RECOLTAREA si TRANSPORTUL PROBELOR

PENTRU DIAGNOSTIC MICROBIOLOGIC

Modul de prelevare a produselor patologice destinate examinarii bacte-

riologice conditioneaza in mod direct eficienta etapelor ulterioare, in final,
obtinerea unui rezultat fidel.
Reguli generale:
- prelevarea trebuie executata de catre medic sau cadru medical mediu, sub
directa supraveghere a acestuia, in conditii stricte de asepsie,
- prelevatul sa fie obtinut direct din leziune, astfel incat produsul patologic
sa contina portiunile cele mai caracteristice ca semnificatie etiologica,
- prelevarea sa fie executata inainte de inceperea terapiei cu antibiotice
sau la 48h de la intreruperea ei. Pe buletinul de trimitere se va specifi-
ca tipul antibioticului si doza aplicata,
- e necesar a se recolta cantitati suficiente de produs, pentru a face
posibile toate examenele, inclusiv cele indicate ulterior,
- fiecare produs trebuie recoltat in recipiente sterile, de unica folosinta
sau recipiente de sticla sterile, fara urme de antiseptice,
- un recipient va contine un singur produs: proba unica recoltata de la
un singur bolnav,
- recipientul care contine produsul va fi etichetat: nume, prenume pacient;
pavilion, salon;
- pentru fiecare proba se intocmeste Buletin de trimitere, in care
se va specifica:
* Nume , prenume pacient,
* Nr. Foaie observatie,
* Data nasterii, data internarii,
* Pavilion, nr. salon,
* diagnosticul clinic,
* tipul produsului recoltat,
* examenul solicitat,
* tratament cu substante antimicrobiene,
* data recoltei, ora recoltei,
* responsabil de recolta,
* parafa si semnatura medicului.
- Buletinul de analize contine rubrica cu rezultatul examinarii.

1
- recipientele in care se recolteaza produsele de examinat, sunt:
* sterile, inchise etans,
* din material transparent( sticla, mat. plastic),
* dop, capac ce se deschid prin desurubare,
* cu sau fara medii de conservare si transport,
* pentru germeni anaerobi, conditii speciale de recolta, cu
evitarea contactului cu aerul atmospheric.
Reguli particulare de recolta:
● Hemocultura:
- sange recoltat dintr-o vena a plicii cotului, dupa antisepsizarea regiunii,
cu alcool etilic 70- 95%, apoi cu tinctura de iod,
- momentul optim al recoltei: cu aprox. 1 ora inainte de aparitia
frisonului si febrei,
- se vor recolta 2- 3 perechi de hemoculturi (fiecare pentru dubla
insamantare: aeroba si anaeroba), in decurs de 24 ore, in caz de
septicemia si in decurs de 48 ore, in suspiciunea de bacteriemie.
- la copiii mici e suficienta o singura recolta,
- sangele se recolteaza in conditii de stricta sterilitate de catre medic la
patul bolnavului,
- volumul de sange este de 10- 20 ml la adulti si de 1- 5 ml la copii sub 5
ani.
- inocularea flacoanelor de hemocultura se face in conditii de asigurare a
asepsiei dopurilor de cauciuc ale recipientelor ,
- pentru adulti tratati cu antibiotice se folosesc flacoane FAN aerob-
anaerob (10 ml sange in fiecare flacon),
- pentru adulti netratati cu antibiotic, se folosesc flacoane Standard aerob-
anaerob ( 10 ml sange in fiecare flacon),
- pentru copii tratati si netratati cu antibiotic se folosesc flacoane Pedi
FAN ( 1-2 ml sange / flac./ proba).

● Lichidul cefalorahidian:
- recoltarea LCR se executa la patul bolnavului de catre medicul
clinician, in conditii de absoluta sterilitate,
- cat mai la inceputul bolii,
- de preferat inaintea aplicarii tratamentului cu antibiotice,
- volumul necesar este de 10- 15 ml pentru adulti si de 2- 10 ml pen-
tru copii,
- pentru explorari chimice, se va recolta acelasi volum, dar in eprubeta
separate.

2
● Exsudatele si transsudatele seroaselor (lichide pleurale, peritoneale,
articulare):
- recoltarea se efectueaza prin punctie cu seringa, in conditii riguroase de
asepsie,
- necesari 10- 15 ml, in cazul lichidelor pleurale si peritoneale si 4- 5 ml
pentru cele articulare,
- pentru suspiciunea etiologiei cu flora anaeroba, produsul patologic
ramane in seringa impins pana la ambou, fara contact cu aerul atmosferic,
inchis ermetic,
- este total contraindicata recoltarea florei anaerobe cu tamponul.

● Secretii purulente din colectii deschise (infectii ale pielii si sructurilor

subjacente, plagi de diferite categorii: traumatice, chirurgicale, arse
etc.):
Procedeul prelevarii este diferit in functie de localizarea leziunii:
- in colectiile purulente profunde, neabcedate, prelevarea se face prin
punctie dupa antiseptizarea regiunii suprajacente,
- in cazul plagilor profunde insuficient drenate, fistulizate, (colectii de la
nivelul ganglionilor, osului), este indicatea recoltarea cu seringa, dupa
antiseptizare prealabila,
- produsul recoltat cat mai aproape de baza leziunii,
- se pot trimite in eprubete sterile mese de tifon imbibate cu produs,
- leziuni cutanate superficiale inchise (vezicule, pustule, flictene,
furuncule) este indicata prelevarea prin punctie cu seringa cu ac
hipodermic, dupa antiseptizarea cu alcool si spalare cu ser fiziologic
steril,
- din leziunile deschise, prelevarea produsului se poate face cu tamponul.
- Sunt necesare obligatoriu 2 tampoane: unul pentru etalarea frotiurilor si
unul pentru insamantarea mediilor (evitarea contaminarii incrucisate).

● Secretia oculara:
- recoltarea se face cu tamponul steril din fundul de sac conjunctival,
- cand pleoapele sunt tumefiate, se va recolta cu tamponul sau cu ansa
direct de la nivelul unghiului interior, fara coborarea pleoapei,
- in caz de orgelet, prelevarea se face direct, cu aceleasi mijloace.
- se recolteaza cu tampoane diferite, din ambii ochi.

● Secretia otica:
- se trage de varful pavilionului extern in sus si posterior, pentru a vizu-
aliza conductul auditiv si indrepta tamponul spre locul leziunii.

3
 - necesare 2 tampoane (frotiuri si culturi).

● Secretia vaginala si uretrala:

- prelevarea la barbat se face dimineata, inainte de mictiune, prin expresia
posteroanterioara a uretrei si comprimarea glandului,
- picatura de secretie care apare din meatul uretral, se preleveaza cu
tamponul si se etaleaza pe lama de sticla (pentru examenul direct),
- la femeie, prelevarea secretiilor vaginale si uretrale se face in primele 10
zile dupa ciclul menstrual, pe masa ginecologica; folosirea valvelor
sterile este obligatorie,
- sunt necesare 2 tampoane : pentru frotiuri si culture,
- la fetite, secretiile vulvo- vaginale se recolteaza cu tampon steril.

● Urocultura:
- in prealabil se face o toaleta a organelor genitale exterioare, cu apa si
sapun, stergerea cu tampon de vata imbibat in solutie salina sterila,
- prelevarea se face din jet mijlociu, direct in vas steril, cu gatul larg,
- volumul necesar unei examinari uzuale este de 10- 15 ml.
- in prezenta unei simptomatologii caracteristice, se recolteaza 1- 2 urini la
interval de 24 ore,
- la bolnavi asimptomatici sunt necesare 2-3 probe de urina repetate,
- numai obtinerea aceluiasi rezultat de mai multe ori are semnificatie
etiologica.
- in infectia gonococica recoltarea urinei se face in aceleasi conditii, cu
mentiunea ca se retine primul jet de urina,
- urocultura in leptospiroza: se recolteaza urina dupa prima saptamana de
boala, in conditii aseptice, dupa o administrare timp de 24- 48 ore de
regim alimentar alcalinizant,
- urocultura in tuberculoza renala: prelevatul de electie il constituie urina
recoltata dimineata, din jetul mijlociu, timp de 3 zile consecutiv.
Pana la obtinerea celei de a 3- a probe, urina se pastreaza la frigider.

● Exsudatul naso- faringian:

- dimineata pe nemancate (in absenta unui gargarism cu antiseptice),
- sau, cel putin dupa 4 ore de la ingerarea de alimente,
- persoana, pe scaun, in pozitie sezanda, cu capul aplecat pe spate, cu fata
indreptata spre o sursa de lumina puternica,
- se deschide gura la maximum, se apasa limba, se vizualizeaza peretele
posterior al faringelui, amigdalele, pilierii si valul paltin,

4
- recoltarea se efectueaza cu tampoane de vata sterile, insistandu- se asupra
zonelor cu eritem, punctelor de puroi, secretiei mucopurulente,
pseudomembranelor,
- se recolteaza cel putin 2 tampoane (frotiu Gram pentru diagnosticul
asocierii anaerobe fuso- spirilare, Angina Plaut- Vincent)),
- in caz de suspiciune de difterie, se recolteaza 3 tampoane faringiene si 2
tampoane nazale,
- daca leziunea este profunda, in fosele nazale, recoltarea secretiilor este
efectuata de catre specialist ORL, prin rinoscopie anterioara, cu speculul
nasal,
- este indicat ca pe buletinul de trimitere sa se specifice examenul solicitat,

● Sputa si aspiratul bronsic:

- prelevarea sputei se efectueaza din expectoratia de dimineata, cand
pacientul isi face “ toaleta bronsiilor”,
- in prealabil, bolnavul va efectua o gargara cu ser fiziologic,
- se va insista asupra obtinerii sputei propriu-zise si nu a salivei sau
secretiilor nazale,
- produsul este prelevat intr-un recoltor steril, de unica folosinta, din
materil plastic transparent, cu capac etans, ce se deschide prin
desurubare,
- la copiii sub 2 ani, care inghit sputa, prelevarea se efectueaza prin
spalatura gastrica,
- metoda fidela dar laborioasa, care necesita servicii specilizate si aparatura
deosebita: bronhoscopia, consta in recoltarea spalaturii bronsice, prin
lumenul bronhoscopului, indreptat direct spre locul leziunii,
- recoltoarele trebuie etichetate cu nume, prenume, pav., salon, data si ora
recoltei.
- prelevarea sputei in tuberculoza pulmonara : se face prin expectoratie
spontana sau provocata, procedandu- se la recolte repetate, cu mentinerea
intre timp a produsului la frigider.
● Coprocultura:
- recoltarea materiilor fecale se realizeaza in recipiente speciale (copro-
recoltoare) din material plastic transparent, sterile, cu capac etans,
indepartat prin desurubare,
- produsul care permite cele mai multe izolari este scaunul emis spontan,
proaspat,
- la bolnavii cu scaune diareice, in perioada de stare, se recolteaza cu
lopetica recoltorului portiuni de scun cu mucus, sange, sau esantioane
din 2- 3 locuri diferite,

5
- la bolnavii cronici, purtatori, persoane nespitalizate, scaunul va fi
provocat prin purgativ salin ( sulfat de Na si Mg),
- pentru controlul purtatorilor de bacilli tifici, prelevarea se face timp de
3 zile consecutiv, dupa administrare unica de purgativ,
- in cazul purtatorilor cronici de bacilli dizenterici, se folosesc sonde
Nelaton nr. 16- 18,
- conservare in mediu Cary- Blair sau transport imediat,

● Lichid gastric, lichid duodenal si bila:

- recoltarea lichidului gastric se efectueaza dupa tehnica cunoscuta cu
urmatoarele precautii: neadministrarea pranzului de proba, sterilizarea
sondei, gargara prelungita cu apa oxigenata,
- sucul gastric se recolteaza dimineata pe nemancate, dupa 8- 12 ore de la
ultima masa,
- se introduce sonda Foucher si sucul gastric se obtine prin sifonare in
recipient steril,
- tubajul duodenal se executa dimineata, pe nemancate, (8- 10 ore de post),
- bolnavul in decubit dorsal,
- se introduce lent sonda Einhorn, pana cand reperul 45 apare in dreptul
arcadei dentare (in stomac dupa aprox. 45 min),
- se schimba pozitia bolnavului in decubit lateral drept, se solicita
bolnavului sa inghita sonda pana la diviziunea 65( atingerea duodenului),
- se aspira cu seringa de 10 ml,
- primul continut se arunca (suc gastric),
- se aspira lichid galben, consistent= lichid duodenal,
- dupa 10 min se scurge lichid galben- portocaliu= bila A; dupa alte 20
min, se scurge lichid castaniu= bila B,

● Probe de exereza chirurgicala si necroptice:

- prelevarea organelor de exereza este de competenta exclusiva a
specialistului chirurg,
- in caz de necropsie, se recolteaza sange din inima, organe, tesuturi si
colectii purulente, cu instrumentar steril, de uz strict in scop bacteriol.
- recoltarea de puroi, lichide pleurale, peritoneale, se executa cu seringa si
se transvazeaza in recipient steril,
- nu se recomanda recolta cu tamponul.

6
TRANSPORTUL PROBELOR

catre laboratorul de microbiologie se efectueaza in cel mai scurt timp

posibil de la momentul recoltei,
- se efectueaza in recipiente sterile,
- insotite de buletine de analiza corect completate,
- Lcr si hemoculturile se transporta imediat, la temperatura corpului,consti-
tuind urgente majore,
- in suspiciune de flora anaeroba, produsul se transporta in seringa, cu
evitarea contactului cu aerul atmospheric, in cel mai scurt timp,
- se folosesc la nevoie medii de conservare si transport: Stuart, Amies,
Cary- Blair.
- se efectueaza doar de catre persoane instruite in acest scop,
- timpul maxim admis de la recoltarea produsului este de 1 ora, dupa care,
rezultatul este compromis.