CÂNEPA CODRULUI (EUPATORIUM CANNABINUM)

Cânepa-codrului este o plantă cu un potențial fitoterapeutic ridicat dar și cu un grad

important de citotoxicitate. Pentru utilizarea eficientă a acesteia și în condiții de siguranță sunt
necesare studii științifice și clinice pentru determinarea efectelor, dozelor terapeutice,
mecanismelor de acțiune.

Planta are un conținutbogat în substanțe bioactive, după partea vegetală:

 Partea aeriană - lactone amare (eupatorina, eupatopicrina), saponine, taninuri,

ulei volatil care conferă frunzelor un miros caracteristic, alcaloizi. Cercetările din
ultimii ani, au condus la izolarea unor flavonoide anticancerigene (M. Ebadi). s-au
identificat poliglucide cu greutatea moleculară mare, care prezintă asupra omului
acţiune imunostimulentă (Bojor O., Popescu O). Flavonele 6-metoxi hispidulin și
eupafolin au fost identificate recent din părțile aeriene ale Eupatorium
cannabinum L. Glicozide flavonolice determinate anterior: astragalin,
kaempferol-3-rutinoside, hyperoside, isoquercitrin și rutin. Hispidulin, eupafolin
și rutin au fost verificate pentru citotoxicitate in vitro. (Elema ET1, Schripsema J,
Malingré TM., Flavones and flavonol glycosides from Eupatorium cannabinum
L., Pharm Weekbl Sci. 1989 Oct 20;11(5):161-4.)

 Rădăcini - uleiuri volatile, amidon, taninuri. Un component al uleiului volatil din

rădăcina de cânepa codrului este euparina.

Substanțele bioactive din cânepa-codrului au fost extrase și studiate în ultimii ani.

Astfel, lactonele sesquiterpenice (STLs) sunt reprezentate prin două clase structurale,
guaianolide și germacrolanolide (Herz, Kalyanaraman, & Ramakrishnan, 1977). Recent (Mass
colab., 2011) au fost descrise mai multe STLs noi folosind cromatografie lichidă de înaltă
performanță (HPLC) cuplată cu spectrometrie de masă (MSMS). Au fost identificate patru noi
guaianolide și toate au demonstrat o activitate antiprotozoare împotriva vectorului malariei
Plasmodium falciparum și alte protozoare (Maas, Hensel, da Costa, Brun, Keiser & Schmidt,
2011). Maas M1, Hensel A, Costa FB, Brun R, Kaiser M, Schmidt TJ., An unusual dimeric
guaianolide with antiprotozoal activity and further sesquiterpene lactones from
Eupatoriumperfoliatum, Phytochemistry. 2011 May;72(7):635-44. doi:
10.1016/j.phytochem.2011.01.025. Epub 2011 Feb 15.)

Polizaharide
Două polizaharide au fost izolate din E. perfoliatum prin HPLC cuplată cu rezonanță magnetică
nucleară (RMN 13C) și metode spectroscopice (Vollmar, Schäfer, & Wagner, 1986). Cei doi
compuși au fost caracterizați ca fiind 4-0-methylglucuronoxilani, unul cu greutate moleculară
mare (> 500000) și unul cu greutate moleculară mai mica (cca 40000), și ambele au aratat
activitate de fagocitoză (Vollmar, Schäfer, & Wagner, 1986).

Flavonoide
Metoxiflavonoidele sunt un alt grup de compusi caracteristici pentru genul Eupatorium. Herz și colab.
(1972) au izolat trei dihidroxiflavonoli din E. perfoliatum la începutul anilor 1970, în timp ce Wagner et al.
au identificat astragalinul, hiperozid, quercetina și kaempferol (Maas, Petereit, & Hensel, 2009). Mai
recent, patru agliconi flavonoizici metoxilați - eupafolin, hispidulin, patuletin și kaempferol - au fost
identificati folosind HPLC cuplată cu RMN și spectroscopie de masă (MS) (Maas și colaboratorii 2011.).

Fenoli
Folosind HPLC cu fază inversă cuplat cu diodă (DAD-UV), șase derivați de acid cafeic au fost izolati și
identificati prin spectroscopie RMN. Ei au fost acidul chinic, acidul clorogenic, acidul neoclorogenic și trei
derivați de acid cafeic (Maas și alții. 2009).

Lactonele sesquiterpenice din E. perfoliatum s-au dovedit a avea acțiuni citotoxice și

imunostimulante in vitro (Herz, Kalyanaraman, & Ramakrishnan, 1977; Wagner,
PROKSCH, VOLLMAR, Kreutzkamp, & Bauer, 1985) în timp ce un extract etanolic
din frunze uscate a arătat efecte citotoxice puternice împotriva a trei linii celulare de
mamifere și efecte antibacteriene slabe împotriva a două specii gram-pozitive
(Habtemariam & Macpherson, 2000). Habtemariam S1, Macpherson AM., Cytotoxicity
and antibacterial activity of ethanol extract from leaves of a herbal drug, boneset
(Eupatorium perfoliatum). , Phytother Res. 2000 Nov;14(7):575-7.). Extractele apoase și
 polizaharidele izolate au arătat, de asemenea, efecte imunomodulatoare - prin creștere
semnificativă a fagocitozei in vitro și in vivo (Wagner și colab, 1985; Vollmar, Schäfer, &
Wagner, 1986.). Studiile efectuate au demonstrat activitatea antibacteriană împotriva
Staphylococcus aureus in vitro (Brinker, 2009)

E. perfoliatum a fost, de mult timp folosit pentru tratarea tulburărilor febrile, și a fost
utilizat pe scară largă de indieni în acest scop (Hall, 1974; Brinker, 2009). Studiile
efectuate cu STLs indică mulți dintre acești compuși au efecte puternice impotriva
protozoare, deși efectele pot fi legate de citotoxicitatea lor inerentă (Schmidt, Nour,
Khalid, Kaiser, si Brun, 2009). Extractul în cloroform din părțile aeriene de E.
Perfoliatum a inhibat în mod activ vectorul malariei Plasmodium falciparum in vitro, și
un guaianolid dimeric s-a dovedit a fi cel mai activ constituent (Maas și colab., 2011).
Maas M1, Hensel A, Costa FB, Brun R, Kaiser M, Schmidt TJ., An unusual dimeric
guaianolide with antiprotozoal activity and further sesquiterpene lactones from
Eupatoriumperfoliatum., Phytochemistry. 2011 May;72(7):635-44. doi:
10.1016/j.phytochem.2011.01.025. Epub 2011 Feb 15.

Câteva studii științifice care demonstrează unele dintre proprietățile terapeutice ale plantei au
fost realizate, dar mai sunt necesare astfel de cercetări pentru a înțelege mecanismul de
acțiune și în special acțiunea in vivo.

1. Extractele de cânepa-codrului prezintă toxicitate față de celulele cancerigene

(cancer de colon).

Eupatorium cannabinum L. a fost mult timp folosit în medicina tradițională, cu toate

acestea nu sunt disponibile multe informații științifice cu privire la efectele extractelor complete.
Într-un studiu recent, din 2014, (Ribeiro-Varandas E, Ressurreição F, Viegas W, Delgado M.
Cytotoxicity of Eupatorium cannabinum L. ethanolic extract against colon cancer cells and
interactions with Bisphenol A and Doxorubicin., BMC Complement Altern Med. 2014 Jul
24;14:264. doi: 10.1186/1472-6882-14-264.), s-au evaluat efectele unui extract etanolic de E.
cannabinum (ECEE) asupra unei linii de celule tumoral de colon HT29. Au fost, de asemenea,
evaluate interacțiunile potențiale cu bisfenol A (BPA), un compus fenolic sintetic la care oamenii
sunt în general expuși, și cu un agent chimioterapeutic frecvent folosit, doxorubicină (DOX).
După 24 h de expunere la 50 μg/ml de extract, s-a detectat o pierdere severă a viabilității
celulare HT29 în timp ce concentrații mai scăzute, de 0.5, 5 and 25 μg/ml au condus la scăderi
semnificative ale viabilității celulare după 96 h de expunere. Expunerea la 25 μg/ml, timp de 48
de ore a dus la deteriorarea ireversibilă a celulelor cancerigene. Expunerea timp de 48 h la 25
μg/ml a indus, de asemenea, modificarea morfologiei coloniilor, hiperacetilarea H3K9, și
reducerea capacității proliferative. Acest tratament, de asemenea, a dus la o mitotiză drastică și
perturbarea nucleară. (Fig. 1)

Extractul etanolic de cânepa-codrului are activitate citotoxică asupra celulelor canceroase

HT29 și duc la perturbări mitotice si moartea celulelor non-apoptotice fără inducerea gravă a
deteriorării ADN-ului. Experimentele de interacțiune au arătat că extractul poate crește efectele
aneugenic ale bisfenolului A. Efectele sinergice ale extractului cu doxorubicină DOX susțin
utilizarea extractului de cânepa-codrului ca adjuvant în abordările chimioterapice.

2. Derivați de timol, benzofuranoid și fenilpropanoid au dovedit proprietăți

antiinflamatorii
 Într-un studiu din 2011 (Chen JJ1, Tsai YC, Hwang TL, Wang TC., Thymol,
benzofuranoid, and phenylpropanoid derivatives: anti-inflammatory constituents from
Eupatorium cannabinum., J Nat Prod. 2011 May 27;74(5):1021-7. doi: 10.1021/np100923z.
Epub 2011 Mar 10.), au fost izolați nouă noi compuși din părțile aeriene de Eupatorium
cannabinum subsp. Asiaticum, alături de alți 16 compuși deja cunoscuți. Compușii 6-8, 11, 13, și
15 au inhibat generarea anionului superoxid (valoarea IC50 ≤18.4 μM) de către neutrofile umane
supuse unor condiții inflamatorii (substanțe precum formil-L-metionil-L-leucil-L-
fenilalanine/citocalasin B).
Radicalii liberi sunt substanţe care derivă din compuşi oxidaţi incomplet, care au trecut
prin arderi parţiale, având în structura lor grupări de oxigen capabile să iniţieze la suprafaţa
membranelor celulare sau chiar în interiorul celulelor reacţii agresive de oxidare. Radicalii liberi
provin din procesele ce se petrec în organism (fagocitoza, catabolismul incomplet, producerea de
energie, detoxifiera hepatică), cât şi din mediul exterior (fum de ţigară, aer poluat, anumite
alimente şi medicamente, apa de fântână sau de robinet). Radicalii liberi cei mai activi sunt ionii:
superoxid (O22-), peroxid (O2-), hidroxid (OH￣), oxid nitric (NO ￣). Stimularea de la nivelul
membranelor neutrofilului produce radicali liberi derivaţi ai oxigenului activat. Inhibarea
producerii de către neutrofile a anionilor superoxide a derivaților de timol, benzofuranoid și
fenilpropanoid din cânepa-codrului a dovedit capacitatea antiinflamatorie.

3. Cânepa-codrului prezintă efecte hepatoprotective și coleretice

Într-un studiu din 1989, (Lexa A, Fleurentin J, Lehr PR, Mortier F, Pruvost M, Pelt JM.,
Choleretic and hepatoprotective properties of Eupatorium cannabinum in the rat., Planta Med.
1989 Apr;55(2):127-32.) s-a demonstrate efectele coleretic eși hepatoprotective ale speciei de
Eupatorium cannabinum.

Un extract apos a indus hipercolereza. Extractul are și proprietăți anti-necrotice în cazul hepatotoxicității
induse la cobia cu tetraclorură de carbon, reducând nivelul GPT plasmatic.
 4. Extractul de cânepa-codrului prezintă activitate antioxidantă și coleretică

Extractul apos din părțile aeriene de Eupatorium cannabinum a fost testat pe șobolani pentru
activitatea sa coleretică, antioxidantă și pentru evaluarea toxicității acute.
Extractul a prezentat un efect coleretic semnificativ (35%, i.v. și
50%, p.o.) după administrarea orală (500 mg / kg) și intravenoasă (250 mg/ kg)
fără modificări în producția de acizi biliari. Măsurarea Potențialului Antioxidant Total Reactiv
(TRAP) și a Reactivității antioxidante totale (TAR) indică faptul că
extractul are capacitate antioxidantă ridicată. Acesta poate fi datorată prezenței de antioxidanți,
cum ar fi compușii fenolici și flavonoidici care neutralizează și îndepărtează radicalii liberi.
Semne de toxicitate nu au fost observate până la doze orale de 3000 mg / kg.

Studiul a fost efectuat la Universitatea din Buenos-Aires, Argentina, în 2008. (Gorzalczany S1,
Muschietti L2, Repetto M3, Kartin L4, Ferraro G. 2, Martino V 2, Acevedo C., CHOLERETIC
AND ANTIOXIDANT EFFECT OF EUPATORIUM BUNIIFOLIUM, Pharmacologyonline
1: 139-147 (2008)). Anterior, la aceeași Universitate, în alte studii, s-au evidențiat activități
farmacologice precum: antivirale (García G, Campos, R, de Torres R, et al. Antiherpetic Activity
of Argentine Medicinal Plants. Fitoterapia 1990;61:542-546), anti-inflamatoare și analgezică
(Muschietti L, Gorzalczany S, Ferraro G, Acevedo C, Martino V. Phenolic compounds with anti-
inflammatory activity from Eupatorium buniifolium. Planta Medica 2001;67:743-744., Miño J.,
Muschietti, L., Ferraro G, Martino V, Acevedo C. Antinociceptive activity of Eupatorium
buniifolium aqueous extract. Fitoterapia 2005;76:100-103.) și de asemenea au raportat un efect
de deprimare (Miño J, Muschietti L, Ferraro G, Martino V, Acevedo C. Neuropharmacological
activity of Eupatorium buniifolium aqueous extract in mice. Phytoterapy Research 2007;21:262-
365).
Cercetările fitochimice pe părțile aeriene au arătat prezența de flavonoide, triterpenoide,
acizii hidroxicinamici și derivați (Muschietti L, Martino V, Ferraro G, Coussio J. Compuestos
polifenólicos aislados de Eupatorium buniifolium. An. Asoc. Quim. Argent. 1990;78:329.,
Muschietti L, Martino V, Ferraro G, Coussio J. 5,7,5’trihydroxy-3,6,2’,4’ tetramethoxyflavone
from Eupatorium buniifolium. Phytochemistry 1994;36:1085-1086. , Caula S, Villar S, Martino
V, Coussio J, Ferraro G. Polyphenols isolated from Eupatorium buniifolium. Revista
Latinoamericana de Química 1991;22:1-3.).

Rezultatele studiului sunt illustrate în Fig. 1 și Fig. 2

Figura 1. Efectul extractului apos de Eupatorium buniifolium (125, 250 and 500 mg/kg i.v.),
DHC (dehidrocolat de sodiu) (20 mg/Kg) și soluție salină (control) asupra fluxului biliar la
cobai. Rezultatele sunt exprimate ca medii ± SEM (n = 6), *p<0.05, ** p<0.01 versus control.
Figure 2. Efectul extractului apos de Eupatorium buniifolium (500 and 750 mg/kg p.o.), DHC
(500mg/Kg) și apă (control)asupra fluxului de bilă la cobai. on bile flow in rats. Rezultatele sunt
exprimate ca medii ± SEM (n = 6), *p<0.05, ** p<0.01 versus control.

5. Eupatoriopicrina, o lactonă sesquiterpenică din Eupatorium cannabinum L., posedă

activitate citostatică

Într-un studiu din 1989 s-a evidențiat această capacitate a extractelor de cânepa-codrului, aplicată
deja de mult timp în medicina tradițională. (Woerdenbag HJ1, Lemstra W, Malingré TM,
Konings AW., Enhanced cytostatic activity of the sesquiterpene lactone eupatoriopicrin by
glutathione depletion., Br J Cancer. 1989 Jan;59(1):68-75.)
Acest lucru a fost demonstrat pentru celule FIO 26 prin studii in vitro cu ajutorul unui test
clonogenic și in vivo prin întârzierea creșterii tumorii in tumori FIO 26 și Lewis pulmonare
la șoareci.

Glutationul din țesutul tumoral joacă un rol foarte important în mecanismul de apărare împotriva
acțiunii citostatice a eupatoriopicrinei isolate din extractul de cânepa-codrului.
Eupatoriopicrina poate induce peroxidarea lipidică în ficatul și țesuturile tumorale de la
cobaii folosiți în studiu. EUP determină deteriorarea ADN pe culturi de cellule tumorale
de ascita Ehrlich. Această acțiune este amplificată în celulele cu glutation scăzut.