1. Edwin Southern desarrolló una técnica de transferencia de ADN en 1973.

La cual se usa para

determinar la identidad, el tamaño y la abundancia de ADN especificas

Ventajas:
Manera efectiva de detectar una secuencia de ADN específica en un gran complejo de ADN
Se puede usar para cuantificar la cantidad de ADN presente
Más barato que la secuenciación de ADN
Desventajas:
Complejo y laborioso
Requiere mucho tiempo el proceso.

2. Para facilitar el análisis de secuencias concretas del DNA genómico, se procede a la digestión del
mismo utilizando enzimas de restricción. Estas enzimas son endonucleasas que tienen la
propiedad de reconocer secuencias cortas, de unos cuatro a seis pares de bases en el DNA de
doble hebra, y cortar el DNA en todos los puntos donde se encuentre tal secuencia, llamada diana
de restricción. Cada enzima de restricción tiene una diana particular.

3. La matriz presenta poros cuyo tamaño puede controlarse variando la concentración del gel. Al
depositar en el gel el producto de la digestión de un DNA genómico, colocar el gel en un tampón
adecuado y aplicar una corriente eléctrica, los fragmentos de DNA, cargados negativamente, se
mueven a través del gel hacia el ánodo. Las moléculas de mayor longitud tienen más dificultades
de movimiento a través de los poros del gel por lo que se mueven más lentamente. Por el
contrario, las moléculas más cortas tienen menos impedimentos y se mueven más rápidamente.
Como resultado, se originará una separación por tamaños de la mezcla de fragmentos iniciales
Los fragmentos se separan por tamaño en un gel de agarosa o poliacrilamida
mediante electroforesis. Los fragmentos más pequeños migrarán más lejos en
el gel que los más grandes. Después de la electroforesis, el ADN del gel se
transfiere a una membrana de nylon. La membrana se incuba con una sonda
de ácido nucleico que tiene una secuencia homóloga a la secuencia objetivo y
se marca con radiactividad, tinte fluorescente o una enzima capaz de generar
una señal quimioluminiscente

.4. La identificación de fragmentos de interés entre los miles generados en una digestión de DNA
genómico se realizará, como hemos indicado antes, por hibridación. La hibridación no funciona
bien cuando se realiza directamente sobre el gel, por lo que se recurre a realizar una transferencia
de los fragmentos desde el gel a un soporte sólido fácilmente manejable. Este soporte es un filtro
o membrana de nitrocelulosa o nylon que es capaz de unir covalentemente moléculas de DNA. La
transferencia se realiza por capilaridad haciendo pasar a través del gel un tampón apropiado que
arrastra los fragmentos de DNA hasta la membrana colocada encima del gel. Puesto que la
hibridación requiere que las moléculas de DNA estén en forma de hebras sencillas, previamente a
la transferencia el gel será equilibrado en un tampón fuertemente alcalino que desnaturalizará al
DNA. Las moléculas simples quedarán unidas a la membrana en las mismas posiciones relativas
que ocupaban en el gel.