Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
TESIS:
AUTORA:
ICA – PERÚ
2019
DEDICATORIA
ii
AGRADECIMIENTOS
iii
ÍNDICE
Pág.
DEDICATORIA ii
AGRADECIMIENTOS iii
RESUMEN vii
ABSTRACT viii
INTRODUCCIÓN ix
CAPÍTULO I. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 11
1.1. Descripción de la realidad problemática 11
1.2. Formulación del problema 13
1.3. Justificación e importancia 13
1.4. Objetivos de la investigación 15
1.4.1. Objetivo General 15
1.4.2. Objetivos Específicos 15
1.5. Hipótesis y variables 15
1.5.1. Hipótesis Principal 15
1.5.2. Hipótesis Secundarias 15
1.5.3. Variables 16
1.5.4. Operacionalización de las variables 16
CAPÍTULO II. BASES TEÓRICAS 17
2.1. Antecedentes de la investigación 17
2.2. Marco teórico 24
2.2.1. Lycopersicum esculentum L “tomate” 24
2.2.1.1. Origen 24
2.2.1.2. Historia 25
2.2.1.3. Descripción botánica 26
2.2.1.4. Hábitat 28
2.2.1.5. Clasificación científica 28
iv
2.2.2. Actividad antioxidante 29
2.2.2.1. Defensas antioxidantes 30
2.2.2.2. Clasificación de los antioxidantes según el
sitio donde ejercen su acción 31
2.2.2.3. Clasificación de los antioxidantes según
origen 32
2.2.2.4. Características de las enzimas antioxidantes 34
2.2.2.5. Recomendaciones para potenciar la acción
antioxidante 34
2.2.3. Radicales libres 34
2.2.3.1. Factores que favorecen los radicales libres 35
2.2.3.2. Clasificación de los radicales libres del
oxígeno 36
2.2.4. Estrés oxidativo 38
2.2.4.1. Daños provocados por el estrés oxidativo 39
2.2.5. Aplicaciones medicinales de Lycopersicum
esculentum L 41
2.2.6. Método de evaluación de la actividad antioxidante 45
2.2.6.1. Método del DPPH
(2,2-difenil-1-picrilhidrazilo) 46
2.2.7. Marco conceptual 48
CAPÍTULO III. METODOLOGÍA 50
3.1. Material 50
3.1.1. Tipo, nivel y diseño de la investigación 50
3.1.2. La especie estudiada 50
3.2. Métodos 51
3.2.1. Recolección y tratamiento de la especie
estudiada 51
3.2.2. Obtención de los extractos 52
3.2.3. Caracterización de los extractos 54
3.2.4. Determinación de la actividad antioxidante 57
v
CAPÍTULO IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 61
4.1. Resultados 61
4.1.1.Del material objeto de estudio 61
A) De la obtención del material a estudiar 61
B) De la caracterización del material seco y
molido 61
4.1.2.De la obtención de extractos 61
A) Del extracto etanólico (Fracción A) 61
B) Del fraccionamiento del extracto etanólico 61
4.1.3.De la caracterización de extractos 62
A) Del análisis organoléptico 62
B) De la determinación de metabolitos
secundarios 62
4.1.4.De la determinación de la actividad antioxidante 63
4.2. Discusión 67
CONCLUSIONES 70
RECOMENDACIONES 71
FUENTES DE INFORMACIÓN 72
ANEXOS 76
vi
RESUMEN
Los antioxidantes son compuestos químicos esenciales en el cuerpo
humano ya que evitan la formación de radicales libres, retrasan el proceso
de envejecimiento y evitan la muerte celular, estas sustancias pueden
obtenerse de diferentes fuentes como frutas y plantas.
vii
ABSTRACT
The present contains a study on the post harvest leaves of the plant species
Lycopersicum esculentum L, these leaves are dried and milled obtaining
a granular powdery material of green color, bitter taste and suigeneris smell,
of the dried and ground leaves using ethanol as solvent and by the method
of digestion the ethanolic extract is obtained which was fractionated in order
to obtain fractions of this extract.
viii
INTRODUCCIÓN
ix
Los antioxidantes derivados de las plantas desde el punto de vista
fitoquímico pueden ser taninos, lignanos, estilbenos, cumarinas, quinonas,
xantonas, ácidos fenólicos, flavones, flavonoles, catequinas, antocianinas
y proantocianinas los cuales debido a sus propiedades redox pueden actuar
como donadores de hidrógenos y de esta manera prevenir o retrasar el
desarrollo de enfermedades degenerativas.2
x
CAPÍTULO I
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
11
la demanda ha ido en aumentando significativamente por el
reciente reconocimiento de su valor nutritivo, representado por el
licopeno y teniendo en cuenta que en Ica se destinan 2,500
hectáreas para la producción del cultivo del tomate, el cual resulta
ser uno de los mayores ingresos de dinero a nuestro departamento,
pero lamentablemente las hojas pos cosecha de Lycopersicum
esculentum L aún no se aprovechan ya que generalmente terminan
siendo quemados.5,6
12
1.2. FORMULACIÓN DEL PROBLEMA
Problema principal:
El problema queda enmarcado en la siguiente interrogante:
¿Qué características tiene y cuál es la actividad antioxidante del
extracto etanólico de las hojas pos cosecha de Lycopersicum
esculentum L?
Problemas específicos:
¿Qué características tiene el extracto etanólico de las hojas pos
cosecha de Lycopersicum esculentum L?
¿En qué medida tiene actividad antioxidante el extracto etanólico
de las hojas pos cosecha de Lycopersicum esculentum L?
13
revertir esta situación es incrementar el consumo de frutas y
hortalizas. Desde la década de los noventa, varios estudios
epidemiológicos han demostrado que el consumo de tomate puede
prevenir el desarrollo de eventos cardiovasculares (infarto agudo
de miocardio y enfermedad cerebrovascular) y ciertos tipos de
cánceres. Respecto a los mecanismos protectores de ECV se ha
observado que el tomate presenta actividad antiplaquetaria,
protectora del endotelio, antioxidante y antiaterogénica. Por su
parte, entre los mecanismos por los cuales puede prevenir el
cáncer, se han descrito las siguientes actividades: antioxidante,
activación de apoptosis, disminución de la proliferación celular y
disminución de la angiogénesis y metástasis.
Importancia
La investigación para determinar que porcentaje de actividad
antioxidante tiene el extracto etanólico de las hojas pos cosecha de
Lycopersicum esculentum L es importante porque:
De conocerse el porcentaje de la actividad antioxidante del extracto
etanólico de las hojas pos cosecha de Lycopersicum esculentum
L se abrirán nuevas rutas de investigación para el aprovechamiento
de estos extractos, ya no se quemarán los residuos
agroindustriales de la planta del tomate, por ende no se causará
daño al medio ambiente y lo más importante es que al saber que el
extracto etanólico de las hojas pos cosecha del Lycopersicum
esculentum L tiene actividad antioxidante esto ayudaría a consumir
dicho vegetal con más frecuencia esto con el fin de mejorar la salud
de la población ya que hay estudios epidemiológicos en donde
indican que el tomate previene el desarrollo de enfermedades
cardiovasculares y del cáncer.
14
1.4. OBJETIVOS
1.4.1. Objetivo General
Caracterizar y determinar la actividad antioxidante que tiene
el extracto etanólico de las hojas pos cosecha de
Lycopersicum esculentum L.
15
1.5.3 . Variables
Variable Independiente
Hojas pos cosecha de Lycopersicum esculentum L
Variables Dependientes
- Características del extracto etanólico
- Actividad antioxidante
Posición de Nominación
Indicador Índice
la Variable de la Variable
Rendimiento %
Característica Reacciones de
s del extracto coloración y o
etanólico precipitación:
FeCl3 Positivo y/o negativo
Gelatina sal Positivo y/o negativo
Shinoda Positivo y/o negativo
Variables Fluorescencia Positivo y/o negativo
Dependientes Rosenheim Positivo y/o negativo
Espuma Positivo y/o negativo
16
CAPÍTULO II
BASES TEÓRICAS
17
método orgánico presentó el mayor poder antioxidante, el cual tiene
una actividad antioxidante de 1.273 mg equivalentes de trolox por
gramo de muestra, seguido del tomate cherry convencional con 0.836
mg equivalentes de trolox por gramo de muestra, finalmente
encontraron que los tomates producidos bajo un método convencional
obtuvieron la más baja capacidad antioxidante.
Acosta T. (2017)10 esta tesis tiene como título “Efecto del tipo de cultivo
y la temperatura sobre la capacidad antioxidante del tomate variedad
cherry (Solanum lycopersicum var. cerasiforme). El objetivo de esta
tesis fue evaluar el efecto del tipo de cultivo y la temperatura sobre la
capacidad antioxidante del tomate cherry (Solanum lycopersicum var.
cerasiforme). La conclusión de esta tesis fue que el tomate cherry del
cultivo tradicional presenta actividad antioxidante con un coeficiente de
inhibición medio (CI 50) de 2,4 mg/mL a temperatura ambiente y un CI
50 de 1,8 mg/mL, cuando se somete a ebullición por 10 minutos y a los
15 minutos tiene un CI 50 de 1,6 mg/mL. Para el tomate cherry de
cultivo hidropónico presentó un CI 50 de 1,9 mg/mL a temperatura
ambiente y al someterse a temperatura de ebullición por 10 minutos
tiene un CI 50 de 1,5 mg/mL y a los 15 minutos un CI 50 de 1,3 mg/mL,
al momento que realizaron los análisis estadísticos se encontró un valor
de r= -0,982 y r= -0,961 del cultivo hidropónico y tradicional
respectivamente, lo que indica una relación inversamente proporcional,
por lo que a un menor CI hay una mayor capacidad antioxidante.
Además, el tipo de cultivo hidropónico y tradicional modifican la
capacidad antioxidante del tomate cherry, siendo el hidropónico el que
presenta mayor capacidad antioxidante. Por lo tanto, se concluye que
el efecto de la temperatura modifica de forma directamente
proporcional la capacidad antioxidante del tomate cherry, aumentando
su capacidad antioxidante, el tipo de cultivo modifica la concentración
de vitamina C del tomate cherry, siendo el hidropónico el que presenta
una mayor concentración de vitamina C, el efecto de la temperatura
afecta de manera inversamente proporcional el contenido de vitamina
18
C del tomate cherry, ya que al someterse a una temperatura elevada y
por más tiempo disminuye la concentración de vitamina C.
19
sensible y utiliza menor cantidad de muestra que los métodos DPPH y
ABTS.
20
tomate crudo y procesado presentaron valores aptos. El contenido de
ácido ascórbico disminuyó considerablemente debido al procesamiento
a elevadas temperaturas. La actividad antioxidante del tomate fresco,
pasta y salsa de tomate tipo ketchup mostró un incremento en tiempos
de incubación mayores, lo cual es indicativo del efecto protector
prolongado de los antioxidantes en contra. La actividad antioxidante fue
determinada mediante el ensayo FRAP, en donde la actividad
antioxidante del tomate fresco, evaluada a 15 segundos, 4 minutos y
30 minutos de reacción (11,48; 13,33; 46,11 mmoles de Fe2+.100g-1
de materia seca) fue superior a la actividad antioxidante del tomate
procesado (pasta concentrada: 7,33; 11,31 y 19,46; salsa tipo ketchup:
3,38; 7,43 y 14,86 mmoles de Fe2+.100g-1 de materia seca). Además,
la actividad antioxidante de la muestra aumentó con el tiempo de
incubación, por lo tanto el tomate fresco como el procesado
presentaron una elevada actividad antioxidante.
21
frutas y hortalizas (al menos 5 porciones al día). En esta investigación
reportaron una relación inversamente proporcional entre la ingesta y el
riesgo de desarrollar ECV, lo que se explica por su actividad
antioxidante, hipolipemiante y en algunos casos antiplaquetaria. En ese
sentido aumentar el consumo actual de tomate y productos del tomate,
puede mejorar algunos parámetros cardiovasculares, además ayuda a
mejorar la capacidad de defensa del organismo frente al estrés
oxidativo, debido a su contenido en flavonoides, carotenoides y
polifenoles (potentes antioxidantes).
22
ascórbico y fenoles totales. La actividad antioxidante se midió utilizando
los métodos: FRAP y decoloración del β-caroteno. Los antioxidantes
ácido L-ascórbico, licopeno y β-caroteno fueron 2,6 veces mayor en la
comercialización respecto de los valores iniciales, mientras que la
actividad antioxidante en la última etapa fue 2,1 y 3,5 veces más alta
que en el crecimiento para los métodos FRAP y decoloración de b-
caroteno, respectivamente. En consecuencia, el consumidor dispone
de un fruto rico en antioxidantes, lo que le atribuye la capacidad de
captación de los radicales libres presentes en nuestro cuerpo que
podrían disminuir los riesgos que contraer enfermedades crónicas.
23
2.2. MARCO TEÓRICO
2.2.1.1. ORIGEN
24
«Historia de las Plantas de México» hecha por el
naturalista español Hernández no se menciona para
nada esta planta. En el vocabulario de las lenguas
asiáticas no hay ninguna palabra para designar esta
planta y particularmente en el Japón aun no era
conocida en el siglo XVIII. Los malayos la conocían con
el nombre de Tomalte, palabra de origen americano,
pues ya en el siglo XVI César Bauhino habla de ella en
sus escritos con el nombre de Tomate americanorum.
Los nombres vulgares con que se la reseña en los
tratados de Botánica del mismo siglo XVI Mala
peruviana y Pomi del Perú, nos hacen suponer que sea
el Perú el lugar de origen de esta especie, hoy tan
difundida por todos los continentes, siendo lo más
probable que fueran los expedicionarios que
acompañaron a Pizarro los que trajeran a España
esta planta para luego ser difundida por Francia,
Italia y los demás países europeos.17
2.2.1.2. HISTORIA
25
2.2.1.3. DESCRIPCIÓN BOTÁNICA
26
uniloculares son raros. Además, se indica que los
frutos maduros pueden ser rojos o amarillos.
27
maduración. La corola está formada por cinco o más
pétalos amarillos y encurvados cuando la flor está
abierta. El número de estambres es de cinco, los
cuales están soldados formando un cono. Las anteras
son cortas y anchas. La flor está unida al eje floral por
un pedicelo articulado que contiene la zona de abcisión
o por la inserción del fruto al pedicelo. Las flores están
agrupadas en inflorescencias que pueden ser simples,
bifurcadas o ramificadas. El número de flores es muy
variable, en algunos casos excepcionales con más de
30 flores.19
2.2.1.4. HÁBITAT
Reino: Plantae
División: Magnoliphyta
Clase: Magnoliopsida
Filo: Angiospermas
Orden: Solanales
Familia: Solanáceas
Género: Solanum
Especie: Lycopersicum L
28
2.2.2. ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE
Los antioxidantes son sustancias que evitan la formación de
radicales libres, limitan las reacciones en cadena, activan los
mecanismos antioxidantes del organismo, como el de
prevenir la formación de radicales libres por encima de los
parámetros normales. Además, retrasan el proceso de
envejecimiento, combaten la degeneración y evita la muerte
de las células que provocan los radicales libres.
29
radicales libres. Las grasas oxidadas son nuevos
compuestos, de sabor y olor horrible, de manera que todo lo
que pueda evitar esta reacción tendrá evidentemente una
gran importancia económica, por esta razón, los químicos han
estado buscando antioxidantes de forma muy activa durante
algún tiempo. Hasta la fecha, los antioxidantes más populares
como aditivos alimentarios han sido el BHA (butil
hidroxianisol); el BHT (butil hidroxitolueno), el galato de
propilo y el tocoferol (vitamina E), estos antioxidantes actúan
cediendo átomos de hidrogeno al radical hidroxilo,
formándose agua. La ecuación es simple: H + OH= H 2O. En
otras palabras, dos radicales peligrosamente activos se
combinan para formar una inofensiva molécula de agua. 22
30
especies reactivas del oxígeno que con el resto de las
moléculas presentes, en un determinado
microambiente: membrana plasmática, citosol, núcleo
o líquido extracelular.
31
2.2.2.3. CLASIFICACIÓN DE LOS ANTIOXIDANTES
SEGÚN ORIGEN
Origen Acción
1. Exógenos
Vitamina E - Neutraliza el oxígeno singlete
- Captura radicales libres hidroxilo
- Captura O2
- Neutraliza peróxidos
Vitamina C - Neutraliza el oxígeno singlete
- Captura radicales libres de
Hidroxilo
- Captura O2
- Regenera la forma oxidada de la
vitamina E
Betacarotenos -Neutraliza el oxígeno singlete
Flavonoides,
Licopenos
2.Endógenos
Enzimáticos Cofactor
Superóxido Cobre, sodio, manganese
dismutasa
(SOD)
Catalasa Hierro
(CAT)
Glutatión Selenio
peroxidasa
(GPx)
3. No
enzimáticos
Glutatión Barreras fisiológicas que enfrenta
el oxígeno a su paso desde el aire
hasta las células.
Coenzima Q
Ácido Tióctico Transportadores de metales
(transferrina y ceruloplasmina).
32
epitelios, prácticamente nula en tejido nervioso y se
localiza a nivel celular: mitocondrias, peroxisomas,
citosol (eritrocitos); presenta 2 funciones
fundamentales: catalítica y peroxidativa, forma parte
del sistema antioxidante CAT/SOD que actúa en
presencia de altas concentraciones de peróxido de
hidrógeno.
33
2.2.2.5. RECOMENDACIONES PARA POTENCIAR LA
ACCIÓN ANTIOXIDANTE
34
constantemente a las proteínas, carbohidratos, grasas y ADN
del cuerpo, causando daños potencialmente graves si no se
les pone freno. Aproximadamente cada célula del cuerpo
padece unos 10.000 impactos de radicales libres al día.
Entre los radicales libres hay algunos que por su acción son
más destructivos de los tejidos celulares causando daños de
gravedad en el organismo. Los radicales libres están
clasificados para su estudio como: Especies Reactivas de
Oxigeno (ERO 2), y se determinan como HOCL (ácido
hipocloroso), HO (hidroxilo-oxidrilo), RO (peroxidrilo), NO
(óxido nítrico), 1O2 (oxígeno singlete), H2O 2 (peróxido de
hidrógeno), O2 (anión superóxido), Q (semiquinona) y ozono.
Además, existen radicales libres que se producen en el
organismo mediante los mecanismos bioquímicos propios.
35
celular, por la acción del cortisol y el ácido láctico y
fundamentalmente por el consumo de alimentos
inadecuados, mal cocidos y preparados, por una dieta
baja en elementos oxidantes que atribuyen a que los
radicales libres circulen por todo los órganos y tejidos
causando daños severos que muchos de ellos son
irreparables, destruyendo la membrana celular por la
oxidación, pudiendo variar las funciones de las
células, de las lipoproteínas de baja densidad (LDL),
el código genético celular puede sufrir cambios por
daños en la composición del ADN (ácido
desoxirribonucleico), favorecer los procesos de
degradación celular, y el crecimiento celular
descontrolado, con disminución de los niveles
inmunológicos y defensivos del organismo.
36
que los primarios; y los átomos de las biomoléculas
son: carbono, nitrógeno, oxígeno y azufre.
37
producción aumenta considerablemente pasando a
estrés oxidativo.
38
facilidad en radicales. Como sustrato oxidable se pueden
considerar casi todas las moléculas orgánicas o inorgánicas
que se encuentran en las células vivas, como proteínas,
lípidos, hidratos de carbono y las moléculas de ADN.
39
déficit de las defensas, que trae como consecuencia
daños y alteraciones de la relación estructura-función
en cualquier células, sistemas y órganos.
40
entre los cuales se encuentran los daños causados
por el estrés psíquico, por su liberación y aumento de
sustancias oxidativas entre las que se encuentra el
“cortisol” u hormona del estrés. Entre otras muchas
más como la diabetes, enfermedades inflamatorias y
degenerativas, artritis, artrosis, reumatismo, todas
provocadas o por la acción directa e indirecta de la
oxidación.25
41
través de la alimentación. El tomate fresco proporciona el 90 %
de licopeno necesario para el organismo, también está presente
en menor cantidad en otras frutas y verduras, como la sandía
45,3 µg/g), pomelo rosado (14,2 µg/g), papaya y damasco
(también están presentes en la salsa de tomate en lata -287,6
µg/g).
42
pueden prevenir y reducir el riesgo de derrame cerebral,
cardiovascular y otras enfermedades, tales como el cáncer.
43
hipertensión, angina de pecho e infarto al miocardio), porque
reduce el colesterol, la homocisteína, la agregación plaquetaria
y la presión arterial.
44
tomate por su contenido en minerales (calcio y fósforo) y
carotenoides puede constituirse en una oseoprotector y
contrarrestar el riego de padecer osteoporosis. Los estudios
realizados mostraron la capacidad del licopeno para mantener
la densidad de los huesos y reducir la osteoporosis.
45
para captar radicales libres. Entre ellos se pueden mencionar el
uso del 2,2-difenil-1-picril hidrazilo (DPPH), ácido 2,2, azino-bis
(3-etilbenzotiazolin)-6-sulfónico (ABST), la reacción con el
óxido nitroso (test NO), diclorhidrato de N, N-Dimetil-p-
fenilendiamina (DMPD), generación de radicales peroxilo,
superóxido e hidroxilo y otros.28
46
manera:
47
2.2.7. MARCO CONCEPTUAL
Actividad antioxidante: Propiedad de ciertos componentes
o compuestos químicos que es capaz de atrapar electrones
no apareados de los radicales libres, retrasando el
envejecimiento, combatiendo la degeneración y evitando la
muerte de las células que provocan los radicales libres.25
48
número variable de grupos hidroxilo fenólicos y excelentes
propiedades de quelación del hierro y otros metales de
transición, lo que les confiere una gran capacidad
antioxidante.12
49
CAPÍTULO III
METODOLOGÍA
3.1. MATERIAL
Nivel de Investigación:
Por la naturaleza y aprovechamiento de la información que se
consigue en este trabajo es de carácter básico.
Diseño de la investigación:
El diseño es analítico-experimental ya que se usará
información reportada (métodos de análisis) para buscar y
obtener información desconocida que me propuse como
objetivos del trabajo.
50
3.2. MÉTODOS
FLUJOGRAMA N° 01
Cosecha de
Manual
tomate
Planta pos
Campo de cultivo
cosecha
Corte de tallo a
10 cm del suelo Cuchillo de acero
Traslado a
laboratorio
Separación de
Manual
hojas
Tallos y Hojas
demás
Limpieza
Desechar Secado
51
Molienda
Las hojas pos cosecha se limpian y se secan a la sombra durante
10 días y luego se lleva a la estufa a 55 – 60 ºC hasta sequedad
total.
52
líquido filtrado que se une al primero y ambos se concentran
hasta la eliminación del solvente. El marco se desecha.
FLUJOGRAMA Nº 2
OBTENCIÓN DE LAS FRACCIONES DEL EXTRACTO
ETANÓLICO DE LAS HOJAS POS COSECHA SECAS Y
MOLIDAS DE Lycopersicum esculentum L.
53
3.2.3. CARACTERIZACIÓN DE LOS EXTRACTOS
1º. Análisis organoléptico
Color: En un tubo de ensayo se depositan 3 g del extracto
a analizar y se deja en reposo por cinco minutos y se evalúa
el color.
Olor: En una luna de reloj se depositan 3 g del extracto a
evaluar y se agita con una varilla, posteriormente se
procede a evaluar el olor.
Sabor: Con una cucharilla de plástico se retiran unos mg
del extracto a evaluar y se lleva a la boca para la evaluación
del sabor. El extracto no es ingerido.
Aspecto: De las apreciaciones anteriores y palpando la
consistencia del extracto se evalúa el aspecto.
54
B. REACCIÓN DE GELATINA 1% EN NaCl 10 %: Para
determinar taninos.
Procedimiento: En un tubo de ensayo se colocó 3 mL
de solución de gelatina 1 % en NaCl 10% y se agregó
0.5 mL de la muestra a ensayar. La formación de un
precipitado o una turbidez de color blanco o crema es
indicativa de presencia de taninos.
Se ensayó en el extracto etanólico o fracción A.
55
hasta rosado débil, esto para leucoantocianidinas y de
color marrón para catequinas.
Se ensayó en el extracto etanólico y la fracción D.
56
3.2.4. DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE
Para esta parte del trabajo se utilizó las fracciones A y D. Se
determinará la actividad antioxidante como porcentaje de
inhibición al radical libre y a su vez se expresará esta
actividad en su equivalencia al polifenol ácido gálico.
B) FUNDAMENTO
C) PREPARACIÓN DE REACTIVOS
Preparación de la Solución de DPPH: Se pesan 22.00
mg del reactivo y se disuelven en 100 mL de metanol. La
solución preparada se guarda protegiéndola de la luz del
día.
57
Preparación de soluciones patrón de ácido gálico: Se
prepara una solución patrón con 0.1 g ácido gálico/100
mL, a partir de esta solución se preparan soluciones 5, 10,
15,20 y 25 mg ácido gálico/100 mL, respectivamente.
CUADRO Nº 1.
SET DE TRABAJO PARA DETERMINAR LA CURVA
DE CALIBRACIÓN DE SOLUCIONES PATRÓN DE
ÁCIDO GÁLICO VERSUS DPPH
Muestra Ensa Mues Meta Soluci Reacti
yo tra nol ón vo
(mL) (mL) buffer DPPH
(mL) (mL)
DPPH 1 0.0 1.5 1.0 0.5
Sólo 2 0.0 1.4 1.0 0.5
3 0.0 1.4 1.0 0.5
Sol. 1 0.1 1.4 1.0 0.5
5mg/100 2 0.1 1.4 1.0 0.5
mL 3 0.1 1.4 1.0 0.5
Sol. 1 0.1 1.4 1.0 0.5
10mg/10 2 0.1 1.4 1.0 0.5
0mL 3 0.1 1.4 1.0 0.5
Sol. 1 0.1 1.4 1.0 0.5
15mg/10 2 0.1 1.4 1.0 0.5
0mL 3 0.1 1.4 1.0 0.5
Sol. 1 0.1 1.4 1.0 0.5
2 0.1 1.4 1.0 0.5
58
20mg/10 3 0.1 1.4 1.0 0.5
0mL
Sol. 1 0.1 1.4 1.0 0.5
25mg/10 2 0.1 1.4 1.0 0.5
0 mL 3 0.1 1.4 1.0 0.5
59
CUADRO Nº 2
SET DE TRABAJO PARA DETERMINAR LA ACTIVIDAD
ANTIOXIDANTE DE LAS MUESTRAS A ANALIZAR
Metanol Solució Reactivo
Muestra
(mL) n buffer DPPH
Muestra (mL)
Ensayo (mL) (mL)
1 0.1 1.4 1.0 0.5
Fracción 2 0.1 1.4 1.0 0.5
A 3 0.1 1.4 1.0 0.5
1 0.1 1.4 1.0 0.5
Fracción 2 0.1 1.4 1.0 0.5
D 3 0.1 1.4 1.0 0.5
Los reactivos se adicionaron en el orden de izquierda a
derecha, se mezclaron adecuadamente y se dejó en
reposo durante 30 minutos protegiéndolo de la luz;
después se lleva a la lectura en el espectrofotómetro a 517
nm de longitud de onda.
60
CAPÍTULO IV
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.1 RESULTADOS
4.1.1. DEL MATERIAL OBJETO DE ESTUDIO
A) De la obtención del material a estudiar
El promedio de las hojas secas y molidas que deja tres plantas
pos cosecha de Lycopersicum esculentum L es de 2,4 kg.
61
4.1.3. DE LA CARACTERIZACIÓN DE LOS EXTRACTOS
A) Del análisis organoléptico
Para esta parte del trabajo se examinaron los extractos libres
de solvente. Los resultados se presentan en el siguiente
cuadro:
CUADRO Nº 3.
RESULTADOS DEL ANÁLISIS ORGANOLÉPTICO AL
EXTRACTO ETANÓLICO Y SUS FRACCIONES
EXTRACTO COLOR OLOR SABOR ASPECTO
O
FRACCIÓN
Etanólico Verde Suigeneris Amargo Pasta
(Fracción A) intenso áspero
Fracción B Verde Inodoro Amargo Pasta
intenso Áspero pegajosa
Fracción C Ámbar Inodoro Amargo Película
claro pastosa
Fracción D Ámbar Inodoro Soso Película
pastosa
Fuente: La autora del trabajo
62
CUADRO Nº 4
RESULTADOS DEL ANÁLISIS DE METABOLITOS
SECUNDARIOS EN LAS HOJAS POS COSECHA DE
Lycopersicum esculentum L.
REACCIÓN EXTRACTO O RESULTADO
FRACCIÓN
TRICLORURO Etanólico ++++
FÉRRICO Fracción D ++
GELATINA SAL Etanólico ++++
Fracción D -
SHINODA Etanólico +++
Fracción D +++
FLUORESCENCIA Etanólico ++
ROSENHEIM Etanólico + Catequinas
Fracción D + Catequinas
ESPUMA Etanólico +
Fuente: La autora del trabajo
63
CUADRO N° 5.
ABSORBANCIAS DE LAS SOLUCIONES PATRÓN DE
ÁCIDO GÁLICO
Solución de Ácido
Absorbancia
Gálico
5 mg/100 mL 0.890
10 mg/100 mL 0.764
15 mg/100 mL 0.641
20 mg/100 mL 0.503
25 mg/100 mL 0.340
GRÁFICO Nº 1.
CURVA DE ABSORBANCIA DE LAS SOLUCIONES
PATRÓN DE ÁCIDO GÁLICO VERSUS EL REACTIVO
DPPH DE ABSORBANCIA 0.980
Chart Title
1
y = -0.0272x + 1.0359
0.8 R² = 0.9965
0.6
0.4
0.2
0
0 5 10 15 20 25 30
Fuente: cuadro Nº 5
Obteniéndose los siguientes valores:
m = - 0.0272
64
b= 1.0359
R2 = 0.996
65
4º. RESULTADOS DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE
EXPRESADA COMO % DE INHIBICIÓN AL RADICAL
LIBRE DPPH
Los resultados se presentan en el siguiente cuadro:
CUADRO Nº 7.
% DE ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE AL RADICAL LIBRE
DPPH DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LAS HOJAS POS
COSECHA DE Lycopersicum esculentum L. Y SU
FRACCIÓN D
Disminució %
Muestra % de la
Absorb n de actividad
ensayad dismin
ancia absorbanci antioxida
a ución
as nte
DPPH 1.026 0.000 100 0.00
Fracción
A 0.516 0.490 47.75 52.24
Fracción
D 0.706 0.300 29.23 70.77
66
4.2. DISCUSIÓN
Sin duda alguna el desarrollo de los pueblos está ligado directamente
al desarrollo de su actividad económica, Ica se basa en la explotación
de sus recursos naturales, como por ejemplo la agroindustria. Sin
embargo, es necesario evaluar los impactos ambientales que generan
los procedimientos al culminar un proceso productivo. La
agroindustria galopante genera inevitablemente demasiados residuos
agrarios como son las plantas pos cosecha de Lycopersicum
esculentum L. que en nuestro medio no se le da uso ya que no existen
reportes de estudios para esta especie vegetal, por tal motivo
terminan siendo quemados y esto genera una gran contaminación
ambiental.
67
Lycopersicum esculenta L de 5 mg/mL, 0,5 mg/mL, 0,25 mg/mL, 0,1
mg/mL, 0,05 mg/mL y 0,01 mg/mL se tuvo un porcentaje de inhibición
de 3,15 %, -0,66 %, -4,82 %, -5,11 %, -4,75 % y -3,56 %,
respectivamente, por lo tanto queda demostrado que la especie
vegetal Lycopersicum esculentum L. posee actividad antioxidante.
Acosta T. (2017)10 determinó la capacidad antioxidante encontrando
que la especie S. lycopersicum var. cerasiforme del cultivo tradicional
presentaba un coeficiente de inhibición medio (CI 50) de 2,4 mg/mL a
temperatura ambiente y un CI 50 de 1,8 mg/mL, cuando se somete a
ebullición por 10 minutos y a los 15 minutos tiene un CI 50 de 1,6
mg/mL. Para el S. lycopersicum var. cerasiforme de cultivo
hidropónico presentó un CI 50 de 1,9 mg/mL a temperatura ambiente
y al someterse a temperatura de ebullición por 10 minutos tiene un CI
50 de 1,5 mg/mL y a los 15 minutos un CI 50 de 1,3 mg/mL,
demostrando que esta especie vegetal tiene actividad antioxidante
pero la temperatura afecta dicha actividad. Palomo I, Fuentes E,
Carrasco G, Gonzales D, Moore R. (2010) 14 indicaron que las
enfermedades cardiovasculares (ECV) son la principal causa de
muerte en el mundo, demostrando que hay una relación inversa entre
la ingesta de este cultivo y el riesgo de desarrollar ECV, lo que se
explica principalmente por su actividad antioxidante, hipolipemiante y
en algunos casos antiplaquetaria. En ese sentido aumentar el
consumo actual de tomate (Solanum lycopersicum L.) y productos del
tomate, puede mejorar algunos parámetros cardiovasculares, además
ayuda a mejorar la capacidad de defensa del organismo frente al
estrés oxidativo, debido a su contenido en flavonoides, carotenoides
y polifenoles (potentes antioxidantes). Zapata L ,Gerard L, Davies C,
Schvab M. (2007)15 determinaron la concentración de los
componentes antioxidantes presentes en el tomate y la actividad
antioxidante total durante su crecimiento, almacenamiento,
maduración y comercialización. Los antioxidantes analizados fueron:
licopeno, β-caroteno, ácido L-ascórbico y fenoles totales. La actividad
68
antioxidante se midió utilizando los métodos: "Ferric
reducing/antioxidant power" (FRAP) y decoloración del β-caroteno.
Los antioxidantes ácido L-ascórbico, licopeno y β-caroteno fueron 2,6
veces mayor en la comercialización respecto de los valores iniciales,
mientras que la actividad antioxidante en la última etapa fue 2,1 y 3,5
veces más alta que en el crecimiento para los métodos FRAP y
decoloración de b-caroteno, respectivamente. En consecuencia, el
consumidor dispone de un fruto rico en antioxidantes, lo que le
atribuye la capacidad de captación de los radicales libres presentes
en nuestro cuerpo que podrían disminuir los riesgos que contraer
enfermedades crónicas. Sulbarán B, Sierra E, Ojeda G, Berradre
M, Fernández V, Peña J. (2011)13 determinaron la actividad
antioxidante de muestras de tomate fresco y se comparó con la del
tomate procesado, la actividad antioxidante fue determinada mediante
el ensayo FRAP (poder antioxidante para reducir al ión férrico). La
actividad antioxidante del tomate fresco, evaluada a 15 segundos, 4
minutos y 30 minutos de reacción (11,48; 13,33; 46,11 mmoles de
Fe2+.100g-1 de materia seca) fue superior a la actividad antioxidante
del tomate procesado (pasta concentrada: 7,33; 11,31 y 19,46; salsa
tipo ketchup: 3,38; 7,43 y 14,86 mmoles de Fe2+.100g-1 de materia
seca). Además, se demostró que la actividad antioxidante de la
muestra aumentó con el tiempo de incubación, por lo tanto, el tomate
fresco como el procesado presentan una elevada actividad
antioxidante. García I, Reyes H, Echevarría A, Rodríguez J. (2016)11
determinaron que los extractos de pulpa de tomate y semillas de
ahuyama evaluados mostraron un comportamiento muy similar entre
los valores obtenidos de la actividad antioxidante de estos dos frutos,
en el caso del tomate se le atribuye como porcentaje de actividad
antioxidante con un valor de 31,04 % para los ensayos de ABST y
84,48 % para los ensayos DPPH, este último resultado es similar al
hallado en mi tesis, por lo tanto se concluye que el tomate tiene
actividad antioxidante.
69
CONCLUSIONES
70
RECOMENDACIONES
Dar un mayor uso a los residuos que genera la agroindustria del cultivo del
tomate en el departamento de Ica ya que estos residuos aún no se
aprovechan, teniendo en cuenta que el tomate es un antioxidante natural,
el cual puede ser útil en diferentes tipos de enfermedades ya que contiene
gran cantidad de polifenoles que pueden ayudar a mejorar la calidad de
vida de la población.
71
FUENTES DE INFORMACIÓN
72
9. Torres A, Morales F, Quiroz L, Aguilar A, Chávez L, Martínez R, et
al. Compendio Científico en Ciencias Agrícolas y Biotecnología
[Internet]. México: Universidad Autónoma de Baja California Sur
;2019 [revisión 2019; consultado 2019 Julio 17]. Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?id=FFyUDwAAQBAJ&pg=PA67
&dq=Poder+antioxidante+de+cinco+variedades+de+tomate+(Solan
um+Lycopersicum+L.).&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwi4u6_iifLnAhXfILkGHQZ5C1kQ6AEIJzA
A#v=onepage&q=Poder%20antioxidante%20de%20cinco%20varie
dades%20de%20tomate%20(Solanum%20Lycopersicum%20L.).&f
=false
10. Acosta T. Efecto del tipo de cultivo y la temperatura sobre la
capacidad antioxidante del tomate variedad cherry (Solanum
lycopersicum var, cerasiforme. Perú.2017. Universidad Alas
Peruanas. Facultad de Medicina Humana y Ciencias de la Salud.
Tesis para obtener el Título Profesional de Licenciada en Nutrición
Humana. [Internet] [Consultado:2018 Diciembre 12]. Disponible en:
http://repositorio.uap.edu.pe/bitstream/uap/6937/1/T059_70077521
_T.pdf
11. García I, Reyes H, Echevarría A, Rodríguez J. Comparación
cuantitativa de la actividad antioxidante en tomate chonto y ahuyama
por los métodos ABST, DPPH y voltamperometría cíclica. Vitae.
2016; 23(1): S576-S579.
12. Flores S, Hernández C. Evaluación bromatológica de Lycopersicum
esculenta M (tomate regional) y su capacidad antioxidante. Perú.
2016. Universidad Nacional de la Amazonia. Facultad de Industrias
Alimentarias. Tesis para obtener el Título Profesional de Licenciada
en Bromatología y Nutrición Humana. [Internet] [Consultado:2018
Diciembre 20]. Disponible en:
https://alicia.concytec.gob.pe/vufind/Record/UNAP_9ad31429cb014
09386585468f39026ae
73
13. Sulbarán B, Sierra E, Ojeda G, Berradre M, Fernández V, Peña J.
Evaluación de la actividad antioxidante del tomate crudo y
procesado. Revista de la Facultad de Agronomía
(Venezuela).2011;28(2): 273-291.
14. Palomo I, Fuentes E, Carrasco G, Gonzales D, Moore R. Actividad
antioxidante, hipolipemiante y antiplaquetaria del tomate (Solanum
lycopersicum L.) y el efecto de su procesamiento y almacenaje. Rev.
chil. nutr.2010;37(4): 524-533.
15. Zapata L, Gerard L, Davies C, Schvab M. Estudio de los
componentes antioxidantes y actividad antioxidante en tomates.
Ciencia Docencia y Tecnología.2007;18(35):175-193.
16. Ramandeep K. Actividad antioxidante en diferentes fracciones de
tomate. Investigación Alimentaria Internacional. 2005; 38(5):487-
494.
17. Hernanzaes P, Pastor J. El tomate, su cultivo y enfermedades
[Internet]. España: Universidad de Murcia ;2009 [revisión 2009-2010;
consultado 2019 Noviembre 28]. Disponible en:
https://digitum.um.es/digitum/bitstream/10201/4707/1/El%20Tomate
%2C%20su%20cultivo%20y%20sus%20enfermedades.pdf
18. Arango M. Plantas medicinales: botánica de interés médico
[Internet]. Colombia: Manizales;2006 [revisión 2006-2007;
consultado 2018 Noviembre 22]. Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?id=fefaqvwHHoYC&printsec=fr
ontcover&dq=18.%09Arango+M.+Plantas+medicinales:+bot%C3%
A1nica+de+inter%C3%A9s+m%C3%A9dico&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwjo4c7O8_HnAhWLGbkGHcc0AfkQ6AEIJ
zAA#v=onepage&q=18.%09Arango%20M.%20Plantas%20medicin
ales%3A%20bot%C3%A1nica%20de%20inter%C3%A9s%20m%C
3%A9dico&f=false
19. Vallejo F, Estrada E. Producción de hortalizas de clima cálido
[Internet]. Colombia: Universidad Nacional de Colombia;2004
[revisión 2004-2005; consultado 2018 Noviembre 16]. Disponible en:
74
https://books.google.com.pe/books?id=UpyfvNokkroC&pg=PA59&d
q=Vallejo+F,+Estrada+E.+Producci%C3%B3n+de+hortalizas+de+cl
ima+c%C3%A1lido.&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwiIt6Wa8fHnAhXnLLkGHU6PAJAQ6wEIL
DAA#v=onepage&q=Vallejo%20F%2C%20Estrada%20E.%20Prod
ucci%C3%B3n%20de%20hortalizas%20de%20clima%20c%C3%A
1lido.&f=false
20. Vergani R. Lycopersicum esculentum: Una breve historia. Revista de
industria, distribución y socioeconomía hortícola. 2002; 1:18-27.
21. Casseres E. Producción de Hortalizas [Internet]. Costa Rica:
IICA;1980 [revisión 1980-1981; consultado 2018 Octubre 10].
Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?id=thsPAQAAIAAJ&pg=PA71&
dq=tomate+clasificacion&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwiM8eODiPLnAhVNIbkGHeORCB0Q6AEI
VTAF#v=onepage&q=tomate%20clasificacion&f=false
22. Youngson R. Antioxidantes y radicales libres [Internet]. España:
Edaf;2003 [revisión 2003-2004; consultado 2018 Diciembre 10].
Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?id=SNthxQBeHkUC&printsec=f
rontcover&dq=Antioxidantes+y+radicales+libres&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwiH3tCi7_HnAhXmHLkGHaeyDfkQ6AEIJ
zAA#v=onepage&q=Antioxidantes%20y%20radicales%20libres&f=f
alse
23. Camps D. Bioquímica del estrés oxidativo [Internet]. Argentina: Lulu;
2009 [revisión 2009-2010; consultado 2018 Diciembre 20].
Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?id=QcELAgAAQBAJ&printsec=f
rontcover&dq=Da%C3%B1o+oxidativo,+radicales+libres+y+antioxi
dantes.&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwjBzP7m7fHnAhXjJLkGHSxUBo4Q6AEIJ
75
zAA#v=onepage&q=Da%C3%B1o%20oxidativo%2C%20radicales
%20libres%20y%20antioxidantes.&f=false
24. Gutiérrez V. Daño oxidativo, radicales libres y antioxidantes. Rev
Cub Med Mil. 2002; 31(2):126-333.
25. Márquez C, Vázquez G. Stop radicales libres: 150 recetas
antioxidantes [Internet]. España: Edaf; 2016 [revisión 2016-2017;
consultado 2019 Enero 10]. Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?id=OSyICwAAQBAJ&pg=PA11
&dq=Stop+radicales+libres:+150+recetas+antioxidantes.&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwjHq5WV7PHnAhVEJrkGHQqJBi4Q6AEI
LzAB#v=onepage&q=Stop%20radicales%20libres%3A%20150%20
recetas%20antioxidantes.&f=false
26. Pucho A, Alecu I. Poder farmacéutico de los alimentos. Tomo 1,
Alimentación y nutrición: aplicada al cuidado de la salud, a la
prevención y tratamientos de las enfermedades [Internet]. España:
Bloomington; 2018 [revisión 2018-2019; consultado 2019 Abril 15].
Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?id=qedVDwAAQBAJ&printsec=
frontcover&dq=Poder+farmac%C3%A9utico+de+los+alimentos&hl=
es-419&sa=X&ved=0ahUKEwj-
gZTF6PHnAhUDGbkGHfAdBroQ6AEIJzAA#v=onepage&q=Poder
%20farmac%C3%A9utico%20de%20los%20alimentos&f=false
27. Pamplona R. Salud por los alimentos [Internet]. España:
Safeliz;2006 [revisión 2006-2007; consultado 2019 Marzo 12].
Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?id=t9Az_8Yzgr4C&printsec=fro
ntcover&dq=salud+por+los+alimentos&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwi81s234vHnAhWkB9QKHWzVA2wQ6AE
IJzAA#v=onepage&q=salud%20por%20los%20alimentos&f=false
28. Ramos E, Castañeda B, Ibáñez L. Evaluación de la capacidad
antioxidante de plantas medicinales peruanas nativas e introducidas.
Rev Acad Perú Salud. 2008;15(1):42-46.
76
29. Poma E, Inocente M, Pardo J, Zarzosa E. Evaluación de la técnica
2,2-Difenil-I-Picrilhidrazilo (DPPH) para determinar capacidad
antioxidante. Horiz. Med. 2015;5(1):57-70.
………………………………………
Tesista
…………………………………………
Asesor
77
ANEXO. 1 Matriz de consistencia
Anexo № 01.
Hipótesis
Principal
De las hojas pos
Objetivo general
cosecha de Características
Caracterizar y
Lycopersicum organolépticas
determinar la
esculentum L se
actividad
obtiene extracto
antioxidante que
etanólico con
tiene el extracto
metabolitos Variable etanólico de las
secundarios que Independiente hojas pos
tienen actividad Hojas pos cosecha de
antioxidante. cosecha de Lycopersicum
Principal Licopersicum esculentum L.
¿Qué esculentum L.
características Hipótesis
Objetivos
tiene y cuál es la Secundarias Rendimiento
específicos
actividad El rendimiento del
Determinar el %
antioxidante del extracto etanólico Características
de rendimiento de
extracto etanólico de las hojas pos organolépticas
extracto etanólico
de las hojas pos cosecha de
que se obtiene y Reacción de
cosecha de Lycopersicum
tipo de coloración y/o
Lycopersicum esculentum L es
metabolitos de las
esculentum L? de entre 12 – 16 % precipitación
hojas pos
y tiene metabolitos Variables
cosecha de
secundarios del Dependientes
Lycopersicum
tipo fenólico. Características
esculentum L.
del extracto
El extracto etanólico.
Determinar el % Reacción DPPH
etanólico de las
de actividad antioxidante
hojas pos cosecha Actividad
antioxidante del
de Lycopersicum antioxidante.
extracto etanólico
esculentum L
de las hojas pos
tiene la capacidad
cosecha de
de inhibir entre el
Lycopersicum
60-80 % la
esculentum L.
actividad del
radical libre DPPH.
78
Anexo № 02.
79
Anexo № 03.
80