

5. RESULTADOS.
Tabla 4.1-1
Concentración.
Sección Concentración
[ce/ml]
1
2

6. DISCUSIÓN
7. CONCLUSIONES
8. BIBLIOGRAFIA
8.1.Morales, G. (2004). E Ensayos Toxicológicos Y Métodos de Evaluación de Calidad de
Agua. Primera edición. México.
8.2.Brand. (2010). Laboratorio Clínico, cámaras de recuento. México.
9. CUESTIONARIO.
9.1. De donde sale el término 10000, en la ecuación de concentración para la cámara
Neubauer, Explicar con ecuaciones.
9.2.Aplicaciones para todos los cuadros de la cámara de Neubauer.
9.3.Ventajas y desventajas del método de recuento por cámara de Neubauer
10. ANEXOS
10.1. Diagrama del equipo.
10.2. Curva de crecimiento microbiano

RESUMEN DISCUSIÓN CALCULOS CUESTIONARIO ANEXOS

UNIR DATOS
1 2 3 4 5

Conclusión 1 cada uno