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1.1 Fijarse que todos los datos estén completos y correctos, rechazando
aquellos que no lo estuvieran.
1.2 Colocar la fecha del día de recepción de la muestra en la parte superior
de las fichas.
1.3 Enumerar las muestras o sus respectivas fichas en el cuaderno,
siguiendo el orden correlativo.
1.4 Leer los datos clínicos y observar en que microorganismos se está
pensando (el Médico solicitante), para poder dicernir que medios son
los adecuados para ese microorganismo.
a) Staphilococcus aureus
b) Estafilococo coagulasa negativo.
2.- CULTIVO
a) Coloración de Gram.
b) Pruebas de Catalasa.
a) Prueba de de oxidasa
b) Pruebas de identificación bioquímica por el método de fermentación
rápida.
c) Neisseria meningitidis Antibiograma en Agar Muller-Hinton con sangre
de Carnero al 5 %.
Neisseria gonorhoeae Antibiograma en Agar chocolate.
N.catarrahalis - - - - -
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Con éste método se diferencian los bacilos Gram negativos cortos (Moraxella,
Acinetobacter etc.) de los cocos Gram negativos (Neisserias). Se siembra la cepa
problema en dos placas de Mueller Hinton uno sin antibiótico y otro con los
siguientes antibióticos: Penicilina, Ampicilina, Sulfadiazina. Incubar 24 horas.
Después de la incubación, se preparan láminas de Gram de los gérmenes
removidos del margen externo de la zona de inhibición de los discos.
Controles:
Positivo : Estreptococcus agalactie (Estreptococo del grupo B).
EXAMEN DE LA MUESTRA
1 Examen microscópico:
En el exudado vaginal normal se observará flora regional con predominio de
morfotipo Lactobacillus sp y células epiteliales.
Evaluar:
- La presencia de leucocitos.
- La presencia de levaduras o pseudohifas.
- La presencia única o abundante de cualquier otro microorganismo.
- El exudado característico de la VAGINOSIS BACTERIANA:
a) Presencia de Células “clue” (células epiteliales recubiertas de bacilos o
cocobacilos Gram variables.)
b) Presencia o ausencia de Leucocitos.
c) Flora mixta alterada
d) Trichomonas vaginalis: morfología y movilidad típicas en examen directo
en fresco.
3.2 Procedimiento
1) Una vez que el frotis se haya secado a temperatura ambiente, fijar la muestra pasando el lado
de la lámina opuesto a la muestra tres veces sobre una llama de calor suave.
2) Vierta la solución de cristal violeta completamente sobre toda la superficie de la lámina. Deje
reposar por 10 segundos.
3) Enjuague completamente la cristal violeta con agua corriente hasta que no escurra más cristal
violeta de la lámina. Deje escurrir el agua de la lámina momentáneamente colocándola
verticalmente sobre un papel secante o papel absorbente como el papel higiénico.
4) Vierta la solución de lugol completamente sobre toda la superficie de la lámina. Deje reposar
durante 20 segundos. Este paso es importante para la formación del complejo molecular cristal
violeta-yoduro.
Enjuague con agua corriente.
5) Decolorar con la mezcla alcohol etílico-acetona por 2 segundos e inmediatamente después
enjuagar la lámina con un flujo suave de agua corriente.
6) Aplicar la safranina completamente sobre toda la superficie de la lámina. Déjela reposar por
10 segundos.
7) Enjuague la lámina con agua corriente, deje escurrir el agua verticalmente y dejar secar al
aire libre.
Formato de Vaginosis : …………………………………………………………………….
Celulas delatoras : …………………………………………………………………….
Reaccion Inflamatoria : …………………………………………………………………….
Aminas : …………………………………………………………………….
Bacilos de doderlein : …………………………………………………………………….
Coloracion de Gram : …………………………………………………………………….
Examen en fresco : …………………………………………………………………….