Degradación de polietileno de baja densidad por

Pseudomonas
sp. AKS2 biofilm

Los materiales de polietileno abstractos son

una preocupación ambiental seria ya que su
naturaleza no degradable les permite persistir
en el medio ambiente. Estudios recientes han
demostrado que el polietileno puede ser
degradado por microbios a una velocidad muy
lenta tasa, por lo que los cambios detectables
son evidentes después de varios años. En el
presente estudio, informamos la degradación
del polietileno de baja densidad por
Pseudomonas sp. AKS2. A diferencia del
informes anteriores, degradación por
Pseudomonas sp. AKS2 es relativamente
rápido ya que puede degradar 5 ± 1% de la
partida material en 45 días sin oxidación
previa. Esta degradación puede ser alterada
por agentes que modulan la hidrófoba.
interacción entre polietileno y el microbio.
Como mineral el aceite promueve
interacciones hidrofóbicas, mejora las
bacterias fijación a la superficie del polímero.
Este accesorio mejorado da como resultado
una mayor formación de biopelícula y una
mayor degradación polimérica. Por el contrario,
Tween 80 reduce la unión bacteriana a la
superficie del polímero al disminuir las
interacciones hidrófobas y, por lo tanto, reduce
el polímero degradación. Por lo tanto, este
estudio establece una correlación entre la
interacción hidrófoba y la degradación del
polímero y También relaciona la capacidad de
formación de biopelículas de las bacterias con
Potencial degradante de polímeros. Palabras
clave Biodegradación. Pseudomonas LDPE
Hidrofobicidad Biofil

Introducción El polietileno representa hasta el

64% de todos los sintéticos. plásticos
producidos y utilizados principalmente para la
fabricación bolsas de plástico, botellas y
envases desechables (Byuntae et al.1991). El
polietileno permanece en el ambiente por un
largo período de tiempo ya que carece de
grupos funcionales requeridos para la
degradación microbiana. Por lo tanto, a base
de polietileno los materiales plásticos se
acumulan en el medio ambiente a una tasa
alarmantemente alta de aproximadamente 25
millones de toneladas por año (Soni et al.
2009; Zahra et al. 2010). De acuerdo con su
naturaleza inerte, una lámina de polietileno que
se mantuvo en suelo húmedo durante un
período de 12 años no mostró evidencia de
pérdida de peso (Potts 1978). En un estudio
separado, solo la degradación parcial de Se ha
observado una película de polietileno después
de una incubación prolongada de 32 años
dentro del suelo (Otake et al. 1995). Sin
embargo, es evidente por los estudios
recientes que la tasa de degradación biótica de
polietileno de baja densidad (LDPE) puede ser
mejorado por su oxidación previa (Chatterjee
et al. 2010; Albertsson et al. 1998; Roy y col.
2008; VolkeSepulveda et al. 2002). Es
probable que la oxidación de el polietileno
genera grupos carbonilo que pueden ser
utilizados por microorganismos para su
degradación (Albertsson 1978, 1980; Cornell y
col. 1984). Todos estos informes indican que el
polietileno es altamente recalcitrante con
respecto al natural degradación. En nuestro
estudio anterior, hemos informado el
aislamiento de un Cepa de Pseudomonas
(Pseudomonas sp. AKS2) capaz de
degradación de un polímero sintético de
polietileno succinato (PES) (Tribedi et al.
2012). En el estudio actual, mostramos que el
el mismo organismo puede degradar LDPE
hasta 5 ± 1% a 30 ° C en solo 45 días sin
oxidación previa y discuta el papel de
hidrofobicidad y la capacidad de formación de
biopelículas de la organismo en este proceso
de degradación.

materiales y métodos Polietileno Las películas

de LDPE utilizadas en este estudio se
obtuvieron de mercados locales (Kolkata)
donde se vendieron como bolsas de transporte
de 20 μm de espesor. Para los experimentos,
películas de LDPE se cortaron en tiras
pequeñas y se esterilizaron con 70% alcohol.
Cepa bacteriana y condición de cultivo
Pseudomonas sp. AKS2 fue previamente
aislado del Desechos sólidos municipales de
Calcuta vertiendo tierra del suelo (Kolkata,
India) como un posible degradante de PSA
(Tribedi et Alabama. 2012). Este aislado se
inoculó en 100 ml de basal. medios que
contienen 100 mg de extracto de levadura, 1 g
(NH4) 2SO4, 200 mg de MgSO4 · 7H2O, 100
mg de NaCl, 20 mg de CaCl2 · 2H2O, 10 mg
de FeSO4 · 7H2O, 0.5 mg de Na2MoO4 ·
2H2O, 0.5 mg Na2WO4 · 2H2O, 0.5 mg
MnSO4, 1.6 g K2HPO4, 200 mg KH2PO4 (por
litro de agua destilada) y 300 mg de estéril
Películas de LDPE y posteriormente incubadas
a 30 ° C durante 45 días en condición de
agitación. En algunos experimentos, el aceite
mineral (un mezcla de alcanos que contienen
longitud de cadena que varía de Se añadió
C15 a C40) o Tween 80 (tensioactivo no
iónico) a los medios de comunicación para
probar el efecto de estas sustancias en
bacterias unión al polímero y degradación de
LDPE por Pseudomonas sp. AKS2. El aceite
mineral y Tween 80 fueron hecho estéril
mediante filtración a través de un policarbonato
de 0.4 μm filtro de membrana Determinación
del peso seco del LDPE residual. Para facilitar
la medición precisa del peso seco de LDPE
residual, las películas de LDPE se recuperaron
de los medios condicionados, y las células
bacterianas adheridas, si las hubo, fueron
lavado de la superficie de LDPE con 2% (v / v)
de sodio solución de dodecil sulfato (SDS) y
luego se lava con agua destilada (Gilan et al.
2004). El aceite mineral residual que contenía
LDPE, si lo hubiera, se trató con cloroformo
antes para lavar con SDS para eliminar el
aceite mineral del LDPE superficie. El LDPE
lavado se secó durante la noche a 60 ° C.
antes de pesar La diferencia de peso entre
inicial peso y peso final indica la extensión de
polietileno utilización por la bacteria. Análisis
microscópico de la degradación de LDPE. Para
examinar la degradación de la película de
polietileno por la bacteria Pseudomonas sp.
AKS2, las películas de polietileno se
recuperaron de los medios acondicionados y
se lavaron con SDS al 2% para eliminar
organismos adheridos, si los hay. A partir de
entonces, las películas se secaron al aire
durante la noche, y la morfología superficial de
la ambas películas tratadas con microbios o sin
tratar fueron examinadas por ambos
microscopía electrónica de barrido (SEM) y
microscopía de fuerza atómica (AFM). Para el
análisis SEM, las películas de polietileno
fueron cortadas en tiras pequeñas, recubiertas con
oro, y luego
examinado bajo SEM. Para el análisis AFM, todas
las imágenes fueron
obtenido con una velocidad de exploración de 1.0
Hz y una resolución de
512 × 512 píxeles.
Análisis de resistencia a la tracción de LDPE
La resistencia a la tracción de estas piezas se midió
usando un tensómetro como se describió
anteriormente (Tribedi et al. 2012).
Estimación de biomasa bacteriana a partir de
película de LDPE
La densidad de población de Pseudomonas sp.
AKS2 en el
La superficie de la película de LDPE se determinó
indirectamente determinando la concentración de
proteína extraíble como la cantidad de
La proteína extraíble es directamente proporcional
al número de
microorganismos adheridos. Para extraer la proteína
de los microorganismos que se adhieren a las
películas de LDPE, se sacaron las películas
de medios acondicionados a diferentes intervalos de
tiempo, lavados
con agua, y luego se hierve durante 30 minutos en 5
ml de 0.5 N
NaOH La suspensión se centrifugó y el
sobrenadante
fue coleccionado. La concentración de proteína fue
determinada por el
Método de Lowry (Lowry et al. 1951).
Fijación bacteriana en película de LDPE
Para examinar la adherencia de Pseudomonas sp.
AKS2 en el
Superficie de LDPE, la película de LDPE se
recuperó del
medios condicionados con intervalo de tiempo
regular, teñidos con
naranja de acridina (4 μgml − 1
), secados al aire y observados bajo un
microscopio de fluorescencia Para análisis SEM,
películas de LDPE
se fijaron con glutaraldehído al 2,5% durante 1 h
después de su
eliminación del medio de crecimiento. Las películas
se secaron en
al vacío y recubierto de oro. Células adheridas o la
biopelícula
las células fueron examinadas bajo SEM (× 6,000).
Viabilidad de la biopelícula bacteriana
Para comprobar la actividad metabólica de la
biopelícula en el
superficie de polietileno, la película de LDPE se
retiró del
medio acondicionado a un matraz que contiene 60
ml de
Tampón de fosfato de sodio 60 mM, pH 7,6.
Fluoresceína
se añadió diacetato (FDA) a una concentración final
de
10 μgml − 1
. El matraz se agitó a 30 ° C, y 1 ml
la alícuota se retiró en varios puntos de tiempo
durante el
incubación. Estas muestras fueron centrifugadas a
8,000 rpm
durante 5 min, y la absorbancia del sobrenadante a
Se midieron 494 nm. Las muestras sin FDA
sirvieron como
blancos, y una muestra de LDPE de un medio basal
estéril sirvió como control
Extracción y medición de exopolisacáridos.
La biopelícula en la superficie de LDPE se recuperó
por desguace en
agua esteralizada. Esta suspensión de biopelícula se
centrifugó a
6,000 rpm por 20 min a 4 ° C. Se recogió el
sobrenadante. El sedimento se trató con EDTA 10
mM, se agitó vorticialmente durante
15 min, y se vuelve a centrifugar para extraer
exopolisacáridos unidos a células (EPS). El
sobrenadante fue recogido y mezclado
con el sobrenadante anterior. El sobrenadante
agrupado era
luego se mezcla con 2,2 volúmenes de etanol
absoluto frío,
incubado a -20 ° C durante 1 h y centrifugado a
6,000 rpm
durante 20 min a 4 ° C. El sedimento que contenía
EPS se disolvió.
en agua estéril y medido por el método del ácido
fenol sulfúrico (Dubois et al. 1956).
análisis estadístico
Los resultados experimentales se sometieron a
análisis estadísticos de
Análisis de varianza unidireccional (ANOVA).
análisis estadístico
se llevó a cabo utilizando el software SPSS-16.
Todos los experimentos se realizaron tres veces.
Resultados
Pseudomonas sp. AKS2 puede utilizar LDPE como
única fuente
de carbono
Hemos informado que Pseudomonas sp. AKS2 tiene
el
capacidad de degradar PES (Tribedi et al. 2012).
Desde PES es
muy similar en naturaleza con LDPE (Tansengco y
Tokiwa
1998), hemos examinado la degradación de LDPE
por
Pseudomonas sp. AKS2. Hacia esto, películas
estériles de LDPE
se agregaron como única fuente de carbono al
medio basal,
seguido de la inoculación con Pseudomonas sp.
AKS2. En
En el experimento de control, se omitió el paso de
inoculación.
Después de 45 días de incubación a 30 ° C,
observamos que el
medio inoculado con Pseudomonas sp. AKS2 se
convierte
turbio que indica el crecimiento del organismo
utilizando
LDPE como única fuente de carbono (Fig. 1a). Para
confirmar más
La capacidad de degradación de LDPE de
Pseudomonas sp. AKS2
El cambio en la topografía de la superficie de las
películas de LDPE fue
examinado tanto por SEM como por AFM. La
imagen SEM mostró
Una alteración en la topología de la superficie para
aquellas películas de LDPE que
fueron tratados con Pseudomonas sp. AKS2. La
superficie de
la película tratada se volvió áspera, y una serie de
grietas y
las ranuras también fueron evidentes (Fig. 1b). En
contraste, la película que
no fue tratado con Pseudomonas sp. AKS2 retuvo
un
superficie lisa incluso después de 45 días de
incubación bajo el
misma condición (Fig. 1b). También se han
observado alteraciones similares en la topología de
la superficie del análisis de imágenes AFM
(Fig. 1b). De acuerdo con estas observaciones,
también tenemos
examinó la resistencia a la tracción de la película de
LDPE, y fue descubrió que la resistencia a la
tracción se redujo significativamente
la película de LDPE que se trató con Pseudomonas
sp.
AKS2 (Fig. 1c).
Para cuantificar la eficiencia de degradación de
LDPE de
Pseudomonas sp. AKS2, la pérdida de peso de las
películas de LDPE
se midió en diferentes puntos de tiempo después de
incubarlos
con Pseudomonas sp. AKS2. El resultado mostró
una pérdida de peso dependiente del tiempo de la
película de LDPE. Durante un período de
45 días, se encontró 5 ± 1% del material de partida
de LDPE
ser degradado por Pseudomonas sp. AKS2 (Fig. 2).
Sin embargo, no fue evidente la pérdida de peso en
el experimento de control en el que la incubación se
llevó a cabo a la misma temperatura durante un
período de tiempo similar pero sin
Pseudomonas sp. AKS2 (datos no mostrados). Por
lo tanto, esto
El resultado muestra que la pérdida de peso de
LDPE durante la incubación con Pseudomonas sp.
AKS2 se debió a la utilización del polietileno por
las bacterias como único carbono
fuente. Tomados en conjunto, los resultados
anteriores indican que
Pseudomonas sp. AKS2 es capaz de degradar
LDPE.
Aceite mineral y surfactante no iónico Tween 80
modulate
adherencia de Pseudomonas sp. AKS2 a LDPE
En nuestro estudio anterior, hemos demostrado que
la superficie celular
hidrofobia de Pseudomonas sp. AKS2 es muy alto
(31 ± 2%), y juega un papel importante en la
degradación del PSA
(Tribedi et al. 2012). También se ha informado que
los agentes
como el aceite mineral y Tween 80 que son
moduladores de
La interacción hidrofóbica entre el polímero y el
organismo puede modular la biodegradación del
polietileno.
(Gilan et al. 2004). Por lo tanto, es posible que estos
dos
los agentes también podrán modular la degradación
de
LDPE por Pseudomonas sp. AKS2. Para examinar
esto, nosotros
ha agregado aceite mineral o Tween 80 a los medios
basales
que contiene LDPE estéril antes de la inoculación
con
Pseudomonas sp. AKS2. Observamos una
degradación reducida
de LDPE con una concentración creciente de Tween
80
(Tabla 1). Sin embargo, la degradación de LDPE
por
Pseudomonas sp. Se descubrió que AKS2
aumentaba con
El aumento en la concentración de aceite mineral
(Tabla 1). Mineral
el aceite promueve la interacción hidrofóbica entre
la célula y
superficie polimérica, mientras que Tween 80 la
reduce (Gilan et al.
2004). Por lo tanto, se espera que el archivo adjunto
de
Pseudomonas sp. La superficie de AKS2 a LDPE se
reducirá
con Tween 80, y por otro lado, el aceite mineral
facilitar la fijación de Pseudomonas sp. AKS2
células a
La superficie del polímero. Para probar esta
hipótesis, hemos monitoreado la adherencia de
Pseudomonas sp. AKS2 a la
Superficie de LDPE en diferentes puntos de tiempo
mediante tinción de bacterias
con naranja de acridina. Hemos observado un
aumento constante en
La adherencia de Pseudomonas sp. AKS2 con
tiempo en el
superficie de LDPE (Fig. 3a). De acuerdo con
nuestra hipótesis,
También observamos una mayor unión de las
células a la polymer surface when mineral oil was added to the medium
while the addition of Tween 80 in the medium resulted in a reduced

attachment of cells to LDPE, in comparison to films in media lacking

either mineral oil or Tween 80 (compare Fig. 3a and b). Thus, the current

study reveals that the agents like mineral oil and Tween 80 can modulate

the biodegradation of LDPE by Pseudomonas sp. AKS2 by altering the

bacterial adherence to LDPE.

El aceite mineral mejora Pseudomonas sp.

AKS2 biofilm formación en la superficie de
LDPE La capacidad de un organismo para
formar una biopelícula mejora su potencial de
biodegradación significativamente (Gilan et al.
2004;

Fig. 1 Pseudomonas sp. AKS2 utiliza LDPE

como única fuente de carbón. una
Pseudomonas sp. AKS2 sobrevive en medios
basales que contiene LDPE. Igual números de
células de un saturado cultivo de
Pseudomonas sp. AKS2 fueron inoculados en
basal medio que contiene o no que contiene
película de LDPE y fueron incubado a 30 ° C
durante 45 días. La aparición de turbidez.
indica el crecimiento de la organismo. b
Microscópico (SEM y AFM) observaciones de
Pseudomonas sp AKS2 tratada o película de
LDPE sin tratar. los la imagen es
representativa de las imágenes obtenido de 20
campos diferentes para cada grupo y de tres
Experimentos independientes. los
barrepresenta 1 μm. c tratamiento de la
película de LDPE con Pseudomonas sp. AKS2
reduce la tensión fuerza. El resultado
representa el promedio de tres independientes
experimentos Las barras de error indican
desviación estándar (± SD). Significación
estadística entre el los grupos fueron
evaluados por ANOVA al nivel del 5%. Media
valores con letras diferentes (a yb) son
significativamente diferentes entre tratamientos

como el aceite mineral y Tween 80 pueden

modular la biodegradación de LDPE por
Pseudomonas sp. AKS2 alterando el
adherencia bacteriana al LDPE. El aceite
mineral mejora Pseudomonas sp. AKS2 biofilm
formación en la superficie de LDPE La
capacidad de un organismo para formar una
biopelícula mejora su potencial de
biodegradación significativamente (Gilan et al.
2004; Fig. 1 Pseudomonas sp. AKS2 utiliza
LDPE como única fuente de carbón. una
Pseudomonas sp. AKS2 sobrevive en medios
basales que contiene LDPE. Igual números de
células de un saturado cultivo de
Pseudomonas sp. AKS2 fueron inoculados en
basal medio que contiene o no que contiene
película de LDPE y fueron incubado a 30 ° C
durante 45 días. La aparición de turbidez.
indica el crecimiento de la organismo. b
Microscópico (SEM y AFM) observaciones de
Pseudomonas sp AKS2 tratada o película de
LDPE sin tratar. los la imagen es
representativa de las imágenes obtenido de 20
campos diferentes para cada grupo y de tres
Experimentos independientes. los
barrepresenta 1 μm. c tratamiento de la
película de LDPE con Pseudomonas sp. AKS2
reduce la tensión fuerza. El resultado
representa el promedio de tres independientes
experimentos Las barras de error indican
desviación estándar (± SD). Significación
estadística entre el los grupos fueron
evaluados por ANOVA al nivel del 5%. Media
valores con letras diferentes (a yb) son
significativamente diferentes entre tratamientos
Fig. 2 Biodegradación de la película de LDPE
por Pseudomonas sp. AKS2. El peso seco de
las películas de LDPE se midió en diferentes
puntos de tiempo. durante el curso de
incubación. La pérdida de peso se trazó contra
el tiempo de incubación. El resultado
representa el promedio de tres independientes
experimentos Las barras de error indican
desviación estándar (± SD) Tabla 1 Efectos de
Tween 80 y aceite mineral en la degradación
de LDPE por Pseudomonas sp AKS2
Concentración aditiva (en%) Pérdida de peso
(en%) después 45 días de incubación Ninguno
0 5 ± 1d Tween 80 0.01 2 ± 1 c 0.05 2 ± 1 c
Aceite mineral 0.01 8 ± 2 b 0,05 14 ± 2 a Los
valores son promedio ± DE de tres
experimentos independientes. Valores con la
misma letra en una columna no es
significativamente diferente por el LSD prueba
al nivel del 5%
Fig. 3 Modulación de Pseudomonas sp. AKS2
adherencia a LDPE por
aceite mineral y Tween 80. una cinética de
Pseudomonas sp. AKS2
apego a LDPE. Adherencia de Pseudomonas sp.
AKS2 a LDPE
Las películas recuperadas en diferentes momentos
se examinaron mediante tinción con
naranja de acridina (4 μgml − 1
) y observado bajo un microscopio de fluorescencia.
La figura es representativa de imágenes obtenidas
de 20 campos diferentes para cada grupo y de tres
experimentos independientes. si
Efecto del aceite mineral y Tween 80 sobre la
adherencia de Pseudomonas sp.
AKS2 a la película de LDPE. La figura es
representativa de las imágenes.
obtenido de 20 campos diferentes para cada grupo y
de tres experimentos independientes

Balasubramanian et al. 2010). De acuerdo con

esta idea, observamos la formación de una
biopelícula en la superficie de LDPE por
Pseudomonas sp. AKS2 tanto en presencia
como en ausencia de aceite mineral en el
medio de crecimiento (Fig. 3a yb). Para
confirmar aún más la formación de
biopelículas, hemos examinado el superficie de
películas de LDPE por SEM. La figura 4a
muestra claramente formación de una
biopelícula en la superficie de LDPE tanto en
presencia y ausencia de aceite mineral. Sin
embargo, la tasa de La formación de
biopelículas se mejoró significativamente en
presencia de aceite mineral ya que se formó
una extensa biopelícula en solo 15 días, en
comparación con la muestra de control en la
que La formación de biopelículas fue evidente
a los 30 días (Fig. 4a). Incluso en el punto de
tiempo de 45 días, la extensión de la formación
de biopelículas hizo No alcanzar el nivel
alcanzado en 15 días en presencia de aceite
mineral. No se observó formación de
biopelículas cuando Tween 80 estaba presente
(Fig. 3b). Secreciones de EPS de Los
organismos estabilizan la red de biopelículas, y
por lo tanto, EPS la medición se considera una
prueba importante para formación de
biopelículas. De acuerdo con nuestras
expectativas, observamos que la secreción de
EPS aumentó notablemente con el
aumento en el tiempo de incubación tanto en
presencia como en ausencia de aceite mineral
(Fig. 4b). Sin embargo, una mayor cantidad de
EPS Se observó secreción cuando estaba
presente aceite mineral. Esta resultado indica
claramente la formación de una biopelícula en
el Superficie de LDPE por Pseudomonas sp.
AKS2. Para examinar el viabilidad bacteriana y
actividad metabólica en una biopelícula,
nosotros han medido la cantidad de actividad
de la enzima fluoresceína diacetato hidrolasa
en películas de LDPE tratadas
diferencialmente. Las células microbianas
viables producen una gran variedad de células
hidrolíticas. enzimas, que pueden escindir el
diacetato de fluoresceína para producir
fluoresceína que se puede detectar por
espectrofotometría, y Este ensayo es
ampliamente utilizado para medir la actividad
metabólica celular. y la viabilidad celular de la
biopelícula (Killham y Staddon 2002; Teng y
col. 2010). De acuerdo con la formación de
biopelículas, nosotros han observado mayores
actividades microbianas desde la superficie de
las películas de LDPE cuando se agregó aceite
mineral al medio de crecimiento en
comparación con las películas tratadas con
Tween 80 o no se trata (Fig. 4c). Para
comparar cuantitativamente el tamaño de la
población bacteriana en las diferentes
películas de LDPE, hemos determinado la
proteína extraíble total de Películas de LDPE
(ver Materiales y métodos). Como se
esperaba, nosotros han obtenido la mayor
cantidad de proteína de la superficie de la
película de LDPE en el crecimiento que
contiene aceite mineral medio (Fig. 4d).
Tomados en conjunto, nuestros resultados
muestran que la adición de El aceite mineral
produce un mayor nivel de fijación bacteriana.
a la superficie de LDPE e induce la formación
de una biopelícula que finalmente da como
resultado una degradación mejorada de LDPE.
Por lo tanto, la formación de una biopelícula
puede ser un factor importante que contribuye
a la mayor eficiencia de la degradación de
LDPE por Pseudomonas sp. AKS2 en
presencia de aceite mineral en la médium.
También se sabe que las bacterias cambiaron
de tamaño y se forman cuando forman una
biopelícula. De acuerdo con esto, nosotros
También hemos observado que Pseudomonas
sp. AKS2 sufrió Una reducción significativa en
su tamaño y forma en una biopelícula (Fig. 4a).
Discusión En este estudio, informamos la
degradación del LDPE por las bacterias
mesofílicas Pseudomonas sp. AKS2. Hemos
observado que Pseudomonas sp. AKS2 puede
degradar LDPE hasta 5 ± 1% después de 45
días de incubación sin oxidación previa de
LDPE por tratamiento térmico, ácidos y / o
irradiación UV, y esta degradación puede
incrementarse hasta 14 ± 1% con el adición de
aceite mineral al medio de crecimiento. Esto es
en en contraste con los informes publicados
anteriormente que muestran muy degradación
lenta de LDPE y una mejora de esto
degradación solo después de que LDPE fue
sometido a oxidación previa (Chatterjee et al.
2010; Albertsson et al. 1998; Roy et al. 2008).
Por lo tanto, en comparación con informes
anteriores, la tasa de LDPE degradación por
Pseudomonas sp. AKS2 es muy alto, incluso
sin el uso de oxidación previa. Esta mayor tasa
de degradación puede atribuirse en parte a la
alta hidrofobia de la superficie. de
Pseudomonas sp. AKS2. En general, la
hidrofobicidad del polietileno evita la adhesión
bacteriana a su superficie como la mayoría Las
superficies bacterianas son hidrofílicas. Sin
embargo, en un informe anterior, Hemos
demostrado que la superficie celular de
Pseudomonas sp. AKS2 es altamente
hidrofóbico (Tribedi et al. 2012). Esta superficie
celular hidrofobicidad resulta en un aumento
de la unión de Pseudomonas sp. AKS2 a la
superficie del polímero hidrofóbico LDPE.
Constantemente, también hemos observado
que agentes como el aceite mineral y Tween
80, capaz de modular la interacción hidrófoba
entre polietileno y organismo, influyen tanto las
bacterias adherencia y degradación del
polímero. La formación de biopelículas
bacterianas puede verse influenciada por
hidrofobicidad de la superficie celular (Gilan et
al. 2004; Balasubramanian et al. 2010).
Consistentemente, en el presente estudio,
hemos encontrado la formación de una capa
densa de biopelícula y mejora concomitante de
biodegradación en
sin el uso de oxidación previa. Esta mayor tasa
de degradación puede atribuirse en parte a la
alta hidrofobia de la superficie. de
Pseudomonas sp. AKS2. En general, la
hidrofobicidad del polietileno evita la adhesión
bacteriana a su superficie como la mayoría Las
superficies bacterianas son hidrofílicas. Sin
embargo, en un informe anterior, Hemos
demostrado que la superficie celular de
Pseudomonas sp. AKS2 es altamente
hidrofóbico (Tribedi et al. 2012). Esta superficie
celular hidrofobicidad resulta en un aumento
de la unión de Pseudomonas sp. AKS2 a la
superficie del polímero hidrofóbico LDPE.
Constantemente, también hemos observado
que agentes como el aceite mineral y Tween
80, capaz de modular la interacción hidrófoba
entre polietileno y organismo, influyen tanto las
bacterias adherencia y degradación del
polímero. La formación de biopelículas
bacterianas puede verse influenciada por
hidrofobicidad de la superficie celular (Gilan et
al. 2004; Balasubramanian et al. 2010).
Consistentemente, en el presente estudio,
hemos encontrado la formación de una capa
densa de biopelícula y mejora concomitante de
biodegradación en Conclusión
En conclusión, el estudio actual demuestra la
degradación de
LDPE por un microbio mesofílico, Pseudomonas
sp. AKS2
eso no requiere oxidación previa. Indica la
presencia de actividades enzimáticas únicas en
Pseudomonas sp.
AKS2. Además de las actividades enzimáticas, la
mejor degradación de LDPE por Pseudomonas sp.
AKS2 también puede ser
atribuido a su capacidad para formar una biopelícula
en la que la hidrofobicidad de la superficie celular
puede desempeñar un papel importante.
Agradecimientos Los autores desean agradecer al
Dr. Srimonti
Sarkar para la lectura crítica del manuscrito. PT es
apoyado por
CSIR-Senior Research Fellowship, Gobierno de
India. Instalación AFM
fue utilizado en la instalación instrumental central
bajo el programa DBT-IPLS en
Universidad de Calcuta. Este trabajo es apoyado en
parte por una subvención en ayuda
para investigación científica del Departamento de
Biotecnología, Gobierno de Bengala Occidental,
India.
Conflicto de intereses Los autores declaran no tener
ningún conflicto de intereses.

Fig. 4 El aceite mineral mejora la formación de

biopelículas de Pseudomonas sp. AKS2 en la
superficie de LDPE. Una comparación de la
formación de biopelículas de Pseudomonas sp.
AKS2 en la superficie de LDPE en presencia y
ausencia de aceite mineral en el medio de
crecimiento evaluado por análisis SEM. La
figura es representativa de imágenes
obtenidas de 20 diferentes campos para cada
grupo y de tres experimentos independientes.
El bar representa 3 μm. La secreción de EPS
se indica con una flecha. b aceite mineral
aumenta la secreción de EPS. EPS producido
por Pseudomonas sp. AKS2 bajo diferentes
condiciones experimentales se midieron por el
método convencional de ácido fenol sulfúrico.
El resultado representa el promedio de Tres
experimentos independientes. Las barras de
error indican desviación estándar (± SD). La
significación estadística entre los grupos fue
evaluada por ANOVA al 5% de nivel de
significancia. Valores medios con letras
diferentes (a, b, cyd) son significativamente
diferentes entre los tratamientos. c microbiana
perfil de actividad. El grado de actividad
microbiana de Pseudomonas sp.
Biofilm AKS2 en el LDPE recuperado de
diferentes medios de crecimiento fue
monitoreado por el ensayo de hidrólisis de la
FDA. Los cuadrados indican medio con aceite
mineral, los triángulos indican medio con
Tween 80, y los diamantes indican medio sin
aceite mineral o Tween 80. El resultado
representa el promedio de tres experimentos
independientes. Barras de error indicar
desviación estándar (± DE). d Efecto del aceite
mineral y Tween 80 sobre biomasa bacteriana
en la superficie de LDPE. La extensión de
Pseudomonas sp. AKS2 biomasa en películas
de LDPE bajo diferentes tratamientos se
cuantificó midiendo la proteína total extraída de
la biopelícula. Los cuadrados indican medio
con aceite mineral, los triángulos indican medio
con Tween 80, y los diamantes indican medio
sin aceite mineral o Tween 80. Se han utilizado
tres réplicas para cada tratamiento. los El
resultado representa el promedio de estas tres
réplicas. Barras de error indicar desviación
estándar (± DE)