ANEXO DE LAB.

N°4: METABOLISMO ANAERÓBICO

El objetivo de la actividad practica es evaluar el metabolismo anaeróbico

(fermentación alcohólica) de la levadura Saccharomyces cerevisiae en presencia de
diferentes hidratos de carbono. Para ello, el experimento inicia exponiendo la levadura a:
glucosa (monosacárido), sacarosa (disacárido) y almidón (polisacárido). El objetivo de
utilizar estos tres carbohidratos es evaluar si la levadura es capaz de metabolizarlos a través
de la ruta glucolítica ya sea de manera directa o indirecta (recordar que tipo de hidratos de
carbono se metabolizan en esta ruta). Si la levadura es capaz de metabolizar estas moléculas
y por tanto la glucolisis se encuentra activa, el resultado será la producción de moléculas de
piruvato, las cuales luego en una condición anaeróbica (ausencia de oxígeno) podrán ser
metabolizadas en la fermentación alcohólica. Del proceso de fermentación alcohólica
debemos recordar que los productos mas importantes de las reacciones involucradas son:
etanol, NAD+ y CO2. La formación de este último producto es lo que se detecta a través de
la actividad práctica. Para ello, lo que hacemos es utilizar una pipeta graduada en la cual
por unos de sus extremos incorporamos la mezcla de levadura más el carbohidrato
correspondiente utilizando una jeringa y sobre esta mezcla agregamos un colorante, de esta
manera la levadura queda en un ambiente anaeróbico (ver imagen 1 ). Una vez montado el
sistema lo que vamos observando cada 2 min. es el avance del colorante a través de la
pipeta graduada el cual es el resultado de la producción de CO2 que “empuja” al colorante
dentro de la pipeta hacia el extremo opuesto de donde se encuentra la mezcla de levadura
con el carbohidrato.
Este resultado se explica ya que: si la levadura es capaz de metabolizar los carbohidratos y
por tanto la glucolisis esta activa, aumentara la producción de piruvatos, los cuales en
ausencia de oxígeno serán utilizados en la fermentación alcohólica y por tanto esperaremos
un aumento en la cantidad de CO2 producido, lo que visualizamos experimentalmente a
través del avance del colorante, además, mientras más rápido la levadura es capaz de
metabolizar estos carbohidratos, más rápido se moverá el colorante por la pipeta.
Las tablas que se adjuntan en el informe muestran el tiempo (en minutos) al cual se fue
evaluando el avance del colorante (el avance se estimo en ml) en presencia de los tres
carbohidratos. Se propone entonces que a partir de estos datos Uds. sean capaces de
comparar los resultados obtenidos y dar una posible explicación de las diferencias
observadas.
 AVANCE DEL COLORANTE

Colorante
Mezcla de levadura + carbohidrato

Manguera
A través de la jeringa y haciendo uso
de una manguera, se incorpora la
mezcla de levadura y carbohidrato a
la pipeta.

Imagen 1: sistema experimental para

evaluar metabolismo anaeróbico